中药制剂检测技术 中药制剂的杂质检查技术.pptx

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1、一、杂质定义 中药制剂的杂质：系指中药制剂中存在的无治疗作用或影响中药制剂的疗效和稳定性，甚至对人体健康有害的物质。包括：毒性物质，如重金属、砷盐、黄曲霉毒素等。无毒副作用，但影响药物的稳定性和疗效的物质，如水、铁盐等。无毒副作用，也不影响药物的稳定性和疗效，但能反映药物的生产工艺和贮存状况是否正常的物质，如氯化物、硫酸盐等。第1页/共61页二、杂质的来源二、杂质的来源 中药制剂中的杂质主要来源于三个方面：由中药材原料中带入；由中药材原料中带入；在生产制备过程中引入在生产制备过程中引入：使用试剂、溶剂及与生产设 备接触等；贮存过程中引入：贮存过程中引入：外界条件的影响使中药制剂中的化 学成分发

2、生氧化、水解、分解等变化而产生。第2页/共61页三、杂质的分类三、杂质的分类 一般杂质：自然界中分布广泛，普遍存在于药材中，在大 多数中药制剂的生产和贮存过程中均易引入的杂 质。如酸、碱、泥砂、氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属砷盐等。特殊杂质：药物在生产和贮存过程中，由于药物本身的性 质、生产方法和工艺的不同可能引入或产 生的 杂质是某种（类）特定药物中特有的杂质。如大 黄流浸膏中的土大黄苷、阿胶中的挥发性碱性物 质等。第3页/共61页四、杂质检查的意义四、杂质检查的意义 中药制剂质量的优劣主要从两方面来评价：药物本身的疗效及其毒副作用。药物所含杂质的多少。杂质杂质的存在严重影响中药制剂的有效性、

3、安全性和稳定性影响中药制剂的有效性、安全性和稳定性 为确保中药制剂安全有效、稳定可控确保中药制剂安全有效、稳定可控，必须对所含杂质进 行严格检查。第4页/共61页五、杂质检查的方法五、杂质检查的方法 对照法（限量检查法）：对照法（限量检查法）：供试液与待检杂质对照液在相同供试液与待检杂质对照液在相同 条件下处理，比较反应结果，判断供试品中所含杂条件下处理，比较反应结果，判断供试品中所含杂 质是否质是否 超出限量。不需测定杂质的准确含量。超出限量。不需测定杂质的准确含量。准确测量法（含量测定法）：准确测量法（含量测定法）：可测定杂质的准确含量可测定杂质的准确含量。灵敏度法：灵敏度法：是以检测条件

4、下反应的灵敏度来控制杂质限量是以检测条件下反应的灵敏度来控制杂质限量 的方法的方法。第5页/共61页六、杂质限量及计算六、杂质限量及计算 杂质限量：杂质限量：药物中所含杂质的最大允许量称为杂质限量。通常药物中所含杂质的最大允许量称为杂质限量。通常 用百用百 分之几（分之几（%）或百万分之几（）或百万分之几（ppm）表示。）表示。杂质限量（杂质限量（%）=100%杂质限量（杂质限量（ppm）=106 L（ppm）=106L（%）=100%C：杂质标准溶液的浓度杂质标准溶液的浓度V：杂质标准溶液的体积杂质标准溶液的体积W：样品量样品量第6页/共61页七、实例解析七、实例解析 阿胶砷盐限量的计算阿胶

5、砷盐限量的计算 取本品2.0g，加氢氧化钙1g，混合，加少量水，搅匀，干燥后先用小火烧灼使炭化，再在500600炽灼使完全灰化，放凉，加盐酸3ml与适量的水使溶解成30ml，分取溶液10ml，加盐酸4ml与水14ml，依法检查砷盐。已知标准砷溶液（每1ml相当于1g的As）取用量为2ml，计算砷盐限量。解：解：L=106=106=3（即百万分之三）（即百万分之三）答：阿胶中砷盐的限量为百万分之三。第7页/共61页灰分检查灰分检查灰分灰分总灰分（生理灰分）：总灰分（生理灰分）：纯净的样品高温灼烧后遗留的灰分称总纯净的样品高温灼烧后遗留的灰分称总 灰分（药材本身所含的各种盐类）。灰分（药材本身所含

6、的各种盐类）。每一种中药材或制剂 剂，在无外来掺杂物时，一般都有一定的总灰分含量范围，此范围内的总灰分不属于杂质。如果总灰分超过含量限度范 围，则说明有泥砂（主要为硅酸盐）等外来杂质掺入。酸不溶性灰分：酸不溶性灰分：总灰分加盐酸处理，得到的不溶于盐酸的总灰分加盐酸处理，得到的不溶于盐酸的 灰分称酸不溶性灰分灰分称酸不溶性灰分（泥砂等外来掺杂物）。（泥砂等外来掺杂物）。总灰分检查总灰分检查酸不溶性灰分检查酸不溶性灰分检查第8页/共61页一、总灰分测定法一、总灰分测定法供试品粉碎过二号筛取23 g称重500600炽灼至恒重炽灼至恒重残渣称重残渣称重计算总灰分含量计算总灰分含量总灰分含量总灰分含量%

7、=100%m1：为炽灼后残渣的重量（g）；m2：为炽灼前供试品的重量（g）。结果判断结果判断将将计算结果与计算结果与该品种项下的该品种项下的规定值规定值进行进行比比较较，判断供试，判断供试品中酸不溶性品中酸不溶性灰分是否超过灰分是否超过规定限量。规定限量。第9页/共61页二、酸不溶性灰分测定法二、酸不溶性灰分测定法供试品粉碎过二号筛取35g g称重500600炽灼至恒重炽灼至恒重滤渣干燥称重滤渣干燥称重计算酸不溶性灰计算酸不溶性灰 分含量分含量酸不溶性灰分含量酸不溶性灰分含量%=100%m1：为酸不溶性残渣的重量（g）；m2：为炽灼前供试品的重量（g）。结果判断结果判断残渣加稀盐酸残渣加稀盐酸

8、无灰滤纸无灰滤纸过滤过滤第10页/共61页三、应用实例三、应用实例 九味羌活丸总灰分和酸不溶性灰分测定九味羌活丸总灰分和酸不溶性灰分测定中国药典2010年版规定，九味羌活丸应进行“总灰分总灰分”和“酸不溶性酸不溶性灰分灰分”检查。要求总灰分不得过要求总灰分不得过7.0%，酸不溶性灰分不得过，酸不溶性灰分不得过2.0%。u总灰分测定总灰分测定：取九味羌活丸5袋，粉碎，过二号筛，混合均匀后，取35g，置炽灼至恒重的坩埚中，称定重量（准确至0.01g），缓缓炽热，注意避免燃烧，至完全炭化时，逐渐升高温度至500600，使完全灰化并至恒重，称定残渣重量，计算供试品中总灰分的含量（%）。u酸不溶性灰分测

9、定酸不溶性灰分测定：将“总灰分测定”中所得的灰分，在坩埚中小心加入稀盐酸约10ml，用表面皿覆盖坩埚，置水浴上加热10分钟，表面皿用热水5ml冲洗，洗液并入坩埚中，用无灰滤纸滤过，坩埚内的残渣用水洗于滤纸上，并洗涤至洗液不显氯化物反应为止。滤渣连同滤纸移至同一坩埚中，干燥，炽灼至恒重。根据残渣重量，计算供试品中酸不溶性灰分的含量（%）。第11页/共61页 重金属：重金属：在规定实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠试液作用而显色的金属杂质。如银、铅、汞、铜、镉等。中药制剂生产过程中接触铅铅的机会较多，且铅铅在人体内易蓄积中毒，故重金属检查一般以铅铅为代表。中国药典中国药典2010年版有三种重金属检查

10、法：年版有三种重金属检查法：一、硫代乙酰胺法一、硫代乙酰胺法 检查原理：检查原理：硫代乙酰胺在酸性（pH3.5的醋酸盐缓冲液）条件下水解产生硫化氢，与重金属作用生成黄色到棕黑色的金属硫化物混悬液，与一定量的标准铅溶液同法处理后所呈颜色比较，判断供试品中重金属是否超过限量。CH3CSNH2+H2O CH3CONH2+H2S Pb2+H2S PbS+2H+第12页/共61页 操作操作25ml3支支纳纳氏氏比比色色管管甲管甲管标准铅溶液标准铅溶液 2ml 醋醋酸盐缓冲液（酸盐缓冲液（pH3.5）2ml溶溶剂适量剂适量 （共（共25ml）乙管乙管醋酸盐缓冲液（醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml 供试液适

11、量供试液适量 （共（共25ml）丙管丙管标准铅溶液标准铅溶液 2ml 醋酸盐缓冲液（醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml 与乙管同量的供试品及溶剂适量与乙管同量的供试品及溶剂适量（共（共25ml）显色与判断：显色与判断：再于甲、乙、丙三管中分别加硫代乙酰胺试液2ml，2分钟后，同置白纸上，自上向下观察，当丙管中显出的颜色不浅于甲管时，乙管中显同置白纸上，自上向下观察，当丙管中显出的颜色不浅于甲管时，乙管中显示的颜色与甲管比较，不得更深。示的颜色与甲管比较，不得更深。如丙管中显出的颜色浅于甲管，应取样按第二法重新检查。第13页/共61页二、二、炽灼法炽灼法适用于适用于需先灼烧破坏，使与有机分子结合的

12、重金属游离出来，再取炽灼残渣进行检查的供试品。中药及其制剂的重金属检查多采用此法。检查原理：检查原理：将供试品炽灼破坏后，加硝酸处理，使有机物分解、破坏完 全，然后按第一法进行检查。操作：操作：取供试品一定量，缓缓炽灼至完全炭化，放冷，加硫酸0.51.0ml 使恰湿润，用低温加热至硫酸除尽后，加硝酸0.5ml，蒸干，至氧 化氮蒸气除尽后，放冷，在500600炽灼使完全灰化，放冷，加 盐酸2ml，置水浴上蒸干后，加水15ml，滴加氨试液至对酚酞指示 液显中性（微粉红色），再加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml，微热溶 解后移置纳氏比色管中，加水稀释成25ml，按照第一法检查。第14页/共61页 重

13、金属检查注意事项重金属检查注意事项u标准铅溶液标准铅溶液（每1ml相当于10g 的Pb）应临用前配制临用前配制，用量为2ml。配制与贮 存标准铅溶液用的玻璃容器，均不得含有铅。u显色条件显色条件：最佳酸度为pH=3.5。最佳显色时间为2分钟分钟。u若供试品溶液有颜色若供试品溶液有颜色，可在对照液管中加稀焦糖液加稀焦糖液或其他无干扰的有色溶液，使之与供试液颜色一致。u供试品中如含高铁盐供试品中如含高铁盐，影响检查，可在供试液管和对照液管中分别加入维生素维生素 C 0.51.0g，将高铁离子还原成为亚铁离子消除干扰。u炽灼温度炽灼温度必须控制在500600，温度过低灰化不完全，重金属不能全部游离

14、，温度在700以上，多数重金属盐都有不同程度的挥发损失。u为了消除盐酸或其他试剂可能夹杂重金属的影响，在配制供试品溶液时，如使 用的盐酸超过1.0ml（或与盐酸1.0ml相当的稀盐酸），氨试液超过2ml，或加 入其他试剂进行处理者，除另有规定外，对照液中应取同样同量的试剂置瓷对照液中应取同样同量的试剂置瓷 皿中蒸干皿中蒸干，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml与水15ml，微热溶解后，移置纳氏 比色管中，加标准铅溶液一定量，再用水稀释成25ml。第15页/共61页三、硫化钠法三、硫化钠法 适用于能溶于碱而不溶于稀酸（或在稀酸中即生成沉淀）的药物的重金属限量检查。检查原理检查原理：在碱性条件碱性条

15、件下，药物中的重金属离子重金属离子，与硫化钠硫化钠试液作用，生成 有色的金属硫化物混悬液，与一定量标准铅溶液经同法处所呈现 的颜色进行比较，判断供试品中重金属是否超过规定限量。Pb2+Na2S PbS+2Na+操作方法操作方法：除另有规定外，取供试品适量，加氢氧化钠试液5ml与水20ml溶解 后，置纳氏比色管中，加硫化钠试液5滴，摇匀，与一定量的标准 铅溶液同样处理后的颜色比较，不得更深。第16页/共61页 冰片中重金属检查 中国药典2010年版收载的冰片为人工合成品，又称合成龙脑。中国药典2010年版采用第一法对冰片进行重金属检查，并规定冰片含 重金属不得过百万分之五。地奥心血康中重金属检查

16、 地奥心血康为薯蓣科植物黄山药和穿山龙薯蓣的根茎提取物。中国药典2010年版采用第二法检查其重金属，并规定含重金属不得过百万分之二十。三、应用实例三、应用实例第17页/共61页一、古蔡氏法一、古蔡氏法 中国药典收载有两种砷盐检查法：古蔡氏法古蔡氏法和二乙基二硫代氨基甲酸二乙基二硫代氨基甲酸银法银法（Ag-DDC法）法）检查原理检查原理u砷盐与锌和盐酸作用产生砷化氢气体砷盐与锌和盐酸作用产生砷化氢气体；+3Zn +3H+AsH3+3Zn2+（反应快）（反应快）+3Zn +9H+AsH3+3Zn2+3H2O（反应快）（反应快）+4Zn+11H+AsH3+4Zn2+4H2O（反应慢）（反应慢）第18

17、页/共61页u砷化氢与溴化汞试纸作用，生成黄色至棕色的砷斑；AsH3+2HgBr2 2HBr +AsH（HgBr）2（黄色）（黄色）AsH3+3HgBr2 3HBr +AsH（HgBr）3（棕色）（棕色）u比较供试品砷斑与标准砷斑颜色的深浅，判定供试品中砷盐是否 超过限量。u供试品砷斑颜色比标准砷斑颜色浅，则供试品含砷盐符合规定；供试品砷斑颜色比标准砷斑颜色深，则供试品含砷盐不符合规定。第19页/共61页 检砷装置检砷装置A磨口锥形瓶 B磨口塞（中有一孔）C导气管（装醋酸铅棉花60mg）D有机玻璃旋塞 E有机玻璃旋塞盖 标准砷溶液（或供试液）标准砷溶液（或供试液）酸性氯化亚锡、盐酸、酸性氯化亚

18、锡、盐酸、碘化钾、锌粒、水碘化钾、锌粒、水醋酸铅棉花醋酸铅棉花溴化汞试纸溴化汞试纸使五价砷还原为三价砷使五价砷还原为三价砷 吸收吸收H H2 2S S气体气体与与AsHAsH3 3生成砷斑生成砷斑第20页/共61页 操作操作（1）导气管的准备：）导气管的准备：在导气管C中装入醋酸铅棉花60mg（高度为6080mm），再于旋塞D的顶端平面上放一片溴化汞试纸（试纸大小以能覆盖孔径而不露出平面外为宜），盖上旋塞盖E并旋紧，即得。（2）标准砷斑的制备：）标准砷斑的制备：精密量取标准砷溶液2ml，置A瓶中，加盐酸5ml与水21ml，再加碘化钾试液5ml与酸性氯化亚锡试液5滴，在室温放置10分钟后，加锌粒

19、2g，立即将照上法装妥的导气管C密塞于A瓶上，并将A瓶置2540水浴中，反应45分钟，取出溴化汞试纸，即得。（3）供试品砷盐检查）供试品砷盐检查：取按各品种项下规定方法制成的供试品溶液，置A瓶中，加盐酸5ml与水适量使成28ml，照标准砷斑的制备，自“再加碘化钾试液5ml”起，依法操作。将生成的砷斑与标准砷斑比较，不得更深。第21页/共61页课课 堂堂 活活 动动导气管中的醋酸铅棉花为什么要松紧适宜，保持干燥？导气管中的醋酸铅棉花为什么要松紧适宜，保持干燥？注意事项注意事项（1）标准砷溶液的制备标准砷溶液的制备：用三氧化二砷配制贮备液，临用前稀释而成。（2）标准砷溶液的用量标准砷溶液的用量：以

20、2ml为宜。（3）碘化钾和氯化亚锡的作用碘化钾和氯化亚锡的作用：主要是使五价砷还原为三价砷。（4）醋酸铅棉花醋酸铅棉花：用于吸收硫化氢气体。应松紧适宜、保持干燥。（5）锌粒：锌粒：无砷锌粒。锌粒大小以能过一号筛（粒径2mm左右）为宜。（6）反应时间反应时间：45分钟。（7）反应温度反应温度：控制在2540之间。第22页/共61页二、二乙基二硫代氨基甲酸银法二、二乙基二硫代氨基甲酸银法 本法简称Ag-DDC法，既可检查药品中砷盐限量，又可准确测定砷盐含量。检查原理：检查原理：利用金属锌与酸作用产生新生态的氢，与药品中的微量砷盐反应生 成具有挥发性的砷化氢，用二乙基二硫代氨基甲酸银试液吸收，使 二

21、乙基二硫代氨基甲酸银还原生成红色胶态银红色胶态银，与相同条件下一定 量的标准砷溶液所产生的颜色进行目视比色，或在510nm波长处以 二乙基二硫代氨基甲酸银试液作空白，测定吸光度测定吸光度，与标准砷对照 液同法测得的吸光度比较，以判定供试品中砷盐是否符合限量规定 或计算砷盐含量u要求供试液管的颜色不得比对照液管的颜色更深或供试液的吸光度不得比对照液的要求供试液管的颜色不得比对照液管的颜色更深或供试液的吸光度不得比对照液的吸光度更大。吸光度更大。第23页/共61页 Ag-DDC法检砷装置法检砷装置Ag-DDC试液试液+H2S 胶态银胶态银红色红色第24页/共61页 A为100ml 标准磨口锥形瓶；

22、B为中空的标准磨口塞，上连导气管C（一端的外径为8mm，内径为6mm；另一端长180mm，外径4mm，内径 1.6mm，尖端内径为1mm）。D为平底玻璃管（长180mm，内径10mm，于 5.0ml处有一刻度）。测试时，于导气管C中装入醋酸铅棉花60mg（装管高度约6080mm），并于D管管中精密加入二乙基二硫代氨基甲酸银试液二乙基二硫代氨基甲酸银试液（含1.8%三乙胺的 0.25%二 乙基二硫代氨基甲酸银的三氯甲烷溶液）5ml。A瓶中加入供试液（或标准砷溶液）及各种试剂（同古蔡氏法）。第25页/共61页 结果判断结果判断 比较供试液D管和对照液D管的颜色深浅或供试液和对照液的吸光度大小。u若

23、供试液若供试液D管的颜色浅于对照液管的颜色浅于对照液D管，或供试液的吸光度小于管，或供试液的吸光度小于 对照液的对照液的吸光度，则判为符合规定；若供试液吸光度，则判为符合规定；若供试液D管的颜色深于对照液管的颜色深于对照液D管，或供试液管，或供试液 的吸光度大于对照液的吸光度，则判为不符合规定。的吸光度大于对照液的吸光度，则判为不符合规定。注意事项注意事项（1）操作时由于在2540水浴中反应45分钟后，D管中有部分氯仿挥发，故比色前应添加氯仿至5.00ml，摇匀。（2）因二乙基二硫代氨基甲酸银试液带浅黄绿色，测吸光度时要用此试 液作空白。（3）其他注意事项同古蔡氏法。第26页/共61页 应用实

24、例应用实例（一）冰片中砷盐的检查（一）冰片中砷盐的检查 中国药典2010年版采用古蔡氏法对冰片中砷盐进行检查。并规定本品含砷盐不得过百万分之二。取本品1g，加氢氧化钙氢氧化钙0.5g与水2ml，混匀，置水浴上加热使本品挥发后，放冷，置检砷瓶A中，加盐酸中和，再加盐酸5ml与水适量使成28ml，再加碘化钾试液5ml与酸性氯化亚锡试液5滴，在室温放置10分钟后，加锌粒2g，立即将已准备好的导气管C与A瓶密塞，置2540水浴中反应45分钟，取出溴化汞试纸，将生成的砷斑与标准砷斑比较，不得更深。课课 堂堂 活活 动动冰片中砷盐检查，加氢氧化钙的作用是什么？冰片中砷盐检查，加氢氧化钙的作用是什么？第27

25、页/共61页（二）石膏中砷盐的检查（二）石膏中砷盐的检查 本品为硫酸盐类矿物硬石膏族石膏，主要含含水硫酸钙（CaSO42H2O）。中国药典2010年版用第二法（二乙基二硫代氨基甲酸银法）检查砷盐，规定含砷盐不得过百万分之二。点点 滴滴 积积 累累u 中药材种植及中药制剂生产中均会引入砷盐。砷盐有毒，应严格检查并控制其中药材种植及中药制剂生产中均会引入砷盐。砷盐有毒，应严格检查并控制其 限量。限量。u 砷盐检查法有两种：古蔡氏法和二乙基二硫代氨基甲酸银法。以古蔡氏法较常砷盐检查法有两种：古蔡氏法和二乙基二硫代氨基甲酸银法。以古蔡氏法较常 用。检查中药及其制剂的砷盐，多需要有机破坏后使砷游离出再检

26、查。用。检查中药及其制剂的砷盐，多需要有机破坏后使砷游离出再检查。u 古蔡氏法中，供试品中砷盐与盐酸和锌反应产生的砷化氢气体，与溴化汞试纸古蔡氏法中，供试品中砷盐与盐酸和锌反应产生的砷化氢气体，与溴化汞试纸 生成黄至棕色的砷斑，与标准砷斑比较，颜色不得更深。生成黄至棕色的砷斑，与标准砷斑比较，颜色不得更深。u 醋酸铅棉花的作用是吸收硫化氢；碘化钾和氯化亚锡的主要作用是将五价砷还醋酸铅棉花的作用是吸收硫化氢；碘化钾和氯化亚锡的主要作用是将五价砷还 原为三价砷。原为三价砷。第28页/共61页 中药注射剂中药注射剂 系指药材经提取、纯化后制成的供注入人体内的溶液、乳 状液及供临用前配制成溶液的粉末或

27、浓溶液的无菌制剂。现行版中国药典收载的中药注射剂有止喘灵注射液、灯盏细辛注射液、注射用双黄连（冻干）、注止喘灵注射液、灯盏细辛注射液、注射用双黄连（冻干）、注射用灯盏花素、清开灵注射液射用灯盏花素、清开灵注射液五个品种。中药注射剂有关物质中药注射剂有关物质 系指中药材经提取、纯化制成注射剂后，残留在注射剂中可能含有并需要控制的物质。u除另有规定外，中药注射剂一般应检查蛋白质、鞣质、树脂等，静脉注射液还应检查草酸盐、钾离子等。这些物质存在于注射剂中既会影响注射剂的澄明度，又会使患者注射后产生局部疼痛、红肿、组织坏死或出现过敏反应等。故应检查这些杂质并控制其存在量。第29页/共61页一、蛋白质检查

28、法一、蛋白质检查法 注射剂中的蛋白质在灭菌及贮存期间易聚集沉淀，从而影响注射剂的稳定性和澄明度，注射后还易引起过敏反应，故应检查。检查原理检查原理：利用蛋白质pH值小于等电点时呈正离子状态，可与磺基水杨酸或 鞣酸试剂产生不溶性的沉淀，以判断蛋白质的存在。操作方法：操作方法：除另有规定外，取注射液1ml，加新配制的30%的磺基水杨酸溶液 1ml，混匀，放置5分钟，不得出现浑浊。注射液中如含有遇酸能 产生沉淀的成分，可改用鞣酸试液13滴，不得出现浑浊。注意事项：注意事项：（1）试管应选质量较好、质地一致、无色、无刻度的玻璃试管。（2）磺基水杨酸试液应新鲜配制，否则会影响检验结果。（3）注射剂含有黄

29、芩苷、蒽醌类等成分时，应改用鞣酸试液检查。（4）某些注射剂遇酸能产生沉淀，会干扰检查结果，应注意。（5）如结果不明显，可取注射用水作空白，同法操作，加以比较。第30页/共61页二、鞣质检查法二、鞣质检查法 中药注射剂含鞣质，肌注会引起注射部位红肿、出现硬结和疼痛；静脉注射会引起凝血；在灭菌和贮存过程中，鞣质易被氧化，使注射液颜色加深、浑浊甚至生成沉淀，影响注射剂的澄明度和稳定性。因此，中药注射剂应检查鞣质。检查原理：检查原理：利用鞣质与蛋白质在水中形成鞣酸蛋白而析出沉淀，以判断鞣质 的存在。操作方法：操作方法：除另有规定外，取注射液1ml，加新配制的含1%鸡蛋清的生理氯 化钠溶液5ml，放置1

30、0分钟，不得出现浑浊或沉淀。如出现浑浊 或沉淀，取注射液1ml，加稀醋酸1滴，再加氯化钠明胶试液45 滴，不得出现浑浊或沉淀。注意事项：注意事项：（1）鸡蛋清生理氯化钠溶液应新鲜配制，否则影响检查结果。（2）含有聚乙二醇、聚山梨酯等聚氧乙烯基物质的注射液，虽有鞣质也不 产生沉淀，对这类注射液应取未加附加剂前的半成品检查。第31页/共61页三、树脂检查法三、树脂检查法 中药注射剂中如含树脂，在灭菌后或贮藏过程中容易析出，影响注射剂的澄明度，注射后还会引起疼痛。因此中药注射剂应进行树脂检查。测定原理：测定原理：利用树脂在酸性水中溶解度降低析出絮状沉淀，进行检查。操作方法：操作方法：除另有规定外，取

31、注射液5ml，加盐酸1滴，放置30分钟，不得 出现沉淀。如出现沉淀，可另取注射液5ml，加三氯甲烷10ml振 摇提取，分取三氯甲烷液，置水浴上蒸干，残渣加冰醋酸2ml使 溶解，置具塞试管中，加水3ml，混匀，放置30分钟，不得出现 沉淀。注意事项：注意事项：（1）用三氯甲烷提取时，应充分放置，使其分层完全，否则，易出现假 阳性。（2）如结果不明显，可取注射用水作空白，同法操作，加以比较。第32页/共61页 +CaCl2 CaC2O4+2Cl-四、草酸盐检查法四、草酸盐检查法 注射剂中如含有草酸盐，进入人体后会与钙离子结合为不溶于水的草酸钙而引起血栓，并使血液脱钙，甚至引起痉挛；故供静脉注射用的

32、注射剂还应检查草酸盐，以保证用药安全。检查原理检查原理：利用草酸盐与氯化钙反应生成不溶于水的草酸钙，以判断 草酸盐的存在。操作方法：操作方法：除另有规定外，取溶液型静脉注射液适量，用稀盐酸调节 pH值至 12，滤过，取滤液2ml，加氢氧化钠溶液调节pH 值至56，加3氯化钙溶液23滴，放置10分钟，不得出 现浑浊或沉淀。第33页/共61页五、钾离子检查法五、钾离子检查法 中药注射剂中钾离子含量过高，可引起局部刺激和心肌损害。用于静脉注射会使病人血钾浓度偏高，电解质平衡失调，故应对静脉注射剂中钾离子进行限量检查。检查原理检查原理 ：利用注射液中的钾离子与四苯硼钠试剂在酸性条件下生成白色沉淀，使供

33、试液浑浊，与一定量的标准钾离子溶液在相同条件下所产生的浊度进行比较，判断注射液中钾离子是否超过规定限度。操作方法操作方法：（1 1）除另有规定外，取静脉注射液2ml，蒸干，先用小火炽灼至炭化，再在500500600600炽灼至完全灰化，加稀醋酸2ml使溶解，置25ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。第34页/共61页（2）取10ml纳氏比色管两支，甲管甲管中精密加入标准钾离子溶液标准钾离子溶液0.8ml，加碱性甲醛溶液0.6ml、3%乙二胺四醋酸二钠溶液2滴、3%四苯硼钠溶液0.5ml，加水稀释成10ml，乙管乙管中精密加入供试品溶液供试品溶液1ml，与甲管同时依法操作，摇匀，甲

34、、乙两管同置黑纸上，自上向下透视，乙管中显出的浊度与甲管比较，不得更浓。注注意事项意事项（1）标准钾离子溶液的浓度为每1ml相当于100g的K。临用前用贮备液稀释配制。（2）供试品在炭化时，应注意缓慢加热，以防止暴沸而造成误差。炽灼温度应控制 在500600，灰化必须完全。第35页/共61页六、应用实例六、应用实例 注射用双黄连（冻干）有关物质的检查注射用双黄连（冻干）有关物质的检查u 注射用双黄连（冻干）是由连翘、金银花、黄芩三味中药制成的黄棕色无定形粉末或疏松固体状物。中国药典2010年版规定应检查蛋白质、鞣质、树脂、检查蛋白质、鞣质、树脂、草酸盐与钾离子草酸盐与钾离子等有关物质。第36页

35、/共61页一、概述一、概述（一）农药残留的来源 1栽培过程 2.生长环境 3.其他（二）农药按化学成分分类 1有机氯类 2有机磷类 3拟除虫菊酯类 4氨基甲酸酯类 5有机氮类第37页/共61页二、有机氯类农药残留量测定法二、有机氯类农药残留量测定法 方法：气相色谱法 仪器：气相色谱仪 检测器：63Ni-ECD电子捕获检测器 色谱柱：SE-54或DB-1701弹性石英毛细管柱 对照品：六六六（-BHC，-BHC，-BHC，-BHC）、滴滴涕（PP-DDE，PP-DDD，OP-DDT，PP-DDT）、五氯硝基苯（PCNB）色谱条件与系色谱条件与系统适用性试验统适用性试验对照品溶对照品溶液的制备液的

36、制备供试品溶供试品溶液的制备液的制备测测定定结果结果判断判断计计算算第38页/共61页三、有机磷类农药残留量测定法三、有机磷类农药残留量测定法 方法：气相色谱法 仪器：气相色谱仪 检测器：氮磷检测器（NPD）色谱柱：DB-17MS或HP-5弹性石英毛细管柱对照品：对硫磷、甲基对硫磷、乐果、氧化乐果、甲 胺磷、久效磷、二嗪农、乙硫磷、马拉硫磷、杀扑磷、敌敌畏、乙酰甲胺磷 色谱条件与系色谱条件与系统适用性试验统适用性试验对照品溶对照品溶液的制备液的制备供试品溶供试品溶液的制备液的制备测测定定结果结果判断判断计计算算第39页/共61页四、拟除虫菊酯类农药残留量测定四、拟除虫菊酯类农药残留量测定色谱条

37、件与系色谱条件与系统适用性试验统适用性试验对照品溶对照品溶液的制备液的制备供试品溶供试品溶液的制备液的制备测测定定结果结果判断判断计计算算 方法：气相色谱法 仪器：气相色谱仪 检测器：63Ni-ECD电子捕获检测器 色谱柱：SE-54或DB-5弹性石英毛细管柱 对照品:氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯 第40页/共61页五、应用实例五、应用实例色谱条件与系色谱条件与系统适用性试验统适用性试验对照品溶对照品溶液的制备液的制备供试品溶供试品溶液的制备液的制备测测定定结果结果判断判断计计算算黄芪中有机氯类农药残留量测定 第41页/共61页一、概述一、概述 中国药典规定酒剂和口服酊剂要进行甲醇量测定。除另

38、有规定外，酒剂或口服酊剂中甲醇量不得过0.05%（ml/ml）。除另有规定外，均采用气相色谱法来测定甲醇的含量。根据色谱柱不同，又分为第一法（毛细管柱法）和第二法（填充柱法）。第42页/共61页二、测定原理二、测定原理 第一法（毛细管柱法）毛细管柱法是采用气相色谱外标法测定酒剂或酊剂中的甲醇含量。第二法（填充柱法）填充柱法是采用气相色谱内标-校正因子法测定酒剂或酊剂中的甲醇含量。第43页/共61页三、操作方法三、操作方法第一法（毛细管柱法）色谱条件与系色谱条件与系统适用性试验统适用性试验对照品溶对照品溶液的制备液的制备供试品溶供试品溶液的制备液的制备测测定定第二法（填充柱法）色谱条件与系色谱条

39、件与系统适用性试验统适用性试验对照品溶对照品溶液的制备液的制备供试品溶供试品溶液的制备液的制备测测定定内标溶液内标溶液的制备的制备第44页/共61页四、计算四、计算 第一法（毛细管柱法）第二法（填充柱法）（1）校正因子计算校正因子（f）(AS/CS)/(AR/CR)（2）供试品含甲醇量的计算甲醇量（V/V%）=f /VS/VX100%第45页/共61页五、结果判断五、结果判断 根据测定的平均值计算，将计算结果与药品标准相比较，若含供试品含甲醇量低于或等于0.05%（ml/ml），则符合规定；若含甲醇量高于0.05%（ml/ml），则不符合规定。六、应用实例六、应用实例 寄生追风酒（寄生追风液）

40、中甲醇量检查 第46页/共61页一、概述一、概述 可见异物是指存在于注射剂、眼用液体制剂中，在规定条件下目视可以观测到的不溶性物质，其粒径或长度通常大于50m。常见可见异物有金属、玻璃、纤维、块状物、点状物及其他外来异物等。可见异物检查法有灯检法和光散射法。第47页/共61页二、灯检法二、灯检法（一）检查条件环境：灯检法应在暗室中进行 检查装置：A.带有遮光板的日光灯光源：光照度可在10004000lx范围内调节 B.反光的白色背景（指遮光板内侧）C.不反光的黑色背景 D.不反光的白色背景和底部（供检查有色异物）第48页/共61页检查人员条件：检查人员的远距离和近距离视力要求均应为4.9或4.

41、9以上（矫正后应为5.0或5.0以上）；同时应无色盲。检视距离：使供试品位于眼部的明视距离处（指供试品至人眼的清晰观测距离，通常为25cm）。第49页/共61页（二）操作方法 1.溶液型、乳状液及混悬型液体制剂 除另有规定外，取供试品20支（瓶），除去容器标签，擦净容器外壁；置供试品于遮光板边缘处，在明视距离，分别在黑色和白色背景下，手持供试品颈部轻轻旋转和翻转容器使药液中存在的可见异物悬，轻轻翻摇后即用目检视，重复3次，总时限为20秒。2.无菌原料药 除另有规定外，按抽样要求抽取各品种制剂项下最大规格量5份，分别置洁净透明的适宜容器内，用适宜的溶剂及适当的方法使药物全部溶解后，按上述方法检查

42、。第50页/共61页（三）注意事项1.不同药品检查时对光照度要求也不同。用无色透明容器包装的无色供试品溶液，检查时被观察样品所在处的光照度应为10001500lx；透明塑料容器包装或用棕色透明容器包装的供试品溶液或有色供试品溶液，检查时被观察样品所在处的光照度应为20003000lx；混悬型供试品或乳浊液，检查时被观察样品所在处的光照度应增加至约4000lx。2.正面不反光的黑色面作为检查无色或白色异物的背景，侧面和底面白色面作为检查有色异物的背景。第51页/共61页（四）结果判定 各类注射剂、眼用液体制剂 在静置一定时间后轻轻旋转时均不得检出烟雾状微粒柱，且不得检出金属屑、玻璃屑、长度或最大

43、粒径超过2mm的纤维和块状物等明显可见异物。微细可见异物（如点状物、2mm以下的短纤维和块状物等）如有检出，除另有规定外，应分别符合相应规定。第52页/共61页三、光散射法三、光散射法（一）检测原理 当一束单色激光照射溶液时，溶液中存在的不溶性物质使入射光发生散射，散射的能量与不溶性物质的大小有关。光散射法就是通过对溶液中不溶性物质引起的光散射能量的测量，并与规定的阈值比较，以检查可见异物。（二）仪器装置 仪器由旋瓶装置、激光光源，图像采集器、数据处理系统和终端显示系统组成，并配有自动上瓶和下瓶装置。（三）仪器校准 除另有规定外，分别用粒径为40m和60m的标准粒子对仪器进行标定。根据标定结果

44、得到曲线方程并计算出与粒径50m相对应的检测像素值。第53页/共61页（四）检查方法 1.溶液型注射液 除另有规定外，取供试品20支（瓶），除去不透明标签，擦净容器外壁，置仪器上瓶装置上，根据仪器使用说明书选择适宜的测定参数，启动仪器，将供试品检测3次并记录检测结果。2.注射用无菌粉末 除另有规定外，取供试品5支（瓶），用适宜的溶剂及适当的方法使药物全部溶解后，按上述方法检查。3.无菌原料药 除另有规定外，称取各品种制剂项下的最大规格量5份，分别置洁净透明的适宜容器内，用适宜的溶剂及适当的方法使药物全部溶解后，按上述方法检查。第54页/共61页（五）注意事项1.凡仪器判定有1次不合格者，须用灯

45、检法作进一步确认。用灯检法检查困难的品种（如用深色透明容器包装或液体色泽较深）不用灯检法确认。2.供试品溶液应为目视透明溶液，安瓿上的印字在仪器旋瓶时如不脱落并不影响测定结果。3.本法不适用于易产生气泡且气泡不易消除的供试品，如高分子溶液。（六）结果判定 同灯检法第55页/共61页一、概述一、概述 特殊杂质指在某些药物制剂生产和贮运过程中，由于药物本身的性质、生产方式及工艺条件可能引入的杂质。特殊杂质的检查一般是利用药品和杂质的理化性质及生理作用的差异，采用物理的、化学的、药理的、微生物的方法来进行。第56页/共61页二、乌头碱的检查二、乌头碱的检查1.三七伤药片和附子理中丸中乌头碱的限量检查

46、-薄层色谱法 供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上出现的斑点应小于对照品的斑点，或不出现斑点。2.制川乌中酯型生物碱的检查-高效液相色谱法 制川乌中含双酯型生物碱以乌头碱（C34H47NO11）、次乌头碱（C33H45NO10）及新乌头碱（C33H45NO11）的总量计，不得过0.040%。第57页/共61页三、猪去氧胆酸的检查三、猪去氧胆酸的检查 安宫牛黄丸中猪去氧胆酸的限量检查-薄层色谱法 供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点。第58页/共61页四、土大黄苷的检查四、土大黄苷的检查1.大黄流浸膏中土大黄苷的检查-荧光分析法 置紫外光灯(365nm)下观察，不得显持久的亮紫色荧光。2.三黄片中土大黄苷的检查-薄层色谱法 供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，不得显相同颜色的荧光斑点。五、焦袂康酸的检查五、焦袂康酸的检查 灯盏生脉胶囊中焦袂康酸的检查-化学反应法 供试品的水溶液加三氯化铁试液1滴，不得显红色。第59页/共61页卫生部教材办公室人民卫生电子音像出版社第60页/共61页谢谢您的观看！第61页/共61页