配位化学在细胞凋亡中的应用.pptx
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1、配位化学在细胞凋亡中的应用一、细胞凋亡的简介二、文献三、设计思路四、总结第1页/共22页配位化学在细胞凋亡中的应用TextTextText一、细胞凋亡的简介19721972年KerrKerr根据细胞发生与坏死不同的死亡现象,提出了细胞凋亡的概念,称为ApoptosisApoptosis,宣告了对细胞凋亡的真正探索的开始。而细胞程序性死亡(programmed cell deathprogrammed cell death,PCDPCD)最初是19561956年发育生物学中提出的概念,是个功能性概念,强调的是其分子生物学和生理功能,一般指生理性细胞死亡。描述在一个多细胞生物体中某些细胞死亡是个体
2、发育中的一个预定的、并受到严格程序控制的正常组成部分。在现在的研究中把二者作为一个意思解释。随着分子生物学检测技术的飞速发展,近二三十年来,细胞凋亡的研究取得了重大的突破,越来越受到医学界和生物学界的普遍关注。尽管人们尚未完全掌控细胞凋亡,但是目前人们对细胞凋亡机制和凋亡异常导致的疾病有了比较全面的认识,并且根据细胞凋亡的不同特征,形成了不同的凋亡检测方法。这些都为人们更加深入地研究细胞凋亡奠定了坚实的基础,也为对疾病的新认识打下了分子生物学基础。而且也为解决恶性肿瘤的医学难题指明了新的方向。第2页/共22页凋亡细胞的特征welcome to use these PowerPoint temp
3、lates,New Content design,10 years experience形态学特征 细胞凋亡过程可分为三个不太明显的阶段:感应阶段、效应阶段和分解阶段。感应阶段通过死亡诱导信号刺激凋亡前信号大量转变。这种死亡诱导信号包括氧化还原种类、神经酰胺信号、CaCa2+2+的超活化途径和BclBcl家族蛋白如BaxBax和BadBad。在第二阶段,即效应阶段,在关键调节器线粒体的作用下,细胞开始死亡。最后的分解阶段包含了细胞质和核质两个部分。在细胞质中一种叫caspasescaspases的复合级联蛋白被激活;在细胞核中,染色质浓缩,核膜破裂DNADNA被分解成若干小片段。最后细胞被分解
4、成若干凋亡小体,在表面的磷脂酰丝氨酸被识别后被邻近的细胞或者吞噬细胞所吞噬。从细胞发生凋亡开始,到出现凋亡小体仅需数分钟,而被吞噬消化整个过程可持续4 49 h9 h。第3页/共22页凋亡细胞的特征welcome to use these PowerPoint templates,New Content design,10 years experience生化特征 早期凋亡细胞及活细胞的胞膜正常,对DNADNA染料碘化丙锭(PIPI)拒染,但可被另外一种DNADNA染料Hoechst 33342Hoechst 33342(Ho33342Ho33342)染色;而坏死细胞的胞膜完整性受到破坏,细胞
5、不需固定即可被PIPI染色。凋亡细胞在凋亡早期原来位于细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸(PSPS)翻转至磷脂双分子层外侧。凋亡发生时线粒体呼吸链受损,使细胞生成ATPATP的量减少;跨膜电位降低,细胞色素c c从线粒体内漏到胞质中;线粒体膜的通透性升高。胞浆中CaCa2+2+和Mg2+Mg2+浓度升高,可以激活核酸内切酶和蛋白酶激活的核酸内切酶可以将DNADNA切成5050300 bp300 bp大小的DNADNA,然后进一步将染色质裂解成单个核小体和寡聚核小体,形成180180200 bp200 bp的DNADNA片断。第4页/共22页配位化学在细胞凋亡中的应用二、文献报道Conjugates of
6、 ferrocene with biological compounds.Coordination to gold complexes and antitumoral properties Journal of Inorganic Biochemistry 105(2011)13731382在这篇文献中,他们合成了一系列带有生物配体的二茂铁配合物。并且将这些配合物和Au(I)和Au(III)结合。他们检测了这两个基团的结合位点。而且这两个基团结合表现出很好的抗癌活性。他们将金的配合物运用到三种癌细胞中:MCF-7(人类的乳腺癌细胞)、HeLa(人类的宫颈癌细胞)和NIE-115(来源于老鼠的交
7、感神经囊肿神经元细胞)。检测这些配合物对癌细胞的作用。第5页/共22页Scheme 1.i)L-histidine methyl ester,ii)histamine,iii)L-tryptophan methyl ester,iv)L-methionine methyl ester,v)L-lysine ethyl ester,vi)L-prolinamide.第一步、合成所需的配合物第6页/共22页Scheme 2.i)Au(acac)(PR3),ii)Au(acac)(PR3),iii)Au(OTf)(PR3),iv)Au(C6F5)3(OEt2).第7页/共22页第二步、基于MTT比色
8、法检测IC50值的实验 Cells were exposed to each compound for a total of 48 h.Using the colorimetric mitochondrial function-based MTT viability assay,the IC50 values(final concentration0.5%DMSO)were calculated from dose-response curves obtained by nonlinear regression analysis.IC50 values are concentrations o
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