生化试剂的基本知识学习教案.pptx

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1、会计学1生化生化(shn hu)试剂的基本知识试剂的基本知识第一页，共23页。全球全球(qunqi)信赖的迈瑞信赖的迈瑞 A world together主要内容主要内容(nirng)介介绍绍生化试剂的分类反应速度特性显色原理(yunl)性能评价方法第1页/共23页第二页，共23页。全球全球(qunqi)信赖的迈瑞信赖的迈瑞 A world together生化试剂生化试剂(shj)的分的分类类按照化学性质分酶类：包括ALT，AST，ALP，ACP，r-GT，-HBDH，LDH，CK，CK-MB,-AMY，MSO，ADA，ChE等。底物/代谢(dixi)产物类：包括TG，TC，HDL-C，LD

2、L-C，UA，UREA，Cr，Glu，TP，Alb，T-Bil，D-Bil，TBA，NH4+，CO2等。无机离子类：包括Ca，P，Mg，Cl等。特种蛋白类：包括apoA1，apoB，Lp(a)，C3，C4，PFB(B因子)，IgG，IgA，IgM等。第2页/共23页第三页，共23页。全球全球(qunqi)信赖的迈瑞信赖的迈瑞 A world together生化试剂生化试剂(shj)的分的分类类按照临床应用分无机(wj)离子：包括Ca，P，Mg，Cl等。肝功能：包括ALT，AST，r-GT，ALP，MSO，T-Bil，D-Bil，TBA，TP，Alb等。肾功能：UA，UREA，Cr等。心肌酶谱

3、：CK，CK-MB，LDH，-HBDH，AST，MSO。糖尿病：GLU等。前列腺疾病：ACP，p-ACP等。胰腺炎：-AMY。第3页/共23页第四页，共23页。全球全球(qunqi)信赖的迈瑞信赖的迈瑞 A world together生化试剂生化试剂(shj)的分的分类类按照临床应用分胰腺炎：-AMY。血脂：TC，TG，HDL-C，LDL-C，apoA1，apoB，Lp(a)。痛风：UA。有机磷中毒(zhng d)：ChE。免疫性疾病：C3，C4，PFB(B因子)，IgG，IgA，IgM，Kappa链，Lambda链。第4页/共23页第五页，共23页。全球全球(qunqi)信赖的迈瑞信赖的迈

4、瑞 A world together反应速度反应速度(fn yng s d)特性特性按照反应速度，可以将生化试剂(shj)分为二大类：终点法试剂(shj)；动力学法试剂(shj)：又可再分为零级动力学法和一 级动力学法第5页/共23页第六页，共23页。全球全球(qunqi)信赖的迈瑞信赖的迈瑞 A world together反应速度反应速度(fn yng s d)特性之终点法特性之终点法终点法指经过一段时间(一般为几分钟)的反应，反应进行到完全，使全部底物(被测物)转变成产物，称终点法，更确切地说应称平衡法，这是最理想的分析类型。整个反应达到平衡，由于正向反应的平衡常数很大，可认为所有的被测

5、定物已转变为产物，反应液的吸光度不再增加(或降低)，吸光度的增加(或降低)程度与被测定物的浓度成正比。终点法对反应条件(如酶量、pH、温度)小的改变不敏感，只要这种改变不影响在一定(ydng)时间内反应达到平衡即可，是最理想的反应模型。第6页/共23页第七页，共23页。全球全球(qunqi)信赖的迈瑞信赖的迈瑞 A world together反应速度反应速度(fn yng s d)特性之终点法特性之终点法属于终点法的试剂(shj)主要有：TG，TC，HDL-C，LDL-C，UA，Glu，TP，Alb，T-Bil，D-Bil，Cr（氧化酶法），NH4+，CO2，Ca，P，Mg，Cl，apoA1

6、，apoB，Lp(a)，C3，C4，PFB(B因子)，IgG，IgA，IgM等。第7页/共23页第八页，共23页。全球全球(qunqi)信赖的迈瑞信赖的迈瑞 A world together反应速度反应速度(fn yng s d)特性之动力学法特性之动力学法零级动力学法 指反应过程中反应速度维持不变，达到最大，与底物浓度无关(wgun)，因此，在整个反应过程中，反应物可以匀速地生成某个产物，导致被测定溶液在某一波长下吸光度均匀地减小或增加，减小或增加的速度(A/min)与被测物的活性或浓度成正比，主要用于酶活性的测定。实际上，由于底物浓度不可能足够大，随着反应的进行，底物消耗到一定程度后，反应

7、速度不再维持不变，同样从启动反应到达到最大速度需要一定时间。因此，零级动力学法是针对于特定时间段而言的，各试剂商对这段时间有严格规定。第8页/共23页第九页，共23页。全球全球(qunqi)信赖的迈瑞信赖的迈瑞 A world together反应速度反应速度(fn yng s d)特性之动力学法特性之动力学法属于零级(ln j)动力学法的试剂主要有：ALT，AST，ALP，ACP，r-GT，-HBDH，LDH，CK，CK-MB,-AMY，MSO，ADA，ChE，TBA等第9页/共23页第十页，共23页。全球全球(qunqi)信赖的迈瑞信赖的迈瑞 A world together反应速度反应速

8、度(fn yng s d)特性之动力学法特性之动力学法一级动力学法(固定时间法）在一定的反应时间内，反应速度与底物浓度的一次方成正比,由于底物在不断的消耗，因此(ync)整个反应速度在不断的减小，表现为吸光度的增加(或降低)速度越来越小，这类反应达到平衡的时间很长，理论上可以在任意时间段进行监测，但由于血清成份复杂，反应刚启动时反应较复杂，杂反应较多，经过一段延迟时间才能进入稳定反应期，必需在特定时间段内进行监测，各试剂商对这段时间有严格规定。在一固定时间间隔中，底物浓度的变化量正比于底物的初浓度。这是一级反应的通性。该段时间内吸光度的增加(或)降低与被测定物的浓度成正比。第10页/共23页第

9、十一页，共23页。全球全球(qunqi)信赖的迈瑞信赖的迈瑞 A world together反应速度反应速度(fn yng s d)特性之动力学法特性之动力学法属于一级动力学法的试剂主要(zhyo)有：Cr（苦味酸法），UREA（紫外监测法）第11页/共23页第十二页，共23页。全球全球(qunqi)信赖的迈瑞信赖的迈瑞 A world together显色显色(xin s)原理原理NAD-NADH和NADP-NADPH系统p-NP和p-NA系统H2O2偶联的指示系统抗原抗体反应指示系统其它(qt)显色反应第12页/共23页第十三页，共23页。全球全球(qunqi)信赖的迈瑞信赖的迈瑞 A

10、world together显色显色(xin s)原理原理NAD-NADH和NADP-NADPH系统(xtng)NADH和NADPH在340nm有特征性吸收峰，而NAD和NADP在340nm无特征性吸收峰，利用其偶联的脱氢酶(工具酶)反应，根据340nm吸光度的变化，可以测定物质的浓度或活性。作为该指示系统(xtng)常用的工具酶有LDH、MDH、GLDH和G6PDH 目前利用此指示系统(xtng)进行测定的临床项目有：ALT、AST、CK、LDH、CK-MB、-HBDH、Glu、UREA、NH4+、CO2等。第13页/共23页第十四页，共23页。全球全球(qunqi)信赖的迈瑞信赖的迈瑞 A

11、 world together显色显色(xin s)原理原理p-NP和p-NA指示系统 p-NP和p-NA在405nm有特征性吸收峰，根据405nm吸光度(gungd)的变化，可以测定物质的浓度或活性。目前利用此指示系统进行测定的临床项目有ALP、ACP、r-GT、AMY等。第14页/共23页第十五页，共23页。全球全球(qunqi)信赖的迈瑞信赖的迈瑞 A world together显色显色(xin s)原理原理H2O2偶联的指示系统 H2O2在过氧化物酶的作用下，可使单一个或成对的无色的色素原氧化成有色的色素，导致某一波长吸光度的增加，因此可用来测定物质的浓度(nngd)或活性 用于此指

12、示系统的单一色素原有TMB、ABTS等；成对色素原有酚和4AA、MBTH和DMA等。目前利用此指示系统进行测定的临床项目有TC、TG、HDL-C、LDL-C、Glu、Cr、UA等。第15页/共23页第十六页，共23页。全球全球(qunqi)信赖的迈瑞信赖的迈瑞 A world together显色显色(xin s)原理原理抗原抗体反应指示系统 特异性抗体与抗原(待测物质)在相应的缓冲环境下反应生成抗原抗体复合物，形成一定的浊度，导致特定波长透光率的改变。在抗体过剩的前提下，改变程度与抗原浓度成正比。目前利用此指示系统进行测定的临床(ln chun)项目有apoAI、apoB、Lp(a)、IgG

13、、IgA、IgM、C3、C4、CRP等。第16页/共23页第十七页，共23页。全球全球(qunqi)信赖的迈瑞信赖的迈瑞 A world together显色显色(xin s)原理原理其它显色反应 蛋白质中的肽键在碱性溶液中能与铜离子作用产生紫红色络合物，在一定浓度范围内颜色反应强度与蛋白质的浓度成正比。用于TP的测定。溴甲酚绿(BCG)在非离子去污剂Brij35的存在下，可与白蛋白形成(xngchng)紧密结合的绿色复合物。用于Alb的测定。重氮苯磺酸盐与胆红素生成红紫色偶氮胆红素。用于总胆红素和直接胆红素的测定。甲基麝香草酚兰(MTB)在碱性条件下可与Ca、Mg形成(xngchng)有色络

14、合物。用于Ca、Mg的测定。第17页/共23页第十八页，共23页。全球全球(qunqi)信赖的迈瑞信赖的迈瑞 A world together性能评价性能评价性能评价性能评价(pngji)(pngji)方法方法方法方法主要性能指标：稳定性：指在规定条件下经过一段时间的保存(bocn)，仍能达到相应的性能指标，如试剂空白吸光 度、线性范围、灵敏度等。反应灵敏度：指单位浓度(或活性)的测定物反应所产生的 反应度，反应度越高，灵敏度越大。精密度：结果间相互符合的一致程度准确度：与参考测定程序结果的一致性线性范围：在规定的重复性和线性偏差下，测得的浓度或活性值 与设定的浓度或活性值之间的比例关系的范围

15、。基质效应：抗干扰性：其它：试剂/样本比例、反应时间、价格等。第18页/共23页第十九页，共23页。全球全球(qunqi)信赖的迈瑞信赖的迈瑞 A world together性能评价性能评价性能评价性能评价(pngji)(pngji)方法方法方法方法稳定性：连续(linx)观测，每日试验；热加速试验。反应灵敏度：直接计算单位浓度反应物的吸光 度变化或变化率。精密度：按照NCCLS EP5-A进行。准确度：按照NCCLS EP9-A2 进行。线性范围：按照NCCLS EP6-A 进行。基质效应：通过回收试验确定抗干扰性：按照NCCLS EP7-A进行。第19页/共23页第二十页，共23页。谢谢

16、谢谢(xi xie)大家！大家！第20页/共23页第二十一页，共23页。已推出的试剂已推出的试剂(shj)种类种类共共3535个项目个项目3838种试剂（按照化学性质分）：种试剂（按照化学性质分）：酶类：包括酶类：包括(boku)ALT(boku)ALT，ASTAST，ALPALP，r-GTr-GT，-HBDHHBDH，LDHLDH，CKCK，CK-MB,-AMYCK-MB,-AMY等。等。底物底物/代谢产物类：包括代谢产物类：包括(boku)TG(boku)TG，TCTC，HDL-HDL-C C，LDL-CLDL-C，UAUA，UREAUREA，CrCr，GluGlu，TPTP，AlbAlb

17、，T-BilT-Bil，D-BilD-Bil，TBATBA等。等。无机离子类：包括无机离子类：包括(boku)Ca(boku)Ca，P P，MgMg等。等。特种蛋白类：包括特种蛋白类：包括(boku)ApoA1(boku)ApoA1，ApoBApoB，Lp(a)Lp(a)，C3C3，C4C4，IgGIgG，IgAIgA，IgMIgM，CRPCRP，PAPA等。等。第21页/共23页第二十二页，共23页。已推出和计划推出的试已推出和计划推出的试剂剂(shj)包装包装已推出：已推出：BS-200BS-200包装包装(bozhung)(bozhung)：试用装试剂、销售试剂：试用装试剂、销售试剂BS-300BS-300包装包装(bozhung)(bozhung)：装机试剂、销售试剂：装机试剂、销售试剂日立日立71707170包装包装(bozhung)(bozhung)：销售试剂：销售试剂计划推出：计划推出：BS-400BS-400包装包装(bozhung)(bozhung)通用包装通用包装(bozhung)(bozhung)日立日立70207020包装包装(bozhung)(bozhung)第22页/共23页第二十三页，共23页。