《常用实验动物》课件.ppt
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1、1.111.11月月1 1、2 2日和日和1111月月2828、2929日是动物实验操作技能日是动物实验操作技能培训课,已初步进行了分培训课,已初步进行了分班,每班不超过班,每班不超过4545人。分人。分班的情况已张贴在墙上。班的情况已张贴在墙上。个别同学因课程安排需要个别同学因课程安排需要调整,请在姓名旁边注明调整,请在姓名旁边注明要求。要求。2.2.如果如果3 3,4 4班同学愿意调到班同学愿意调到1 1、2 2班,也请在姓名旁注班,也请在姓名旁注明。明。3.3.因学生人数太多,教学资因学生人数太多,教学资源有限,凡研究生课题不源有限,凡研究生课题不做动物实验者,可申请不做动物实验者,可申
2、请不参加,并在姓名旁边注明。参加,并在姓名旁边注明。动物实验操作技能培训课动物实验操作技能培训课上午班上午班8:30-11:308:30-11:30下午班下午班1:30-4:301:30-4:3011.2111.21(六)六)1 1,2 2班班3 3,4 4班班11.2211.22(日)日)班班11.2811.28(六)六)1 1,2 2班班3 3,4 4班班11.2911.29(日)日)班班第六章第六章 常用实验动物常用实验动物第一节第一节 小鼠小鼠第二节第二节 大鼠大鼠第三节第三节 豚鼠豚鼠第四节第四节 兔兔第五节第五节 猫猫第六节第六节 犬犬第七节第七节 猕猴猕猴实验动物各论的讲课要点实
3、验动物各论的讲课要点一、生物学特性一、生物学特性(一)习性和行为(一)习性和行为(二)主要解剖学特点(二)主要解剖学特点(三)主要生理学特点(三)主要生理学特点二、在生物医学研究中的应用二、在生物医学研究中的应用三、常用品种、品系三、常用品种、品系四、饲养管理要点四、饲养管理要点第一节第一节 实验小鼠实验小鼠 概况概况在一亿两千五百万年到七千五百万年前在一亿两千五百万年到七千五百万年前(白垩白垩纪时代纪时代)小鼠和人类有共同的祖先。约六百万小鼠和人类有共同的祖先。约六百万年前形成了小家鼠种(年前形成了小家鼠种(Mus MusculusMus Musculus)在动物分类学上,小鼠在动物分类学上
4、,小鼠(Mouse)(Mouse)属于哺乳纲属于哺乳纲(Classis MammaliaClassis Mammalia)、啮齿目、啮齿目(Order Order RodentiaRodentia)、鼠科、鼠科(Familia MurinaeFamilia Murinae)、小鼠属、小鼠属(Genus Mus musculusGenus Mus musculus)、小家鼠种、小家鼠种(Species Species musculusmusculus)动物,染色体数动物,染色体数2n=402n=40。1919世纪小鼠作为观赏动物饲养。世纪小鼠作为观赏动物饲养。2020世纪初开始应用于实验研究。世
5、纪初开始应用于实验研究。19001900年年CastleCastle首先将小鼠用于遗传学研究。首先将小鼠用于遗传学研究。19091909年年LitterLitter等培育出世界上第一个近交系小鼠等培育出世界上第一个近交系小鼠DBADBA。19481948年年SnellSnell培育出与培育出与H-2H-2基因相关的同类系,获基因相关的同类系,获得诺贝尔奖金。得诺贝尔奖金。19621962年年IssacsonIssacson发现裸小鼠。发现裸小鼠。19821982年年Ricard PalmiterRicard Palmiter制备成功转基因小鼠。制备成功转基因小鼠。19871987年年Marti
6、n EvansMartin Evans等制备出第一只基因敲除小等制备出第一只基因敲除小鼠。鼠。20052005年以年以C57BL/6JC57BL/6J为代表的小鼠为代表的小鼠 基因组测序的完成基因组测序的完成 是品系最多、使用量最大、使用是品系最多、使用量最大、使用 最广泛、研究得最透彻的一种实最广泛、研究得最透彻的一种实 验动物。验动物。生物医学研究离不开小鼠!生物医学研究离不开小鼠!2007 2007年年1010月月1010日,日,Martin Evans,Martin Evans,Mario Capecchi,Mario Capecchi,Oliver SmithiesOliver Sm
7、ithies共享诺贝尔医学奖,共享诺贝尔医学奖,以表彰他们在生命以表彰他们在生命科学领域里做出的科学领域里做出的卓越贡献。卓越贡献。1.1.最最小小的的哺哺乳乳动动物物之之一一 (25-40g)(25-40g),具具有有繁繁殖殖力力强强、生生殖殖周周期期短短、个个体体小小等特点。等特点。2.2.生生物物进进化化上上与与人人类类接接近近,胎胎盘盘形形成成和和早早期期胚胚胎胎发发育育、组组织织器器官官结结构构和和细胞功能与人类相似细胞功能与人类相似3.3.小鼠的基因组与人类基因组有很高的同源性,小鼠基因总数与目前已小鼠的基因组与人类基因组有很高的同源性,小鼠基因总数与目前已知的人类基因数量相近,约
8、为知的人类基因数量相近,约为3 3万个左右;人类万个左右;人类99%99%的基因存在于小鼠,的基因存在于小鼠,基因同源性高达基因同源性高达78.5%78.5%。基因组基因组93%93%的区域基因排列顺序与人类相同,的区域基因排列顺序与人类相同,90%90%以上的小鼠和人类基以上的小鼠和人类基因组分布在相应的保守区域里。一些基因的功能可类推到人类,因而因组分布在相应的保守区域里。一些基因的功能可类推到人类,因而基因的突变导致表型的改变和病理变化可作为极好的人类疾病动物模基因的突变导致表型的改变和病理变化可作为极好的人类疾病动物模型,用来阐明人类基因的功能。型,用来阐明人类基因的功能。小鼠广泛使用
9、的理由小鼠广泛使用的理由4.4.小小鼠鼠近近交交品品系系(426426个个)、自自发发性性突突变变和和遗遗传传工工程程小小鼠鼠模模型型多多等等特特点点,因因而而被广泛应用于生命科学的各个领域。被广泛应用于生命科学的各个领域。5.5.迄迄今今为为止止除除了了人人以以外外,小小鼠鼠是是唯唯一一建建立立胚胚胎胎干干细细胞胞(ESES细细胞胞)在在体体外外培培养养的的哺哺乳乳动动物物,而而ESES细细胞胞是是进进行行基基因因修修饰饰和和遗遗传传操操作作的最重要的手段之一。的最重要的手段之一。6.6.小鼠基因组测序计划已完成小鼠基因组测序计划已完成7.7.基因组改造的技术手段成熟基因组改造的技术手段成熟
10、一、生物学特性一、生物学特性(一)习性和行为(一)习性和行为1.胆小怕惊胆小怕惊2.昼伏夜动昼伏夜动3.喜群居喜群居4.适应性差适应性差5.喜啃咬喜啃咬(二)主要解剖学特点(二)主要解剖学特点1.1.外外观观和和体体型型:体体型型最最小小,出出生生时时体体重重仅仅1.5g1.5g,体体长长2cm2cm左左右右,6 6周周龄龄达达18-30g18-30g,成成年小鼠最大时可达年小鼠最大时可达30-40g30-40g,体长,体长11cm11cm左右。左右。2.2.尾长约与体长相等。尾长约与体长相等。3.3.盲肠不发达。盲肠不发达。4.4.骨髓为红骨髓而无黄骨髓,终生造血。骨髓为红骨髓而无黄骨髓,终
11、生造血。5.5.雌雌性性小小鼠鼠为为双双子子宫宫型型,呈呈“Y Y”形形;卵卵巢巢有系膜包绕,不与腹腔相通,故无宫外孕。有系膜包绕,不与腹腔相通,故无宫外孕。6.6.小鼠皮肤无汗腺,散热靠尾巴。小鼠皮肤无汗腺,散热靠尾巴。(三)主要生理学特点三)主要生理学特点生长发育指标生长发育指标生长期短、成熟早、繁殖力强生长期短、成熟早、繁殖力强0 0日龄:出生时日龄:出生时1.5g1.5g,体长,体长20mm20mm,赤裸无毛,身体成半透明,眼紧闭,赤裸无毛,身体成半透明,眼紧闭,两耳贴皮肤,嗅觉、味觉敏感。两耳贴皮肤,嗅觉、味觉敏感。3 3日龄:皮肤出现毛色日龄:皮肤出现毛色4-64-6日龄:双耳张开
12、耸立,日龄:双耳张开耸立,7-87-8日龄:开始爬动日龄:开始爬动9-119-11日龄:听觉发育,被毛长齐日龄:听觉发育,被毛长齐12-1412-14:睁眼,开始采食饮水,四处活动:睁眼,开始采食饮水,四处活动 2121日龄:离乳日龄:离乳 性成熟:性成熟:45-6045-60日龄,日龄,35-4535-45日龄日龄 体成熟:体成熟:70-8070-80日龄,日龄,65-7565-75日龄日龄 发情周期:发情周期:4-54-5天天 妊娠期:妊娠期:19-2119-21天天 哺乳期:哺乳期:20-2220-22天天 生育期:生育期:1 1年年 寿命:寿命:2-32-3年年 小鼠性周期阴道分泌物涂
13、片变化小鼠性周期阴道分泌物涂片变化小鼠性周期阴道分泌物涂片变化小鼠性周期阴道分泌物涂片变化阶阶 段段 持续时间(持续时间(h h)涂片可见涂片可见 卵巢变化卵巢变化动情前期动情前期 9-18 9-18 大量有核上皮细胞大量有核上皮细胞 卵泡加速生长卵泡加速生长 少量角化上皮细胞少量角化上皮细胞 动动 情情 期期 6-12 6-12 满视野角化上皮细胞满视野角化上皮细胞 卵泡成熟、排卵卵泡成熟、排卵 少量有核上皮细胞少量有核上皮细胞动情后期动情后期 30-48 30-48 角化上皮细胞及白细胞角化上皮细胞及白细胞 黄体生成黄体生成动情间期动情间期 36-42 36-42 大量白细胞及少量粘液大量
14、白细胞及少量粘液 黄体退化黄体退化阴拴:阴拴:雌雄小鼠交配后,在雌鼠阴道口形成白色的阴道雌雄小鼠交配后,在雌鼠阴道口形成白色的阴道拴,有防止精液流出,提高受孕率的作用。拴,有防止精液流出,提高受孕率的作用。阴拴是确认小鼠受孕的标志,有阴拴的小鼠记为妊阴拴是确认小鼠受孕的标志,有阴拴的小鼠记为妊 娠娠0.50.5天。天。动情前期:大量有核上皮细胞动情前期:大量有核上皮细胞动情期:满视野角化上皮细胞动情期:满视野角化上皮细胞动情后期:角化上皮细胞及白细胞动情后期:角化上皮细胞及白细胞动情间期:大量白细胞及少量粘液动情间期:大量白细胞及少量粘液ICRICR小鼠的生长曲线小鼠的生长曲线Balb/cBa
15、lb/c小鼠的生长曲线小鼠的生长曲线 生长曲线:生长曲线:以小鼠出生后不同周龄(一般为以小鼠出生后不同周龄(一般为3-153-15周)为横轴线,相应体重为纵轴线,得到不同品系小周)为横轴线,相应体重为纵轴线,得到不同品系小鼠的生长曲线。鼠的生长曲线。品品 系系初生初生1 1周周2 2周周3 3周周4 4周周5 5周周6 6周周7 7周周8 8周周KMKMBALB/cBALB/cC57BL/6C57BL/6615615C3HC3H2.012.011.951.951.461.461.401.401.441.441.401.401.581.581.581.581.441.441.441.445.82
16、5.825.545.543.503.503.353.353.503.503.423.424.644.644.644.644.404.404.404.408.358.357.907.905.605.605.505.505.605.605.555.557.967.967.967.967.707.707.707.7014.8014.8013.5513.557.407.407.327.326.906.906.406.409.839.839.839.839.709.709.709.7022.6022.6021.3521.3512.4512.4511.6011.6012.5712.5712.2012.20
17、19.0019.0015.7515.7513.3013.3012.1012.1033.2533.2527.9027.9016.1016.1014.7514.7518.1018.1016.9016.9022.5822.5820.7520.7517.2017.2015.2015.2039.2539.2532.8032.8017.4017.4015.6015.6020.5020.5018.4018.4025.9625.9621.8821.8820.0020.0017.8017.8039.9039.9034.0734.0718.6518.6516.1016.1021.6021.6019.0019.00
18、27.9627.9623.1223.1221.2021.2018.0018.0040.0540.0534.8034.8020.2520.2518.1618.1622.4022.4020.2520.2528.8328.8324.1624.1622.3022.3019.2719.27 不同日龄小鼠体重情况(单位:不同日龄小鼠体重情况(单位:不同日龄小鼠体重情况(单位:不同日龄小鼠体重情况(单位:g g g g)在体成熟前,我们可以用体重表示动物的年龄,或用在体成熟前,我们可以用体重表示动物的年龄,或用年龄估算动物的体重。年龄估算动物的体重。主要生理指标主要生理指标体温:体温:373739 39 呼
19、吸:呼吸:140-210140-210次次/min/min心率:心率:310-840310-840次次/min/min血压:收缩压血压:收缩压17.73-21.33 kPa17.73-21.33 kPa 舒张压舒张压13.60-14.66 kPa13.60-14.66 kPa白细胞计数白细胞计数 总数:总数:8.4(5.1-11.6)108.4(5.1-11.6)109 9/L/L 中性白细胞:中性白细胞:17.9(6.7-37.2)%17.9(6.7-37.2)%淋巴细胞:淋巴细胞:69(63-75)%69(63-75)%单核细胞:单核细胞:1.2(0.7-2.6)%1.2(0.7-2.6)
20、%嗜酸性细胞:嗜酸性细胞:2.1(0.9-3.8)%2.1(0.9-3.8)%嗜碱性细胞:嗜碱性细胞:0.5(0-1.5)%0.5(0-1.5)%红细胞计数红细胞计数 8.7-10.5 108.7-10.5 101212/L/L 血小板血小板 600600(100-1000100-1000)10 109 9/L/L 胃容量:,一般灌胃量为胃容量:,一般灌胃量为0.4ml/100.4ml/10克体重克体重日摄食量:日摄食量:日饮水量日饮水量4-7ml4-7ml二、在生物医学中的应用二、在生物医学中的应用(一)药物研究(一)药物研究1.药物安全性评价:用于急性毒性、亚急药物安全性评价:用于急性毒性
21、、亚急性毒性试验,半数致死量测定,最大耐性毒性试验,半数致死量测定,最大耐药量测定,致癌、致突变、生殖毒性试药量测定,致癌、致突变、生殖毒性试验等。验等。2.药物筛选药物筛选3.药效学评价试验药效学评价试验4.生物制品的检定生物制品的检定二、在生物医学中的应用二、在生物医学中的应用(二)肿瘤学研究(二)肿瘤学研究 进行肿瘤病因、发病机理、防治进行肿瘤病因、发病机理、防治及抗癌药物筛选的研究及抗癌药物筛选的研究1.1.自发肿瘤自发肿瘤2.2.诱发性肿瘤诱发性肿瘤3.3.人癌细胞移植人癌细胞移植二、在生物医学中的应用二、在生物医学中的应用(三)遗传学研究(三)遗传学研究1.1.遗传学分析遗传学分析
22、2.2.基因研究:利用重组近交系、同源突变基因研究:利用重组近交系、同源突变近交系和遗传工程小鼠(转基因小鼠、近交系和遗传工程小鼠(转基因小鼠、基因敲除基因敲除/敲入小鼠、基因突变小鼠、敲入小鼠、基因突变小鼠、染色体工程小鼠等)进行基因功能、表染色体工程小鼠等)进行基因功能、表达和调节的研究达和调节的研究3.3.突变系疾病动物模型突变系疾病动物模型二、在生物医学中的应用二、在生物医学中的应用(四)感染性疾病的研究(四)感染性疾病的研究1.1.病毒性疾病病毒性疾病2.2.细菌性疾病细菌性疾病3.3.寄生虫疾病寄生虫疾病(五)免疫学研究(五)免疫学研究1.1.制备单克隆抗体制备单克隆抗体2.2.用
23、免疫缺陷小鼠研究淋巴细胞的功能用免疫缺陷小鼠研究淋巴细胞的功能3.3.利用小鼠对病原体的敏感性进行病原体与宿利用小鼠对病原体的敏感性进行病原体与宿主免疫系统相互作用等方面的研究。主免疫系统相互作用等方面的研究。二、在生物医学中的应用二、在生物医学中的应用(六)老年病研究(六)老年病研究 在老年病实验研究中的使用仅次于大鼠。用于老年病的发病在老年病实验研究中的使用仅次于大鼠。用于老年病的发病机理、表现以及防治研究。日本京都大学培育成功快速老化模型机理、表现以及防治研究。日本京都大学培育成功快速老化模型小鼠(小鼠(senescence accelerated mouse,SAMsenescence
24、 accelerated mouse,SAM););SAMSAM系列中的一系列中的一个品系在个品系在4-64-6月龄以前与普通小鼠的生长一样,月龄以前与普通小鼠的生长一样,4-64-6月龄以后则迅月龄以后则迅速出现老化诸特征。该小鼠是研究老年病的理想动物模型。速出现老化诸特征。该小鼠是研究老年病的理想动物模型。(七)其他疾病研究(七)其他疾病研究1.1.神经系统疾病神经系统疾病如亚急性坏死性脑脊髓病、癫痫可用小鼠进行。如亚急性坏死性脑脊髓病、癫痫可用小鼠进行。2.2.呼吸系统疾病呼吸系统疾病小鼠是研究镇咳药的首选动物。小鼠是研究镇咳药的首选动物。3.3.消化系统疾病消化系统疾病4.4.计划生育
25、计划生育 目前绝大多数实验小鼠品系是国外培育的,并目前绝大多数实验小鼠品系是国外培育的,并得到国际小鼠遗传命名委员会的承认。得到国际小鼠遗传命名委员会的承认。我国自己培育的小鼠品系我国自己培育的小鼠品系昆明种小鼠(封闭群):昆明种小鼠(封闭群):原型为原型为SwissSwiss小鼠,小鼠,19461946年从印度引进到昆明,年从印度引进到昆明,19521952年运送到北京生物制年运送到北京生物制品所,品所,19541954年由北京分送到上海生物制品所,并年由北京分送到上海生物制品所,并分送到各地。分送到各地。615615品系(近交系):品系(近交系):19611961年中国医科院血液病研年中国
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