高中生物选修1PPT课件-DNA的粗提取与鉴定.ppt

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1、DNADNA和蛋白质技术和蛋白质技术DNADNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定1 1、DNADNA的溶解性的溶解性的溶解性的溶解性DNADNA和和和和蛋蛋蛋蛋白白白白质质质质等等等等其其其其他他他他成成成成分分分分在在在在不不不不同同同同浓浓浓浓度度度度的的的的NaClNaCl溶溶溶溶液液液液中中中中溶溶溶溶解解解解度度度度不不不不同同同同，利利利利用用用用这这这这一一一一特特特特点点点点，选选选选择择择择适适适适当当当当的的的的盐盐盐盐浓浓浓浓度度度度就就就就能能能能使使使使DNADNA充充充充分分分分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。

2、溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。根根根根据据据据DNADNADNADNA在在在在NaClNaClNaClNaCl溶溶溶溶液液液液中中中中的的的的溶溶溶溶解解解解度度度度曲曲曲曲线线线线图图图图，思思思思考考考考在在在在什什什什么么么么浓浓浓浓度度度度下下下下，DNADNADNADNA的的的的溶溶溶溶解解解解度度度度最最最最小小小小？DNADNADNADNA在在在在NaClNaClNaClNaCl溶溶溶溶液液液液中中中中的的的的溶溶溶溶解解解解度度度度是是是是如如如如何何何何变化的变化的变化的变化的？如如如如何何何何通通通通过过过过控控

3、控控制制制制NaClNaClNaClNaCl溶溶溶溶液液液液的的的的浓浓浓浓度度度度使使使使DNADNADNADNA在在在在盐盐盐盐溶溶溶溶液液液液中中中中溶溶溶溶解解解解或或或或析出？析出？析出？析出？2 2、DNADNA在酒精溶液中的溶解性在酒精溶液中的溶解性在酒精溶液中的溶解性在酒精溶液中的溶解性DNADNA不不不不溶溶溶溶于于于于酒酒酒酒精精精精溶溶溶溶液液液液，但但但但是是是是细细细细胞胞胞胞中中中中的的的的某某某某些些些些蛋蛋蛋蛋白白白白质质质质则则则则可可可可以以以以溶溶溶溶于于于于酒酒酒酒精精精精。利利利利用用用用这这这这一一一一原原原原理理理理，可可可可以以以以将将将将DNA

4、DNA与与与与蛋蛋蛋蛋白白白白质质质质进进进进一步分离一步分离一步分离一步分离3 3 3 3、DNADNADNADNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性对酶、高温和洗涤剂的耐受性对酶、高温和洗涤剂的耐受性对酶、高温和洗涤剂的耐受性蛋白酶能水解蛋白质，但是蛋白酶能水解蛋白质，但是蛋白酶能水解蛋白质，但是蛋白酶能水解蛋白质，但是对对对对DNADNADNADNA没有影响没有影响没有影响没有影响大多数蛋白质不能忍受大多数蛋白质不能忍受大多数蛋白质不能忍受大多数蛋白质不能忍受6060606080808080的高温，而的高温，而的高温，而的高温，而DNADNADNADNA在在在在80808080以以以以上才会变性

5、上才会变性上才会变性上才会变性洗涤剂可以溶解细胞的细胞洗涤剂可以溶解细胞的细胞洗涤剂可以溶解细胞的细胞洗涤剂可以溶解细胞的细胞膜，去除脂质和蛋白质膜，去除脂质和蛋白质膜，去除脂质和蛋白质膜，去除脂质和蛋白质,但对但对但对但对DNADNADNADNA没有影响没有影响没有影响没有影响4.DNA的鉴定的鉴定DNA与二苯胺（沸水浴）会染成蓝色与二苯胺（沸水浴）会染成蓝色（一）实验材料的选取（一）实验材料的选取（一）实验材料的选取（一）实验材料的选取实验设计实验设计（二）破碎细胞，获取含（二）破碎细胞，获取含（二）破碎细胞，获取含（二）破碎细胞，获取含DNADNADNADNA的滤液的滤液的滤液的滤液思思

6、思思考考考考：为为为为什什什什么么么么加加加加入入入入蒸蒸蒸蒸馏馏馏馏水水水水能能能能使使使使鸡鸡鸡鸡血血血血细细细细胞胞胞胞破破破破裂？裂？裂？裂？2 2 2 2、植物细胞、植物细胞、植物细胞、植物细胞植植植植物物物物细细细细胞胞胞胞需需需需要要要要先先先先用用用用一一一一定定定定的的的的洗洗洗洗涤涤涤涤剂剂剂剂和和和和食食食食盐盐盐盐，进进进进行行行行充充充充分分分分的的的的搅拌和研磨。搅拌和研磨。搅拌和研磨。搅拌和研磨。讨讨论论：如如果果研研磨磨不不充充分分，会会对对实验结果产生怎样的影响？实验结果产生怎样的影响？（三）去除滤液中的杂质（三）去除滤液中的杂质（三）去除滤液中的杂质（三）去

7、除滤液中的杂质为为了了纯纯化化提提取取的的DNADNA，需需要将滤液作进一步处理要将滤液作进一步处理讨讨论论：此此步步骤骤获获得得的的滤滤液液中中可可能能含含有哪些细胞成分？有哪些细胞成分？答答：可可能能含含有有核核蛋蛋白白、多多糖糖和和RNA等等杂质杂质为为什什么么反反复复地地溶溶解解与与析析出出DNADNA，能能够够去去除除杂杂质？质？方案一方案一方案一方案一 利用利用利用利用DNADNA在不同浓度的在不同浓度的在不同浓度的在不同浓度的NaClNaCl溶液中溶解度的溶液中溶解度的溶液中溶解度的溶液中溶解度的不同，通过控制不同，通过控制不同，通过控制不同，通过控制NaClNaCl溶液的浓度去

8、除杂质。具体做法溶液的浓度去除杂质。具体做法溶液的浓度去除杂质。具体做法溶液的浓度去除杂质。具体做法是：在滤液中加入是：在滤液中加入是：在滤液中加入是：在滤液中加入NaClNaCl，使，使，使，使NaClNaCl溶液物质的量浓度为溶液物质的量浓度为溶液物质的量浓度为溶液物质的量浓度为2mol/L2mol/L，过滤除去不溶的杂质，再调节，过滤除去不溶的杂质，再调节，过滤除去不溶的杂质，再调节，过滤除去不溶的杂质，再调节NaClNaCl溶液物质溶液物质溶液物质溶液物质的量浓度为的量浓度为的量浓度为的量浓度为0.14mol/L0.14mol/L，析出，析出，析出，析出DNADNA，过滤去除溶液中的，

9、过滤去除溶液中的，过滤去除溶液中的，过滤去除溶液中的杂质，再用物质的量浓度为杂质，再用物质的量浓度为杂质，再用物质的量浓度为杂质，再用物质的量浓度为2mol/L2mol/L的的的的NaClNaCl溶液溶解溶液溶解溶液溶解溶液溶解DNADNA方案二方案二方案二方案二 直接在滤液中加入嫩肉粉，反应直接在滤液中加入嫩肉粉，反应直接在滤液中加入嫩肉粉，反应直接在滤液中加入嫩肉粉，反应10151015分钟，分钟，分钟，分钟，嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。方案三方案三方案三方案三 将滤液放在将

10、滤液放在将滤液放在将滤液放在60756075的恒温水浴箱中保温的恒温水浴箱中保温的恒温水浴箱中保温的恒温水浴箱中保温1010101015151515分钟，注意严格控制温度范围。分钟，注意严格控制温度范围。分钟，注意严格控制温度范围。分钟，注意严格控制温度范围。（四）（四）（四）（四）DNADNADNADNA的析出与鉴定的析出与鉴定的析出与鉴定的析出与鉴定实验中对实验中对DNA进行鉴定时做如下操作进行鉴定时做如下操作:AB1加入加入2mol/L的的NaCl溶液溶液5mL加入加入2mol/L的的NaCl溶液溶液5mL2加丝状物并搅拌加丝状物并搅拌不加不加3加加4mL二苯胺二苯胺,混匀混匀 加加4mL二苯胺二苯胺,混匀混匀4沸水浴沸水浴5min沸水浴沸水浴5min实验现象实验现象a:b:实验结论实验结论c:试管试管序号序号变蓝变蓝不变不变丝状物主要是丝状物主要是DNA