植物组织培养基本知识 (2)精选课件.ppt
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1、关于植物组织培养基本知识(2)第一页,本课件共有48页第一章第一章 植物组织培养的基本知识植物组织培养的基本知识主要内容主要内容植物组织培养定义及类型植物组织培养定义及类型植物组织培养的基本原理植物组织培养的基本原理植物组织培养的发展简史植物组织培养的发展简史植物组织培养在农业上的应用植物组织培养在农业上的应用第二页,本课件共有48页目的与要求目的与要求掌握植物组织培养的概念与类型掌握植物组织培养的概念与类型掌握植物组织培养的基本原理掌握植物组织培养的基本原理了解植物组织培养的特点了解植物组织培养的特点 了解植物组织培养的发展简史了解植物组织培养的发展简史了解植物组织培养在农业上的应用了解植物
2、组织培养在农业上的应用第三页,本课件共有48页一、植物组织培养一般概念一、植物组织培养一般概念 定义定义:离体离体(in vitro)条件下利用条件下利用人工培人工培养条件养条件在在无菌无菌情况下,对植物情况下,对植物组织组织(器官、组织(器官、组织、细胞、原生质体等)、细胞、原生质体等)进行培养,并使之生长、发进行培养,并使之生长、发育再生出育再生出完整植株完整植株的过程。的过程。外植体外植体(explant):由活体(:由活体(in vivo)植物体上植物体上提取下来的,接种在培养基上的无菌细胞、组织、提取下来的,接种在培养基上的无菌细胞、组织、器官等。器官等。第四页,本课件共有48页第五
3、页,本课件共有48页第六页,本课件共有48页第七页,本课件共有48页二、植物组织培养的类型二、植物组织培养的类型1.依外植体不同分:依外植体不同分:器官培养器官培养(organ culture)茎尖分生组织培养茎尖分生组织培养(shoot tip culture,shoot apex culture,apical meristem culture)愈伤组织培养愈伤组织培养(calluse cultrue)细胞培养细胞培养(cell culture)原生质体培养原生质体培养(protoplast culture)愈伤组织(愈伤组织(callus):在人工培养基上由外植体上形成的一团在人工培养基上
4、由外植体上形成的一团无序生长状态的薄壁细胞。无序生长状态的薄壁细胞。第八页,本课件共有48页蟹爪兰的愈伤组织蟹爪兰的愈伤组织第九页,本课件共有48页第十页,本课件共有48页二、植物组织培养的类型二、植物组织培养的类型按培养方法分为按培养方法分为固体培养固体培养(solid culture):在液体培养液中加入在液体培养液中加入0.5%1%的琼脂使液体培养液半固化,再接种培养物的一种培养技术。的琼脂使液体培养液半固化,再接种培养物的一种培养技术。液体培养液体培养(submerged culture):):把细胞或生物体的把细胞或生物体的一部分,置于液体培养基中使其发育,并不断振荡,使之一部分,置
5、于液体培养基中使其发育,并不断振荡,使之均匀地在悬浊液中进行培养的一种方法均匀地在悬浊液中进行培养的一种方法第十一页,本课件共有48页看护培养看护培养(nurse culture):将亲本愈伤组织或高密度的):将亲本愈伤组织或高密度的悬浮细胞同低密度细胞一起培养,以促进低密度细胞生长、分悬浮细胞同低密度细胞一起培养,以促进低密度细胞生长、分裂的培养方法。裂的培养方法。看护培养是由缪尔(看护培养是由缪尔(Muir)于)于1953年创立的。年创立的。微室培养微室培养(microchamber culture):利用玻璃或塑料制:利用玻璃或塑料制作的小室进行细胞培养的技术。作的小室进行细胞培养的技术
6、。第十二页,本课件共有48页看护培养看护培养(nurse culture):将亲本愈伤组织或高密度的):将亲本愈伤组织或高密度的悬浮细胞同低密度细胞一起培养,以促进低密度细胞生长、分悬浮细胞同低密度细胞一起培养,以促进低密度细胞生长、分裂的培养方法。裂的培养方法。看护培养是由缪尔(看护培养是由缪尔(Muir)于)于1953年创立的。年创立的。第十三页,本课件共有48页微室培养微室培养(microchamber culture):利用玻璃或塑料:利用玻璃或塑料制作的小室进行细胞培养的技术。制作的小室进行细胞培养的技术。第十四页,本课件共有48页二、植物组织培养的类型二、植物组织培养的类型3.按培
7、养过程分为:按培养过程分为:初代培养(初代培养(Primary culture)(无菌培养物无菌培养物)将从植物体上分离下来的第一次培养。将从植物体上分离下来的第一次培养。继代培养(继代培养(Subculture)(增殖培养)(增殖培养)将初代培养得到的培养物转移到新的培养将初代培养得到的培养物转移到新的培养基上进行培养,称为继代培养。基上进行培养,称为继代培养。第十五页,本课件共有48页三、植物组织培养的基本原理三、植物组织培养的基本原理植植物细胞的全能性物细胞的全能性基本原理:基本原理:植物细胞的全能性(植物细胞的全能性(totipotent):-植物细胞具有该植物体植物细胞具有该植物体全
8、部遗传全部遗传的可能性,在一定条件下具的可能性,在一定条件下具有发育成有发育成完整植物体完整植物体的的潜在能力潜在能力。从理论上讲,生物体的每一个活。从理论上讲,生物体的每一个活细胞都应该具有全能性细胞都应该具有全能性.细胞差异细胞差异:(1)受精卵的全能性最高(胚性强)受精卵的全能性最高(胚性强)(2)体细胞的全能性比生殖细胞的低体细胞的全能性比生殖细胞的低。实践证明实践证明:处于离体状态的植物活细胞,在一定的处于离体状态的植物活细胞,在一定的营养物质营养物质、激激素素和其他外界条件的作用下,就可能表现出全能性,发育成和其他外界条件的作用下,就可能表现出全能性,发育成完整的植株。人工条件下实
9、现的这一过程,就是植物组织培完整的植株。人工条件下实现的这一过程,就是植物组织培养。养。第十六页,本课件共有48页三、植物组织培养的基本原理三、植物组织培养的基本原理植植物细胞的全能性物细胞的全能性植物细胞全能性的表达植物细胞全能性的表达两个过程:两个过程:脱分化脱分化(dedifferentiation):一个成熟细胞转变为分生状态一个成熟细胞转变为分生状态的过程。恢复细胞的分裂活性。的过程。恢复细胞的分裂活性。再分化再分化(redifferentiation):经脱分化的组织或细胞在一定的培经脱分化的组织或细胞在一定的培养条件下转变为各种不同细胞类型的过程。养条件下转变为各种不同细胞类型的
10、过程。第十七页,本课件共有48页离体的植物离体的植物器官、组织、器官、组织、细胞细胞脱分化脱分化愈愈伤伤组组织织再分化再分化根根芽芽胚胚状状体体植植物物体体 植物组织培养过程植物组织培养过程(细胞全能性表达过程)(细胞全能性表达过程)植物组织培养条件植物组织培养条件 含有全部营养成分的培养基(无机、有机营养、无机、有机营养、植物植物激素激素)、一定的温度、空气、光照、适合的pH、无菌环境等。植物激素控制理论:植物激素控制理论:细胞分裂素细胞分裂素/生长素生长素-可控制器官的分化:可控制器官的分化:高高-茎芽的分化;中茎芽的分化;中-诱导愈伤组织;低诱导愈伤组织;低-根的形成)根的形成)第十八页
11、,本课件共有48页四、植物组织培养特点四、植物组织培养特点培养条件可以人为控制培养条件可以人为控制 在人为提供的培养基质和小气候环境条件下进行生长,摆脱了大自然中四季、昼夜的在人为提供的培养基质和小气候环境条件下进行生长,摆脱了大自然中四季、昼夜的变化以及灾害性气候的不利影响,且条件均一,对植物生长极为有利,便于稳定地进变化以及灾害性气候的不利影响,且条件均一,对植物生长极为有利,便于稳定地进行周年培养生产。行周年培养生产。生长周期短,繁殖率高生长周期短,繁殖率高 由于人为控制培养条件,因此生长较快,一般由于人为控制培养条件,因此生长较快,一般2030d为一个周期。植物材为一个周期。植物材料按
12、几何级数繁殖生产,总体来说成本低廉,且能及时提供规格一致的优质料按几何级数繁殖生产,总体来说成本低廉,且能及时提供规格一致的优质种苗或脱病毒种苗。种苗或脱病毒种苗。管理方便,利于工厂化生产和自动化控制管理方便,利于工厂化生产和自动化控制 植物组织培养是在一定的场所和环境下,人为提供一定的温度、光照、湿度、营养、植物组织培养是在一定的场所和环境下,人为提供一定的温度、光照、湿度、营养、激素等条件,既利于高度集约化和高密度工厂化生产,也利于自动化控制生产。它是激素等条件,既利于高度集约化和高密度工厂化生产,也利于自动化控制生产。它是未来农业工厂化育苗的发展方向。它与盆栽、田间栽培等相比省去了中耕除
13、草、浇水未来农业工厂化育苗的发展方向。它与盆栽、田间栽培等相比省去了中耕除草、浇水施肥、防治病虫害等一系列繁杂劳动,可以大大节省人力、物力及田间种植所需要的施肥、防治病虫害等一系列繁杂劳动,可以大大节省人力、物力及田间种植所需要的土地。土地。第十九页,本课件共有48页五、植物组织培养的发展简史五、植物组织培养的发展简史探索阶段(探索阶段(1902-1929年)年)组培方法和定义的建立阶段(组培方法和定义的建立阶段(1930-1939年)年)细胞全能性的证实阶段(细胞全能性的证实阶段(1940-1959)组培技术和理论迅速发展阶段(组培技术和理论迅速发展阶段(1960-今)今)四个阶段四个阶段第
14、二十页,本课件共有48页1.探索阶段(探索阶段(1902-1929年)年)Haberlandt:基础:基础:贡献:贡献:提出细胞全能性假设提出细胞全能性假设实验实验-检验细胞学说检验细胞学说小野芝麻和凤眼兰的栅栏细胞和虎小野芝麻和凤眼兰的栅栏细胞和虎眼万年青属表皮细胞眼万年青属表皮细胞无分裂无分裂细胞高度分化细胞高度分化+培养基中无生长激素培养基中无生长激素首次进行离体细胞培养首次进行离体细胞培养细胞学说细胞学说Knop+蔗糖蔗糖第二十一页,本课件共有48页关于单离植物细胞培养实验关于单离植物细胞培养实验我愿意指出:在我的我愿意指出:在我的培养实验中,虽然经常培养实验中,虽然经常观察到细胞的明
15、显生长,观察到细胞的明显生长,但从未观察到细胞分裂。但从未观察到细胞分裂。发现单细胞培养的条件,发现单细胞培养的条件,将是未来培养试验的难将是未来培养试验的难题。在未来,人们可以题。在未来,人们可以成功地从营养细胞培养成功地从营养细胞培养出人工胚。出人工胚。第二十二页,本课件共有48页1904年年:Hanning胚培养:培养萝卜和辣根胚培养:培养萝卜和辣根菜的胚,得到植株菜的胚,得到植株1922年年:Kotte和和Robbins根培养根培养1925年年:Laibach亚麻种间杂交幼胚培养得到杂亚麻种间杂交幼胚培养得到杂种种其它研究其它研究1922年:年:Knudson采用胚培养法获得兰花幼苗,
16、采用胚培养法获得兰花幼苗,克服其种子发芽困难的问题。克服其种子发芽困难的问题。第二十三页,本课件共有48页2.组培方法和定义的建立阶段(组培方法和定义的建立阶段(1930-1939年)年)1934年:年:White番茄根建立第一个活跃生长的植物无性系。番茄根建立第一个活跃生长的植物无性系。当根当根2厘米长切成厘米长切成0.5-1厘米厘米切断切断,无菌,无菌液体培养液体培养完全完全 相相同的同的离体根离体根根离体培养真正成功。根离体培养真正成功。28年年-1600代。代。1934年:年:Gautherete培养山毛杨、黑杨形成层组织产生了培养山毛杨、黑杨形成层组织产生了Callus1937年:年
17、:White发现发现3种种B族维生素族维生素(吡哆醇、硫胺素、烟酸)(吡哆醇、硫胺素、烟酸)和和IAA对植物生长有用对植物生长有用1939年:年:Gautherete培养胡萝卜培养胡萝卜根根小外植体成功小外植体成功1939年:年:White培养烟草种间杂种培养烟草种间杂种幼茎切段幼茎切段原形成层成功原形成层成功1939年:年:Nobecourt培养胡萝卜培养胡萝卜根块茎薄壁组织根块茎薄壁组织成功成功组织培养学科的奠基人组织培养学科的奠基人第二十四页,本课件共有48页组织培养的奠基人组织培养的奠基人第二十五页,本课件共有48页3.细胞全能性的证实阶段(细胞全能性的证实阶段(1940-1959)1
18、943年:年:White植物组织培养手册植物组织培养手册A Handbook of Plant Tissue Culture,标志组织培养成,标志组织培养成为一门新兴学科为一门新兴学科1946年:年:罗士韦在菟丝子茎尖培养中观察到花的罗士韦在菟丝子茎尖培养中观察到花的形成,为形成,为试管受精试管受精奠定了基础奠定了基础1948年:年:Skoog和崔真培养烟草茎段时,发现腺和崔真培养烟草茎段时,发现腺嘌呤或腺苷可解除生长素对芽生长的抑嘌呤或腺苷可解除生长素对芽生长的抑制作用,制作用,腺嘌呤腺嘌呤/生长素生长素高,生芽;低,生高,生芽;低,生根;相等,不分化。根;相等,不分化。第二十六页,本课件共
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