不同生姜提取物对雄性小鼠生殖毒性的研究.ppt

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3、，因此有必要进行整体动物实验。有必要进行整体动物实验。初步探讨采用整体动物实验，生姜提取物对雄初步探讨采用整体动物实验，生姜提取物对雄性生殖系统的影响，为生姜新产品的开发提性生殖系统的影响，为生姜新产品的开发提供毒理学依据。供毒理学依据。研究方法研究方法小鼠生殖脏器系数测定小鼠生殖脏器系数测定小鼠睾丸染色体畸变试验小鼠睾丸染色体畸变试验 小鼠精子畸形试验小鼠精子畸形试验 试试验验方方法法20g20g姜粉姜粉生姜提取物生姜提取物5050水浴水浴3h3h 生姜醇提物生姜醇提物生姜水提物生姜水提物每次加每次加200mL200mL水水200mL200mL乙醇乙醇煮煎煮煎3 3次次 过滤过滤浓缩浓缩 动

4、物分组动物分组阴性对照组（阴性对照组（NCGNCG）环磷酰胺注射组（环磷酰胺注射组（CPCP）生姜水提物灌胃组（生姜水提物灌胃组（AEGAEG）生姜水提物灌胃和环磷酰胺注射组（生姜水提物灌胃和环磷酰胺注射组（AEG+CPAEG+CP）生姜醇提物灌胃组（生姜醇提物灌胃组（EEGEEG）生姜醇提物灌胃和环磷酰胺注射组（生姜醇提物灌胃和环磷酰胺注射组（EEG+CPEEG+CP）动物分组动物分组动物处理方法动物处理方法给予受试物前隔夜禁食给予受试物前隔夜禁食1616小时，不禁水。按照小时，不禁水。按照体重给予受试物，环磷酰胺体重给予受试物，环磷酰胺0.1ml/10g0.1ml/10g体重腹腔体重腹腔注

5、射，生姜提取物和生理盐水均以注射，生姜提取物和生理盐水均以0.1ml/10g0.1ml/10g体体重灌胃。连续处理五天重灌胃。连续处理五天 生殖脏器系数测定生殖脏器系数测定计算公式：计算公式：计算公式：计算公式：睾丸（附睾睾丸（附睾/精囊）脏器系数（精囊）脏器系数（%）=100=100 小鼠睾丸染色体畸变试验小鼠睾丸染色体畸变试验适用于检测环境有害物质对整体哺乳动物睾丸适用于检测环境有害物质对整体哺乳动物睾丸生殖细胞染色体的损伤，是目前常用的一种较生殖细胞染色体的损伤，是目前常用的一种较好的检测外源性化合物生殖毒性的方法好的检测外源性化合物生殖毒性的方法 。小鼠睾丸染色体畸变试验小鼠睾丸染色体

6、畸变试验 操作：操作：小鼠处死小鼠处死双侧睾丸双侧睾丸 磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液（1mL1mL）剪碎剪碎离心管定容离心离心管定容离心10minKCl10minKCl溶液恒温溶液恒温20min20min离心离心10min 10min 固定液固定液10min 10min 离心离心10min 10min 固定固定20min 20min 混匀混匀滴片滴片染色染色 小鼠精子畸形试验小鼠精子畸形试验优点优点优点优点：敏感性高、简明、快速、终点明确敏感性高、简明、快速、终点明确精子收集精子收集精子收集精子收集：小鼠处死小鼠处死双侧附睾双侧附睾 磷酸盐缓冲生理盐水磷酸盐缓冲生理盐水（1ml1ml）剪碎剪碎再加

7、再加1 12ml2ml稀释稀释静止静止3 35 5分钟分钟精子悬液精子悬液制片制片制片制片：涂片涂片干燥干燥无水甲醇固定（无水甲醇固定（5 5分钟）分钟）染色（染色（2%2%伊红伊红10 10 20 20分）分）洗片洗片观察观察试验结果试验结果 显微镜下观察显微镜下观察1生殖脏器系数的测定生殖脏器系数的测定2小鼠睾丸染色体畸变试验小鼠睾丸染色体畸变试验3小鼠精子畸形试验小鼠精子畸形试验4 显微镜下观察睾丸染色体显微镜下观察睾丸染色体 显微镜下观察精子显微镜下观察精子生殖脏器系数的测定生殖脏器系数的测定组别睾丸脏器系数附睾脏器系数精囊脏器系数NCG0.4630.04950.2450.0560.6

8、590.226*CP0.3370.1360.1800.290.3680.102AEG0.4180.0770.2070.0230.5090.085EEG0.4520.1310.2300.0470.5620.153*AEG+CP0.3930.2080.2220.0420.6860.1187*EEG+CP0.4930.0200.3680.0420.5220.081*表示与表示与cpcp组比较组比较P0.05P0.05 小鼠睾丸染色体畸变试验小鼠睾丸染色体畸变试验组别动物数（只）镜检细胞数（个）染色体畸变率（%）NCG55003.801.48*CP550011.03.54AEG55004.402.80

9、*EEG55004.201.30*AEG+CP55007.401.52*EEG+CP55007.602.07*表示与表示与cpcp组比较组比较P0.05P0.05小鼠精子畸形试验小鼠精子畸形试验结论结论生姜提取物生姜提取物 1不能对小鼠不能对小鼠的生殖脏器的生殖脏器系数产生不系数产生不利影响利影响2不能诱发小不能诱发小鼠睾丸染色鼠睾丸染色体畸变体畸变3不能诱发小不能诱发小鼠精子畸形鼠精子畸形结论结论生姜提取物生姜提取物 1改善了环磷酰改善了环磷酰胺作用下生殖胺作用下生殖脏器系数降低脏器系数降低的状况的状况2对环磷酰胺诱对环磷酰胺诱发的小鼠睾丸发的小鼠睾丸染色体畸变具染色体畸变具有明显的抑制有明显的抑制作用作用3对环磷酰胺诱对环磷酰胺诱发的小鼠精子发的小鼠精子畸形具有明显畸形具有明显的抑制作用的抑制作用结论结论1 1对雄性小鼠无生殖毒性对雄性小鼠无生殖毒性2 2对环磷酰胺诱发的生殖对环磷酰胺诱发的生殖毒性有一定的抑制作用毒性有一定的抑制作用请请老老师师批批评评指指正正!