维生素B测定学习.pptx

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1、一、实验目的荧光光度法测定多维葡萄糖粉中维生素B2学会使用荧光光度计第1页/共10页二、实验原理维生素B2（又叫核黄素，VB2）是橘黄色无臭的针状结晶易溶于水而不溶于乙醚等有机溶剂在中性或酸性溶液中稳定光照易分解，对热稳定第2页/共10页二、实验原理第3页/共10页二、实验原理在430440nm蓝光的照射下，发出绿色荧光，荧光峰在535nm。维生素B2在pH=67的溶液中荧光强度最大，在pH=11的碱性溶液中荧光消失，荧光分光光度法第4页/共10页三、实验试剂、仪器荧光光度计5ml吸量管1只，2ml吸量管1只，50ml容量瓶6只,100ml容量瓶1只10.0g/ml维生素B2标准溶液，冰乙酸，

2、多维葡萄糖粉试样.第5页/共10页四、实验步骤了解荧光光度计的基本操作，调节仪器到工作状态。设置激发波长为440nm，发射波长为540nm，灵敏度2，入射缝宽和出射缝宽均为10nm。第6页/共10页四、实验步骤(1)标准系列溶液的配制及标准溶液荧光强度的测定：标准液：0.50、1.00、1.50，2.00，2.50，3.00ml冰醋酸：2.00ml浓度：0.1，0.2，0.3，0.4，0.5，0.6ug/ml从稀到浓测量系列标准溶液的荧光强度第7页/共10页四、实验步骤（2）未知样的测定多维葡萄糖粉试样：1.3368g冰醋酸：2.00ml用测定标准系列时相同的条件，平行测量其荧光强度3次第8页/共10页五、实验数据处理以维生素B2的浓度为横坐标，相对荧光强度为纵坐标，绘制标准曲线。根据测得的被测样品的相对荧光强度含量在标准曲线上确定其浓度。第9页/共10页感谢您的观看！第10页/共10页