10基因治疗.ppt

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1、 基因治疗 Gene Therapy医学遗传学国家重点实验室医学遗传学国家重点实验室National Key Laboratory of Medical Genetics.（1 1）概述）概述（2 2）基因转移系统）基因转移系统（3 3）临床例子）临床例子（4 4）肿瘤的基因治疗）肿瘤的基因治疗（5 5）基因治疗存在的问题基因治疗存在的问题概述概述基因治疗的定义基因治疗的定义 基因治疗基因治疗 （gene therapy)gene therapy)是指将正常基因植是指将正常基因植 入靶细胞代替遗传缺陷的基因，或关闭、抑制入靶细胞代替遗传缺陷的基因，或关闭、抑制 异常表达的基因，以达到预防和治疗

2、疾病目的异常表达的基因，以达到预防和治疗疾病目的 的一种临床治疗技术。的一种临床治疗技术。一句话：将外源性基因引入细胞，以改变细一句话：将外源性基因引入细胞，以改变细 胞或个体的表型来达到治疗的目的。胞或个体的表型来达到治疗的目的。1 1、原理、原理 1)DNA1)DNA是遗传的物质基础。是遗传的物质基础。2)2)基因是能表达产生特异蛋白质基因是能表达产生特异蛋白质的的DNADNA片段。片段。3)3)遗传病的根源在于基因异常，遗传病的根源在于基因异常，对异常基因的纠正可以使疾病获得对异常基因的纠正可以使疾病获得根治。根治。基因表达序列的改变：基因表达序列的改变：单个或多个核苷酸的突变、缺失、重

3、复单个或多个核苷酸的突变、缺失、重复基因调控区域的改变：基因调控区域的改变：基因启动子的突变、缺失等基因启动子的突变、缺失等20世纪世纪50年代年代,DNA双螺旋结构、遗传密码与中心双螺旋结构、遗传密码与中心法则，奠定了基因结构和功能的分子生物学理论法则，奠定了基因结构和功能的分子生物学理论基础。基础。70年代重组年代重组DNA技术的发展，使携带目的基因技术的发展，使携带目的基因的病毒载体在实验室产生。的病毒载体在实验室产生。80年代现代生物学在理论和技术上的突破，使基年代现代生物学在理论和技术上的突破，使基因治疗成为可能。因治疗成为可能。1980年，年，Cline等采用磷酸钙介导的基等采用磷

4、酸钙介导的基因转移系统治疗地中海贫血，未能成功。因转移系统治疗地中海贫血，未能成功。基础工作的重要，主要是基础工作的重要，主要是 基因转移与表基因转移与表达调控，探讨目的基因在受体细胞或整达调控，探讨目的基因在受体细胞或整体动物中的整合特点、表达水平与调控体动物中的整合特点、表达水平与调控规律。并且疾病的基因治疗必须视不同规律。并且疾病的基因治疗必须视不同疾病而异。疾病而异。基因治疗作为现代医疗史上的充满着很基因治疗作为现代医疗史上的充满着很大希望和潜在风险的现代高新技术，因大希望和潜在风险的现代高新技术，因此伦理学和安全性的讨论有其必要性与此伦理学和安全性的讨论有其必要性与超前性。超前性。目

5、的性目的性 基因转移的受体细胞基因转移的受体细胞病毒载体的安全性病毒载体的安全性基因治疗的审批与临床试验基因治疗的审批与临床试验美国是最早开展基因治疗的国家美国是最早开展基因治疗的国家先在地方伦理小组先在地方伦理小组-HGTS-RAC-FDA1989年首例基因标记与基因治疗，恶性黑色年首例基因标记与基因治疗，恶性黑色素瘤素瘤1990年首例成功案例，年首例成功案例，ADA-SCID1999年患难事件，杰辛格事件年患难事件，杰辛格事件-OTC二、基因转移系统 怎样将重组DNA导入宿主细胞，并且能在宿主细胞中有效表达目的蛋白，达到基因治疗的目的。1 1、基因治疗的策略：、基因治疗的策略：1)1)基因

6、修复基因修复(gene reparation)(gene reparation)2)2)基因代替基因代替(gene substitution)(gene substitution)3)3)基因抑制基因抑制(gene inhibition)(gene inhibition)4)4)基因开放基因开放(gene opening)(gene opening)5)5)基因增强基因增强(gene enhancement)(gene enhancement)基因修复基因修复：原位修复有缺陷的基因，使其在质和量上均能得：原位修复有缺陷的基因，使其在质和量上均能得到正常的表达。到正常的表达。基因代替基因代替：指

7、去除整个变异基因，用有功能的正常基因：指去除整个变异基因，用有功能的正常基因取代之，使疾病基因得到永久的更正。取代之，使疾病基因得到永久的更正。基因抑制：基因抑制：利用反义利用反义RNA抑制有害基因的表达抑制有害基因的表达AG-珠蛋白基因家族（珠蛋白基因家族（11号染色体）：号染色体）：基因开放基因开放基因开放：基因开放：目的在于促使有类似功能的基因表达，目的在于促使有类似功能的基因表达，以超过或代替异常基因的表达。以超过或代替异常基因的表达。drug基因增强：基因增强：是指将目的基因导入病变细胞或其他细胞，目的基因的表达产是指将目的基因导入病变细胞或其他细胞，目的基因的表达产物可以补偿缺陷细

8、胞的功能或使原有的功能得到加强。物可以补偿缺陷细胞的功能或使原有的功能得到加强。2 2、基因转移的方法基因转移的方法 基因转移是基因治疗的关键和基础，实施基因转移是基因治疗的关键和基础，实施基因转移的途径主要有两类：基因转移的途径主要有两类：1 1）直接体内法）直接体内法(in vivoin vivo)，即活体直接转移即活体直接转移法，指将外源基因直接注入人体内有关组织器法，指将外源基因直接注入人体内有关组织器官，使其进入相应的细胞官，使其进入相应的细胞 2 2）间接体内法（）间接体内法（ex vivoex vivo)，即在体转移，指即在体转移，指在体外将外源基因导入细胞，再将这种细胞回在体外

9、将外源基因导入细胞，再将这种细胞回输到病人体内。输到病人体内。直接体内法直接体内法(in vivo)间接体内法（间接体内法（ex vivo)基因转移的方法可分为：基因转移的方法可分为：gene-transferring strategiesgene-transferring strategies 物理 physical；化学 chemical；生物 biochemical。1、基因转移的物理方法、基因转移的物理方法基因转移的物理方法包括：基因转移的物理方法包括：裸裸DNADNA直接注射、微粒轰击、电穿孔、显微注射等直接注射、微粒轰击、电穿孔、显微注射等（1）裸）裸DNA直接注射直接注射(1)(

10、1)裸裸DNADNA直接注射直接注射（2）基因枪（）基因枪（gene gun)（3）电穿孔法（）电穿孔法（electroporation）电 转（4）显微注射）显微注射(microinjection)（1 1）磷酸钙共沉淀法）磷酸钙共沉淀法 （2）DEAE-DEAE-葡聚糖转染法葡聚糖转染法 （3）脂质体转染法脂质体转染法 （4）纳米颗粒转移法）纳米颗粒转移法 2、基因转移的化学方法、基因转移的化学方法（1 1）磷酸钙共沉淀法）磷酸钙共沉淀法CaClCaCl2 2,DNA,DNA和磷酸盐缓冲液缓慢混合时，即和磷酸盐缓冲液缓慢混合时，即有磷酸钙微细沉淀形成，这些细小颗粒可以有磷酸钙微细沉淀形成，

11、这些细小颗粒可以吸附在细胞表面，通过细胞膜的内吞作用将吸附在细胞表面，通过细胞膜的内吞作用将DNADNA吸收进入细胞质而后进入细胞核吸收进入细胞质而后进入细胞核DNADNA多多以以拷拷贝贝首首位位相相连连的的串串珠珠状状排排列列进进入入细细胞，在细胞中多以多拷贝形式存在。胞，在细胞中多以多拷贝形式存在。瞬间表达效率最高可达瞬间表达效率最高可达20%,20%,长期表达效率低。长期表达效率低。（2）DEAE-DEAE-葡聚糖转染法葡聚糖转染法二二乙胺乙基葡聚糖（乙胺乙基葡聚糖（diethyl-diethyl-aminoethyl-aminoethyl-dextran,DEAE-dextrandex

12、tran,DEAE-dextran)是是一种高分子量的多一种高分子量的多聚阴离子试剂聚阴离子试剂能促进哺乳动物细胞捕获外源能促进哺乳动物细胞捕获外源DNADNA该该方法可广泛用于转染病毒、病毒序列及其他方法可广泛用于转染病毒、病毒序列及其他DNADNA适合于细胞瞬间表达检测及小量适合于细胞瞬间表达检测及小量DNADNA的转染。的转染。(3)(3)脂质体（脂质体（liposomeliposome)主要分为两类：主要分为两类：1 1）病毒介导的基因转移）病毒介导的基因转移逆转录病毒（逆转录病毒（RVRV）载体载体腺病毒（腺病毒（AdAd）载体载体腺相关病毒（腺相关病毒（AAVAAV）载体载体单纯疱

13、疹病毒（单纯疱疹病毒（HSVHSV）载体载体多种形式的嵌合病毒载体多种形式的嵌合病毒载体 3、基因转移的生物学方法、基因转移的生物学方法逆转录病毒（逆转录病毒（RV）载体载体(Vector)腺相关病毒（腺相关病毒（AAV）载体载体3、基因转移的生物学方法、基因转移的生物学方法2 2）非病毒载体介导的基因转移）非病毒载体介导的基因转移 配体配体/受体受体 人工染色体人工染色体 配体配体/受体受体（ligand/receptor)电穿孔法电穿孔法，显微注射显微注射，磷酸钙共沉淀法磷酸钙共沉淀法质粒质粒DNADNA注射、吸入，注射、吸入，体内电穿孔，体内电穿孔，基因疫基因疫苗苗非载体法非载体法脂质体

14、，微粒子，脂质体，微粒子，GAMGAM脂质体脂质体，微粒子微粒子，GAMGAM非生物性载体法非生物性载体法Mt,MAC,HAC,HMCMt,MAC,HAC,HMC配体配体/受体受体非病毒性生物载体法非病毒性生物载体法RV,HIVRV,HIV，AV,AAV,AV,AAV,HSV,poxrivusHSV,poxrivusRVRV,HIVHIV，AVAV,AAVAAV,HSVHSV，poxrivuspoxrivus病毒载体法病毒载体法间接体内法间接体内法(ex vivo)(ex vivo)直接体内法直接体内法(in vivo)(in vivo)基因转移方法基因转移方法基因治疗的靶细胞基因治疗的靶细胞

15、造血干细胞造血干细胞肝细胞肝细胞肌细胞肌细胞淋巴细胞淋巴细胞皮肤成纤维细胞皮肤成纤维细胞iPS细胞（细胞（induced pluripotent stem cell）iPS细胞（人工诱导的多潜能干细胞）细胞（人工诱导的多潜能干细胞）最先由日本京都大学Yamanaka科研团队发起这项研究，他们选择Oct3/4,Sox2,c-Myc,and Klf4四个基因，通过逆转录病毒将这四个基因导入小鼠胚胎成纤维细胞和小鼠成体成纤维细胞中，可以引起待诱导细胞的基因组发生重新编程而转变为具有ES细胞（胚胎干细胞）特性的iPS细胞。iPS 细胞显示了ES细胞的形态学（圆形、大核仁和少细胞质）和生长特性，表达了E

16、S细胞的标志基因。通过皮下注射把iPS细胞移植到裸鼠体内形成了畸胎瘤（包含了来自三个胚层的各种组织），说明其具有分化多潜能性。用显微注射的方法把iPS细胞注射到小鼠胚泡内，iPS细胞参与了胚胎发育，形成成熟的嵌合体小鼠。后来科研人员用后来科研人员用Oct3/4,Sox2,和和Klf4 三个基因组合以及三个基因组合以及OCT4,SOX2,NANOG,和和LIN28四个基因组合把人四个基因组合把人皮肤成纤维细胞成功诱导为皮肤成纤维细胞成功诱导为iPS细胞，同细胞，同时待诱导的细胞也由成纤维细胞扩大到时待诱导的细胞也由成纤维细胞扩大到胃上皮细胞、肝细胞等细胞。胃上皮细胞、肝细胞等细胞。为了评价为了评

17、价iPS细胞的治疗性潜能，美国科学家细胞的治疗性潜能，美国科学家Jacob Hanna等做了用自体成纤维细胞诱导出的等做了用自体成纤维细胞诱导出的iPS治疗镰治疗镰状细胞性贫血症小鼠模型的动物实验。状细胞性贫血症小鼠模型的动物实验。治疗策略：治疗策略：1.将突变体小鼠体内成纤维细胞诱导成将突变体小鼠体内成纤维细胞诱导成iPS细胞；细胞；2.通过同源重组修复有遗传缺陷的通过同源重组修复有遗传缺陷的iPS细胞；细胞；3.体外把修复的体外把修复的iPS细胞诱导分化成细胞诱导分化成HPs（造血祖细（造血祖细胞）；胞）；4.把这些把这些HPs移植到经辐射照射的供体小鼠体内。移植到经辐射照射的供体小鼠体内

18、。实验比较成功，达到了预期的治疗效果，显示了iPS细胞用于遗传病基因治疗的巨大潜力。三三 临床应用例子临床应用例子(Examples of clinical application)血友病B（hemophilia B)重症联合免疫缺陷症 (Severe Combined Immunodeficiency,SCID）-地中海贫血 糖尿病 血友病B：一种X连锁遗传的出血性疾病，由FIX的缺乏而出现严重的凝血功能障碍。在男性中该病的发病率1/30000，临床特征为关节和软组织的自发性出血。正常人体内，FIX的浓度为5ug/ml，根据血浆中FIX的水平，可以将血友病B分为三类：重型 低于正常浓度的1%

19、中间型 低于正常浓度的5%轻型 低于正常浓度的20%FIX基因：基因：定位在定位在X染色体上，全长染色体上，全长33.5Kb，由，由8个个外显子、外显子、7个内含子；个内含子；c DNA全长全长2.8kb，编码序列为编码序列为1383bp，编码，编码461个氨基酸，个氨基酸，成熟成熟FIX蛋白为蛋白为415氨基酸。在肝脏中特异氨基酸。在肝脏中特异表达，蛋白加工后，以分泌途径从肝细胞释表达，蛋白加工后，以分泌途径从肝细胞释放到血液。放到血液。血友病血友病B的基因治疗的临床前研究的基因治疗的临床前研究通过病毒载体介导的通过病毒载体介导的in vivo和和ex vivo基因转移基因转移系统的途径实现

20、。系统的途径实现。采用的宿主细胞：肝细胞、肌细胞和成纤维细胞。采用的宿主细胞：肝细胞、肌细胞和成纤维细胞。基因转移的载体：病毒载体。基因转移的载体：病毒载体。反转录病毒载体介导的反转录病毒载体介导的FIX基因转移，采用部分基因转移，采用部分肝脏切除，转染的效率不高，不能达到治疗的目肝脏切除，转染的效率不高，不能达到治疗的目的。的。腺病毒介导的腺病毒介导的FIX基因转移，效果在鼠体内维持基因转移，效果在鼠体内维持了较长时间，但在狗体内维持的时间较短。了较长时间，但在狗体内维持的时间较短。腺相关病毒介导的腺相关病毒介导的FIX基因转移，取得了重要的基因转移，取得了重要的发展，临床基因治疗也获得了初

21、步的成功。发展，临床基因治疗也获得了初步的成功。血友病B基因治疗临床研究国际首次血友病基因治疗临床研究是我国的复旦大学遗传研究所与上海长海医院血液科合作开展的。病人皮肤细胞，重组反转录病毒，注射入病人皮下。Kay进行的重组AAV直接肌肉注射法临床基因治疗研究。Nat Genet 2000 Mar;24(3):257-61Comment in:Nat Genet.2000 Mar;24(3):201-2.Evidence for gene transfer and expression of factor IX in haemophilia B patients treated with an

22、AAV vector.Kay MA,Manno CS,Ragni MV,Larson PJ,Couto LB,McClelland A,Glader B,Chew AJ,Tai SJ,Herzog RW,Arruda V,Johnson F,Scallan C,Skarsgard E,Flake AW,High KA.X连锁的重症联合免疫缺陷（连锁的重症联合免疫缺陷（X-SCID）T、B淋巴细胞功能先天性缺乏综合征，淋巴细胞功能先天性缺乏综合征，1/80000。发病机制：发病机制：1、细胞因子受体细胞因子受体 链缺陷链缺陷2、Jak3缺陷缺陷3、X-SCID中中T细胞和细胞和NK细胞发育缺陷细

23、胞发育缺陷4、Jak-STAT途径中其他环节对途径中其他环节对T细胞和细胞和NK细胞的细胞的影响影响X-SCID的基因治疗：的基因治疗：临床前的研究临床前的研究RV介导的介导的c基因转移能纠正细胞的发育缺陷。基因转移能纠正细胞的发育缺陷。临床研究临床研究法国法国Fisher领导的实验室，用领导的实验室，用RV 转染淋巴细转染淋巴细胞后，回输入病人体内。胞后，回输入病人体内。-地中海地中海贫贫血血是一种常是一种常见见的的遗传遗传病，国内主要是以广病，国内主要是以广东东、广、广西、云南和四川等，按症状可分西、云南和四川等，按症状可分为轻为轻型、中型型、中型和重型。和重型。传统传统的治的治疗疗方法是

24、以方法是以输输血、骨髓移植和血、骨髓移植和药药物物诱诱导导，虽虽有点有点疗疗效，但有其局限性效，但有其局限性细胞水平的研究:病毒载体介导的人珠蛋白基因转移，骨髓干、祖细胞。RNA/DNA嵌合体介导的定点修复间接体内间接体内(ex vivo)基因转移研究基因转移研究RV重组体，受体鼠骨髓中，重组体，受体鼠骨髓中，-有效。有效。AAV 用于间接体内珠蛋白基因转移的报道很用于间接体内珠蛋白基因转移的报道很少。少。HIV 研究活跃，动物实验中取得了好的结果。研究活跃，动物实验中取得了好的结果。糖尿病的基因治疗胰岛细胞中胰岛素的表达调控、生物合成与分泌。胰岛素分泌的工程化细胞株的建立。胰岛-细胞系的工程

25、化 胰岛干细胞操作 非-细胞系的工程化四、恶性肿瘤的基因治疗四、恶性肿瘤的基因治疗细胞因子导入疗法自杀基因疗法肿瘤抑制基因疗法耐药基因疗法其他疗法：反义基因疗法“自杀”基因疗法 自杀基因所编码的蛋白产物，能够使无毒自杀基因所编码的蛋白产物，能够使无毒性的化疗前体药物在细胞内转换为强毒性药物，性的化疗前体药物在细胞内转换为强毒性药物，而导致肿瘤细胞而导致肿瘤细胞“自杀自杀”。自杀基因包括：自杀基因包括：单纯疱疹病毒胸苷激酶（单纯疱疹病毒胸苷激酶（HSV-tk）基因；基因；胞嘧啶脱氨酶（胞嘧啶脱氨酶（CD）基因。基因。自杀基因：自杀基因：Hsv1-tkHsv1-tk和和CDCDTherapuati

26、c gene 肿瘤抑制基因：肿瘤抑制基因：RB、p53肿瘤抑制基因疗法肿瘤抑制基因疗法耐药基因疗法耐药基因疗法 多药耐药基因（多药耐药基因（multi-drug resistancegene,MDR）MDR1 and MDR2，正常细胞中有正常细胞中有MDR蛋白表达，并蛋白表达，并发挥一定的功能发挥一定的功能 本疗法：本疗法：1 用反义用反义RNA或或DNA使使MDR-1基因灭活，从而缓解肿瘤化疗的耐基因灭活，从而缓解肿瘤化疗的耐药性，提高化疗效果；药性，提高化疗效果；2 将将MDR基因导入造血干细胞，增强造血系统抵抗化疗药物的骨髓基因导入造血干细胞，增强造血系统抵抗化疗药物的骨髓抑制作用抑制

27、作用。其他疗法 反义基因反义基因疗法疗法 采用反义基因技术在转录和翻译水平阻采用反义基因技术在转录和翻译水平阻断肿瘤断肿瘤 细胞中异常基因的表达，从而引起细胞中异常基因的表达，从而引起细胞的表型逆转或细胞调亡细胞的表型逆转或细胞调亡Antisense RNA第五节第五节 基因治疗中存在的问题：基因治疗中存在的问题：基因治疗存在的问题基因治疗存在的问题(challenges facing the gene therapy)导入基因高效表达问题导入基因高效表达问题 迄今所有导入细胞的目的基因表达率都迄今所有导入细胞的目的基因表达率都不高，目前许多实验室正在研究将高效的启动子构建入逆转录病毒载不高，

28、目前许多实验室正在研究将高效的启动子构建入逆转录病毒载体。体。免疫性免疫性 临床治疗时需要多次操作，使机体产生免疫反应，排斥携带临床治疗时需要多次操作，使机体产生免疫反应，排斥携带基因的病毒或靶细胞，给进一步治疗带来困难。基因的病毒或靶细胞，给进一步治疗带来困难。基因治疗亟待研究的领域：基因治疗亟待研究的领域：（The field of gene therapy to beThe field of gene therapy to be studied）载体载体 (Vector)靶细胞靶细胞 (target cells)免疫学原理免疫学原理 (immunological mechanism)基因

29、治疗的前景（基因治疗的前景（PROSPECT FOR GENE PROSPECT FOR GENE THEARPYTHEARPY）基因治疗是遗传病治疗的一种崭新手段，它正逐基因治疗是遗传病治疗的一种崭新手段，它正逐渐被人们所接受。基因治疗所蕴藏的巨大潜力有力地渐被人们所接受。基因治疗所蕴藏的巨大潜力有力地证明，遗传病一定是可以治疗的。科学家们建议，今证明，遗传病一定是可以治疗的。科学家们建议，今后要加强基础研究，解决目前基因治疗遗传病的一些后要加强基础研究，解决目前基因治疗遗传病的一些问题，再进行大规模的临床试验。我们深信，只要坚问题，再进行大规模的临床试验。我们深信，只要坚持严格的科学态度。

30、设计精细的临床研究基因治疗必持严格的科学态度。设计精细的临床研究基因治疗必将在将在2121世纪获得令人振奋的成果。世纪获得令人振奋的成果。基因工程与基因工程药物基因工程与基因工程药物基因工程与基因工程药物基因工程与基因工程药物简介简介基因工程药物基因工程药物蛋白质工程蛋白质工程基因工程与动物克隆技术基因工程与动物克隆技术基基因因工工程程(genetic(geneticengineering)engineering)就就是是指指有有意意识识地地把把一一个个生生物物体体中中有有用用的的目目的的基基因因转转入入另另一一个个生生物物体体中中，使使后后者者表表达达所所需需要要的的产产物物或或者者获获得得

31、新新的的遗遗传传性性状状，其其核心技术是重组核心技术是重组DNADNA技术技术。基本概念基本概念基因工程大事记基因工程大事记质粒载体质粒载体宿主细胞的转化与筛选宿主细胞的转化与筛选基因工程与基因工程药物基因工程与基因工程药物简介简介基因工程药物基因工程药物蛋白质工程蛋白质工程基因工程与动物克隆技术基因工程与动物克隆技术第一个基因工程药物：第一个基因工程药物：通过大肠杆菌获得人胰岛素通过大肠杆菌获得人胰岛素1982年，美国食品与年，美国食品与药物管理局批准了首药物管理局批准了首例基因工程产品例基因工程产品人人胰岛素投放市场胰岛素投放市场它标志了基因工程产它标志了基因工程产品正式进入到商业化品正式

32、进入到商业化阶段。阶段。工程菌的大规模培养工程菌的大规模培养工艺因素：适合的发酵系统工艺因素：适合的发酵系统生物因素：生物因素：1、工程菌的生、工程菌的生长条件，如氧、长条件，如氧、PH、温度等、温度等2、目的基因表达的诱导、目的基因表达的诱导3、提高目的蛋白的表达、提高目的蛋白的表达基因工程药物基因工程药物目前已有目前已有60多种基因工程生物活性肽上市，多种基因工程生物活性肽上市，每年销售额达每年销售额达200多亿美元，它们主要包括：多亿美元，它们主要包括：激素激素生长因子生长因子细胞因子细胞因子凝血系统相关因子凝血系统相关因子激素激素胰岛素（胰岛素（humulin）生长激素（生长激素（hG

33、H）细胞因子与生长因子细胞因子与生长因子红细胞生成素（红细胞生成素（EPO）：治疗肾性）：治疗肾性/非肾非肾性贫血，需要糖基化，只能用哺乳动物性贫血，需要糖基化，只能用哺乳动物细胞表达系统（细胞表达系统（CHO细胞），全球每年细胞），全球每年销售额数十亿美元，是最成功的基因工销售额数十亿美元，是最成功的基因工程药物之一。程药物之一。干扰素（干扰素（IFN）：治疗肿瘤、病毒性感）：治疗肿瘤、病毒性感染等，染等，1992年我国的第一个基因工程药年我国的第一个基因工程药物是物是1b型干扰素。型干扰素。细胞因子与生长因子细胞因子与生长因子表皮生长因子（表皮生长因子（EGF）：治疗外伤、溃疡、）：治疗外

34、伤、溃疡、烧伤等，已在美国上市。烧伤等，已在美国上市。白介素（白介素（IL）、集落刺激因子（）、集落刺激因子（G-CSF、GM-CSF、M-CSF）、肿瘤坏死因子）、肿瘤坏死因子（TNF）成纤维细胞生长因子（成纤维细胞生长因子（FGF）、转化生长因）、转化生长因子（子（TGF）、胰岛素样生长因子（）、胰岛素样生长因子（IGF）、）、神经生长因子（神经生长因子（NGF）等）等凝血系统相关因子凝血系统相关因子凝血因子凝血因子IX凝血因子凝血因子VIII组织型纤溶酶原激活因子（组织型纤溶酶原激活因子（tPA）DNA疫苗与疫苗与DNA药物药物DNA疫苗：癌症，艾滋疫苗：癌症，艾滋病病2003年年10月我国第一个月我国第一个DNA药物：重组人药物：重组人p53腺病毒注射液（注册商标腺病毒注射液（注册商标名：今又生）获得国家食名：今又生）获得国家食品药品监督管理局批准颁品药品监督管理局批准颁发的生物制品一类新药证发的生物制品一类新药证书书 器官移植Science,2002，January 4th，5552（295）:25-27.