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1、微生物发酵灭菌工 复习题及参考答案 一、简述题(每题 10 分,共 80 分)1.根据微生物对温度的依赖可分类成哪几类微生物?微生物对温度要求不同的原理是什么?什么是发酵热?生物热的大小及哪些因素有关?答:面不同微生物的生长对温度的要求不同,根据它们对温度的要求大致可分为四类:嗜冷菌适应于 0260C 生长,嗜温菌适应于 1543 生长,嗜热菌适应于 3765 生长,嗜高温菌适应于 65 以上生长。2分 微生物及温度相关性的原理:1、微生物对温度的要求不同及它们的膜构造物理化学性质有密切关系;2、蛋白质构造;3、蛋白质合成;4、合成冷休克蛋白。4 分 发酵热就是发酵过程中释放出来的净热量。2
2、分 生物热的大小及发酵类型密切相关,微生物进展有氧呼吸产生的热比厌氧发酵产生的热多。2 分 2.什么是培养基?常用的无机氮源和有机氮源有哪些?有机氮源在发酵培养基中的作用?答:广义上讲培养基是指一切可供微生物细胞生长繁殖所需的一组营养物质和原料。同时培养基也为微生物培养提供除营养外的其它所必须的条件。2 分 常用的无机氮源:氨盐、硝酸盐和氨水2 分;常用的有机氮源:花生饼粉、黄豆饼粉、棉子饼粉、玉米浆、玉米蛋白粉、蛋白胨、酵母粉、鱼粉、蚕蛹粉、尿素、废菌丝体和酒糟等。4 分 有机氮源除提供氮源外,有些还提供大量的无机盐及生长因子。2 分 3.什么是种子的扩大培养?种子扩大培养的目的及要求?种子
3、扩大培养的一般步骤?答:种子扩大培养是指将保存在砂土管、冷冻枯燥管中处休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后,再经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级扩大培养,最终获得一定数量和质量的纯种过程。种子扩大培养的目的:1.提供大量而新鲜的、具有较高活力的菌种接种量的需要;2.让菌种从固试管、液体试管,逐步适应菌种的驯化:3.菌种经过扩大培养,可以提高生产的成功率,减少“倒罐现象缩短发酵时间、保证生产水平。种子的要求:总量及浓度能满足要求;生理状况稳定,个体及群体;活力强,移种至发酵后,能够迅速生长;无杂菌污染。一般步骤:休眠孢子母斜面活化摇瓶种子或茄子瓶斜面或固体培养基孢子一级种子罐二级种子罐发酵罐 4.在大规
4、模发酵的种子制备过程中,实验室阶段和生产车间阶段在培养基选择上各有何特点?答:实验室种子培养阶段,规模一般比拟小,因此为了保证培养基的质量,培养基的原料一般都比拟精细。5 分 生产车间阶段,在原料方面不如实验室阶段那么精细,而是根本接近于发酵培养基,这有两个方面的原因:一是本钱,二是驯化。5分 5.微生物生长可分为几个阶段?次级代谢产物在什么阶段开场合成?答:微生物生长分为:迟滞期、对数生长期、稳定期和死亡期。5分 次级代谢产物在对数生长期后期和稳定期才开场大量合成。5分 6.发酵过程中会不会发生变化?为什么?对发酵的影响表现在哪些方面?发酵过程的控制可以采取哪些措施?答:发酵过程中是不断变化
5、的。2 分原因:1糖代谢特别是快速利用的糖,分解成小分子酸、醇,使下降。糖缺乏,上升,是补料的标志之一 2 氮代谢当氨基酸中的 2 被利用后会下降;尿素被分解成 3,上升,3 利用后下降,当碳源缺乏时氮源当碳源利用上升。3生理酸碱性物质利用后会上升或下降 4 某些产物本身呈酸性或碱性,使发酵液变化。如有机酸类产生使下降,红霉素、洁霉素、螺旋霉素等抗生素呈碱性,使上升。5菌体自溶 上升,发酵后期,上升 6杂菌的污染,下降 3 分 对发酵的影响:1影响酶的活性。2影响微生物细胞膜所带电荷。从而改变细胞膜的透性,影响微生物对营养物质的吸收及代谢物的排泄,因此影响新陈代谢的进展。3 值影响培养基某些成
6、分和中间代谢物的解离,从而影响微生物对这些物质的利用。4值影响代谢方向。5在微生物培养的不同阶段有不同的影响。3 分 控制可以采取哪些措施:1 调节根底培养基的配方。、碳源种类和浓度:2 补料的控制。简单的加酸加碱;补入无机氮源;同时补入碳氮源。2 分 7.什么是正突变?什么是负突变?什么是构造类似物?什么是诱变育种?常用的诱变剂有哪些?答:在自然突变中,有一种是我们生产上希望看到的,对生产有利,这种突变称为正突变 2 分;另一种是我们生产上所不希望看到的,表现为菌株的衰退和生产质量的下降,这种突变成为负突变。2 分 构造类似物:在化学和空间构造上和代谢的中间物终产物相似,因而在代谢调节方面可
7、以代替代谢中间物终产物的功能,但细胞不能以其作为自身的营养物质。2 分 用各种物理、化学的因素人工诱发基因突变进展的筛选,称为诱变育种2 分 诱变剂:物理诱变剂有紫外,X 射线,射线,快中子等;化学诱变剂有硫酸二乙酯,亚硝基胍等。2 分 8.染菌对发酵有什么危害,对提炼有什么危害?有哪些原因会引起染菌?染菌以后应采取什么措施?答:染菌对发酵的危害:生产不同的品种,可污染不同种类和性质的微生物。不同污染时间,不同污染途径,污染不同菌量,不同培养基和培养条件又可产生不同后果 分)染菌对提炼的危害:染菌的发酵液一般发粘,过滤困难。染菌发酵液中含有比正常发酵液更多的水溶性蛋白和其它杂质,比拟难于进一步提炼。分)染菌原因:分 染菌以后应采取的措施:染菌后的培养基必须灭菌后才可放下水道。凡染菌的罐要找染菌的原因,对症下药,该罐也要彻底清洗,进展空罐消毒,才可进罐。染菌厉害时,车间环境要用石灰消毒,空气用甲醛熏蒸。特别,假设染噬菌体,空气必须用甲醛蒸汽消毒。分)二、论述题(20 分)假设你是某发酵企业的总工程师,请论述投产某一发酵产品应考虑的因素。答:内容和要点局部15 分 产品的市场情况5 分 产品在当地的原料情况5 分 产品的本钱情况技术含量,人才情况等5 分 综合组织水平5 分
限制150内