沉降菌检测学习教案.pptx

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1、会计学1沉降沉降(chnjing)菌检测菌检测第一页，共23页。基本概念测试原理测试方法结果评定第1页/共22页第二页，共23页。基本概念基本概念n n菌落:细菌培养后,由一个或几个细菌繁殖而形成的一细菌集落,简称CFU.通常用个数表示。n n沉降菌:用GB/T16292-2010提及的方法收集空气中的活性微生物粒子(lz),通过专门的培养基在适宜的生长条件下繁殖到可见的菌落数。第2页/共22页第三页，共23页。测试测试(csh)原理原理n n本测试方法利用沉降法,即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿,经若干(rugn)时间,在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落数,以平板培养皿中

2、的菌落数来评定洁净环境内的活微生物数,并以此来评定洁净区的洁净度。第3页/共22页第四页，共23页。测试方法测试方法1、使用的仪器设备和培养基:（1）高压消毒锅:使用时应严格按照操作规程进行。（2）恒温培养箱:必须定期对培养箱的温度计进行检定。（3）培养皿:一般采用90mm15mm硼硅酸(u sun)玻璃培养皿。使用前将培养皿置于121湿热灭菌20min。第4页/共22页第五页，共23页。测试方法测试方法1、使用的仪器设备和培养基:（4）培养基:胰酪大豆胨琼脂培养基。将培养基加热熔化,冷却至约45在无菌操作条件下将培养基注入培养皿,每皿约15ml。待琼脂培养基凝固后,将培养基平皿放入32恒温培

3、养箱中培养72 小时(xiosh)若培养基平皿上确无菌落生长即可供采样用,制备好的培养基平皿应在2-8的坏境中存放。第5页/共22页第六页，共23页。测试方法测试方法2、测试时间对单向流,如A级净化房间内及层流工作台,测试应在净化空调系统正常运行(ynxng)不少于10分钟后开始。对非单向流,如B级、C级、D级以上的净化房间,测试应在净化空调系统正常运行(ynxng)不少于30分钟开始。第6页/共22页第七页，共23页。测试方法测试方法3、采样点数目(shm)及其布置:（1）最少采样点数目(shm):沉降菌的最少采样点可按表1确定。第7页/共22页第八页，共23页。测试方法测试方法3、采样(c

4、i yn)点数目及其布置:在满足最少测点数的同时,不宜满足最少培养皿数,见表2第8页/共22页第九页，共23页。测试方法测试方法3、采样点数目及其布置:（2）采样点的布置:除受洁净区的设备限制外,取样点应在洁净区均匀布置。在日常监控时,那些与产品(chnpn)相邻近的区域,以及可能与产品(chnpn)直接接触的空气及设备附近应考虑增加取样点和取样次数(与产品(chnpn)非接触区相比,这些区域应视为关键区):人员活动频繁或人员较集中的区域也应视为关键区,需加强监控。第9页/共22页第十页，共23页。测试方法测试方法3、采样点数目及其布置:（2）采样点的布置:取样点一般在离地面0.8-1.0m之

5、间或操作平台的高度。取样设备会对气流产生干扰,取样时应避免(bmin)可能对气流组织的干扰。尽量避免(bmin)在回风口附近取样(距离lm以上),且测试人员应在取样口的下风侧,并尽量少走动。第10页/共22页第十一页，共23页。测试方法测试方法4、测试步骤:（1）采样方法:用无菌容器(如不锈钢储槽)将预先(yxin)培养的培养皿(无菌平皿)带至待测区,将培养皿取出,放置在预先(yxin)确定取样点,打开培养皿盖,使培养基表面暴露0.5小时,再将培养皿盖上,盖后倒置。检测时记下培养皿打开的起始时间和结束时间。第11页/共22页第十二页，共23页。测试方法测试方法4、测试步骤:（2）培养:全部采样

6、结束,将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。32培养,时间为72小时。每批培养基应有对照试验,检查培养基本身是否(sh fu)污染,可每批选定三个培养皿做对照培养。第12页/共22页第十三页，共23页。测试方法测试方法4、测试步骤:（3）菌落计数:用肉眼直接计数,然后用5-10倍放大镜检查,是否有遗漏。若培养皿上有2个或2个以上(yshng)菌落重叠,可分辨时仍以2个或2个以上(yshng)计数。第13页/共22页第十四页，共23页。测试方法测试方法5、注意事项:测试用具要做灭菌处理,以确保测试的可靠性、正确性。采取一切措施防止人为对样本的污染。对培养基、培养条件及其他参数作详细的记录。由于细菌种类

7、繁多,差别甚大,计数时一般用透射光于培养皿背面或正面仔细观察,不要(byo)漏计培养皿边缘生长的菌落,必要时用显微镜鉴别。第14页/共22页第十五页，共23页。测试方法测试方法5、注意事项:采样前应仔细检查每个培养皿的质量,如发现变质、破损或污染的应剔除。测试(csh)状态:沉降菌测试(csh)前,被测试(csh)洁净区的温湿度须达到规定的要求,静压差必须控制在规定值内。沉降菌测试(csh)前,被测试(csh)洁净区己经过消毒。第15页/共22页第十六页，共23页。测试方法测试方法5、注意事项:测试状态有静态和动态两种,在空调(kn dio)系统验流时、长期停产恢复生产前、设施设备大修复产前进

8、行静态测试,在日常监测时进行动态监测。测试人员:测试人员必须穿戴符合环境级别的工作服。静态测试时,室内测试人员不得多于2个人。第16页/共22页第十七页，共23页。测试方法测试方法6、结果计算(j sun):用计数方法得出各个培养皿的菌落数。平均菌落数的汁算见下式:第17页/共22页第十八页，共23页。测试方法测试方法7、标准(biozhn):第18页/共22页第十九页，共23页。结果结果(ji gu)评定评定n n用平均菌落(jnlu)数判断洁净室的空气中的微生物。n n洁净区内的平均菌落(jnlu)数必须符合所选定的评定标准。n n若某洁净区的菌落(jnlu)数超过评定标准,则必须对此区域先行消毒,然后重新测试两次,测试结果必须合格。第19页/共22页第二十页，共23页。采样采样(ci yn)点布置图点布置图第20页/共22页第二十一页，共23页。谢谢 谢谢第21页/共22页第二十二页，共23页。感谢您的观看感谢您的观看(gunkn)。第22页/共22页第二十三页，共23页。