《实验室检验》课件.ppt
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1、兽医临床诊断技术讲稿第第2 2章章 实验室检验实验室检验l实验室检验就是运用物理学、化学和生物学等实验技术和方法,对病畜的血液、尿液、粪便、体液(如胃液、脑脊髓液、胸腹腔穿刺液)、组织细胞及病理产物,在实验室特定的设备和条件下,测定其物理性状,分析其化学成分,或借助于显微镜观察其有形成分的方法,以获取反映机体功能状态,病理变化或病因等客观资料,配合临床资料进行综合分析。l实验室检验是一种复杂而细致的工作,为了得到正确的结果,必须遵守严格的操作规程和次序。采取的样本必须有代表性,检验所有的试剂与器材,应符合要求,并定期进行检查和校正。要注意消毒工作,污染的器皿应先消毒后洗涤,以防传染性物质的扩散
2、。血液检验l血液检验是临床医学检验中应用最广,对辅助诊断最有价值,最常用的基本内容之一。血液是由血浆和血细胞两部分组成,是通过循环系统与全身各个组织器官密切联系,参与机体呼吸、运输、防御,调节生理,维持正常新陈代谢和内外环境平衡的。临床血液学检查内容l物理学检查:借助物理学方法测定其物理特性,如出血时间、凝血时间、红细胞脆性、红细胞沉降率、红细胞压积。l化学检验:即用定性或定量的化学分析方法,检测被检标本各种化学成分方面的变化,如血红蛋白的检查。l显微镜检查:检查其血细胞的形态及数量的变化,如红细胞,白细胞,血小板等。临床血液检查内容l自动化仪器检验,血液分析仪兽医临床诊断技术讲稿血液检验血液
3、检验血液样本的采取与抗凝血液样本的采取与抗凝血液样本的采取血液样本的采取 采血的部位和方法,根据检验的项目、所采血的部位和方法,根据检验的项目、所需血量和动物种类的不同,可分为毛细血需血量和动物种类的不同,可分为毛细血管采血、静脉采血和心脏采血。管采血、静脉采血和心脏采血。毛毛细细血血管管采采血血法法 除除血血沉沉测测定定和和红红细细胞胞压压积积测测定定需需较较多多量量血血液液外外,其其他他各各项项测测定定均均可可在在耳耳尖尖、耳耳缘缘及及耳耳静静脉脉处处按按毛毛细细血血管管采采血血。采采血血前前先先剪剪毛毛,酒酒精精棉棉球球消消毒毒,待待酒酒精精挥挥发发后后,用用消消毒毒的的干干燥燥的的针针
4、头头迅迅速速刺刺入入23mm深深,让让血血液液自自然然流流出出,且且勿勿挤挤压以免混入过多组织液。压以免混入过多组织液。流流出出的的第第一一滴滴血血,可可用用于于制制作作血血片片,然然后后用用干干棉棉球球擦擦去去局局部部的的剩剩余余血血液液,用用流流出出的的第第二二滴滴血血液液作作红红、白白细细胞胞计计数数和和血血红红蛋蛋白白测测定定,若若利利用用第第三三滴滴血血时时,仍仍要要将将第第二二滴滴血血擦擦干干,否否则则流流出出的血不能形成滴状,不易吸取。的血不能形成滴状,不易吸取。静静脉脉采采血血法法 马马、牛牛、羊羊可可由由颈颈静静脉脉采采血血。猪猪可可选选用用前前腔腔静静脉脉采采血血;鸡鸡可可
5、由由翼翼下下静静脉脉采采血血,即即用用细细针针头头刺刺入入翼翼下下静静脉脉后后,任任血血液液自自行行流流出出并并接接入入试试管管中中。犬犬、猫猫可可于于小小腿腿外外侧侧跖跖背背外外侧侧静静脉脉或或前前臂臂内内侧侧皮皮下下静静脉脉采采血血。局局部部剪剪毛毛消消毒毒,用用止止血血带带扎扎住住采采血血部部上上端端,使使静静脉脉怒怒张张,用用消消毒毒、干干燥燥的的注注射射器器接接上上针针头头,针针头头斜斜上上面面刺刺入入静静脉脉采采血血,待待抽抽至至所所需需量量后后,先先放放松松止止血血带带,再再用用消消毒毒棉棉球球按按住住伤伤口口,拔拔出出针针头头。除除去去针针头头,将将血血液液缓缓缓缓注注入入清清
6、洁洁的的试试管管内内。需需抗抗凝凝血血液液时时,试试管管内内加加抗抗凝凝剂,并立即混匀,以免凝固。剂,并立即混匀,以免凝固。心心脏脏采采血血法法 多多用用于于鸡鸡及及实实验验动动物物多多量量血血液液时时,鸡鸡可可由由胸胸腔腔入入口口处处向向心心脏脏刺刺入入由由于于心心腔腔压压力力较较静静脉脉高高,血血液液自自然然涌涌入入注注射射器器,兔兔及及鸡鸡亦亦可可在在左左侧侧胸胸部部第第1、2肋肋间间,心心搏搏动动明明显显处处,针针头头与与胸壁呈垂直方向缓缓刺入。胸壁呈垂直方向缓缓刺入。l猪的前腔静脉采血马的颈静脉采血兔的耳静脉采血兽医临床诊断技术讲稿血液检验血液检验血液的抗凝血液的抗凝草酸钠草酸钠 是
7、常用的抗凝剂,每是常用的抗凝剂,每1.52.0mg可抗凝可抗凝1.0ml血液,可用于血液常规检验。因对红细胞大小有影响,血液,可用于血液常规检验。因对红细胞大小有影响,故不能用红细胞压积测定,如测定红细胞压积时,可故不能用红细胞压积测定,如测定红细胞压积时,可用双草酸盐抗凝剂或乙二胺四乙酸二钠。用双草酸盐抗凝剂或乙二胺四乙酸二钠。双草酸盐抗凝剂双草酸盐抗凝剂 草酸钠草酸钠 0.8g草酸铵草酸铵 1.2g蒸馏水蒸馏水 加至加至100ml 溶解后吸取溶解后吸取0.5ml,加入供采血试管或小瓶中,置干,加入供采血试管或小瓶中,置干燥箱内(温度不超过燥箱内(温度不超过80)烘干备用,可供)烘干备用,可
8、供5ml全血全血抗凝。抗凝。兽医临床诊断技术讲稿血液检验血液检验乙乙二二胺胺四四乙乙酸酸二二钠钠(EDTANa2)每每10mg可可使使5ml全全血血抗抗凝凝;或或配配成成10%的的溶溶液液,每每2滴滴可可使使5ml全全血血抗抗凝凝。可可适适用用于于一一般般的的血血液液学学检检查查,特特别别是是血血小小板板计计数数,但但因因为为影影响响血血小小板板聚聚集集和和白白细细胞胞吞吞噬噬功功能能,不不适适合合于于血血象及血小板功能检查。象及血小板功能检查。3.8%枸枸橼橼酸酸钠钠溶溶液液 每每0.5ml可可使使5ml全全血血抗抗凝凝。常常用用于于血血沉沉、凝凝血血因因子子和和血血小小板板功功能能检检查查
9、。因因其其毒毒性性小小又又可可作作为为血血液液保保养养液液。但但不不适适用用于于血血液液化化学学检检验验。由由于于抗抗凝凝剂剂溶溶解解缓缓慢慢,故故只只能能配配成溶液,不能用粉剂。成溶液,不能用粉剂。血液的抗凝血液的抗凝兽医临床诊断技术讲稿血液检验血液检验肝素肝素 肝素价格最贵,其优点是抗凝作用强,不影响肝素价格最贵,其优点是抗凝作用强,不影响血细胞的体积,不致溶血等,可用于多种血液生物化血细胞的体积,不致溶血等,可用于多种血液生物化学分析和红细胞压积测定。但过量的肝素可引起白细学分析和红细胞压积测定。但过量的肝素可引起白细胞聚集和血小板减少,故不适用于白细胞和血小板计胞聚集和血小板减少,故不
10、适用于白细胞和血小板计数,也不适用于血涂片检查,因其在瑞氏染色时会出数,也不适用于血涂片检查,因其在瑞氏染色时会出现蓝色背景,更不能用于凝血象的检查。现蓝色背景,更不能用于凝血象的检查。血液的抗凝血液的抗凝通常用肝素粉剂配成通常用肝素粉剂配成1g/L水溶液。取水溶液。取0.5ml置小瓶内,置小瓶内,放于放于3750中烘干后贮于冰箱内保存。能使中烘干后贮于冰箱内保存。能使5ml血血液不凝固,肝素抗凝剂应及时使用,放置过久易失液不凝固,肝素抗凝剂应及时使用,放置过久易失效。效。怀疑传染病时,采血应防止到处流散,检后残余血怀疑传染病时,采血应防止到处流散,检后残余血液及所用器皿应进行消毒处理。液及所
11、用器皿应进行消毒处理。红细胞背景知识红细胞也称红血球,是血液中数量最多的一种血细胞,同时也是脊椎动物体内通过血液运送氧气的最主要的媒介。在所有的脊椎动物及若干无脊椎动物,其血红素包含在特定的细胞中来进行其机能活动,这种血球称为红细胞。其它的血细胞,如白血球,则是免疫细胞。l红细胞中含有血红蛋白,因而使血液呈红色。血红蛋白红细胞中含有血红蛋白,因而使血液呈红色。血红蛋白能和空气中的氧结合,因此红细胞能通过血红蛋白将吸能和空气中的氧结合,因此红细胞能通过血红蛋白将吸入肺泡中的氧运送给组织,而组织中新陈代谢产生的二入肺泡中的氧运送给组织,而组织中新陈代谢产生的二氧化碳也通过红细胞运到肺部并被排出体外
12、。血红蛋白氧化碳也通过红细胞运到肺部并被排出体外。血红蛋白更易和一氧化碳相合,当空气中一氧化碳和含量增高时,更易和一氧化碳相合,当空气中一氧化碳和含量增高时,可引起一氧化碳中毒。可引起一氧化碳中毒。l红细胞和血红蛋白的数量减少到一定程度时,称为红细胞和血红蛋白的数量减少到一定程度时,称为贫血。红细胞大量被破坏可引起溶血性黄疸。贫血。红细胞大量被破坏可引起溶血性黄疸。l红细胞描述:多,小而圆,中央着色较浅,无核。红细胞描述:多,小而圆,中央着色较浅,无核。禽类称为凝血细胞,一般为卵圆形,有细胞核,比哺乳禽类称为凝血细胞,一般为卵圆形,有细胞核,比哺乳动物的大得多,数量少动物的大得多,数量少。兽医
13、临床诊断技术讲稿血液检验血液检验红细胞沉降率测定红细胞沉降率测定魏氏法魏氏法魏魏氏氏血血沉沉管管长长30cm,内内径径2.5mm管管上上有有0200的的刻刻度度,每每一一刻刻度度的距离为的距离为1mm,其溶积为,其溶积为1ml。先先向向10ml刻刻度度试试管管中中加加入入3.8%枸枸橼橼酸酸1ml,再再自自静静脉脉采采血血4ml,颠颠倒倒混混合合数数次次,然然后后用用魏魏氏氏血血沉沉管管吸吸取取抗抗凝凝剂剂至至刻刻度度0处处,擦擦去去管管外外血血液液,在在室室温温条条件件下下,垂垂直直放放于于血血沉沉管管架架上上,经经15、30、45、60min,分分别别观观察察并并记记录录细细胞胞沉沉降降数
14、数值。值。兽医临床诊断技术讲稿血液检验血液检验红细胞沉降率测定红细胞沉降率测定“六五”型血沉管法“六五六五”型血沉管法内径型血沉管法内径0.9cm,全长,全长1720cm,管上,管上有有100个刻度容积为个刻度容积为10ml。于血沉管中加入抗凝剂(草酸钠于血沉管中加入抗凝剂(草酸钠0.0150.02g,枸橼酸钠粉末枸橼酸钠粉末0.040.05g),自颈静脉直接采血自颈静脉直接采血至刻度至刻度“0”处,立即充分混合,于室温垂直处,立即充分混合,于室温垂直立于试管架上,镜立于试管架上,镜15、30、45、60min各观察各观察一次,并记录红细胞沉降的数值。一次,并记录红细胞沉降的数值。兽医临床诊断
15、技术讲稿血液检验血液检验红细胞沉降率测定红细胞沉降率测定各种动物的正常血沉值各种动物的正常血沉值动物种类动物种类15分分30分分45分分60分分测定方法测定方法马马驴驴黄牛黄牛水牛水牛奶牛奶牛山羊山羊猪猪31329.80.33497530.80.785396.7650.752055110.70.891.61.20.630六五型法六五型法魏氏法魏氏法魏氏法魏氏法魏氏法魏氏法魏氏法魏氏法魏氏法魏氏法六五型法六五型法测测定定血血沉沉时时必必须须用用新新配配制制的的抗抗凝凝血血;血血液液与与抗抗凝凝剂剂混混合合要要充充分分,柱柱面面上上不不应应有有气气泡泡,它它可可使使血血沉沉变变慢慢;用用魏魏氏氏法
16、法测测定定时时,事事先先应应检检查查血血沉沉架架是是否否好好用用,以以防防漏漏用用;测测定定时时室室温温以以20左左右右为为宜,温度过低可以减慢血沉。宜,温度过低可以减慢血沉。血沉加快血沉加快,见于马传染性贫血、梨形虫病、结核、鼻疽、猪,见于马传染性贫血、梨形虫病、结核、鼻疽、猪瘟、化脓性炎症、风湿症等。瘟、化脓性炎症、风湿症等。血沉减慢血沉减慢,见于大出汗、多尿、剧烈腹泻、马流行性脑脊髓,见于大出汗、多尿、剧烈腹泻、马流行性脑脊髓炎、破伤风、牛瓣胃阻塞、腹痛症等。炎、破伤风、牛瓣胃阻塞、腹痛症等。兽医临床诊断技术讲稿血液检验血液检验血红蛋白测定血红蛋白测定红细胞遇酸溶解,游离出血红蛋白,红细
17、胞遇酸溶解,游离出血红蛋白,并被酸化为褐色的酸性血红素,稀释并被酸化为褐色的酸性血红素,稀释后与标准色柱比色,即可求得血红蛋后与标准色柱比色,即可求得血红蛋白的含量。白的含量。血血红红蛋蛋白白试试纸纸测测定定法法 器器材材应应备备有有测测定定血血红红蛋蛋白白试试纸纸和和4g%15g%血血红红蛋蛋白白标标准准比比色色板板。测测定定时时,取取试试纸纸一一条条,吸吸附附被被检检血血液液一一小小滴滴,待待血血完完全全浸浸透透后后,立立即即置置于于所所附附标标准准色色板板的的小小孔孔下下,肉肉眼眼与与色色板板色色泽泽进进行行比比较较,选选择择颜颜色色相相同同或或近近似似者者,即即得得100ml血血液液所
18、含血红蛋白的克数。所含血红蛋白的克数。沙利氏血红蛋白测定法沙利氏血红蛋白测定法 沙利氏血红蛋白计由比色架、沙利氏血红蛋白计由比色架、标准比色柱、血红蛋白测定管及血红蛋白吸管组成。标准比色柱、血红蛋白测定管及血红蛋白吸管组成。测定管有两个刻度标志,一侧的测定管有两个刻度标志,一侧的224刻度表示刻度表示100ml血液中含有的血红蛋白克数;另一侧有血液中含有的血红蛋白克数;另一侧有20160刻度,刻度,表示表示100ml血液中所含血红蛋白的百分数。血液中所含血红蛋白的百分数。兽医临床诊断技术讲稿血液检验血液检验血红蛋白测定血红蛋白测定动物种类动物种类血红蛋白值(克血红蛋白值(克/100/100毫升
19、毫升)马、骡马、骡11.011.0(9.09.013.013.0)牛牛10.010.0(9.09.011.011.0)水牛水牛8.38.3(8.08.09.09.0)羊羊9.89.8(7.87.811.611.6)猪猪10.510.5(9.512.0)鸡鸡12.512.5(10.014.5)血红蛋白增高血红蛋白增高 见于各种原因引见于各种原因引起的血液浓缩,如腹泻、呕吐、起的血液浓缩,如腹泻、呕吐、大汗、多尿及肠梗阻等。大汗、多尿及肠梗阻等。血红蛋白减少血红蛋白减少 见于各种贫血,见于各种贫血,如马鼻疽、牛结核、牛羊肝片如马鼻疽、牛结核、牛羊肝片吸虫病、仔猪蛔虫等。吸虫病、仔猪蛔虫等。兽医临床
20、诊断技术讲稿血液检验血液检验红细胞计数红细胞计数红红细细胞胞计计数数是是将将一一定定量量的的供供检检血血液液经经一一定定倍倍数数稀稀释释后后,计计数数一一定定容容积积的的红红细细胞胞数数,并并换换算算为为每立方毫米血液内含量。每立方毫米血液内含量。兽医临床诊断技术讲稿血液检验血液检验红细胞计数红细胞计数健康动物红细胞数(万健康动物红细胞数(万/立方毫米)立方毫米)动物种类动物种类平均数值平均数值变动范围变动范围马马650600700牛(包括水牛)牛(包括水牛)600550700绵羊绵羊9008001100山羊山羊130010001600猪猪600500700鸡鸡350250500红细胞增多红细
21、胞增多 可见于因各种原因引起的血液浓缩,如大出汗、胸可见于因各种原因引起的血液浓缩,如大出汗、胸膜炎和腹膜炎的渗出期等。膜炎和腹膜炎的渗出期等。红细胞减少红细胞减少 多见于各种类型贫血,如马传染性贫血、牛梨形虫多见于各种类型贫血,如马传染性贫血、牛梨形虫病、仔猪营养性贫血、新生幼畜溶血病、牛血红蛋白尿病等。病、仔猪营养性贫血、新生幼畜溶血病、牛血红蛋白尿病等。白细胞计数兽医临床诊断技术讲稿血液检验血液检验白细胞计数白细胞计数用冰醋酸将红细胞破坏后,计算用冰醋酸将红细胞破坏后,计算每立方毫米内白细胞总数。每立方毫米内白细胞总数。健康动物白细胞数(个健康动物白细胞数(个/立方毫米)立方毫米)动物种
22、类动物种类平均数值平均数值变动范围变动范围马马800070009000黄牛、奶牛黄牛、奶牛750070008000水牛水牛880080009000绵羊绵羊850080009500山羊山羊10000700013000猪猪130001100016000鸡鸡200001800030000白细胞增多白细胞增多 可见于多数细菌性感染和炎症,如猪丹毒、猪肺疫、结核、可见于多数细菌性感染和炎症,如猪丹毒、猪肺疫、结核、马鼻疽、马腺疫、肺炎、胸膜炎、腹膜炎等。白血病时以白细胞的显著马鼻疽、马腺疫、肺炎、胸膜炎、腹膜炎等。白血病时以白细胞的显著增多为特征。增多为特征。白细胞减少白细胞减少 主要见于某些病毒性传染
23、病,如猪瘟、流感等;某些重度主要见于某些病毒性传染病,如猪瘟、流感等;某些重度疾病的后期;长期应用某些药物(如氯霉素等);梨形虫病等。疾病的后期;长期应用某些药物(如氯霉素等);梨形虫病等。结核病时鸡的肝脏结核结节肝脏结核结节兽医临床诊断技术讲稿血液检验血液检验白细胞分类计数白细胞分类计数以以百百分分率率表表示示各各种种类类型型白白细细胞胞间间的的数数量量关关系系,称称为为白白细细胞胞分分类类计计数。数。健康动物各类白细胞分类数值(健康动物各类白细胞分类数值(%)动物动物种类种类嗜碱性嗜碱性细胞细胞嗜酸性嗜酸性细胞细胞嗜中性细胞嗜中性细胞淋巴淋巴细胞细胞大单核大单核细胞细胞幼稚型幼稚型杆状核杆
24、状核分叶核分叶核马马牛牛水牛水牛猪猪羊羊0.50.50.50.50.54.54.010.02.55.50.51.04.04.04.55.01.053.033.035.035.033.035.056.047.053.057.03.02.03.03.03.0兽医临床诊断技术讲稿血液检验血液检验临床临床意义意义白细胞增多白细胞增多嗜中性白细胞增多嗜中性白细胞增多:见于猪、牛巴氏杆菌病、马腺:见于猪、牛巴氏杆菌病、马腺疫、肺炎及化脓性感染等。疫、肺炎及化脓性感染等。嗜酸性白细胞增多嗜酸性白细胞增多:见于某些蠕虫病、过敏性疾病:见于某些蠕虫病、过敏性疾病及湿疹等。及湿疹等。淋巴细胞增多淋巴细胞增多:见于
25、结核、鼻疽、布氏杆菌病、猪:见于结核、鼻疽、布氏杆菌病、猪瘟及牛梨形虫病。瘟及牛梨形虫病。单核细胞增多单核细胞增多:见于败血性疾病,某些梨形虫病及:见于败血性疾病,某些梨形虫病及李氏杆菌等。李氏杆菌等。白细胞减少白细胞减少嗜中性白细胞减少嗜中性白细胞减少:见于病毒性传染病、药物中毒:见于病毒性传染病、药物中毒(如长期服用抗生素)、各种疾病的垂危期。(如长期服用抗生素)、各种疾病的垂危期。嗜酸性白细胞减少嗜酸性白细胞减少:见于败血症、某些病毒病及牛梨:见于败血症、某些病毒病及牛梨形虫病等。形虫病等。淋巴细胞减少淋巴细胞减少:多为嗜中性白细胞增多而造成的相对:多为嗜中性白细胞增多而造成的相对性变化
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