食用菌制种技术优秀PPT.ppt

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1、食用菌制种技术第一页，本课件共有66页教学目标、重点、难点教学目标、重点、难点n n教学目的：熟练使用制种用品、用具、设备、教学目的：熟练使用制种用品、用具、设备、设施进行制种生产。设施进行制种生产。n n本节重点：食用菌制种条件，制种工具的使本节重点：食用菌制种条件，制种工具的使用。用。第二页，本课件共有66页一、食用菌菌种的概念与级别一、食用菌菌种的概念与级别(一一)、菌种的概念、菌种的概念菌种菌种是指经人工培养并可供进一步繁殖或是指经人工培养并可供进一步繁殖或栽培使用的食用菌栽培使用的食用菌菌丝体菌丝体，常常包括供，常常包括供菌丝体生长的基质在内，共同组成繁殖菌丝体生长的基质在内，共同组

2、成繁殖材料。材料。菌种菌种是食用菌生产的首要条件，菌种性状的是食用菌生产的首要条件，菌种性状的优劣直接影响到生产的成败。常言道：优劣直接影响到生产的成败。常言道：“有收无收在于种（种子），多收少收在于有收无收在于种（种子），多收少收在于种（栽培）种（栽培）”第三页，本课件共有66页（二）菌种的级别1.一级种（母种）用分离法首次得到的纯次生菌丝体概念概况培养环境 试管、斜面培养基用途 再生母种扩大原种保藏用种菌丝弱而少、不可直接栽培特点第四页，本课件共有66页第五页，本课件共有66页2.二级种（原种）将母种扩大至粗放培养基上形成的菌种概念概况培养环境菌丝较多而壮、适应性较强特点用途 扩大栽培种大

3、口瓶、较粗放的液体或固体培养基第六页，本课件共有66页第七页，本课件共有66页3.三级种（栽培种）将原种扩大至粗放培养基上形成的菌种概念概况培养环境菌丝多而壮、适应性强特点用途栽培生产菌种袋、较粗放的液体或固体培养基第八页，本课件共有66页第九页，本课件共有66页母种、原种和栽培种第十页，本课件共有66页二、制种常用的设备与用品二、制种常用的设备与用品n n（一）、灭菌设备（一）、灭菌设备n1、手提式高压、手提式高压灭菌锅灭菌锅第十一页，本课件共有66页n使用压力：使用压力：1.5kg/cn灭菌时间：灭菌时间：2530minn对象：玻璃器皿、母种培养基、无对象：玻璃器皿、母种培养基、无菌水等。

4、菌水等。n可用高压饭锅替代，但灭菌时间延长可用高压饭锅替代，但灭菌时间延长至至40min第十二页，本课件共有66页2、卧式高压灭菌锅、卧式高压灭菌锅第十三页，本课件共有66页n使用压力：使用压力：1.5kg/cn灭菌时间：灭菌时间：1.52hn对象：原种、栽培种培养基的灭菌对象：原种、栽培种培养基的灭菌n使用方便，但造价高，一般菇农用使用方便，但造价高，一般菇农用常压灭菌灶。常压灭菌灶。第十四页，本课件共有66页3、常压灭菌灶第十五页，本课件共有66页n使用温度：使用温度：100-105n灭菌时间：维持灭菌时间：维持810hn对象：原种、栽培种培养基的灭菌对象：原种、栽培种培养基的灭菌第十六页

5、，本课件共有66页（二）、制种容器（二）、制种容器第十七页，本课件共有66页（三）、接种设备与工具（三）、接种设备与工具n1、接种设备n（1）、超净工作台（局部净化设备空，气过滤除菌）第十八页，本课件共有66页n（2）、接种箱）、接种箱第十九页，本课件共有66页2、接种工具、接种工具n n接种针、接种环、接种刀、接种铲、镊子等第二十页，本课件共有66页（四）、（四）、菌种培养设备菌种培养设备n放置接种后各级菌种，并提供适宜温度和通气条件，使菌丝生长良好的专用设备第二十一页，本课件共有66页1、恒温培养箱、恒温培养箱n n根据需要使温度恒定在一定范围内,一般用于培养斜面试管和少部分原种。第二十二

6、页，本课件共有66页2、培养室、培养室n n培养架：以操作方便为宜,宽0.71.2米，层间40cmn n调温：电炉、红外线、暖气管、门窗、抽风机n n测温：干湿球温度计n n 照明：避免使用蓝光n n 灭菌：紫外灯第二十三页，本课件共有66页第二十四页，本课件共有66页三、菌种的制作三、菌种的制作n n(一一)母种的制作n n1、母种培养基PDA培养基：培养基：去皮马铃薯去皮马铃薯200克，葡萄糖克，葡萄糖20克，克，琼脂琼脂20克，水克，水1000亳升，亳升，PH值自然。适合以一值自然。适合以一般母种的培养般母种的培养第二十五页，本课件共有66页.PDA加富培养基：加富培养基：去皮马铃薯去皮

7、马铃薯200克，麦麸克，麦麸100克，葡萄糖克，葡萄糖20克，琼脂克，琼脂20克，水克，水1000亳升，亳升，PH值自然。适合母种的复壮培养。值自然。适合母种的复壮培养。.PDA综合培养基：综合培养基：去皮马铃薯去皮马铃薯200克，葡萄克，葡萄糖糖20克，琼脂克，琼脂20克，磷酸二氢钾克，磷酸二氢钾3克，硫酸镁克，硫酸镁1.5克，维生素克，维生素B1510mg，水，水1000亳升，亳升，PH值自然。适合草菇、灵芝、猴头菇、茯苓母种值自然。适合草菇、灵芝、猴头菇、茯苓母种的培养。的培养。.母种保藏培养基：母种保藏培养基：在在PDA培养基中加培养基中加10g蛋蛋白胨。白胨。第二十六页，本课件共有6

8、6页粉状条状属天然植物多糖融点96以上凝点40以下冷水中不溶透明度好、粘着力强不被微生物分解利用特性第二十七页，本课件共有66页2、母种培养基的制备母种培养基的制备PDA培养基：培养基：去皮马铃薯去皮马铃薯200g、蔗糖、蔗糖20g、琼脂、琼脂15-20g、水、水1000ml马铃薯去皮，切片，称取马铃薯去皮，切片，称取200克，沸水煮克，沸水煮20-30分钟，过分钟，过滤，取滤汁添水至滤，取滤汁添水至1000ml，加葡萄糖或蔗糖，加葡萄糖或蔗糖20克、琼克、琼脂脂15-20克煮熔，克煮熔，pH自然，常规灭菌即可。自然，常规灭菌即可。第二十八页，本课件共有66页准备工作第二十九页，本课件共有66

9、页 称量、材料预处理称量、材料预处理按配方准确称量各营养物质。将马铃薯去皮、挖按配方准确称量各营养物质。将马铃薯去皮、挖掉芽眼后称量掉芽眼后称量200g200g，切成，切成1cm1cm见方的小块。琼脂剪碎后见方的小块。琼脂剪碎后用水浸泡。用水浸泡。第三十页，本课件共有66页熬煮熬煮将将切切好好的的马马铃铃薯薯块块加加适适量量水水后后放放入入电电饭饭锅锅中中，煮至酥而不烂。煮至酥而不烂。第三十一页，本课件共有66页过滤、加可溶药物过滤、加可溶药物 用双层沙布过滤，取滤汁，放在电饭锅中加用双层沙布过滤，取滤汁，放在电饭锅中加 入糖入糖第三十二页，本课件共有66页熬琼脂、定容熬琼脂、定容 在沸腾状态

10、下加入琼脂，直到琼脂完全溶在沸腾状态下加入琼脂，直到琼脂完全溶化为止，定容至化为止，定容至1000ml1000ml。第三十三页，本课件共有66页母种培养基制作流程母种培养基制作流程1.分装试管分装试管 2.塞棉塞塞棉塞 3.打捆打捆 4.灭菌灭菌 5.摆斜面摆斜面第三十四页，本课件共有66页（1）、装管：）、装管：18 mm180 mm或或20 mm200 mm的玻璃试管，分装量掌握在试管长度的玻璃试管，分装量掌握在试管长度的的1/4-1/5，原则上是摆放成斜面后，斜面，原则上是摆放成斜面后，斜面的长度为试管长度的的长度为试管长度的1/2-2/3。（2）、灭菌：母种培养基灭菌时，需用）、灭菌：

11、母种培养基灭菌时，需用1.051.1 kg/cm2的压强，温度为的压强，温度为121，灭，灭菌（保持菌（保持121）30 min。（3）、斜面的摆置：趁热摆好斜面）、斜面的摆置：趁热摆好斜面第三十五页，本课件共有66页摆斜面摆斜面灭菌结束后锅盖开灭菌结束后锅盖开1/51/5的小缝，用余热烘干报纸和的小缝，用余热烘干报纸和棉塞，然后摆斜面。斜面长是试管总长的棉塞，然后摆斜面。斜面长是试管总长的1/21/2第三十六页，本课件共有66页第三十七页，本课件共有66页3、种菇的组织分离、种菇的组织分离（1）种菇的选择：外观典型、大小适中、无任何污染、7-8成熟、第12茬的子实体。（2）接种箱与分离工具的

12、消毒接种箱：科达气雾消毒粉23g或高锰酸钾5g，甲醛10ml混合气雾消毒30min.分离工具的消毒：用70-75酒精擦拭后，再在酒精灯上反复灼烧。第三十八页，本课件共有66页（3）种菇的解剖分离）种菇的解剖分离纵剖（撕）菇体尖头镊取柄盖交界处绿豆粒大的组织放入新斜面中部第三十九页，本课件共有66页金针菇是横切菌盖上薄的菌肉或金针菇是横切菌盖上薄的菌肉或取未开伞的幼嫩子实体的菌褶片取未开伞的幼嫩子实体的菌褶片第四十页，本课件共有66页灵芝组织分离所取的部位是菌盖灵芝组织分离所取的部位是菌盖边缘的边缘的白色生长圈白色生长圈第四十一页，本课件共有66页木耳等胶质菌类木耳等胶质菌类的菌肉薄，子实的菌肉

13、薄，子实体经无菌水反复体经无菌水反复冲洗后，撕开子冲洗后，撕开子实体或用刀片将实体或用刀片将两层耳片切开，两层耳片切开，挑取一小块菌肉挑取一小块菌肉组织即可。组织即可。第四十二页，本课件共有66页（4）种菇分离后的观察培养）种菇分离后的观察培养 将分离好的试管放入将分离好的试管放入23-25的温箱中培的温箱中培养，养，2436h后开始萌发菌丝，后开始萌发菌丝，23d后形成后形成菌落，此时注意淘汰杂菌污染或菌丝生长希菌落，此时注意淘汰杂菌污染或菌丝生长希弱的试管，弱的试管，10d左右菌丝可长满试管，放入左右菌丝可长满试管，放入冰箱中储存。冰箱中储存。选择适宜的季节做出菇试验。选择适宜的季节做出菇

14、试验。第四十三页，本课件共有66页4、母种的转管培养、母种的转管培养n n母种的接种必须在严格的无菌条件下进行。否则将会造成严重污染，给生产造成造成巨大损失。然后将所有试管及接种器具放入接种箱里进行消毒灭菌，力求灭菌彻底。在点燃酒精灯火焰上进行操作，将菌种试管和接种用斜面培养基放在火焰旁。拨去棉塞，把消毒灭菌的接种针伸入菌种试管内，挑小块n n菌种放入斜面培养基中，一支n n母种可移栽3040支试管。原n n始母种可转管24代。第四十四页，本课件共有66页图图3-14斜面试管转管接种斜面试管转管接种第四十五页，本课件共有66页培养：将移接好的试管放入将移接好的试管放入20-25的温的温箱中培养

15、，同时注意反复观察，清杂去劣，箱中培养，同时注意反复观察，清杂去劣，经经10d左右菌丝可长满试管。左右菌丝可长满试管。第四十六页，本课件共有66页（二）原种的制作（二）原种的制作n n1、原种培养基配方与配制 木屑培养基：木屑木屑培养基：木屑78%，麸皮或谷粒，麸皮或谷粒20%，石膏，石膏1%，磷肥，磷肥1%，水适量。适用于培养，水适量。适用于培养平菇、木耳、香菇、猴头。平菇、木耳、香菇、猴头。棉子壳培养基：棉子壳棉子壳培养基：棉子壳78%，麸皮或谷粒，麸皮或谷粒20%，石膏，石膏1%，磷肥，磷肥1%，水适量。水适量。，水适量。水适量。适用于培养平菇、猴头、金针菇、鸡腿菇。适用于培养平菇、猴头

16、、金针菇、鸡腿菇。第四十七页，本课件共有66页n n谷粒配方：稻谷98%，石膏粉2%n n棉子壳谷粒配方：棉子壳50%，谷粒,49%，石膏粉1%第四十八页，本课件共有66页培养料的配制培养料的配制n n 木屑、棉籽壳培养料的拌料配制木屑、棉籽壳培养料的拌料配制n n 木屑、棉籽壳培养料按配方称量后，堆木屑、棉籽壳培养料按配方称量后，堆制混和，加水拌料，配方中的糖也可先溶于制混和，加水拌料，配方中的糖也可先溶于水中再拌入。拌料时要控制料的含水量在水中再拌入。拌料时要控制料的含水量在60 左右左右。第四十九页，本课件共有66页n n 谷粒培养料的配制谷粒培养料的配制n n 谷粒因其营养较丰富，制作

17、的菌种具有谷粒因其营养较丰富，制作的菌种具有菌丝萌发早、吃料快、抗衰老能力强、产量菌丝萌发早、吃料快、抗衰老能力强、产量高等优点，在生产中应用较多。一般是采用高等优点，在生产中应用较多。一般是采用浸泡法或煮熟法，也可用石灰水浸泡。浸泡法或煮熟法，也可用石灰水浸泡。n n注：煮熟至将开口为度注：煮熟至将开口为度第五十页，本课件共有66页n2、装瓶、装瓶 灭菌灭菌 n n 将培养料拌匀装入菌种瓶（或袋）内、将培养料拌匀装入菌种瓶（或袋）内、装料松紧适宜，上下一致，装料高度以齐瓶装料松紧适宜，上下一致，装料高度以齐瓶（袋）肩为宜。然后用手指在瓶的中央向下（袋）肩为宜。然后用手指在瓶的中央向下大一个小

18、洞，以利接种定植，塞上棉塞。装大一个小洞，以利接种定植，塞上棉塞。装好的料瓶（袋）要当天灭菌，以免培养料发好的料瓶（袋）要当天灭菌，以免培养料发霉变质。霉变质。第五十一页，本课件共有66页n n培养基的灭菌培养基的灭菌 n n 通常采用高压蒸气灭菌法和常压蒸气灭菌法以通常采用高压蒸气灭菌法和常压蒸气灭菌法以达到灭菌的目的。高压灭菌达到灭菌的目的。高压灭菌2 2小时或常压灭菌于小时或常压灭菌于100维持维持8-108-10小时，灭菌后培养基最好放在适温下，小时，灭菌后培养基最好放在适温下，空白培养空白培养5-7天，以检查培养基灭菌的效果。如在此天，以检查培养基灭菌的效果。如在此期间没有出现任何杂

19、菌，说明灭菌效果良好。待其冷期间没有出现任何杂菌，说明灭菌效果良好。待其冷却却3030以下可接种。也可高压灭菌（以下可接种。也可高压灭菌（1.52h)第五十二页，本课件共有66页3、原种的接种、原种的接种接原种用接种耙取蚕豆大母种放于瓶中接种穴内，一支母种可46瓶原种。第五十三页，本课件共有66页4、原种的培养、原种的培养培养室的大小和床架数量应根据生产规模来定。注意：注意：适温培养，对多数食用菌而言，适温培养，对多数食用菌而言，可保可保 持持2025，定期检查杂菌。时间，定期检查杂菌。时间25402540天天。n n正常菌丝：洁白、粗壮。n n杂菌：有黄、绿、黑橘红等多种颜色，且生长速度快，

20、稀疏无力。第五十四页，本课件共有66页第五十五页，本课件共有66页（三）、栽培种的制作（三）、栽培种的制作n n基本上同原种，可参照执行。n n容器可用15cm30cm0.005cm聚丙烯朔料袋加套环替代。第五十六页，本课件共有66页接栽培种用接种匙（镊、铲）取枣大原种放于袋的两端或瓶中料面上表面老菌丝及老种块勿接入返回本节第五十七页，本课件共有66页第五十八页，本课件共有66页第五十九页，本课件共有66页四、菌种的保藏四、菌种的保藏n n（一）菌种的保藏的原理及设备n n1、菌种的保藏的原理：采用干燥、低温、隔氧等方法，尽可能地降低菌种的代谢活动，并保证原种的纯度。n n2、菌种的保藏的设备

21、：普通冰箱或超低温冰箱、真空干燥器（机）第六十页，本课件共有66页特点简便保藏时间短易污染及退化不适于草菇等菌类1.斜面低温法斜面菌种置46冰箱中（34个月）返回本节（二）菌种常用的保藏方法（二）菌种常用的保藏方法第六十一页，本课件共有66页返回本节第六十二页，本课件共有66页n n2、矿油保藏法：将高温灭菌后的矿油（液体石蜡、石蜡油）注入母种试管，高出斜面1cm，然后竖放于冰箱内或室温下保藏。一般成活时间57年，一般以12年移植一次较好。同时因其沾有矿油，恢复慢，长势弱，需转管一次方能恢复正常生长。第六十三页，本课件共有66页n3、无菌水保藏法：将培养好的斜面菌种用接种针切成小块，连同琼脂培养基移入灭菌蒸馏水内，然后用白胶塞封口，在室温下保藏，可成活2年。第六十四页，本课件共有66页菌种厂设计菌种厂设计第六十五页，本课件共有66页第六十六页，本课件共有66页