基金项目本课题获得高等学校优秀青年教师教育和科研奖.pdf

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1、 基金项目:本课题获得高等学校优秀青年教师教育和科研奖励基金(1999)资助;霍英东青年教师基金(71040)资助作者单位:四川大学华西口腔医院口腔颌面外科(610041)作者简介:黄旭(1977-),男,浙江人,硕士.论 著硬腭骨面裸露动物模型的建立及防治的初步研究黄 旭,石 冰,鲁大为,宋庆高,王志勇 摘 要:目的 通过建立研究硬腭裸露骨的兔模型,观察和研究裸露骨面对上颌骨发育情况的影响,以及腭粘膜移植修复裸露骨面的效果。方法 将30只日本白兔(5周龄)随机分为3组:组(空白对照组),组(左侧硬腭骨面裸露,保持右侧完整)和组(左右侧硬腭骨面均裸露,右侧用腭粘膜移植修复),术后25周处死,进

2、行颅骨测量。结果 组 和组 上颌骨左侧的长、宽、高均明显小于对侧和空白对照组。该两组之间统计学无显著性差异。结论 本实验成功建立了硬腭裸露骨面的兔模型,并证明了硬腭裸露是造成上颌骨发育畸形的重要影响因素,而腭粘膜移植修复裸露骨面可有效预防上颌骨发育畸形。关键词:裸露骨面;腭粘膜;颌骨发育;移植 中图分类号:R782文献标识码:A文章编号:100524979(2003)0120004204CONSTRUCTION OF AN ANIMAL MODEL OF BONE DENUDATION ON PALATES AND THEINITIAL RESEARCHOF PREVENTION AND CU

3、RINGHUAN G Xu,S HI Bing,L U Da2wei,et al(Department of Oral and Maxillof acial Surgery,West China College of Stomatology,Sichuan University,Chengdu610041)Abstract:ObjectiveT o construct rabbit modelsof bone denudation onpalates and to study the influence of bone de2nudation on palates on the maxilla

4、ry development and the effect of transplanting palatal mucosa on it.MethodsThirtyJapan white rabbits(5 weeks old)were divided into three groups:group(empty controls),group(bone denudation on the left hard palate with the right side intact),group(bone denudation on theboth side of the hard palates an

5、d transplanting palatal mucosa on the right side).Then the rabbitswere sacrificed at 25 weeks postoperatively and the skulls were measured.ResultsThe length,widthand height of maxilla on the left side were obviously smaller than the opposite side and the empty con2trol group.There were no remarkable

6、 differences in the two groups.ConclusionRabbit models of bonedenudation on palates are successfully constructed.Bone denudation on palates is a major factor induc2ing the maxillary deformity while transplanting palatal mucosal on it is an effective way to prevent thedeformity.Key words:Bone denudat

7、ion;Palatal mucosa;Maxillary development;Transplantation 先天性腭裂是口腔颌面外科最常见的先天性畸形,迄今为止,外科手术仍是治愈这一畸形的最根本办法,但腭裂术后上颌骨的继发畸形,目前多数学者认为腭裂术后硬腭裸露骨面的伤口收缩及其瘢痕组织的形成、收缩是造成这一发育畸形的重要原因1,2。但由于上颌骨复合体发育机制的不确定以及众多因素的存在,至今尚无对临床有明显指导意义的报告。本研究首次在国内建立了研究硬腭裸露骨面的大动物(兔)模型,观察和研究裸露骨面对上颌骨发育情况的影响,以及腭粘膜移植修复裸露骨面的效果。4 口腔颌面外科杂志 2003年 第

8、13卷 第1期 1 材料与方法 选用30只出生后5周的雌性大耳白兔,体重015016kg,随机分为3组。组 为空白对照组,10只;组(左侧裸露骨面组,10只)为腭部左份做一矩形切口,内外侧分别距腭中缝和腭牙槽嵴缘1mm,前至侧切牙远中缘水平,后至第一磨牙远中缘水平,切至骨面,去除腭粘膜及粘骨膜,形成一大小恒定的裸露骨面;组(腭粘膜移植修复组,10只)按上述方法获得腭部双侧裸露骨面,将左侧切除的腭粘膜缝合至右侧裸露骨面,所有操作均由同一操作人员完成。术后隔日肌注庆大霉素4万U,共1周。术后25周用脱颈法处死所有动物,切取颅骨,去尽软组织,用精确到0102mm的游标卡尺在骨标本直接测量,取3次测量

9、的平均值记录。上颌骨测量的骨性标志点见图1,2。测量值包括上颌骨长度指标AB、AC、AE,上颌骨宽图1 上颌骨测量的骨性标志(1)图2 上颌骨测量的骨性标志(2)AB:上颌中切牙的舌侧牙槽突缘至第一磨牙近中牙槽突缘的距离;AC:上颌中切牙的舌侧牙槽突缘至同侧颧突的嚼肌棘的距离AE:上颌中切牙的舌侧牙槽突缘至同侧翼钩的距离;KJ:非裸露骨面侧(右侧)前颌骨-上颌骨缝内缘点至鼻中隔正中线得我垂直距离;LJ:裸露骨面侧(左侧)前颌骨-上颌骨缘内缘点至鼻中隔正中线得我垂直距离;MS:右侧第一磨牙腭侧牙槽突缘至前鼻棘的距离;NS:左侧第一磨牙腭侧牙槽突缘至前鼻棘的距离;VW:右侧第三磨牙腭侧牙槽突缘至后

10、鼻棘的距离;UW:左侧第三磨牙腭侧牙槽突缘至后鼻棘的距离;XH:嚼肌棘的中间缘至同侧额骨前眶上突之间的距离;EI:翼钩至同侧额骨后眶上突之间的距离度指标KJ、LJ、MS、NS、VW、UW,上颌骨高度指标XH、EI。最后将各项指标的左侧数值除以右侧数值(用f表示),所得结果作为最终结果进行统计。2 结果用单因素方差分析后LSD(最小显著性差异法)检验对组 和组,组 和组,组 和组 间的8项指标左右侧比值进行统计学处理(见表1)。2.1 咬合关系与组 相比,组和 组兔子均表现裸露骨面侧中切牙舌向倾斜,中切牙位置略偏转向裸露骨面侧,并出现不同程度的错牙 合。2.2 前颌的偏转与组 相比,组 和组 兔

11、子均表现为不同程度的向左侧偏转。2.3 上颌骨的生长发育组 和组 兔子左侧上颌骨的长度、高度、宽度的均明显小于右侧,统计数据显示其所有八项指标的左右比值均小于1,与组 相比,均有显著性差异(P 0105)。组 和组 各项指标统计学上无显著性差异(P 0105)。图3,4示三组动物上颌骨长度、宽度的比较,图5a、5b示组 和组、组 的颅骨腹侧观。图3 上颌骨长度的比较图4 上颌骨宽度的比较 口腔颌面外科杂志 2003年 第13卷 第1期 5 表1 三组动物上颌骨长、高、宽指标测量值的比较组别nfABfACfAEfXHfEIfMNSfLK JfUVW10019998704111096E204110

12、000004100000E204019994701126846E203019999306148160E204110030409125145E203110005902133164E203019997303127042E203019995901183512E20310019801601115751E202019865200198441E203019848601103623E202019784002103678E202019735401194108E202019239103180816E202019113705129530E202019208006187580E2021001981110118668

13、4E202019771102141859E202019871701132430E202019864901113607E202019832409195425E203019424503139191E2020191693001106279019575703109379E202注:n=小鼠数目,f=指标的左侧数值除以右侧数值3 讨论 腭裂修复术后上颌骨继发性生长发育障碍以及由此引发的一系列形态、功能的异常一直是国内外学者所普遍重视的问题,但至今尚未有理想的解决方法。本实验通过建立兔裸露骨面的动物模型,参照国外学者的同类研究,选用以各组动物上颌骨左右侧测量值的比值,即上颌骨的对称率来进行统计分析,从而消

14、除了个体间差异,较用上颌骨一侧或两则的测量绝对值做统计学分析更具有科学性和合理性。并根据临床特点,将组 设计为一侧裸露一侧用腭粘膜修复,符合腭裂患儿术后遗留裸露骨面的特征,并可验证腭粘膜对瘢痕收缩的抑制作用。在该实验中,兔模型表现出与腭裂修复术后患儿非常相似的发育特征:明显的咬牙 合关系紊乱,以及前颌部分偏向患侧。表明裸露骨面是导致术后上颌骨继发畸形的重要原因。关于腭裂修复术后的继发畸形,其发生机制主要是由于裸露骨面肉芽组织的肌成纤维细胞收缩所致的伤口收缩和随后所形成的瘢痕组织的收缩所致3,4。Wijdeveld认为由于(1)伤口的收缩、(2)瘢痕组织牢固的附着于骨面上、(3)瘢痕组织中缺乏弹

15、力纤维、(4)牙周纤维呈扇状进入瘢痕组织,从而抑制颌骨的生长发育5。大多数学者认为预防肉芽瘢痕组织形成的最好方法是全层植皮法,但游离皮片的使用受到了一定程度的限制。皮片移植虽然耐磨,但手术后往往收缩较严重,并且容易出现中心性6 口腔颌面外科杂志 2003年 第13卷 第1期 坏死。即使是处于口腔内的环境,它也会出现毛发生长的现象,并不会完全化生为口腔粘膜。此外,与口腔粘膜移植相比较,移植区在相容性和颜色上也不如口腔粘膜移植的效果好。而粘膜移植供区隐蔽,其又处于口腔固有的自然环境中,无论在外形或功能上对于口腔创面的修复来说应该都是最佳的。移植的粘膜上皮,可作为暂时的生物衬里,加速上皮形成和伤口愈

16、合,并有预防裸露骨面胶原纤维的形成和促进成骨细胞增生的作用,并可防止Sharpeys纤维的形成,从而在很大程度上预防硬腭裸露骨面的继发畸形6。由于腭粘膜具有组织相容性强、相对简单的操作、成活率高、不出现第二术野等优点,因而本试验作为研究对象。本课题组将自体腭粘膜游离移植入硬腭裸露骨面,通过上颌骨对称率与正常组和单侧裸露组动物作对比研究,全面的观察了自体腭粘膜瓣修复裸露骨面对上颌骨生长发育的影响。结果表明上颌骨腭粘膜移植侧可获得与未裸露侧(即组 右侧正常粘膜)相近的发育情况,该结果也证明腭粘膜上皮移植是一种可有效预防上颌骨的继发畸形的方法。随着组织工程技术的发展,体外已可培养类粘膜的口腔角化细胞

17、作为口腔粘膜的替代物7,而本试验则为采用组织工程化腭粘膜修复腭裂提供了良好的试验依据。参考文献:1 Squier CA,Kremenark.Myofibroblasts in healing palatalwounds of the beagle dogJ.J Anat,1980,130:585.2 Ishikawa H,Nakamura S,Misaki K,et al.Scar tissue dis2tribution on palates and its relation to maxillary dental archformJ.Cleft Palate Craniofac J,199

18、8,35:313.3 Dabelsteen E,Kremenak CR.Demonstration of actin in thefibroblasts of healing palatal wounds J.Plast ReconstrSurg,1978,62:429.4 Jonsson G,Hallmans G.Healingof palatal defects with andwithout skin grafts:an intraindividual experimental studyon dogsJ.Int J Oral Surg,1980,9:128.5 Wijedevekd M

19、G,Maltha JC,Grupping EM,et al.A his2tological study of tissue response to simulated cleft palatalsurgery in beagle dogsJ.Arch Oral Bilol,1991,36:837.6 Sumi Y,Hata KI,Mizuno H,et al.Clinical application ofcultured oral epithelium for palatal wounds after palatoplas2ty:a preliminary reportJ.Oral Dis,1

20、999,5(4):307.7 Ophof R,van Rheden RE,Von den HJ,et al.Oral ker2atinocytes cultured on dermal matrices form a mucosa2liketissueJ.Biomaterials,2002,23(17):3741.本文校对:戴 峰收稿日期:2002-10-22第四届全国正颌外科学术会议征稿通知 经中华口腔医学会口腔颌面外科专业委员会批准,由正颌外科学组主办、福建医科大学协和医院、口腔医院承办的第四届全国正颌外科学术会议将于2003年10月2426日在福建省福州市召开。现开始征稿,欲参加会议者请于2003年7月31日前将以标准四段式书写的500字的中文摘要以及相应的英文摘要寄到上海第二医科大学口腔医学院刘浩清女士处,地址:上海市制造局路639号,邮编:200011,传真号:02163136856,e2mail:gfshen 。中华口腔医学会口腔颌面外科专业委员会正颌外科学组2002年11月19日 口腔颌面外科杂志 2003年 第13卷 第1期 7