生物氧化6课程学习.pptx
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1、会计学1生物生物(shngw)氧化氧化6第一页,共136页。【目的【目的【目的【目的(md)(md)要求】要求】要求】要求】w生物氧化的概念w呼吸(hx)链的概念、组成及排列顺序w氧化磷酸化wATPw胞液中NADH的氧化【重点】【重点】【重点】【重点】1 1、简述氧化磷酸化的偶联部位、简述氧化磷酸化的偶联部位、简述氧化磷酸化的偶联部位、简述氧化磷酸化的偶联部位(bwi)(bwi)及其偶联机制及其偶联机制及其偶联机制及其偶联机制2 2、胞液中的、胞液中的、胞液中的、胞液中的NADHNADH如何参加氧化磷酸化的?如何参加氧化磷酸化的?如何参加氧化磷酸化的?如何参加氧化磷酸化的?第1页/共136页第
2、二页,共136页。物物质质在在生生物物体体内内进进行行的的氧氧化化作作用用称称生生物物氧氧化化,主主要要指指糖糖、脂脂肪肪、蛋蛋白白质质等等在在体体内内分分解解(fnji)时时逐逐步步释放能量,最终生成释放能量,最终生成CO2 和和 H2O的过程。的过程。糖糖 脂肪脂肪 蛋白质蛋白质 CO2和和H2O O2能量能量(nngling)ADP+PiATP热能热能(rnng)*生物氧化的概念(生物氧化的概念(生物氧化的概念(生物氧化的概念(需要掌握需要掌握需要掌握需要掌握)第2页/共136页第三页,共136页。*生物生物(shngw)(shngw)氧化与体外氧化之相同点氧化与体外氧化之相同点w生物氧
3、化中物质的氧化方式有加氧、脱氢、失电子生物氧化中物质的氧化方式有加氧、脱氢、失电子(dinz),遵循氧化还原反应的一般规律。,遵循氧化还原反应的一般规律。w物质在体内外氧化时所消耗的氧量、最终产物(物质在体内外氧化时所消耗的氧量、最终产物(CO2,H2O)和释放能量均相同。)和释放能量均相同。第3页/共136页第四页,共136页。w是是在在细细胞胞内内温温和和的的环环境境中中(体体温温(twn),pH接接近近中中性性),在在一一系系列列酶酶促促反反应应下下逐逐步步进进行行,能能量量逐逐步步释释放。放。w进进行行广广泛泛的的加加水水脱脱氢氢反反应应,脱脱下下的的氢氢与与氧氧结结合合产产生生H2O
4、,有有机机酸酸脱脱羧羧产生产生CO2。*生物生物(shngw)(shngw)氧化与体外氧化之不同点氧化与体外氧化之不同点生物生物(shngw)氧化氧化体外氧化体外氧化w能量是突然释放的。能量是突然释放的。w产产生生的的CO2、H2O由由物物质质中中的的碳碳和和氢氢直直接接与与氧氧结结合合生成。生成。第4页/共136页第五页,共136页。糖原糖原 三酯酰甘油三酯酰甘油 蛋白质蛋白质 葡萄糖葡萄糖 脂酸脂酸+甘油甘油 氨基酸氨基酸 乙酰乙酰CoA TAC TAC 2H 2H 呼呼吸吸(hx)链链 H H2 2O O ADP+Pi ATP COCO2 2 *生物氧化生物氧化生物氧化生物氧化(yngh
5、u)(ynghu)(ynghu)(ynghu)的一般过程的一般过程的一般过程的一般过程第5页/共136页第六页,共136页。第一节第一节 生成生成ATPATP的氧化体系的氧化体系The Oxidation System of ATP The Oxidation System of ATP Producing Producing(重点(重点(zhngdin)(zhngdin)内容)内容)第6页/共136页第七页,共136页。一、呼吸链的概念、组分一、呼吸链的概念、组分二、氧化磷酸化偶联部位二、氧化磷酸化偶联部位(bwi)(bwi)及其偶联及其偶联机制机制三、影响氧化磷酸化的因素三、影响氧化磷酸化
6、的因素四、四、ATPATP五、通过线粒体内膜的物质转运五、通过线粒体内膜的物质转运第7页/共136页第八页,共136页。概念概念代代谢谢物物脱脱下下的的成成对对氢氢原原子子通通过过多多种种酶酶和和辅辅酶酶所所催催化化(cu hu)的的连连锁锁反反应应逐逐步步传传递递,最最终终与与氧氧结结合合生生成成水水,这这一一系系列列酶酶和和辅辅酶酶称称为为呼呼吸吸链链(respiratory chain)又又 称称 电电 子子 传传 递递 链链(electron transfer chain)。组成组成递氢体和电子传递体(递氢体和电子传递体(2H 2H+2e)一、呼吸一、呼吸一、呼吸一、呼吸(hx)(hx
7、)链链链链第8页/共136页第九页,共136页。n n线粒体结构线粒体结构线粒体结构线粒体结构(jigu)(jigu)第9页/共136页第十页,共136页。(一)呼吸(一)呼吸(一)呼吸(一)呼吸(hx)(hx)链的组成链的组成链的组成链的组成洋地黄皂苷洋地黄皂苷第10页/共136页第十一页,共136页。四种四种(s zhn)具有传递电子功能的酶复合体具有传递电子功能的酶复合体(complex)*泛醌泛醌 和和 Cyt c Cyt c 均不包含均不包含(bohn)(bohn)在上述四种复合体中。在上述四种复合体中。人线粒体呼吸人线粒体呼吸(hx)链复合体链复合体第11页/共136页第十二页,共
8、136页。Cytc Q NADH+H+NAD+延胡索酸延胡索酸 琥珀酸琥珀酸 1/2O2+2H+H2O 胞液侧胞液侧 基质基质(j zh)侧侧 线粒体内膜线粒体内膜 e-e-e-e-e-呼吸呼吸呼吸呼吸(hx)(hx)链各复合体在线粒体内膜中的位置链各复合体在线粒体内膜中的位置链各复合体在线粒体内膜中的位置链各复合体在线粒体内膜中的位置第12页/共136页第十三页,共136页。1.1.复合体复合体复合体复合体:NADH-:NADH-泛醌还原酶泛醌还原酶泛醌还原酶泛醌还原酶u 功能功能(gngnng):将电子从将电子从NADH传递给泛醌传递给泛醌(ubiquinone),复合体复合体具有质子泵功
9、能具有质子泵功能(gngnng),每传递,每传递2个电子可将个电子可将4个个H+从内膜的基质侧泵胞浆侧。从内膜的基质侧泵胞浆侧。复合体复合体NADH CoQ FMN;Fe-SN-1a,b;Fe-SN-4;Fe-SN-3;Fe-SN-2 第13页/共136页第十四页,共136页。(1)NADNADH:由以:由以NAD或或NADP为辅酶为辅酶(f mi)的脱的脱氢酶(不需氧脱氢酶)催化。氢酶(不需氧脱氢酶)催化。氧化还原反应时变化氧化还原反应时变化(binhu)发生在五价氮和三价氮之间。发生在五价氮和三价氮之间。第14页/共136页第十五页,共136页。(2)FMNFMNH2:第15页/共136页
10、第十六页,共136页。(3)铁硫蛋白铁硫蛋白(dnbi)中辅基铁硫簇中辅基铁硫簇(Fe-S)含有等量铁原子和硫原子,其中铁原子可进行含有等量铁原子和硫原子,其中铁原子可进行Fe2+Fe3+e 反应传递电子。反应传递电子。表示表示(biosh)(biosh)无机硫无机硫 第16页/共136页第十七页,共136页。(4)QQH2:泛醌(辅酶:泛醌(辅酶Q,CoQ)有多个异戊二烯连接形成较长的疏水侧链(人)有多个异戊二烯连接形成较长的疏水侧链(人CoQ10),氧化),氧化(ynghu)还原反应时生成中间产物半醌型泛醌。还原反应时生成中间产物半醌型泛醌。第17页/共136页第十八页,共136页。复合体
11、复合体的功能的功能(gngnng)(gngnng)NADH+H+NAD+FMN FMNH2还原型还原型Fe-S 氧化型氧化型Fe-S QQH2第18页/共136页第十九页,共136页。2.2.复合体复合体复合体复合体:琥珀酸琥珀酸琥珀酸琥珀酸-泛醌还原酶(即琥珀酸泛醌还原酶(即琥珀酸泛醌还原酶(即琥珀酸泛醌还原酶(即琥珀酸脱氢酶)脱氢酶)脱氢酶)脱氢酶)u 功能功能:将电子将电子(dinz)(dinz)从琥珀酸传递给泛醌,无质子泵功能。从琥珀酸传递给泛醌,无质子泵功能。复合体复合体琥珀酸琥珀酸 CoQFe-S1;b560;FAD;Fe-S2;Fe-S3 第19页/共136页第二十页,共136页
12、。第20页/共136页第二十一页,共136页。3.3.复合体复合体复合体复合体:泛醌泛醌泛醌泛醌-细胞细胞细胞细胞(xbo)(xbo)色素色素色素色素c c还原酶还原酶还原酶还原酶(细胞(细胞(细胞(细胞(xbo)(xbo)色素色素色素色素bc1bc1复合体)复合体)复合体)复合体)uu 功能功能功能功能(gngnng)(gngnng)(gngnng)(gngnng):将电子从泛醌传递给细胞色素:将电子从泛醌传递给细胞色素:将电子从泛醌传递给细胞色素:将电子从泛醌传递给细胞色素c c c c。复合体。复合体。复合体。复合体具有质子泵功能具有质子泵功能具有质子泵功能具有质子泵功能(gngnng)
13、(gngnng)(gngnng)(gngnng),每传递,每传递,每传递,每传递2 2 2 2个电子可将个电子可将个电子可将个电子可将4 4 4 4个个个个H+H+H+H+从内膜的基质侧泵胞浆侧。从内膜的基质侧泵胞浆侧。从内膜的基质侧泵胞浆侧。从内膜的基质侧泵胞浆侧。复合体复合体QH2 Cyt c b562;b566;Fe-S;c1第21页/共136页第二十二页,共136页。第22页/共136页第二十三页,共136页。4.4.复合体复合体复合体复合体:细胞细胞细胞细胞(xbo)(xbo)色素色素色素色素c c氧化酶氧化酶氧化酶氧化酶uu 功能功能(gngnng):将电子从:将电子从细胞色素细胞
14、色素c传递给氧。具有质传递给氧。具有质子泵功能子泵功能(gngnng),每传,每传递递2个电子可将个电子可将2个个H+从内膜从内膜的基质侧泵胞浆侧。的基质侧泵胞浆侧。复合体复合体还原型还原型Cyt c O2CuAaa3CuB 其中其中(qzhng)Cyt a3 和和CuB形成的活性部位将电子交给形成的活性部位将电子交给O2。第23页/共136页第二十四页,共136页。第24页/共136页第二十五页,共136页。第25页/共136页第二十六页,共136页。由以下实验确定由以下实验确定:(1)根据呼吸链各组分的标准氧化根据呼吸链各组分的标准氧化(ynghu)还原电位,由低到高的排列顺序。还原电位,
15、由低到高的排列顺序。(二)呼吸链成分的排列(二)呼吸链成分的排列(pili)(pili)顺序顺序第26页/共136页第二十七页,共136页。(2)(2)在体外将呼吸链拆开和重组在体外将呼吸链拆开和重组在体外将呼吸链拆开和重组在体外将呼吸链拆开和重组鉴定四种鉴定四种鉴定四种鉴定四种(s zh(s zh n n)复合体的组成复合体的组成复合体的组成复合体的组成和排列。和排列。和排列。和排列。(3)(3)特异的抑制剂阻断某一组分的电子传递特异的抑制剂阻断某一组分的电子传递特异的抑制剂阻断某一组分的电子传递特异的抑制剂阻断某一组分的电子传递在阻断部位以前的组在阻断部位以前的组在阻断部位以前的组在阻断部
16、位以前的组分处于还原状态,后面组份处于氧化状态分处于还原状态,后面组份处于氧化状态分处于还原状态,后面组份处于氧化状态分处于还原状态,后面组份处于氧化状态吸收光谱改变吸收光谱改变吸收光谱改变吸收光谱改变检检检检测。测。测。测。抗霉素抗霉素A鱼藤酮鱼藤酮(4)利用各组分特异的吸收光谱,以离体线粒体无氧时)利用各组分特异的吸收光谱,以离体线粒体无氧时处于还原状态为对照处于还原状态为对照缓慢给氧缓慢给氧观察观察(gunch)各各组分被氧化的顺序。组分被氧化的顺序。第27页/共136页第二十八页,共136页。1.NADH氧化氧化(ynghu)呼吸链呼吸链NADH 复合体复合体Q 复合体复合体Cyt c
17、 复合体复合体O22.琥珀酸氧化琥珀酸氧化(ynghu)呼吸链呼吸链 琥珀酸琥珀酸 复合体复合体 Q 复合体复合体Cyt c 复合体复合体O2第28页/共136页第二十九页,共136页。NADH氧化氧化(ynghu)呼吸链呼吸链 FADH2氧化氧化(ynghu)呼吸链呼吸链第29页/共136页第三十页,共136页。二、氧化二、氧化二、氧化二、氧化(y(y nghu)nghu)磷酸化磷酸化磷酸化磷酸化ATP的生成方式:的生成方式:氧化氧化(ynghu)磷酸化磷酸化(oxidative phosphorylation)是指在呼吸链电子传递过程中偶联是指在呼吸链电子传递过程中偶联ADP磷酸化,生成磷
18、酸化,生成ATP,又称为偶联磷酸化。,又称为偶联磷酸化。底物水平磷酸化底物水平磷酸化(substrate level phosphorylation)是底物分子内部能量重新分布是底物分子内部能量重新分布(fnb),生成高能键,使,生成高能键,使ADP磷酸化生成磷酸化生成ATP的过程。的过程。第30页/共136页第三十一页,共136页。(一)氧化(一)氧化(一)氧化(一)氧化(y(y nghu)nghu)磷酸化偶联部位磷酸化偶联部位磷酸化偶联部位磷酸化偶联部位偶联部位:复合体偶联部位:复合体、根据自由能变化根据自由能变化(binhu)和和P/O比值比值1.P/O比值:比值:P/O比值是指物质氧化
19、时,每消耗比值是指物质氧化时,每消耗1摩尔氧原子所消耗的无机磷(或摩尔氧原子所消耗的无机磷(或ADP)的摩尔数,即生成的)的摩尔数,即生成的ATP的摩尔数。的摩尔数。第31页/共136页第三十二页,共136页。第32页/共136页第三十三页,共136页。ATPATP ATP 氧化氧化(ynghu)(ynghu)磷酸化偶联部位磷酸化偶联部位电子传递链自由电子传递链自由(zyu)(zyu)能变化能变化 第33页/共136页第三十四页,共136页。(二)(二)(二)(二)氧化氧化氧化氧化(ynghu)(ynghu)(ynghu)(ynghu)磷酸化的偶联机理磷酸化的偶联机理磷酸化的偶联机理磷酸化的偶
20、联机理1.化学渗透化学渗透(shntu)假说假说(chemiosmotic hypothesis)1961年由年由Peter Mitchell提出。提出。电子经呼吸链传递时,可将质电子经呼吸链传递时,可将质子(子(H+)从线粒体内膜的基)从线粒体内膜的基质侧泵到内膜胞浆侧,产生膜质侧泵到内膜胞浆侧,产生膜内外质子电化学梯度储存能量。内外质子电化学梯度储存能量。当质子顺浓度梯度回流时驱动当质子顺浓度梯度回流时驱动ADP与与Pi生成生成ATP。第34页/共136页第三十五页,共136页。线粒体基质线粒体基质 线粒体膜线粒体膜+-H+O2 H2O H+e-ADP+Pi ATP 化学渗透假说化学渗透假
21、说(ji shu)简单示意图简单示意图第35页/共136页第三十六页,共136页。化化学学渗渗透透(shntu)假假说说第36页/共136页第三十七页,共136页。2.ATP合酶合酶由亲水部分由亲水部分(b fen)F1(33亚基亚基)和疏水部分)和疏水部分(b fen)F0(a1b2c912亚基)组成。亚基)组成。ATP合酶结构合酶结构(jigu)模式图模式图第37页/共136页第三十八页,共136页。当当H+顺顺浓浓度度(nngd)递递度度经经F0中中a亚亚基基和和c亚亚基基之之间间回回流流时时,亚亚基基发发生生旋旋转转,3个个亚亚基基的的构象发生改变。构象发生改变。ATP合酶的工作合酶的
22、工作(gngzu)机制机制第38页/共136页第三十九页,共136页。n n电子传递过程中质子流动电子传递过程中质子流动(lidng)与与ATP产生的关系:产生的关系:n n 1.每合成每合成1molATP,需,需3个质子个质子通过通过ATP合成酶,产生的合成酶,产生的ATP从线粒体基质进入胞质需消耗从线粒体基质进入胞质需消耗1个质子,故每形成个质子,故每形成1个个ATP需需4个质子。个质子。n n 2.电子经电子经NADH到氧,产生到氧,产生2.5个个ATP。n n 3.电子经电子经FADH2到氧,产生到氧,产生1.5个个ATP。第39页/共136页第四十页,共136页。F0 F1 Cyt
23、c Q NADH+H+NAD+延胡索酸延胡索酸 琥珀酸琥珀酸 H+1/2O2+2H+H2O ADP+Pi ATP H+H+H+胞液侧胞液侧 基质基质(j zh)侧侧+-化学化学(huxu)渗透假说详细示意图渗透假说详细示意图第40页/共136页第四十一页,共136页。三、影响三、影响三、影响三、影响(yngxing)(yngxing)(yngxing)(yngxing)氧化磷酸化的因素氧化磷酸化的因素氧化磷酸化的因素氧化磷酸化的因素1.呼吸链抑制剂呼吸链抑制剂 阻断呼吸链中某些部位电子传递。阻断呼吸链中某些部位电子传递。2.解偶联剂解偶联剂使氧化与磷酸化偶联过程使氧化与磷酸化偶联过程(guch
24、ng)脱离。脱离。如:如:2,4二硝基苯酚(二硝基苯酚(dinitrophenol,DNP)、解偶联蛋白、解偶联蛋白 3.氧化磷酸化抑制剂氧化磷酸化抑制剂 对电子传递及对电子传递及ADP磷酸化均有抑制作用。磷酸化均有抑制作用。如:寡霉素如:寡霉素 (一)抑制剂(一)抑制剂抑制剂抑制剂抑制剂抑制剂ADPADP甲状腺素甲状腺素甲状腺素甲状腺素mtDNAmtDNA第41页/共136页第四十二页,共136页。鱼藤酮鱼藤酮粉蝶霉素粉蝶霉素A A异戊巴比妥异戊巴比妥 抗霉素抗霉素A A二巯基丙醇二巯基丙醇 CO、CN-、N3-及及H2S 各种各种(zhn)呼吸链抑制剂的阻断位点呼吸链抑制剂的阻断位点第42
25、页/共136页第四十三页,共136页。n nDNP的作用:的作用:n n脂溶脂溶性,其质子性,其质子化形式和共化形式和共轭碱形式可轭碱形式可穿过穿过(chun u)线粒体线粒体内膜内膜进入进入基质侧释出基质侧释出H+,返回胞,返回胞液侧结合液侧结合H+破坏电破坏电化学梯度。化学梯度。n n 碳氰碳氰-p-三氟三氟甲氧基苯腙甲氧基苯腙第43页/共136页第四十四页,共136页。解偶联蛋白解偶联蛋白(dnbi)作用机制(棕色脂肪组织线粒体)作用机制(棕色脂肪组织线粒体)F F0 0 F F1 1 Cyt cQ胞液侧胞液侧 基质基质(j zh)侧侧 解偶联解偶联 蛋白蛋白(dnbi)热能热能 H H
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