生化分析仪的校准学习教案.pptx

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1、会计学1生化生化(shn hu)分析仪的校准分析仪的校准第一页，共26页。一一个个实实验验室室测测定定结结果果(ji gu)的的可可靠靠性性是是由由其其精精密密度度、准准确确性性及及可可比比性性所所决决定定的的，一一般般必必需需从从下几方面着手。下几方面着手。1.选好测定方法；2.购买(gumi)质量过硬的试剂盒；3.要有质优的测试仪器；第1页/共26页第二页，共26页。4.4.必需进行正确的校准；5.5.还要规范化操作；6.6.搞好过硬的室内质量控制；7.7.积极参加室间质评活动(hu dng)；8.8.还要有一支素质高的队伍；第2页/共26页第三页，共26页。现现就就生生化化分分析析仪仪的

2、的校校准准问问题题提提出出(t ch)个个人人看法。看法。一、校准的重要性和必要性 首先必须明确生化分析仪不论如何先进，它还是一个比较器，它测试出来的标本结果是随着标准(biozhn)限的设置不同而变化的。第3页/共26页第四页，共26页。二二、确确 立立 测测 定定 系系 统统(xtng)的概念的概念 n n对于对于(duy)(duy)一个临床检测项目，测定系统包括一个临床检测项目，测定系统包括测定原理、试剂、仪器、校准品四要素。在全测定原理、试剂、仪器、校准品四要素。在全自动生化分析仪上使用配套的试剂和标准品，自动生化分析仪上使用配套的试剂和标准品，即日立即日立71707170使用宝灵曼的

3、试剂和校准品使用宝灵曼的试剂和校准品（c.f.a.sc.f.a.s），在贝克曼），在贝克曼CX-7CX-7生化分析仪上使用贝生化分析仪上使用贝克曼的试剂和校准品等。各仪器厂家均有自己克曼的试剂和校准品等。各仪器厂家均有自己的标准测定系统。对于的标准测定系统。对于(duy)(duy)校准品不能乱用，校准品不能乱用，如绝对不能用贝克曼的校准品校准日立生化仪，如绝对不能用贝克曼的校准品校准日立生化仪，同样也不能用宝灵曼的校准品去校准贝克曼生同样也不能用宝灵曼的校准品去校准贝克曼生化仪。化仪。第4页/共26页第五页，共26页。三、校准三、校准(jio zhn)品和质控品品和质控品 n n校校校校准准准

4、准品品品品（Calibration Calibration materialsmaterials）含含含含有有有有已已已已知知知知量量量量的的的的欲欲欲欲测测测测物物物物，用用用用以以以以校校校校准准准准该该该该测测测测定定定定方方方方法法法法的的的的数数数数值值值值，它它它它与与与与该该该该方方方方法法法法及及及及试试试试剂剂剂剂、仪仪仪仪器器器器是是是是相相相相关关关关联联联联的的的的。校校校校准准准准品品品品的的的的作作作作用用用用(zuyng)(zuyng)是是是是为为为为了了了了减减减减少少少少或或或或消消消消除除除除仪仪仪仪器器器器、试试试试剂剂剂剂等等等等造造造造成成成成的的的的

5、系系系系统统统统误误误误差差差差。因因因因此此此此最最最最好好好好为为为为人血清基质，以减少基质效应造成的误差。人血清基质，以减少基质效应造成的误差。人血清基质，以减少基质效应造成的误差。人血清基质，以减少基质效应造成的误差。n n 质质质质控控控控品品品品（Control Control materialsmaterials）只只只只用用用用于于于于和和和和待待待待测测测测标标标标本本本本同同同同时时时时测测测测定定定定的的的的，为为为为了了了了控控控控制制制制标标标标本本本本的的的的测测测测定定定定误误误误差差差差，因因因因此此此此要要要要求求求求保保保保存存存存时时时时间间间间十十十十分

6、分分分稳稳稳稳定定定定。前前前前者者者者是是是是校校校校准准准准其其其其值值值值而而而而后后后后者者者者是是是是控制误差用的。控制误差用的。控制误差用的。控制误差用的。第5页/共26页第六页，共26页。四、校准四、校准(jio zhn)前准备前准备 1.了解灯泡已使用多久？检查飘移是否合乎要求；2.检 查 比 色 杯 的 清 洁(qngji)及磨损情况？必要时进行更换；3.用清洁(qngji)剂泡洗管道4.测定仪器的精密度及线性是否达到仪器性能要求？第6页/共26页第七页，共26页。五、定值质控血清五、定值质控血清(xuqng)是否可以校是否可以校准仪器？准仪器？n n我们在相同条件下，同时(

7、tngsh)用五个进口产品，每家两种不同浓度的定值如TP、ALB、UREA、UA、ALP、GGT、CK、HBDH、LD、AMY等。第7页/共26页第八页，共26页。表表表表 不同厂家不同厂家不同厂家不同厂家(ch(ch n n ji)ji)定值质控对定值质控对定值质控对定值质控对TPTP、ALBALB、ASTAST、ALPALP结果结果结果结果与靶值比较与靶值比较与靶值比较与靶值比较 TPTPALBALBUREAUREAT T 偏差偏差%T T 偏差偏差%T T偏差偏差%汽巴康宁汽巴康宁1 1 57574.394.3929290 05.05.04.54.5汽巴康宁汽巴康宁2 246464.89

8、4.8924242.082.0819.319.3-5.76-5.76宝灵曼宝灵曼1 1 50502.02.034.834.8-5.17-5.178.968.960.450.45宝灵曼宝灵曼2 248.648.62.882.8833.733.7-5.04-5.042424-6.77-6.77RANDOX1RANDOX159.759.76.366.3640.840.83.883.887.677.674.34.3RANDOX2RANDOX239398.338.3326.926.95.985.9821.621.6-5.67-5.67Human1Human172724.184.1846.746.7-4.

9、18-4.183.783.785.165.16Human2Human229.829.8-2.68-2.6829.829.8-2.76-2.7625.125.1-5.08-5.08Bio-Red1Bio-Red163630 039391.281.287.17.10 0Bio-Red2Bio-Red242421.791.7927270 018.018.0-4.44-4.44第8页/共26页第九页，共26页。ASTASTALPALPT T偏差偏差%T T偏差偏差%汽巴康宁汽巴康宁1 1 4343-10.5-10.596964.24.2汽巴康宁汽巴康宁2 2184184-11.7-11.7265265

10、0.20.2宝灵曼宝灵曼1 1 58.358.3-11.2-11.22422422.72.7宝灵曼宝灵曼2 214.14.-12.3-12.33843842.72.7RANDOX1RANDOX16262-17.7-17.7214214-16.1-16.1RANDOX2RANDOX2144144-12.7-12.7394394-17.7-17.7Human1Human133.533.5-7.5-7.5168168-2.2-2.2Human2Human2151151-11.7-11.7287287-9.1-9.1Bio-Red1Bio-Red12424-14.6-14.625252222Bio-R

11、ed2Bio-Red2201201-14.3-14.32982980.840.84第9页/共26页第十页，共26页。n n通过上述结果比较，说明不同厂家生产通过上述结果比较，说明不同厂家生产(shngch(shngch n)n)的定值质控血清靶值之间有的相差较的定值质控血清靶值之间有的相差较大，提示我们决不能用定值质控血清代替校准品作大，提示我们决不能用定值质控血清代替校准品作校准用。校准用。第10页/共26页第十一页，共26页。六、校准六、校准(jio zhn)方法方法 第11页/共26页第十二页，共26页。n n例例 如如 日日 立立(Hitachi)(Hitachi)系系 列列 您您 必

12、必 须须 购购 买买 宝宝 灵灵 曼曼(Boehringer)(Boehringer)的的试试剂剂及及其其校校准准品品c.f.a.s.(Calibrator c.f.a.s.(Calibrator for for automated automated systems)systems)，同同时时准准备备1010至至2020份份新新鲜鲜血血清清。按按宝宝灵灵曼曼试试剂剂盒盒内内的的说说明明书书设设置置参参数数，用用c.f.a.s.c.f.a.s.校校准准血血清清进进行行校校准准，即即可可获获得得各各项项目目的的校校准准K K值值，同同时时观观察察一一下下各各项项目目测测定定时时反反应应进进程程图

13、图，检检查查各各项项目目参参数数设设置置是是否否在在最最佳佳位位置置，如如不不在在最最佳佳位位置置应应予予以以重重新新设设置置并并测测定定。此此时时得得到到的的K K值值即即为为准准确确的的校校准准K K值值，然然后后测测定定待待测测的的1010至至2020份份新新鲜鲜血血清清三三次次取取其其平平均均值值，应应 该该 说说 此此 结结 果果 是是 用用 Hitachi-BoehringerHitachi-Boehringer检检 测测 系系 统统(xt(xt ng)ng)所所获获的的测测定定值值。然然后后用用此此血血清清值值校校准准其其它它测定系统测定系统(xt(xt ng)ng)。第12页/

14、共26页第十三页，共26页。TP TPALBALBALTALTASTASTCreaCreaUreaUrea UA UAMenMen30173017 694 6943023302327742774147561475626732673 15431543 SD SD 86 86 6.69 6.69 63 6347.947.9 1448 144850.250.216.116.1CV%CV%2.8 2.8 1.0 1.0 2.1 2.1 1.7 1.7 9.8 9.8 1.9 1.9 1.1 1.1表 日立7170、BM试剂(shj)每天进行校准(n=81)K值的变化第13页/共26页第十四页，共26页

15、。TG TGCholCholGluGlu Ca Ca CK CKGGTGGTMeanMean1172117214491449174417445925923864386426032603 SD SD 16.9 16.9 17.4 17.4 18.1 18.156.856.8 61.1 61.167.967.9CV%CV%1.4 1.4 1.2 1.2 1.0 1.0 9.6 9.6 1.6 1.6 2.6 2.6表 日立7170、BM试剂每天进行校准(jio zhn)(n=81)K值的变化第14页/共26页第十五页，共26页。七、关于七、关于(guny)酶活酶活性测定校准问题性测定校准问题n n

16、酶活力(hul)（u/l）=A/minV106/(v1)n n令k=V106/（v）n n则酶活力(hul)（u/l）=A/mink第15页/共26页第十六页，共26页。a)理论K值：根据理论摩尔消光 系 数（）来 计 算，如NADH为6.22103b)实测K值：由于仪器波长的精密及半宽度(kund)不同，而应根据实测值来设定K值c)厂家给的K值：厂家生产试剂盒说明书上提供的K值（有的厂家提供6.3103）d)校准K值：通过校准物直接校准得到的K值 常用常用(chn yn)K值值有以下几种：有以下几种：第16页/共26页第十七页，共26页。在在在在日日日日立立立立7170A7170A全全全全自

17、自自自动动动动生生生生化化化化分分分分析析析析仪仪仪仪上上上上可以得到可以得到可以得到可以得到(d do)(d do)几种不同的酶几种不同的酶几种不同的酶几种不同的酶K K值，见下表值，见下表值，见下表值，见下表 在在日日立立7170A7170A全全自自动动生生化化分分析析仪仪上上可以得到可以得到(d do)(d do)几种不同的酶几种不同的酶K K值，见下表值，见下表第17页/共26页第十八页，共26页。表表表表 日立日立日立日立7170A7170A全自动生化分析仪上用不同方法全自动生化分析仪上用不同方法全自动生化分析仪上用不同方法全自动生化分析仪上用不同方法 得到得到得到得到(d do)(

18、d do)几种酶的几种酶的几种酶的几种酶的K K值值值值指示物指示物波长波长理论理论K K值值实测实测K K值值校准校准K K值值ALTALTNADHNADH340nm 340nm 2444 2444 2642226422（8.1%8.1%）30263026（23.8%23.8%）ASTASTNADHNADH340mm340mm2444244426422642（8.1%8.1%）27752775（13.5%13.5%）CKCKNADPH NADPH 340mm340mm3878 3878 38783878（8.1%8.1%）38863886（8.3%8.3%）GGTGGT4NA 4NA 405

19、mm 405mm 1418 1418 15391539（8.5%8.5%）16121612（13.7%13.7%）GGTGGT4NB 4NB 405mm405mm1475 1475 17391739（17.9%17.9%）ALPALP4NA4NA（PH10PH10）405mm405mm757 757 825825（8.9%8.9%）注：1校准物为宝灵曼c.f.a.s，试剂也用宝灵曼的配套试剂。2括 号 内 数 字 是 该 K值 与 理 论 K值 相 比(xin b)的 变 化 率825（8.9%）以上摘自张克坚文章中第18页/共26页第十九页，共26页。*从上述从上述K K值中不难发现实测值中

20、不难发现实测K K值大于理论值大于理论K K值，这值，这说明生化分析仪的测光系统还存在着一定误差，说明生化分析仪的测光系统还存在着一定误差，如波长、半宽度及光径等偏差，使仪器达不到如波长、半宽度及光径等偏差，使仪器达不到理论上的最佳状态理论上的最佳状态(zhungti)(zhungti)；*校准校准K K值与实测值与实测K K值之间也存在一定的差距，即使值之间也存在一定的差距，即使指示物和仪器相同，其差异可能由试剂及校准指示物和仪器相同，其差异可能由试剂及校准品造成的；品造成的；*作者认为最好使用校准作者认为最好使用校准K K值，但必须由两个先决值，但必须由两个先决条件：条件：1 1必须使用配

21、套的试剂；必须使用配套的试剂；2 2必须使用配套必须使用配套的高质量的校准品，但校准的高质量的校准品，但校准K K值应有其溯源性。值应有其溯源性。第19页/共26页第二十页，共26页。n n关于酶活标准品，欧洲标准局（BCR）和美国(mi u)国家标准技术研究院（NIST）均发表了人血清基质的酶活性标准物，相信不久将会有公认的标准（校准）品问世。第20页/共26页第二十一页，共26页。八、必须拟订校准计划八、必须拟订校准计划(jhu)（文件）（文件）n n校准工作不是仅进行(jnxng)一次就可万事无忧一劳永逸，而必须经常化。按照“临床实验室质量控制（QC）的要求（草案）”必须要求拟定校准计划

22、，其内容包括：第21页/共26页第二十二页，共26页。1建立校准方法选择合适（配套）的校准品，包括校准品数目(shm)、类型和浓度；如有可能校准品应溯源到参考方法或参考物质；确定校准的频度。至少每六个月进行一次校准；第22页/共26页第二十三页，共26页。*改变试剂(shj)的种类，或者批号更换了。如果实验室能说明改变试剂(shj)批号并不影响结果的范围，则可以不进行校准；*仪器或者检验系统进行一次大的预防性维护或者更换了重要部件，这些都有可能影响检验性能；*质控反映出异常的趋势或偏移，或者超出了实验室规定的接受限，采取一般性纠正措施后，不能识别和纠正问题时；如如有有下下列列情情况况发发生生(fshng)时时，必必须须进进行行校校准准第23页/共26页第二十四页，共26页。2每个实验室对每台仪器必需要有校准(jio zhn)计划。每次校准(jio zhn)必须有详情的记录和分析。每次校准(jio zhn)记录必须保存备查。第24页/共26页第二十五页，共26页。谢 谢第25页/共26页第二十六页，共26页。