动物实验室的生物安全防护优秀PPT.ppt

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1、动物实验室的生物安全防护第1页，本讲稿共50页主要内容主要内容 实验动物的护理和使用原则实验动物的护理和使用原则实验动物的护理和使用原则实验动物的护理和使用原则 实验过程的行为规范实验过程的行为规范实验过程的行为规范实验过程的行为规范 实验动物使用程序和要求实验动物使用程序和要求实验动物使用程序和要求实验动物使用程序和要求 动物安全实验室设施与防护要求动物安全实验室设施与防护要求动物安全实验室设施与防护要求动物安全实验室设施与防护要求第2页，本讲稿共50页一、实验动物的护理和使用原则一、实验动物的护理和使用原则一、实验动物的护理和使用原则一、实验动物的护理和使用原则 实实验验动动物物是是经经过

2、过科科学学育育种种、繁繁殖殖生生产产，遗遗传传背背景景清清楚楚，携携带带的的微微生生物物状状况况明明确确，并并对对其其生生态态学学、生生物物学学、生生物物化化学学、形形态态结结构构了了解解的的特特殊殊动动物物，因因此此，对其护理和使用也有严格的要求。对其护理和使用也有严格的要求。第3页，本讲稿共50页实验动物饲养和使用应遵守国家实验动物饲养和使用应遵守国家相关法律和规定相关法律和规定应明确使用实验动物的应明确使用实验动物的理由和目的理由和目的明确实验所使用动物的明确实验所使用动物的种类和数量，种类和数量，动物的数量应满足统计学的要求。动物的数量应满足统计学的要求。完完善善操操作作规规程程，避避

3、免免或或减减轻轻因因实实验验对对动动物物造造成成的的不不适适和和痛痛苦苦。包包括括使使用用适适当当的的镇静、镇痛或麻醉方法；禁止不必要的重复操作镇静、镇痛或麻醉方法；禁止不必要的重复操作严严格格按按程程序序实实施施实实验验后后动动物物的的处处理理，包包括括麻麻醉醉、止止痛痛、实实验验后后的的护护理理或或用用麻麻醉醉方法处死方法处死实实验验过过程程中中要要求求保保证证实实验验动动物物的的良良好好生生活活条条件件，包包括括饲饲养养环环境境、符符合合需需求求的的饲饲料及细心的护理等料及细心的护理等研研究究人人员员和和实实验验动动物物操操作作人人员员应应接接受受实实验验动动物物的的基基本本知知识识和和

4、操操作作技技能能等等方方面面的培训的培训使用过程中要求保证使用过程中要求保证周围环境和实验人员的安全。周围环境和实验人员的安全。实验动物的护理和使用原则实验动物的护理和使用原则第4页，本讲稿共50页二、动物实验过程的行为规范二、动物实验过程的行为规范二、动物实验过程的行为规范二、动物实验过程的行为规范物理限制物理限制物理限制物理限制手术操作手术操作手术操作手术操作饮食的限制饮食的限制饮食的限制饮食的限制废弃物和尸体处理废弃物和尸体处理废弃物和尸体处理废弃物和尸体处理第5页，本讲稿共50页1.1.物理限制物理限制 指在实验过程中包括检查、收集标本、给药、指在实验过程中包括检查、收集标本、给药、指

5、在实验过程中包括检查、收集标本、给药、指在实验过程中包括检查、收集标本、给药、治疗或实验操作等，用手或工具限制动物活动的治疗或实验操作等，用手或工具限制动物活动的治疗或实验操作等，用手或工具限制动物活动的治疗或实验操作等，用手或工具限制动物活动的过程。过程。过程。过程。第6页，本讲稿共50页 限制的工具不能作为常规的饲养工具。限制的工具不能作为常规的饲养工具。限制的工具不能作为常规的饲养工具。限制的工具不能作为常规的饲养工具。工工工工具具具具的的的的设设设设计计计计应应应应合合合合理理理理，不不不不要要要要仅仅仅仅考考考考虑虑虑虑实实实实验验验验的的的的便便便便利利利利，主主主主要要要要考考考

6、考虑虑虑虑尽尽尽尽量量量量减减减减少少少少动物的不适，避免伤害。动物的不适，避免伤害。动物的不适，避免伤害。动物的不适，避免伤害。尽量减少限制的时间，以达到实验目的为基准。尽量减少限制的时间，以达到实验目的为基准。尽量减少限制的时间，以达到实验目的为基准。尽量减少限制的时间，以达到实验目的为基准。在在在在限限限限制制制制过过过过程程程程中中中中，如如如如果果果果发发发发生生生生损损损损伤伤伤伤或或或或严严严严重重重重的的的的行行行行为为为为改改改改变变变变，应应应应暂暂暂暂停停停停或或或或禁禁禁禁止止止止限限限限制，并给予处理或治疗。制，并给予处理或治疗。制，并给予处理或治疗。制，并给予处理或

7、治疗。保证实验人员和周围人员的安全。保证实验人员和周围人员的安全。保证实验人员和周围人员的安全。保证实验人员和周围人员的安全。物理限制的主要原则和要求物理限制的主要原则和要求物理限制的主要原则和要求物理限制的主要原则和要求第7页，本讲稿共50页 有有有有些些些些实实实实验验验验需需需需要要要要对对对对动动动动物物物物进进进进行行行行手手手手术术术术，即即即即打打打打开开开开或或或或刺刺刺刺穿穿穿穿动动动动物物物物的的的的身身身身体体体体，对对对对动动动动物物物物的的的的身身身身体体体体或或或或生生生生理理理理机机机机能能能能产产产产生生生生较较较较大大大大的的的的损损损损害害害害，同同同同时时

8、时时，实实实实验验验验人人人人员员员员也也也也容容容容易易易易被被被被血血血血液液液液/体体体体液液液液污污污污染染染染或或或或被被被被器器器器械械械械、针针针针头头头头刺刺刺刺伤伤伤伤，存存存存在在在在潜潜潜潜在在在在生生生生物物物物污污污污染染染染的的的的威威威威胁胁胁胁，因此必须做到因此必须做到因此必须做到因此必须做到 操作一定要使用适当的镇静、镇痛或麻醉方法。操作一定要使用适当的镇静、镇痛或麻醉方法。操作一定要使用适当的镇静、镇痛或麻醉方法。操作一定要使用适当的镇静、镇痛或麻醉方法。禁止不必要的重复操作。禁止不必要的重复操作。禁止不必要的重复操作。禁止不必要的重复操作。不不不不提提提提

9、倡倡倡倡利利利利用用用用一一一一个个个个动动动动物物物物进进进进行行行行多多多多个个个个手手手手术术术术实实实实验验验验，但但但但是是是是，为为为为充充充充分分分分利利利利用用用用动动动动物物物物资源，经动物伦理委员会许可，在可能的条件下可以实施。资源，经动物伦理委员会许可，在可能的条件下可以实施。资源，经动物伦理委员会许可，在可能的条件下可以实施。资源，经动物伦理委员会许可，在可能的条件下可以实施。严格实验操作规程，防止发生血液严格实验操作规程，防止发生血液严格实验操作规程，防止发生血液严格实验操作规程，防止发生血液/体液外溅和针刺伤，避免生物污染。体液外溅和针刺伤，避免生物污染。体液外溅和

10、针刺伤，避免生物污染。体液外溅和针刺伤，避免生物污染。手手手手术术术术后后后后的的的的动动动动物物物物、标标标标本本本本以以以以及及及及所所所所用用用用器器器器具具具具材材材材料料料料等等等等必必必必须须须须按按按按规规规规定定定定程程程程序序序序妥妥妥妥善善善善处处处处置。置。置。置。2.2.手术操作手术操作第8页，本讲稿共50页 实实实实验验验验用用用用动动动动物物物物原原原原则则则则上上上上要要要要求求求求随随随随时时时时饮饮饮饮食食食食，如如如如果果果果一一一一些些些些实实实实验验验验需需需需要要要要动动动动物物物物限限限限制食物或水的摄入量，应保证动物存活所需要的最低需求量制食物或水

11、的摄入量，应保证动物存活所需要的最低需求量制食物或水的摄入量，应保证动物存活所需要的最低需求量制食物或水的摄入量，应保证动物存活所需要的最低需求量3.3.饮食的限制饮食的限制第9页，本讲稿共50页1.1.1.1.血液和体液标本的处理血液和体液标本的处理血液和体液标本的处理血液和体液标本的处理 用用用用于于于于抗抗抗抗体体体体、抗抗抗抗原原原原、病病病病原原原原微微微微生生生生物物物物、生生生生化化化化指指指指标标标标等等等等检检检检查查查查的的的的血血血血液液液液和和和和体体体体液液液液，按按按按照照照照要要要要求求求求进进进进行行行行处处处处理理理理并并并并检检检检测测测测，检检检检测测测测

12、后后后后的的的的标标标标本本本本经经经经121121121121，30min30min30min30min高压消毒处理。高压消毒处理。高压消毒处理。高压消毒处理。2.2.2.2.动物脏器组织的处理动物脏器组织的处理动物脏器组织的处理动物脏器组织的处理 动动动动物物物物器器器器官官官官组组组组织织织织，尤尤尤尤其其其其是是是是用用用用于于于于病病病病原原原原微微微微生生生生物物物物分分分分离离离离的的的的组组组组织织织织按按按按照照照照标标标标准准准准程程程程序序序序进进进进行行行行处处处处理理理理；用用用用于于于于病病病病理理理理切切切切片片片片的的的的组组组组织织织织，均均均均需需需需要要要

13、要经经经经过过过过甲甲甲甲醛醛醛醛固固固固定定定定后后后后再再再再进进进进行行行行切切切切片片片片。剩剩剩剩余余余余的的的的组组组组织织织织经经经经121121121121，30min30min30min30min高高高高压压压压消消消消毒毒毒毒处理。处理。处理。处理。4.4.废弃物和尸体处理废弃物和尸体处理第10页，本讲稿共50页3 3动物尸体的处理动物尸体的处理 安安乐乐处处死死后后的的动动物物尸尸体体，取取材材完完毕毕后后，经经121 121 30min30min高高压压灭灭菌菌处处理理后后，集集中中送送环环保保部部门门处处理理。动动物物生生物物安安全全三三级级（ABSL-3ABSL-3

14、）实实验验室室及及以以上上级级的的实实验验室室的的感感染染动动物物尸尸体体需需经经室室内内和和双双扉扉两两道道高高压压灭灭菌菌，才才能能移移出出实实验验室。室。4.4.动物咽拭子的处理动物咽拭子的处理 用用于于病病原原分分离离和和PCRPCR检检测测的的咽咽拭拭子子，按按照照各各自自的的要要求求处处理理后后，进进行行病毒分离和病毒分离和PCRPCR检测，检测，剩余的标本经剩余的标本经121121，30min30min高压消毒处理。高压消毒处理。5.5.病原分离培养物的处理病原分离培养物的处理 病病原原分分离离的的培培养养物物，不不论论是是阳阳性性还还是是阴阴性性结结果果，均均需需经经12112

15、1，30min30min高压消毒处理。高压消毒处理。第11页，本讲稿共50页三、实验动物使用程序和要求三、实验动物使用程序和要求第12页，本讲稿共50页1.1.实验动物的基本使用程序和要求实验动物的基本使用程序和要求实验室如需要使用实验动物，应首先向生物安全和伦理委实验室如需要使用实验动物，应首先向生物安全和伦理委员会员会提出申请，填写申请表提出申请，填写申请表使用实验室得到认可后，根据申请表中申请的动物种属和数量，使用实验室得到认可后，根据申请表中申请的动物种属和数量，安排实验动物的饲养和使用。安排实验动物的饲养和使用。实验动物必须在实验动物必须在指定的区域内饲养和使用，指定的区域内饲养和使

16、用，禁止在实验室饲养禁止在实验室饲养动物。实验操作结束时，动物须返回指定的饲养区域内，不动物。实验操作结束时，动物须返回指定的饲养区域内，不能在实验室内过夜。能在实验室内过夜。动物实验应在实验室内指定的区域进行。动物实验应在实验室内指定的区域进行。第13页，本讲稿共50页 实验动物使用申请表实验动物使用申请表 批 准 号：_批准日期：_有效日期：_一、申一、申请请者基本情况者基本情况科室科室课题负责课题负责人人电话电话传传真真E-mail课题课题名称名称申申请请目的目的初次申初次申请请，延延长长 或或 修改原申修改原申请请（原申（原申请请批准号批准号_）二、所需二、所需实验动实验动物物种种类类

17、年年龄龄体重体重/大大/小小性性别别来源来源饲饲养养场场所所实验实验场场所所数量数量_+_+_=_（第一年）（第一年）（第一年）（第一年）（第一年）（第一年）（总计总计）三、三、动动物的运送（是否需要运送，如果需要，物的运送（是否需要运送，如果需要，说说明运送的路明运送的路线线和使用工具等）和使用工具等）第14页，本讲稿共50页四、研究的目的（四、研究的目的（简单简单描述研究的目的，和描述研究的目的，和该该研究研究对对人人类类，或，或动动物，或科学研究的物，或科学研究的贡贡献）献）五、使用五、使用实验动实验动物的原理（解物的原理（解释释使用使用动动物的原理；物的原理；阐阐述述选择动选择动物属种

18、和数量的依据）物属种和数量的依据）六、描述六、描述动动物物实验实验的的设计设计和操作程序（具体包括：注射或接种的物和操作程序（具体包括：注射或接种的物质质、剂剂量、部位、体量、部位、体积积和和针针次等；血次等；血标标本的收集本的收集体体积积、部位、方法、部位、方法、时间时间；非手；非手术术的操作步的操作步骤骤（手（手术术操作操作见见第七第七项项）；限制）；限制动动物的方法；放射性同位素的使用物的方法；放射性同位素的使用剂剂量量和和时间时间；识别动识别动物的方法，如耳物的方法，如耳朵标签朵标签、饲饲养养笼笼的卡片等；的卡片等；对动对动物的物的损损害，如疼痛、腹水等；害，如疼痛、腹水等；实验终结标

19、实验终结标准，如准，如肿肿瘤的大小、体重降瘤的大小、体重降级级的百分比、行的百分比、行为为学的改学的改变变、中毒症状等，及何、中毒症状等，及何时执时执行安行安乐乐死。）死。）七、手七、手术术操作程序（如需要，操作程序（如需要，请请填写本目填写本目录录）具体操作步具体操作步骤骤手手术术操作人及培操作人及培训训情况情况手手术执术执行的地点行的地点实验实验后的后的护护理理第15页，本讲稿共50页是否在同一是否在同一动动物上物上进进行多个手行多个手术术 否否 是，具体是，具体说说明：明：八、八、导导致疼痛的分致疼痛的分类类 实验动实验动物的数量物的数量 第一年第一年 第二年第二年 第三年第三年 A 轻

20、轻微，或一微，或一过过性，或无疼痛性，或无疼痛 _ _ _ B 有疼痛，但能有疼痛，但能够够解除解除 _ _ _ C 不能不能缓缓解的疼痛解的疼痛 _ _ _九、麻醉，九、麻醉，镇镇痛（痛（对对第八第八项项目中的目中的B或或C类动类动物，物，应说应说明使用麻醉或明使用麻醉或镇镇痛的方法，包括麻醉痛的方法，包括麻醉剂剂的名称、的名称、剂剂量、使量、使用方式和用方式和时间时间）十、十、实验终结实验终结后，如何后，如何终终止止动动物的生命（麻醉物的生命（麻醉剂剂的名称、的名称、剂剂量和使用方法）和如何量和使用方法）和如何处处理理动动物尸体物尸体第16页，本讲稿共50页涉涉及及感感染染性性材材料料的的

21、操操作作要要在在生生物物安安全全柜柜中中进进行行，并并防防止止泄泄露露在在安安全全柜柜底底面面。操操作作包包括括感感染染动动物物的的解解剖剖、组组织织的的取取材材、采采血血及及动动物物的的病病原原接种。接种。动物笼具在清洗前先做消毒处理。动物笼具在清洗前先做消毒处理。污污物物、一一次次性性物物品品需需放放入入医医疗疗废废物物专专用用垃垃圾圾袋袋中中，经经高高压压灭灭菌菌后后方方可拿出实验室。可拿出实验室。动动物物尸尸体体用用双双层层医医疗疗废废物物专专用用垃垃圾圾袋袋包包裹裹后后，放放入入标标有有动动物物尸尸体体专专用用的的容容器器中中，用用消消毒毒液液喷喷雾雾容容器器表表面面后后，运运至至解

22、解剖剖区区域域剖剖检。检。生物安全柜使用后应用消毒液擦拭、揩干。生物安全柜使用后应用消毒液擦拭、揩干。2.2.含有感染性材料的动物实验要求含有感染性材料的动物实验要求第17页，本讲稿共50页废废液液需需按按比比例例倒倒入入有有消消毒毒液液的的桶桶中中，倒倒入入时时需需沿沿容容器器壁壁轻轻倒倒并并戴戴眼罩，防止溅入眼中。眼罩，防止溅入眼中。如如果果有有感感染染性性物物质质溅溅到到生生物物安安全全柜柜上上、地地上上以以及及其其他他地地方方，应应按按“菌，毒外溢在台面、地面和其他表面菌，毒外溢在台面、地面和其他表面”处理。处理。每天工作结束时，应用消毒液擦拭门把手和地面等表面区域。每天工作结束时，应

23、用消毒液擦拭门把手和地面等表面区域。废废物物放放入入高高压压灭灭菌菌器器内内时时需需同同时时粘粘贴贴指指示示条条，物物品品移移出出前前观观察察指指示示条是否达到灭菌要求。颜色不符时需重复高压灭菌。条是否达到灭菌要求。颜色不符时需重复高压灭菌。高压灭菌器需每月做灭菌测试一次，并作记录。高压灭菌器需每月做灭菌测试一次，并作记录。第18页，本讲稿共50页3.3.小动物的饲养小动物的饲养 小小动动物物主主要要指指小小鼠鼠、大大鼠鼠、豚豚鼠鼠等等啮啮齿齿类类动动物物，其其饲饲养养应应遵遵循下列原则：循下列原则：使使用用动动物物必必须须按按国国家家标标准准或或实实验验特特殊殊要要求求检检验验合合格格，充充

24、分分准准备备后后进进入入系系统统，饲饲养养人人员员应应按按实实验验设设施施规规定定程程序序要要求求进进入入系系统。统。及时观察动物饮食、精神状况，有无异常表现，患病或死亡。及时观察动物饮食、精神状况，有无异常表现，患病或死亡。动动物物应应可可自自由由进进食食、饮饮水水。定定期期检检查查水水、料料是是否否充充足足并并及及时补给。同时保证其他饲养条件完备。时补给。同时保证其他饲养条件完备。第19页，本讲稿共50页4.4.大动物饲养大动物饲养 大动物主要指狗、猪及非人类灵长类动物等大动物主要指狗、猪及非人类灵长类动物等使使用用动动物物必必须须按按国国家家标标准准或或实实验验特特殊殊要要求求，检检验验

25、合合格格，充充分分准准备备后后方方可可进进入动物实验室。入动物实验室。应应将将每每只只动动物物日日摄摄取取总总量量分分批批次次喂喂给给，以以保保证证动动物物的的进进食食量量和和减减少浪费。少浪费。应经常检查饮水装置，及时补充不足。应经常检查饮水装置，及时补充不足。动物饲养区域应每天打扫，保持清洁，每周将地面消毒三次。动物饲养区域应每天打扫，保持清洁，每周将地面消毒三次。喂喂给给瓜瓜果果、蔬蔬菜菜等等须须洗洗净净消消毒毒。禁禁止止喂喂给给腐腐烂烂发发霉霉不不洁洁的的食食物物，饮饮水要清洁。水要清洁。对饲喂动物所用的小推车、食物、水容器等用品每周进行两次消毒。对饲喂动物所用的小推车、食物、水容器等

26、用品每周进行两次消毒。室内光照，要求明暗各室内光照，要求明暗各12h自动交替。自动交替。第20页，本讲稿共50页5.5.动物的检疫动物的检疫 实实验验动动物物进进入入检检疫疫室室 在在检检疫疫室室的的缓缓冲冲间间内内，用用75%酒酒精精喷喷洒洒动动物物的的外包装进行消毒，打开紫外灯照射外包装进行消毒，打开紫外灯照射1015min。将经上述处理的动物移入检疫室，根据要求进行检疫。将经上述处理的动物移入检疫室，根据要求进行检疫。各动物的检疫期不同，各动物的检疫期不同，大动物为大动物为2周，小动物为周，小动物为1周。周。在在检检疫疫期期内内观观察察动动物物的的精精神神状状态态、食食欲欲、营营养养状状

27、况况、排排泄泄物物等等，如如有任何异常，动物不得用于实验，应退出动物检疫室。有任何异常，动物不得用于实验，应退出动物检疫室。检检疫疫合合格格的的动动物物经经适适当当处处理理后后由由缓缓冲冲间间或或物物流流通通道道进进入入动动物物实实验室。验室。第21页，本讲稿共50页6.6.动物实验的有关操作动物实验的有关操作 1.给药给药 根根据据实实验验要要求求，按按不不同同的的动动物物，不不同同途途径径给给药药。灌灌胃胃和和静静脉脉注注射射。对对接接种种了了高高致致病病性性病病原原微微生生物物的的动动物物，尤尤其其是是大大动动物物，将将动动物物麻麻醉醉后后方方可可进进行行灌灌胃胃或或静静脉脉注注射射。小

28、小动动物物灌灌胃胃或或静静脉脉注注射可根据情况选择是否麻醉，静脉注射时需使用固定器。射可根据情况选择是否麻醉，静脉注射时需使用固定器。2.采样采样 原原则则上上活活检检时时应应对对动动物物进进行行麻麻醉醉。对对接接种种了了病病原原体体的的大大动动物物进进行行采采血血或或体体检检时时，要要求求将将动动物物麻麻醉醉。对对小小动动物物进进行行灌灌胃胃、注射和采血时，可不麻醉动物，但要注射和采血时，可不麻醉动物，但要防止动物咬抓。防止动物咬抓。第22页，本讲稿共50页四、动物生物安全实验室设施与防四、动物生物安全实验室设施与防护要求护要求第23页，本讲稿共50页 病原微生物的传播途径病原微生物的传播途

29、径病原微生物的传播途径病原微生物的传播途径 病原微生物标本使用的容量和浓度病原微生物标本使用的容量和浓度病原微生物标本使用的容量和浓度病原微生物标本使用的容量和浓度 病原微生物接种途径和方法病原微生物接种途径和方法病原微生物接种途径和方法病原微生物接种途径和方法 病原微生物能否和以何种途径被排出体外病原微生物能否和以何种途径被排出体外病原微生物能否和以何种途径被排出体外病原微生物能否和以何种途径被排出体外 病原微生物的总体危险程度病原微生物的总体危险程度病原微生物的总体危险程度病原微生物的总体危险程度 对于使用的动物，需要考虑的因素包括对于使用的动物，需要考虑的因素包括对于使用的动物，需要考虑

30、的因素包括对于使用的动物，需要考虑的因素包括 动物的自然特性，包括动物的攻击性和抓咬倾向性动物的自然特性，包括动物的攻击性和抓咬倾向性动物的自然特性，包括动物的攻击性和抓咬倾向性动物的自然特性，包括动物的攻击性和抓咬倾向性 自然存在的体内外微生物和寄生虫等自然存在的体内外微生物和寄生虫等自然存在的体内外微生物和寄生虫等自然存在的体内外微生物和寄生虫等 易感的动物性疾病易感的动物性疾病易感的动物性疾病易感的动物性疾病 动物接种病原微生物后可能产生的结果等动物接种病原微生物后可能产生的结果等动物接种病原微生物后可能产生的结果等动物接种病原微生物后可能产生的结果等动物实验室所使用微生物的危害评估应考

31、虑的因素动物实验室所使用微生物的危害评估应考虑的因素第24页，本讲稿共50页实验动物设施实验动物设施 实实验验动动物物设设施施依依其其使使用用功功能能的的不不同同，划划分分为为各各个个功功能能区区域域，各各自自有有不不同同的的要要求求。按按照照“实实验验动动物物环环境境与与设设施施”国国家家标标准准20012001规规定定，实实验验动动物物环环境境设设施施分分为为三三等等，控控制制程程度从低到高，依次为度从低到高，依次为开放环境、隔离环境和屏障环境。开放环境、隔离环境和屏障环境。第25页，本讲稿共50页与普通动物设施的区别与普通动物设施的区别 动动动动物物物物房房房房的的的的建建建建筑筑筑筑要

32、要要要求求求求是是是是避避避避免免免免外外外外界界界界微微微微生生生生物物物物感感感感染染染染饲饲饲饲养养养养的的的的清清清清洁洁洁洁级级级级或或或或SPFSPFSPFSPF级级级级动动动动物物物物，所所所所以以以以空空空空气气气气是是是是外外外外排排排排的的的的，而而而而动动动动物物物物是是是是清清清清洁洁洁洁的的的的。此此此此时时时时，进进进进入入入入实实实实验验验验室室室室的的的的工工工工作作作作人人人人员员员员反反反反而而而而可能作为传染源感染动物。可能作为传染源感染动物。可能作为传染源感染动物。可能作为传染源感染动物。生生生生物物物物安安安安全全全全实实实实验验验验室室室室的的的的建

33、建建建筑筑筑筑理理理理念念念念则则则则与与与与之之之之相相相相反反反反，在在在在BSL-3BSL-3BSL-3BSL-3实实实实验验验验室室室室内内内内的的的的动动动动物物物物是是是是不不不不安安安安全全全全因因因因素素素素，要要要要避避避避免免免免动动动动物物物物及及及及其其其其排排排排泄泄泄泄物物物物污污污污染染染染外外外外界界界界环环环环境境境境，所所所所以以以以BSL-3BSL-3BSL-3BSL-3实实实实验验验验室内是负压，空气是向内流的。室内是负压，空气是向内流的。室内是负压，空气是向内流的。室内是负压，空气是向内流的。第26页，本讲稿共50页一级动物生物安全防护实验室一级动物生

34、物安全防护实验室 ABSL1第27页，本讲稿共50页1.1.标准微生物学规范标准微生物学规范实验人员从事在实验工作，需由实验室负责人批准，实验人员从事在实验工作，需由实验室负责人批准，并决定并决定限制或禁止其限制或禁止其他人员进入实验室他人员进入实验室工作面每天消毒一次，及时对溅落活微生物的材料进行消毒。工作面每天消毒一次，及时对溅落活微生物的材料进行消毒。采用机械吸液装置，禁止用嘴吸液。采用机械吸液装置，禁止用嘴吸液。在实验区内禁止饮食、吸烟、处理隐性眼镜及化妆，在实验区内禁止饮食、吸烟、处理隐性眼镜及化妆，食物应存放在专用的储藏食物应存放在专用的储藏柜或冰箱内，保存食物的柜子或冰箱应放置在

35、实验区以外。柜或冰箱内，保存食物的柜子或冰箱应放置在实验区以外。实验人员在操作活微生物材料及动物，实验人员在操作活微生物材料及动物，离开实验室之前均应洗手。离开实验室之前均应洗手。所有污染的液体或固体废弃物在处理前应去除污染。所有污染的液体或固体废弃物在处理前应去除污染。感染动物尸体需用防漏、感染动物尸体需用防漏、有盖容器运出并焚化。有盖容器运出并焚化。所有操作均应按规程仔细小心进行，使气溶胶的产生减至最低限度。所有操作均应按规程仔细小心进行，使气溶胶的产生减至最低限度。实验室应有防昆虫及鼠类的措施。实验室应有防昆虫及鼠类的措施。第28页，本讲稿共50页2.2.特殊规范特殊规范需需告告知知进进

36、入入实实验验室室人人员员潜潜在在危危害害，符符合合特特定定要要求求人人员员方方能能由由负负责责人人批批准准进进入。入。实验室要制定生物安全手册，供需要进入的工作人员阅读并按程序执行。实验室要制定生物安全手册，供需要进入的工作人员阅读并按程序执行。建建议议穿穿长长工工作作服服，以以防防止止污污染染或或溅溅污污便便服服。动动物物房房工工作作服服不不能能穿穿到到其它实验区域。其它实验区域。需需运运至至实实验验室室外外进进行行消消毒毒处处理理的的污污染染材材料料，应应装装入入坚坚固固、不不漏漏的的容容器器、密密封室。封室。制定安全使用锐利器具的方案。制定安全使用锐利器具的方案。第29页，本讲稿共50页

37、3.3.防护防护设备（初级屏障）设备（初级屏障）ABSLABSLABSLABSL1 1 1 1一般不要求使用专用防护设备。一般不要求使用专用防护设备。一般不要求使用专用防护设备。一般不要求使用专用防护设备。接触非人类灵长动物的人员应进行黏膜暴露危险评估，并接触非人类灵长动物的人员应进行黏膜暴露危险评估，并接触非人类灵长动物的人员应进行黏膜暴露危险评估，并接触非人类灵长动物的人员应进行黏膜暴露危险评估，并且应用合适的眼部和头面部防护设备。且应用合适的眼部和头面部防护设备。且应用合适的眼部和头面部防护设备。且应用合适的眼部和头面部防护设备。第30页，本讲稿共50页4.4.实验室的设施要求实验室的设

38、施要求(二级屏障）二级屏障）动物设施应与大楼内的公共区分开。动物设施应与大楼内的公共区分开。动物设施应与大楼内的公共区分开。动物设施应与大楼内的公共区分开。动物饲养区的门需能自动关闭，向内开启，平时保持关闭状态。动物饲养区的门需能自动关闭，向内开启，平时保持关闭状态。实验室设计与建筑应便于清洁。实验室设计与建筑应便于清洁。实验室设计与建筑应便于清洁。实验室设计与建筑应便于清洁。实验台表面不透水，耐酸、碱、有机溶剂、并耐热。实验台表面不透水，耐酸、碱、有机溶剂、并耐热。实验台表面不透水，耐酸、碱、有机溶剂、并耐热。实验台表面不透水，耐酸、碱、有机溶剂、并耐热。实实实实验验验验室室室室设设设设备备

39、备备坚坚坚坚固固固固。实实实实验验验验台台台台、柜柜柜柜及及及及设设设设备备备备之之之之间间间间的的的的空空空空间间间间应应应应有有有有适适适适当当当当距距距距离离离离便便便便于于于于清洁。清洁。清洁。清洁。实验室区及动物饲养区应设洗手池。实验室区及动物饲养区应设洗手池。实验室区及动物饲养区应设洗手池。实验室区及动物饲养区应设洗手池。如实验室有可开关的窗子应装上纱窗。如实验室有可开关的窗子应装上纱窗。如实验室有可开关的窗子应装上纱窗。如实验室有可开关的窗子应装上纱窗。实验室空气直接外排，不得再循环或回流至其它动物饲养区。实验室空气直接外排，不得再循环或回流至其它动物饲养区。实验室空气直接外排，

40、不得再循环或回流至其它动物饲养区。实验室空气直接外排，不得再循环或回流至其它动物饲养区。动物用笼架具可用手洗及机洗。机洗最后冲洗温度最少应为动物用笼架具可用手洗及机洗。机洗最后冲洗温度最少应为9090。第31页，本讲稿共50页二级动物生物安全防护实验室二级动物生物安全防护实验室 ABSL2 该级与动物实验一级生物安全水平相似，适用于那些该级与动物实验一级生物安全水平相似，适用于那些对人及对人及环境有中度潜在危险的微生物和动物实验工作。环境有中度潜在危险的微生物和动物实验工作。其不同点在于其不同点在于 (1)(1)人员经过操作病原性物质专门训练，并由能胜任的科学人员监人员经过操作病原性物质专门训

41、练，并由能胜任的科学人员监督管理督管理 (2)(2)正在工作时限制外人进入实验室正在工作时限制外人进入实验室 (3)(3)某些产生传染性气溶胶的工作某些产生传染性气溶胶的工作在生物安全柜或其他物理封闭设在生物安全柜或其他物理封闭设备内进行备内进行 第32页，本讲稿共50页应有适当的医疗监测方案。实验室人员须针对所应用的病原体或潜在的应有适当的医疗监测方案。实验室人员须针对所应用的病原体或潜在的病原体接受适当的免疫或检测（如乙肝疫苗或病原体接受适当的免疫或检测（如乙肝疫苗或TBTB皮试），并且应建立适皮试），并且应建立适当的血清监测系统。当的血清监测系统。制定安全使用锐利器具的方案。制定安全使用

42、锐利器具的方案。（1 1）动物实验室内）动物实验室内限制使用针头和注射器或其他锐利器械，限制使用针头和注射器或其他锐利器械，只在没有只在没有其他选择时才应用，如胃肠外注射、血液收集、从实验动物或带隔膜的瓶子其他选择时才应用，如胃肠外注射、血液收集、从实验动物或带隔膜的瓶子中吸取液体等。中吸取液体等。（2 2）可重新接入针头的注射器、无针系统以及其他安全装置在适当的）可重新接入针头的注射器、无针系统以及其他安全装置在适当的时候可应用。时候可应用。（3 3）尽量用塑料制品代替玻璃制品。尽量用塑料制品代替玻璃制品。其他标准微生物学规范同其他标准微生物学规范同ABSL-1ABSL-1。1.1.标准微生

43、物学规范标准微生物学规范第33页，本讲稿共50页2.2.特殊规范特殊规范实验室负责人应确定进入实验室人员的资质。在一般情况下，应禁止高度实验室负责人应确定进入实验室人员的资质。在一般情况下，应禁止高度易感人群，如孕妇或免疫受损人员进入。易感人群，如孕妇或免疫受损人员进入。操作传染性物质的实验室，要有进入实验室的特殊规定操作传染性物质的实验室，要有进入实验室的特殊规定(如进行预防如进行预防接种接种)。在进入动物实验室实验区的门上标明。在进入动物实验室实验区的门上标明“生物危险生物危险”的警告标志，的警告标志，包括通用的生物危险性标志，标明传染性物质种类、实验室负责人包括通用的生物危险性标志，标明

44、传染性物质种类、实验室负责人或其他人姓名、电话、以及进入实验室的特殊要求。或其他人姓名、电话、以及进入实验室的特殊要求。工作人员需进行工作人员需进行意外事故发生后的紧急处理方法的培训，意外事故发生后的紧急处理方法的培训，并保存培训记并保存培训记录。录。由于泄漏或事故导致传染性材料明显暴露时，应立即向实验室负责人报告。由于泄漏或事故导致传染性材料明显暴露时，应立即向实验室负责人报告。应按规定进行医学评估、检查及处理，并保存书面记录。应按规定进行医学评估、检查及处理，并保存书面记录。第34页，本讲稿共50页要特别注意防止经皮肤感染，尤其是要要特别注意防止经皮肤感染，尤其是要避免被动物抓、咬伤。避免

45、被动物抓、咬伤。废物在处理前应去除污染。废物在处理前应去除污染。笼具需经高压灭菌或去污后方可洗涤。笼具需经高压灭菌或去污后方可洗涤。与实验无关的动物不允许放在实验室内。与实验无关的动物不允许放在实验室内。根据传染因子的情况，开展工作前采集并保存所有实验人员及有被感根据传染因子的情况，开展工作前采集并保存所有实验人员及有被感染危险的其他人员的本底血清样品。采集第二份血清样品的间隔时间染危险的其他人员的本底血清样品。采集第二份血清样品的间隔时间可随所用传染因子及实验室情况的不同而异。可随所用传染因子及实验室情况的不同而异。制定生物安全手册，对工作人员说明特殊的危险性，并要求他们严制定生物安全手册，

46、对工作人员说明特殊的危险性，并要求他们严格遵守。格遵守。2.2.特殊规范特殊规范第35页，本讲稿共50页3.3.防护设备防护设备(初级屏障）初级屏障）下列操作要用生物安全柜或其他个人防护用品，或物理阻隔装置。下列操作要用生物安全柜或其他个人防护用品，或物理阻隔装置。产生产生气溶胶气溶胶可能性大的操作，包括可能性大的操作，包括离心、研磨、匀浆、强烈振荡或混合、离心、研磨、匀浆、强烈振荡或混合、超声波破碎、开启内压与环境压力不同的传染材料容器、动物接种、由超声波破碎、开启内压与环境压力不同的传染材料容器、动物接种、由动物或鸡胚收获感染组织。动物或鸡胚收获感染组织。使用高浓度或大容量传染性物质时，如

47、采用密封转头或离心机安全罩可在实验室使用高浓度或大容量传染性物质时，如采用密封转头或离心机安全罩可在实验室内离心上述材料。内离心上述材料。进入非人灵长类动物实验室的人员需配戴保护头面部、眼镜的装备。进入非人灵长类动物实验室的人员需配戴保护头面部、眼镜的装备。在实验室内应穿专用的工作服、帽子、鞋、口罩，离开实验室到非实验室区在实验室内应穿专用的工作服、帽子、鞋、口罩，离开实验室到非实验室区时，应脱下工作服。时，应脱下工作服。第36页，本讲稿共50页4.4.实验室设施实验室设施(二级屏障）二级屏障）除满足除满足ABSL-1ABSL-1的设施要求外，还应有高压蒸汽灭菌器，供传染性的设施要求外，还应有

48、高压蒸汽灭菌器，供传染性实验室废弃物去污染用。实验室废弃物去污染用。第37页，本讲稿共50页三级动物生物安全防护实验室三级动物生物安全防护实验室 ABSL3 第38页，本讲稿共50页ABSL-3ABSL-3的标准微生物学规范同的标准微生物学规范同ABSL-2ABSL-2。1.1.标准微生物学规范标准微生物学规范第39页，本讲稿共50页2.2.特殊规范特殊规范 当当当当实实实实验验验验室室室室或或或或封封封封闭闭闭闭单单单单元元元元内内内内有有有有传传传传染染染染性性性性材材材材料料料料或或或或感感感感染染染染动动动动物物物物时时时时，在在在在进进进进入入入入实实实实验验验验室室室室或或或或动动

49、动动物物物物室室室室的的的的门门门门上上上上应应应应标标标标明明明明“生生生生物物物物危危危危险险险险”警警警警告告告告标标标标志志志志，包包包包括括括括通通通通用用用用的的的的生生生生物物物物危危危危险险险险性性性性标标标标志志志志，标标标标明明明明传传传传染染染染因因因因子子子子名名名名称称称称，实实实实验验验验室室室室负负负负责责责责人人人人或或或或其其其其他他他他负负负负责责责责人人人人姓姓姓姓名名名名，电电电电话话话话号号号号码码码码，以以以以及及及及进进进进入入入入实实实实验验验验室室室室的的的的一一一一些特殊要求，如必须免疫，戴防毒面具或采取其他个人防护措施。些特殊要求，如必须免

50、疫，戴防毒面具或采取其他个人防护措施。些特殊要求，如必须免疫，戴防毒面具或采取其他个人防护措施。些特殊要求，如必须免疫，戴防毒面具或采取其他个人防护措施。所所所所有有有有涉涉涉涉及及及及传传传传染染染染性性性性材材材材料料料料的的的的活活活活动动动动都都都都应应应应在在在在封封封封闭闭闭闭单单单单元元元元中中中中的的的的生生生生物物物物安安安安全全全全柜柜柜柜或或或或其其其其他他他他物物物物理封闭设备内进行。不得在敞开的实验台上进行敞口容器操作。理封闭设备内进行。不得在敞开的实验台上进行敞口容器操作。理封闭设备内进行。不得在敞开的实验台上进行敞口容器操作。理封闭设备内进行。不得在敞开的实验台上