高三生物实验专题复习书本.pptx

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1、序号序号实验内容实验内容必修必修-0-0观察细胞的减数分裂观察细胞的减数分裂必修必修-0-0低温诱导染色体加倍低温诱导染色体加倍必修必修-0-0调查常见的人类遗传病调查常见的人类遗传病必修必修-0-0探究植物生长调节剂对扦插枝条生根的作用探究植物生长调节剂对扦插枝条生根的作用必修必修-0-0模拟尿糖的检测模拟尿糖的检测必修必修-0-0探究培养液中酵母菌数量的动态变化探究培养液中酵母菌数量的动态变化必修必修-0-0土壤中动物类群丰富度的研究土壤中动物类群丰富度的研究必修必修-0-0探究水族箱（或鱼缸）中群落的演替探究水族箱（或鱼缸）中群落的演替第1页/共85页序号序号课题内容课题内容-微微生物的

2、生物的利用利用选修选修-0-0微生物的分离和培养微生物的分离和培养选修选修-0-0测定某种微生物的数量测定某种微生物的数量-酶酶的应用的应用选修选修-0-0利用酶活力测定的一般原理和方法利用酶活力测定的一般原理和方法选修选修-0-0探讨酶在食品制造和洗涤等方面的应探讨酶在食品制造和洗涤等方面的应用用-生生物技术物技术在其他在其他方面的方面的应用应用选修选修-0-0植物的组织培养植物的组织培养选修选修-0-0蛋白质的提取和分离蛋白质的提取和分离选修选修-0-0PCR技术的基本操作和应用技术的基本操作和应用-基基因工程因工程选修选修-0 8-0 8DNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定、学生实验、学生

3、实验(选修部分选修部分)第2页/共85页第一类：显微镜观察类实验（第一类：显微镜观察类实验（7个）个）用显微镜观察多种多样的细胞（用显微镜观察多种多样的细胞（1-P71-P7）观察观察DNADNA、RNARNA在细胞中的分布（在细胞中的分布（1-P26)1-P26)观察线粒体和叶绿体观察线粒体和叶绿体(1-P47)(1-P47)观察植物细胞的质壁分离和复原观察植物细胞的质壁分离和复原(1-P61)(1-P61)观察细胞的有丝分裂观察细胞的有丝分裂(1-P115)(1-P115)观察细胞的减数分裂观察细胞的减数分裂(2-P21)(2-P21)低温诱导染色体加倍低温诱导染色体加倍(2-P88)(2

4、-P88)第3页/共85页实验实验1.使用高倍显微镜观察几种细胞（使用高倍显微镜观察几种细胞（1-P7）第4页/共85页镜筒镜筒压片压片夹夹载物台载物台遮光器与光圈遮光器与光圈反光镜反光镜镜座镜座镜柱镜柱镜臂镜臂细准焦螺旋细准焦螺旋粗准焦螺旋物镜物镜目目镜镜一、显一、显微镜的微镜的结构：结构：第5页/共85页二、操作指导：（显微镜的使用）二、操作指导：（显微镜的使用）2、取镜安放、取镜安放3、对光、对光4、放置玻片标本、放置玻片标本5、观察、观察6、高倍显微镜的使用、高倍显微镜的使用1、显微镜的构造、显微镜的构造（1 1）使用顺序：先低倍后高倍）使用顺序：先低倍后高倍（2 2）放大倍数：）放大

5、倍数：（3 3）目镜、物镜镜头长度与放大）目镜、物镜镜头长度与放大倍数关系：倍数关系：（4 4）成像特点：低倍镜）成像特点：低倍镜/高倍镜高倍镜 （5 5）物象移动方向与装片移动方）物象移动方向与装片移动方向关系（包括顺逆时针问题）向关系（包括顺逆时针问题）（6 6）视野光线亮度的调整与切片）视野光线亮度的调整与切片颜色、厚度的关系颜色、厚度的关系（7 7）污染物位置的判断）污染物位置的判断若在低倍镜下看不到细胞，可改用高倍物镜继续观察。若在低倍镜下看不到细胞，可改用高倍物镜继续观察。第6页/共85页注意：注意：1）正确使用低倍镜：取镜）正确使用低倍镜：取镜对光对光安放安放装片装片下降镜筒下降

6、镜筒调焦。调焦。下降镜筒时，下降镜筒时，必须双眼注视物镜和装片的距离，以免压必须双眼注视物镜和装片的距离，以免压坏装片和碰坏物镜。坏装片和碰坏物镜。2）正确使用高倍镜：将低倍镜下看到的物像）正确使用高倍镜：将低倍镜下看到的物像移到视野中央移到视野中央转动转换器，换用高倍转动转换器，换用高倍物镜物镜调整光圈和反光镜，使视野亮度调整光圈和反光镜，使视野亮度适宜适宜调节细准焦螺旋，直至物像清晰。调节细准焦螺旋，直至物像清晰。第7页/共85页实验二、观察实验二、观察DNA DNA、RNARNA在细胞中的分布在细胞中的分布(1-p26)(1-p26)实验原理实验原理染色剂染色剂染色颜色染色颜色 主要存在

7、部位主要存在部位 DNA RNA吡罗红吡罗红甲基绿甲基绿红色红色绿色绿色主要在细胞核主要在细胞核，线粒，线粒体、叶绿体含少量体、叶绿体含少量主要在细胞质主要在细胞质第8页/共85页取口腔上皮细胞制片取口腔上皮细胞制片(将载玻片烘干）将载玻片烘干）水解水解 冲洗涂片冲洗涂片 染色染色 观察观察（先低倍镜再高倍镜（先低倍镜再高倍镜/选择染色均匀、色泽浅的区域）选择染色均匀、色泽浅的区域）（8%8%的的HCl，能改变细胞膜的通透，能改变细胞膜的通透性，同时使性，同时使DNADNA与蛋白质分离）与蛋白质分离）人口腔上皮细胞人口腔上皮细胞DNADNA、RNARNA分布分布洋葱鳞片叶洋葱鳞片叶内表皮内表皮

8、细胞细胞DNADNA、RNARNA分布分布（蒸馏水）（蒸馏水）（0.9%的的NaClNaCl）第9页/共85页实验三、实验三、观察线粒体和叶绿体观察线粒体和叶绿体(1-p7)一、实验原理一、实验原理 1.高等绿色植物的叶绿体存在于细胞质基质高等绿色植物的叶绿体存在于细胞质基质中，叶绿体一般是中，叶绿体一般是 色的，扁平的色的，扁平的 形或形或 形，可以用高倍显微镜观察它的形态和分布。形，可以用高倍显微镜观察它的形态和分布。2.健那绿健那绿染液是专一性的染线粒体的活细胞染液是专一性的染线粒体的活细胞染料。可以使活细胞的染料。可以使活细胞的线粒体呈现线粒体呈现 色，而色，而细胞质几乎为无色。细胞质

9、几乎为无色。绿绿蓝绿蓝绿球球椭球椭球第10页/共85页二、方法步骤与注意事项二、方法步骤与注意事项 观察叶绿体装片：观察叶绿体装片：取材：取材：（叶片薄且叶绿体大，数目少）（叶片薄且叶绿体大，数目少）制片：制片：载玻片中央滴一滴清水，将叶片放入，加上盖玻片，载玻片中央滴一滴清水，将叶片放入，加上盖玻片，制成临时装片（制成临时装片（临时装片随时保持有水状态临时装片随时保持有水状态）观察：观察：先先 倍镜找到叶片细胞后高倍镜观察叶绿体（形倍镜找到叶片细胞后高倍镜观察叶绿体（形态和分布）（态和分布）（光强度的变化与叶绿体的位置关系光强度的变化与叶绿体的位置关系）绘图：绘图：用铅笔画一个叶绿体形态和分

10、布情况清楚的叶肉细胞用铅笔画一个叶绿体形态和分布情况清楚的叶肉细胞藓类小叶藓类小叶或或黑藻叶黑藻叶或或波菜叶稍带叶肉的下表皮波菜叶稍带叶肉的下表皮 低低第11页/共85页显微镜下的黑藻细胞显微镜下的黑藻细胞第12页/共85页（20082008，广东）用高倍显微镜观察黑藻叶，广东）用高倍显微镜观察黑藻叶绿体时，可见叶绿体绿体时，可见叶绿体A A具有双层膜具有双层膜B B呈绿色带状呈绿色带状C C内部有许多基粒内部有许多基粒D D呈绿色椭球形呈绿色椭球形【线粒体的观察通常可选用易取材的线粒体的观察通常可选用易取材的人的口腔上皮细胞人的口腔上皮细胞】若是水绵细胞呢？若是水绵细胞呢？第13页/共85页

11、细胞细胞 清水清水蔗糖溶液蔗糖溶液（液泡）（液泡）渗入渗入渗出渗出（低浓度）（低浓度）（高浓度）（高浓度）细胞液细胞液（较高浓度）（较高浓度）观察植物的质壁分离与复原观察植物的质壁分离与复原1 1第14页/共85页实验四、观察植物细胞的质壁分离与复原实验四、观察植物细胞的质壁分离与复原(1-P61)(1-P61)细胞液浓度细胞液浓度 外界溶液浓度时外界溶液浓度时:细胞吸水，质壁分细胞吸水，质壁分离复原。离复原。原生质层原生质层伸缩性大于细胞壁伸缩性，因而收伸缩性大于细胞壁伸缩性，因而收缩幅度大，造成质壁分离。缩幅度大，造成质壁分离。1实验原理实验原理紫色洋葱磷片叶（液泡大且有颜色易观察）紫色洋

12、葱磷片叶（液泡大且有颜色易观察）2、实验材料及试剂、实验材料及试剂0.3g/ml0.3g/ml的蔗糖溶液的蔗糖溶液第15页/共85页正常细胞正常细胞初始质壁分离初始质壁分离显著质壁分离显著质壁分离观察植物的质壁分离与复原观察植物的质壁分离与复原2 2第16页/共85页第17页/共85页第18页/共85页 某同学在做某同学在做“观察植物细胞的质壁分离和复原观察植物细胞的质壁分离和复原”实验过程中，实验过程中，分别采用质量分数为分别采用质量分数为30%30%和和50%50%的蔗糖溶液，的蔗糖溶液，1mol/L KNO1mol/L KNO3 3溶液和溶液和lmol/Llmol/L的盐酸溶液制作了的盐

13、酸溶液制作了4 4组临时装片，并用显微镜随时观察。组临时装片，并用显微镜随时观察。发现前发现前3 3组在组在23min23min后发生部分质壁分离，后发生部分质壁分离，5min5min后质壁分离现象后质壁分离现象明显，而第明显，而第4 4组无质壁分离现象。组无质壁分离现象。观察到前观察到前3 3组出现明显的质壁分离现象后，再过组出现明显的质壁分离现象后，再过5min5min观察，观察，发现发现1 1、2 2组无变化，而第组无变化，而第3 3组自动发生了质壁分离复原现象。然组自动发生了质壁分离复原现象。然后对前后对前2 2组装片滴加清水，用显微镜观察，发现第组装片滴加清水，用显微镜观察，发现第1

14、 1组组45min45min后后恢复原状，而第恢复原状，而第2 2组无变化，不能发生复原。组无变化，不能发生复原。请分析各组实验装片发生变化的原因。请分析各组实验装片发生变化的原因。思考题思考题 如果使用的是一定浓度的尿素或者如果使用的是一定浓度的尿素或者甘油溶液，其结果呢？为什么？甘油溶液，其结果呢？为什么？第19页/共85页、实验原理、实验原理 、方法步骤、方法步骤实验五：观察植物细胞的有丝分裂（实验五：观察植物细胞的有丝分裂（1-p115)1-p115)(1)(1)根尖根尖、茎尖的分生区、茎形成层、愈伤、茎尖的分生区、茎形成层、愈伤组织可观察到有丝分裂。组织可观察到有丝分裂。(2)(2)

15、细胞核细胞核内的染色体容易被碱性染料着色内的染色体容易被碱性染料着色（1 1）根尖培养（材料）根尖培养（材料）（2 2）装片制作装片制作：解离解离漂洗漂洗染色染色制片制片（顺序不能交换）（顺序不能交换）（3 3）观察观察：低倍镜观察低倍镜观察 高倍镜观察高倍镜观察 （4 4）绘图绘图：第20页/共85页、注意事项注意事项培养根尖：培养根尖：应每天应每天换水换水 (防止水中缺氧烂根防止水中缺氧烂根)取材取材：取生长旺盛、带有取生长旺盛、带有分生区的根尖分生区的根尖，长度，长度 为根尖的为根尖的2-3mm(2-3mm(时间：上午时间：上午1010时至下午时至下午2 2时最佳）时最佳）解离解离：目的

16、：目的：使组织细胞分离开，杀死并固定细胞；使组织细胞分离开，杀死并固定细胞；解离液：解离液：15%15%盐酸盐酸95%95%酒精溶液酒精溶液1111；时间：时间：室温室温3-53-5分钟，至根尖酥软（分钟，至根尖酥软（时间短则细时间短则细胞没有完全分离，长则可能使根尖烂掉）胞没有完全分离，长则可能使根尖烂掉）漂洗漂洗：用用清水清水漂洗漂洗10min10min，目的目的是洗去组织中的解是洗去组织中的解 离液，便于染色离液，便于染色(防止酸碱中和防止酸碱中和)。第21页/共85页压片压片：目的目的是使细胞分散开。是使细胞分散开。方法方法（用镊子弄碎（用镊子弄碎根尖，盖上盖玻片，再放上一块根尖，盖上

17、盖玻片，再放上一块载玻片载玻片，压片），压片）（压片过重过猛可能将组织压碎、压烂；过轻则细（压片过重过猛可能将组织压碎、压烂；过轻则细胞未充分分散开而重叠。）胞未充分分散开而重叠。）低倍镜观察：低倍镜观察：找到找到分生区分生区细胞（特点：细胞呈正细胞（特点：细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞正在分裂）方形，排列紧密，有的细胞正在分裂）高倍镜观察：高倍镜观察：找各时期细胞。可见找各时期细胞。可见处于间期的细胞处于间期的细胞最多最多，中期最少。不能看到某个细胞连续分裂的过程，中期最少。不能看到某个细胞连续分裂的过程，因细胞在解离时已被杀死。因细胞在解离时已被杀死。染色染色：染液染液（0.01g/mL

18、0.01g/mL的龙胆紫或的龙胆紫或0.02g/mL0.02g/mL的醋酸的醋酸洋红）洋红）;时间时间为为3 35 5分钟；分钟；目的目的是使染色体或染色质是使染色体或染色质被碱性染料染成深色，便于观察。被碱性染料染成深色，便于观察。第22页/共85页 回顾：回顾：(1)(1)解离的目的是什么？如果解离时间过短会造成什么解离的目的是什么？如果解离时间过短会造成什么后果？后果？(2)(2)如果漂洗不干净会有什么结果？如果漂洗不干净会有什么结果？(4)(4)在分生区能不能看到细胞正在分裂？有何特点在分生区能不能看到细胞正在分裂？有何特点?(5)(5)观察有丝分裂，视野中处于什么时期的细胞最多观察有

19、丝分裂，视野中处于什么时期的细胞最多？为什么？为什么？不能不能 ，细胞排列整齐细胞排列整齐、呈正方形、呈正方形 如果解离时间过短，就不能使细胞之间的连接分开，如果解离时间过短，就不能使细胞之间的连接分开，造成压片失败，细胞不能均匀地在装片上铺成一层。造成压片失败，细胞不能均匀地在装片上铺成一层。如果漂洗不干净，沾在洋葱根尖上的盐酸与酒精就如果漂洗不干净，沾在洋葱根尖上的盐酸与酒精就会和龙胆紫反应，造成根尖细胞染色体不能染上颜色会和龙胆紫反应，造成根尖细胞染色体不能染上颜色第23页/共85页A A染色体未着上颜色，无法看清染色体未着上颜色，无法看清 B B细胞重叠，看不到染色体细胞重叠，看不到染

20、色体C C染色体着上颜色，清晰可见染色体着上颜色，清晰可见 D D染色体着色很浅，模糊不清染色体着色很浅，模糊不清 甲观察到的实验结果是甲观察到的实验结果是 乙观察到的实验结果是乙观察到的实验结果是 丙观察到的实验结果是丙观察到的实验结果是 BDA第24页/共85页实验六实验六:观察细胞的减数分裂观察细胞的减数分裂(2-p21)(2-p21)一、实验目的一、实验目的二、实验材料二、实验材料蝗虫精巢蝗虫精巢精母细胞精母细胞减数分裂固定装片等减数分裂固定装片等三、实验原理三、实验原理 减数分裂是生物在性母细胞成熟时配子形成过减数分裂是生物在性母细胞成熟时配子形成过程中发生的一种特殊的细胞分裂，它包

21、括连续两次程中发生的一种特殊的细胞分裂，它包括连续两次的细胞分裂阶段：第一次分裂为染色体数目的减数的细胞分裂阶段：第一次分裂为染色体数目的减数分裂，第二次为染色体数目的等数分裂。两次分裂分裂，第二次为染色体数目的等数分裂。两次分裂可根据可根据染色体变化特点染色体变化特点分为前期、中期、后期和末分为前期、中期、后期和末期。期。第25页/共85页四、实验用具及药品四、实验用具及药品 1 1用具：显微镜、小手术剪、解剖针、小弯镊、载玻用具：显微镜、小手术剪、解剖针、小弯镊、载玻片等。片等。2 2药品：甲醇、冰乙酸、改良品红染色液等。药品：甲醇、冰乙酸、改良品红染色液等。五、实验步骤五、实验步骤 取材

22、取材 固定固定 染色染色 压片压片 镜检镜检第26页/共85页第27页/共85页实验七：低温诱导染色体加倍(2-p88)进行正常有丝分裂的植物分生组织细胞，在有丝分裂进行正常有丝分裂的植物分生组织细胞，在有丝分裂_ 期，染色体的期，染色体的_分裂，子染色体在分裂，子染色体在_的作用下，分别移向两极，最终被平均分配的作用下，分别移向两极，最终被平均分配到两个子细胞中去。到两个子细胞中去。用低温处理植物分生组织细胞，能够抑制用低温处理植物分生组织细胞，能够抑制_形形成，以至影响成，以至影响_被拉向两极，细胞也不能分裂成被拉向两极，细胞也不能分裂成两个子细胞，于是植物细胞染色体数目发生变化。（秋水仙

23、两个子细胞，于是植物细胞染色体数目发生变化。（秋水仙素类似）素类似）一、实验原理一、实验原理后后着丝点着丝点纺锤体纺锤体纺锤体纺锤体染色体染色体问题：问题：1.1.抑制纺锤体形成与着丝点断裂的关系？抑制纺锤体形成与着丝点断裂的关系？2.2.视野中可能的细胞染色体组成（以二倍体做亲代为视野中可能的细胞染色体组成（以二倍体做亲代为例）例）第28页/共85页二、实验过程二、实验过程 1 1、材料用具、材料用具 洋葱或大葱、蒜（均为二倍体，体细胞中染洋葱或大葱、蒜（均为二倍体，体细胞中染色体数为色体数为1616），培养皿、滤纸、纱布、烧杯、镊子、），培养皿、滤纸、纱布、烧杯、镊子、剪刀、显微镜、载玻片

24、、盖玻片、冰箱、剪刀、显微镜、载玻片、盖玻片、冰箱、卡诺氏液卡诺氏液、改良苯酚品红染液改良苯酚品红染液、体积分数为、体积分数为15%15%的盐酸溶液，体的盐酸溶液，体积分数为积分数为95%95%的酒精溶液的酒精溶液。第29页/共85页2 2、方法步骤、方法步骤低温诱导：低温诱导：固定形态：固定形态：制作装片：制作装片：观察：观察：培养洋葱根尖，待根长出约培养洋葱根尖，待根长出约1cm左右将左右将整个装置放入冰箱低温室内（整个装置放入冰箱低温室内（4）,诱诱导培养导培养36小时小时剪取诱导处理的根尖约剪取诱导处理的根尖约0.5-1cm,放入放入卡卡诺氏诺氏液浸泡液浸泡0.5-1小时，以固定形态，

25、小时，以固定形态，然后用体积分数然后用体积分数95%酒精冲洗酒精冲洗2次次解离解离漂洗漂洗染色染色制片（同有丝分裂）制片（同有丝分裂）第30页/共85页3 3、注意事项、注意事项 1）低温处理必须在培养出低温处理必须在培养出1cm左右不定根之后左右不定根之后。如若生根前就送进冰箱，低温抑制新陈代谢也就抑制如若生根前就送进冰箱，低温抑制新陈代谢也就抑制了根尖分生区的形成，不会发生根尖分生区的有丝分了根尖分生区的形成，不会发生根尖分生区的有丝分裂受低温影响的过程。裂受低温影响的过程。2）剪取根尖时间一般在）剪取根尖时间一般在中午中午10点点左右，此时分裂左右，此时分裂旺盛，受低温影响较大，实验效果

26、明显。旺盛，受低温影响较大，实验效果明显。3）染色时间染色时间要严格控制，不足时染色体看不清，要严格控制，不足时染色体看不清，染色过度，染色体一团糟，无法分辨。染色过度，染色体一团糟，无法分辨。第31页/共85页第二类：物质的分离、（粗）提取及鉴第二类：物质的分离、（粗）提取及鉴定实验定实验(3(3个）个）检测检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质(1-(1-p18)p18)叶绿体色素的提取和分离叶绿体色素的提取和分离(1-p97)(1-p97)DNADNA的粗提取与鉴定（选的粗提取与鉴定（选1-p54)1-p54)第32页/共85页实验八：检测实验八：检测生物组织中

27、的糖类、脂肪和蛋生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质（白质（1-p18)1、实验原理：、实验原理：蛋白质蛋白质+双缩脲试剂双缩脲试剂 紫色反应紫色反应脂脂 肪肪+苏丹苏丹IV 红色红色脂脂 肪肪+苏丹苏丹III 橘黄色橘黄色还原糖还原糖+斐林试剂斐林试剂 砖红色沉淀砖红色沉淀第33页/共85页2 2、实验材料、实验材料还原糖还原糖:应选含糖高，颜色为应选含糖高，颜色为白色白色的植物组织，的植物组织，如苹果、梨等如苹果、梨等脂肪：脂肪：选择富含脂肪的种子，如花生、蓖麻种子选择富含脂肪的种子，如花生、蓖麻种子（实验前一般需浸泡（实验前一般需浸泡3-43-4小时）小时）蛋白质：蛋白质：可选富含蛋白质的黄豆

28、或鸡蛋清等可选富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清等 葡萄糖、葡萄糖、果糖果糖、麦芽糖麦芽糖都是还原性糖；淀都是还原性糖；淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。第34页/共85页3 3、实验步骤、实验步骤1 1）可溶性还原糖的鉴定）可溶性还原糖的鉴定原理：原理：-CHO+Cu(HO)2 -COOH+Cu2O 砖红色砖红色 制备组织样液：制备组织样液：检测样液：检测样液：加入加入2ml2ml组织样液组织样液 加入加入1ml1ml新配制新配制斐斐林试剂（淡蓝色）林试剂（淡蓝色）水浴煮沸水浴煮沸2min2min左右左右观察颜色变化：观察颜色变化：（淡蓝色（淡蓝色 棕色棕色 砖红色）砖

29、红色）空白对照问题空白对照问题第35页/共85页2 2）脂肪检测与鉴定）脂肪检测与鉴定染色：染色：滴苏丹滴苏丹染液染液2-32-3滴与花生子叶切片上滴与花生子叶切片上 染染色色2-3min2-3min后吸去染液后吸去染液 滴体积分数滴体积分数50%50%的酒的酒精洗去浮色精洗去浮色 洗去多余酒精，再滴蒸馏水洗去多余酒精，再滴蒸馏水1-21-2滴，盖盖玻片滴，盖盖玻片观察：观察：低倍镜低倍镜 高倍镜（橘黄色（红色）脂肪颗高倍镜（橘黄色（红色）脂肪颗粒）粒）制作切片：制作切片：第36页/共85页生物组织中脂肪的鉴定生物组织中脂肪的鉴定第37页/共85页3 3）蛋白质鉴定）蛋白质鉴定 原理：原理：-

30、CO-NH-CO-NH-（类似双缩脲（类似双缩脲H H2 2NOC-NH-CONHNOC-NH-CONH2 2结构）结构）与与CuCu2+2+作用形成紫色络合物作用形成紫色络合物双缩脲反应双缩脲反应 制备样液：制备样液：检测与观察：检测与观察：取取2ml2ml样液样液 加入双缩脲试剂加入双缩脲试剂A A液液1ml1ml（0.1g/ml0.1g/ml的的NaOHNaOH溶液，溶液，创设碱性创设碱性环境环境）摇匀）摇匀 加入双缩脲试剂加入双缩脲试剂B B液液(0.010.01g/mlg/ml的的CuSOCuSO4 4溶液，溶液，提供提供CuCu2+2+)4 4滴滴，摇匀摇匀 观察（紫色）观察（紫色

31、）第38页/共85页实验九：叶绿体色素的提取和分离实验九：叶绿体色素的提取和分离(1-p97)(1-p97)第39页/共85页实验九：叶绿体中色素的提取和分离实验九：叶绿体中色素的提取和分离 1 1实验原理：实验原理：（1 1）色素）色素提取提取：（2 2）色素）色素分离分离：叶绿体中的色素能够溶解在叶绿体中的色素能够溶解在有机溶剂有机溶剂无水乙醇（丙酮）无水乙醇（丙酮）中，用无水乙醇提中，用无水乙醇提取色素。取色素。叶绿体中色素在叶绿体中色素在层析液（汽油）层析液（汽油）中的中的溶解度不同，溶解度高的随层析液在溶解度不同，溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快，溶解度低的随层析滤纸上扩散得快，溶

32、解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢，这样，叶绿体液在滤纸上扩散得慢，这样，叶绿体中的色素就在扩散过程中分离开来。中的色素就在扩散过程中分离开来。（纸层析法纸层析法）第40页/共85页2 2实验方法步骤：实验方法步骤：（1 1）提取色素：）提取色素：（2 2）制备滤纸条）制备滤纸条（3 3）色素分离）色素分离纸层析法纸层析法（4 4）观察实验结果）观察实验结果（5 5）整理、洗手）整理、洗手称取称取5g5g新鲜绿色叶片新鲜绿色叶片，剪碎放入研钵中，向其，剪碎放入研钵中，向其中加入少许中加入少许碳酸钙碳酸钙和和二氧化硅二氧化硅，再加，再加mLmL无无水乙醇，进行迅速充分研磨，将研磨液倒入漏水乙醇，进

33、行迅速充分研磨，将研磨液倒入漏斗中过滤出色素液。（尼龙膜）斗中过滤出色素液。（尼龙膜）第41页/共85页 问题问题:1.色素提取原理？色素分离方法是什么？色素提取原理？色素分离方法是什么？2.某同学在做叶绿体中色素提取实验时，收集到某同学在做叶绿体中色素提取实验时，收集到的色素提取液是淡绿色的，分析原因可能是（的色素提取液是淡绿色的，分析原因可能是（）研磨不充分，色素未能充分提取出来研磨不充分，色素未能充分提取出来 丙酮加入太多，稀释了色素提取液丙酮加入太多，稀释了色素提取液 丙酮加的太少，色素未提取出来丙酮加的太少，色素未提取出来 未加未加CaCO3 粉末叶绿素分子已经被破坏粉末叶绿素分子已

34、经被破坏 A.A.B.B.C.C.D D.A 请解释请解释:色素带不整齐、色素带异常、色素带不整齐、色素带异常、滤纸上无色素带、色素带只有滤纸上无色素带、色素带只有2 2条（或条（或3 3条）条）第42页/共85页 3.在叶绿体色素的分离实验中，要使色素在叶绿体色素的分离实验中，要使色素带清晰又整齐，应采取的措施有哪些？带清晰又整齐，应采取的措施有哪些？定性滤纸要干燥定性滤纸要干燥 剪去滤纸条一端两角剪去滤纸条一端两角 滤液细线画细、直、齐滤液细线画细、直、齐重复画线重复画线盖上培养皿盖盖上培养皿盖第43页/共85页 实验十：实验十：DNADNA的粗提取与鉴定（选的粗提取与鉴定（选1-p54)

35、1-p54)1.实验材料实验材料（1 1）动物材料：如鸡血细胞（抗凝剂柠檬酸钠，）动物材料：如鸡血细胞（抗凝剂柠檬酸钠，蒸馏水）蒸馏水）（2 2）植物材料：如洋葱细胞（切碎材料并加入一）植物材料：如洋葱细胞（切碎材料并加入一定的洗涤剂和食盐定的洗涤剂和食盐)第44页/共85页2.2.实验原理实验原理（1 1）DNADNA的溶解度随着的溶解度随着NaClNaCl的浓度变化而改的浓度变化而改变，在变，在0.14mol/L NaCl0.14mol/L NaCl溶液中溶解度最低，溶液中溶解度最低，而蛋白质在此时的溶解度很高而蛋白质在此时的溶解度很高（2 2）DNADNA不溶于酒精，而细胞中的某些物质不

36、溶于酒精，而细胞中的某些物质能溶于酒精，从而能溶于酒精，从而 可以进一步提纯杂质较少可以进一步提纯杂质较少的的DNADNA（3 3）DNADNA和二苯胺（沸水浴）反应显蓝色和二苯胺（沸水浴）反应显蓝色第45页/共85页第46页/共85页在在“DNADNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定”实验中，将提取获得的含实验中，将提取获得的含DNADNA的的黏稠物黏稠物(还含有较多杂质还含有较多杂质)分别处理如下：分别处理如下：A A放入放入0.14mol/L0.14mol/L的氯化钠溶液中，搅拌后过滤，得的氯化钠溶液中，搅拌后过滤，得滤液滤液A A和黏稠物和黏稠物a a；B B放入放入2mol/L2mol/

37、L的氯化钠溶液中，搅拌后过滤，得滤液的氯化钠溶液中，搅拌后过滤，得滤液B B和黏稠物和黏稠物b b；C C放入冷却的放入冷却的9595的酒精溶液中，搅拌后过滤，得滤的酒精溶液中，搅拌后过滤，得滤液液C C和黏稠物和黏稠物c c；以上过程获得的滤液和黏稠物中，因含以上过程获得的滤液和黏稠物中，因含DNADNA少而可以丢少而可以丢弃的是弃的是_ 为鉴定实验所得丝状物的主要成分是为鉴定实验所得丝状物的主要成分是DNADNA，将丝状物放入，将丝状物放入试管中，滴加试管中，滴加 溶液加热，试管呈现溶液加热，试管呈现 色；与此色；与此同时应作同时应作 实验。实验。A、b、C二苯胺二苯胺 蓝蓝对照对照第47

38、页/共85页第三类实验：探究类实验（第三类实验：探究类实验（7个）个）探究影响酶活性的因素（探究影响酶活性的因素（1-p83)1-p83)探究酵母菌的呼吸方式（探究酵母菌的呼吸方式（1-p91)1-p91)模拟探究细胞表面及与体积的关系模拟探究细胞表面及与体积的关系(1-p110)(1-p110)探究植物生长调节剂对扦插枝条生根的作用（探究植物生长调节剂对扦插枝条生根的作用（3-3-p51p51）探究培养液中酵母菌数量的动态变化（探究培养液中酵母菌数量的动态变化（3-p683-p68）土壤中动物类群丰富度的研究（土壤中动物类群丰富度的研究（3-p753-p75）探究水族箱（或鱼缸）中群落的演替

39、（探究水族箱（或鱼缸）中群落的演替（3-p1123-p112）第48页/共85页实验十一：探究影响酶活性的因素实验十一：探究影响酶活性的因素（1-p83)1-p83)（高效性、专一性、温度、（高效性、专一性、温度、pHpH）第49页/共85页（一）比较过氧化氢酶和（一）比较过氧化氢酶和FeFe3+3+的催化效率的催化效率1、实验原理：、实验原理：新鲜肝脏中含有过氧化氢酶，和新鲜肝脏中含有过氧化氢酶，和Fe3+一样，能一样，能催化过氧化氢分解成水和氧，但二者效率不一样。催化过氧化氢分解成水和氧，但二者效率不一样。2、实验方法与步骤、实验方法与步骤（1 1）取两支洁净的试管并编号取两支洁净的试管并

40、编号1 1号、号、2 2号号，各注入，各注入2ml2ml过氧过氧化氢溶液化氢溶液（2 2）向）向1 1号试管内滴入号试管内滴入2 2滴肝脏研磨液；向滴肝脏研磨液；向2 2号对照试管内号对照试管内 滴入滴入2 2滴氯化铁溶液。滴氯化铁溶液。（3 3）堵住试管口，轻轻地振荡两支试管，使试管内的物）堵住试管口，轻轻地振荡两支试管，使试管内的物质混合均匀。质混合均匀。观察并记录哪支试管产生的气泡多。观察并记录哪支试管产生的气泡多。（4 4）将点燃但无火焰的卫生香分别放入）将点燃但无火焰的卫生香分别放入1 1、2 2号试管内液面号试管内液面 的上方，的上方，观察并记录哪支卫生香燃烧猛烈观察并记录哪支卫生

41、香燃烧猛烈。（常温、高温常温、高温）第50页/共85页4、注意事项、注意事项肝脏要肝脏要新鲜，新鲜，并要并要研磨研磨（不新鲜的肝脏中，过氧化不新鲜的肝脏中，过氧化氢酶的活性会由于细菌的破坏而降低。研磨液效果好，氢酶的活性会由于细菌的破坏而降低。研磨液效果好，因为它增加过氧化氢酶与过氧化氢的接触面积）因为它增加过氧化氢酶与过氧化氢的接触面积）滴加氯化铁溶液和肝脏研磨液不能合用一支滴管。滴加氯化铁溶液和肝脏研磨液不能合用一支滴管。过氧化氢有腐蚀性；实验注意安全。过氧化氢有腐蚀性；实验注意安全。实验时实验时将点燃的卫生香插入试管处，不要插入太将点燃的卫生香插入试管处，不要插入太深，防止受潮熄灭。深，

42、防止受潮熄灭。3、实验结果与结论、实验结果与结论 两支试管均有气泡产生，但两支试管均有气泡产生，但1 1号试管产生得快号试管产生得快而且多，两支卫生香均燃烧，但而且多，两支卫生香均燃烧，但1 1号试管口的更猛号试管口的更猛烈。以上的一组对比实验可以烈。以上的一组对比实验可以证明酶的证明酶的高效性高效性。第51页/共85页（二）探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的水解作用（二）探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的水解作用1、实验原理：、实验原理：淀粉和蔗糖都没有还原性，淀粉酶将淀粉水淀粉和蔗糖都没有还原性，淀粉酶将淀粉水解成的麦芽糖则具有还原性；蔗糖水解产生的葡解成的麦芽糖则具有还原性；蔗糖水解产生的葡萄糖和果糖都具有

43、还原性，但淀粉酶不能将蔗糖萄糖和果糖都具有还原性，但淀粉酶不能将蔗糖水解。水解。2、实验材料：、实验材料：质量分数为质量分数为3的可溶性淀粉溶液和蔗糖溶的可溶性淀粉溶液和蔗糖溶液；质量分数为液；质量分数为2的新鲜淀粉酶溶液。的新鲜淀粉酶溶液。第52页/共85页3、实验方法与步骤、实验方法与步骤（1 1）取两支）取两支洁净洁净的试管，的试管，编号编号，然后向，然后向1 1号管注入号管注入2ml2ml可溶性淀粉溶液和可溶性淀粉溶液和2ml2ml新鲜淀粉酶溶液。向新鲜淀粉酶溶液。向2 2号管号管注入注入2ml2ml蔗糖溶液和蔗糖溶液和2ml2ml新鲜淀粉酶溶液。新鲜淀粉酶溶液。（2 2）轻轻振荡两支

44、试管，使试管内的液体混合均）轻轻振荡两支试管，使试管内的液体混合均匀，然后将试管的下半部浸到匀，然后将试管的下半部浸到60600 0C C左右的热水中左右的热水中，保温保温5min5min。（控制温度。（控制温度1 1）（3 3）取出试管，各加入）取出试管，各加入2ml2ml斐林试剂斐林试剂。（4 4）将两支试管的下半部放进盛有热水的大烧杯中，）将两支试管的下半部放进盛有热水的大烧杯中，用酒精灯加热，用酒精灯加热，煮沸煮沸并保持并保持1min1min（控制温度（控制温度2 2）（5 5）观察并记录观察并记录两支试管内的变化。两支试管内的变化。第53页/共85页5、注意事项、注意事项（1)1)做

45、好本实验的关键是蔗糖的纯度和新鲜程度；做好本实验的关键是蔗糖的纯度和新鲜程度；4、实验结果与分析、实验结果与分析 1号有砖红色沉淀，号有砖红色沉淀，2号没有颜色变化。号没有颜色变化。即淀即淀粉被淀粉酶水解，而蔗糖没有被水解。粉被淀粉酶水解，而蔗糖没有被水解。酶作用有酶作用有专一性。专一性。第54页/共85页下列关于下列关于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验的叙探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验的叙述中正确的是述中正确的是 （）A 淀粉酶能否催化淀粉和蔗糖的水解，是通过有无淀粉酶能否催化淀粉和蔗糖的水解，是通过有无还原糖特定的颜色反应而证明的还原糖特定的颜色反应而证明的B 本实验有两次控制温度，目的

46、是一样的本实验有两次控制温度，目的是一样的C 本实验也可用碘液替代斐林试剂的作用本实验也可用碘液替代斐林试剂的作用D 蔗糖的纯度与新鲜程度如何并不影响实验蔗糖的纯度与新鲜程度如何并不影响实验A第55页/共85页（三）探索影响酶活性的因素（三）探索影响酶活性的因素1、实验原理、实验原理2、方法步骤、方法步骤（略）（略）第56页/共85页A A、温度对酶活性的影响、温度对酶活性的影响（1 1）取）取3 3支试管编上号，并且分别注入支试管编上号，并且分别注入2ml2ml可溶性淀粉可溶性淀粉溶液。溶液。（2 2）将）将3 3支试管分别放入支试管分别放入6060左右的左右的温水温水、沸水沸水和和冰块冰块

47、中，维持各自的温度中，维持各自的温度5min5min。（3 3）在）在3 3支试管中各注入支试管中各注入1ml1ml新鲜的淀粉酶溶液，摇匀新鲜的淀粉酶溶液，摇匀后，维持各自的温度后，维持各自的温度5min5min。（4 4）在）在3 3支试管中各滴入支试管中各滴入1 1滴滴碘液碘液，然后摇匀。，然后摇匀。（5 5）观察并记录这）观察并记录这3 3支试管中溶液颜色的变化情况。支试管中溶液颜色的变化情况。酶溶液最好也先分别在特定的温度下保温，确保酶溶液最好也先分别在特定的温度下保温，确保反应一开始就是在所要求的温度条件下进行。另不反应一开始就是在所要求的温度条件下进行。另不宜使用斐林试剂为检测试剂

48、，也不宜用过氧化氢酶宜使用斐林试剂为检测试剂，也不宜用过氧化氢酶为研究对象。为研究对象。（相互对照）（相互对照）第57页/共85页B B、pHpH对酶活性的影响对酶活性的影响（1 1）取三支洁净的试管，编号，分别注入）取三支洁净的试管，编号，分别注入1ml1ml过氧化氢过氧化氢酶溶液（可用质量分数酶溶液（可用质量分数20%20%的新鲜肝脏研磨液替代）的新鲜肝脏研磨液替代）（）振荡这（）振荡这3 3支试管，使试管内的液体混合均匀。用支试管，使试管内的液体混合均匀。用点燃但无火焰的卫生香来检测氧气的生成情况点燃但无火焰的卫生香来检测氧气的生成情况（）在（）在3 3支试管中分别加入盐酸、蒸馏水、支试

49、管中分别加入盐酸、蒸馏水、氢氧化钠各氢氧化钠各1ml1ml（3 3）在）在3 3支试管中各加入支试管中各加入2ml2ml质量分数质量分数3%3%的过氧化氢的过氧化氢溶液溶液本实验最好也将过氧化氢溶液事先调至统一本实验最好也将过氧化氢溶液事先调至统一pHpH，以保证反应开始便达预设以保证反应开始便达预设pHpH，另最好不要使用，另最好不要使用淀粉淀粉酶酶做实验做实验第58页/共85页探究温度对酶活性影响的实验，需要进行如下步骤：探究温度对酶活性影响的实验，需要进行如下步骤：取取3 3支试管，编号并各注入支试管，编号并各注入2mL2mL淀粉溶液；淀粉溶液；向各向各试管注入试管注入lmLlmL淀粉酶

50、溶液；淀粉酶溶液；向各试管滴向各试管滴1 1滴碘液；滴碘液；将将3 3支试管分别放在支试管分别放在6060的热水、沸水和冰块中维的热水、沸水和冰块中维持温度持温度5min5min；观察实验现象。以上步骤最合理的观察实验现象。以上步骤最合理的实验顺序应为实验顺序应为 实验成功的关键应是先确保反应所要求实验成功的关键应是先确保反应所要求的条件，然后才让酶与底物相遇的条件，然后才让酶与底物相遇第59页/共85页实验十二：实验十二：探究酵母菌的呼吸方式探究酵母菌的呼吸方式(1-p91)(1-p91)探究的基本思路：探究的基本思路：提出问题提出问题 作出假设作出假设 设计实验设计实验 （包括选择实验材料