2017版高考生物人教版一轮复习课件第十单元-第37讲.ppt

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1、2017版高考生物人教版一轮复习课件第十单元-第37讲考点一基因工程的操作工具考点二基因工程的操作过程与应用栏目索引知识网络 答题语句探究高考 明确考向练出高分考点一基因工程的操作工具知识梳理解题探究考纲要求 1.基因工程的诞生基因工程的诞生()。2.基因工程的原理及技术基因工程的原理及技术()。返回总目录1.基因工程的概念基因工程的概念(1)供体：提供供体：提供_。(2)操作环境：操作环境：_。(3)操作水平：操作水平：_水平。水平。(4)原理：原理：_。(5)受体：表达目的基因。受体：表达目的基因。(6)本质：性状在本质：性状在_体内的表达。体内的表达。(7)优点：克服优点：克服_的障碍，

2、定向改造生物的的障碍，定向改造生物的_。目的基因目的基因体外体外分子分子基因重组基因重组受体受体远缘杂交不亲和远缘杂交不亲和遗传性状遗传性状知识梳理答案2.DNA重组技术的基本工具重组技术的基本工具(1)限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶(简称：简称：_)来源：主要是从来源：主要是从_中分离纯化出来的。中分离纯化出来的。作用：识别特定的作用：识别特定的_并切开特定部位的两个核苷酸之间的并切开特定部位的两个核苷酸之间的_。结果：产生结果：产生_或平末端。或平末端。(2)DNA连接酶连接酶种类：按来源可分为种类：按来源可分为EcoliDNA连接酶和连接酶和_。作用：将双链作用：将双链DNA片段片段“

3、缝合缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的之间的_。磷酸二酯键磷酸二酯键黏性末端黏性末端原核生物原核生物核苷酸序列核苷酸序列T4DNA连接酶连接酶磷酸二酯键磷酸二酯键限制酶限制酶答案DNA连接酶和限制酶的关系连接酶和限制酶的关系能自我复制能自我复制有一个至多个有一个至多个有特殊的有特殊的(3)载体载体种类：、种类：、噬菌体的衍生物、动植物病毒等。噬菌体的衍生物、动植物病毒等。质粒的特点质粒的特点标记基因标记基因限制酶切割位点限制酶切割位点质粒质粒答案1.判断下列说法的正误判断下列说法的正误(1)限制酶只能用于切割目的基因限制酶只能用于切割目的基因()(

4、2)DNA连接酶能将两碱基间通过形成的氢键连接起来连接酶能将两碱基间通过形成的氢键连接起来()(3)EcoliDNA连接酶既可连接平末端，又可连接黏性末端连接酶既可连接平末端，又可连接黏性末端()(4)质粒是小型环状质粒是小型环状DNA分子，是基因工程常用的载体分子，是基因工程常用的载体()(5)载体的作用是携带目的基因导入受体细胞中，使之稳定存在并表达载体的作用是携带目的基因导入受体细胞中，使之稳定存在并表达()也可以切割质粒也可以切割质粒连接磷酸二酯键连接磷酸二酯键诊断与思考只可以连接黏性末端只可以连接黏性末端解析答案2.下图中的图下图中的图1和图和图2分别表示的是分别表示的是EcoR限制

5、酶和限制酶和Sma限制酶的作用示意图。限制酶的作用示意图。请据图回答：请据图回答：(1)请说出请说出EcoR限制酶和限制酶和Sma限制酶识别的碱基序列及切割的位点。限制酶识别的碱基序列及切割的位点。(2)以上实例说明限制酶有何特性？以上实例说明限制酶有何特性？提示提示EcoR限制酶识别的碱基序列是限制酶识别的碱基序列是GAATTC，切割位点在，切割位点在G和和A之间；之间；Sma限制酶识别的碱基序列是限制酶识别的碱基序列是CCCGGG，切割位点在，切割位点在G和和C之间。之间。提示提示说明限制酶具有专一性。说明限制酶具有专一性。返回答案题组一限制性核酸内切酶、题组一限制性核酸内切酶、DNA连接

6、酶等酶的作用连接酶等酶的作用1.如图为如图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制酶、限制酶、DNA聚合酶、聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是连接酶、解旋酶作用的正确顺序是()A.B.C.D.C解题探究答案12342.若要利用某目的基因若要利用某目的基因(见图甲见图甲)和和P1噬菌体载体噬菌体载体(见图乙见图乙)构建重组构建重组DNA(见图丙见图丙)，限制性核酸内切酶的酶切位点分别是，限制性核酸内切酶的酶切位点分别是Bgl(AGATCT)、EcoR(GAATTC)和和Sau3A(GATC)。下列分析合理的是。下列分析合理

7、的是()A.用用EcoR切割目的基因和切割目的基因和P1噬菌体载体噬菌体载体B.用用Bgl和和EcoR切割目的基因和切割目的基因和P1噬菌体载体噬菌体载体C.用用Bgl和和Sau3A切割目的基因和切割目的基因和P1噬菌体载体噬菌体载体D.用用EcoR和和Sau3A切割目的基因和切割目的基因和P1噬菌体载体噬菌体载体关键是要看清切割后关键是要看清切割后目的基因插入的方向目的基因插入的方向D解析答案12343.下列关于载体的叙述中，错误的是下列关于载体的叙述中，错误的是()A.载体与目的基因结合后，实质上就是一个重组载体与目的基因结合后，实质上就是一个重组DNA分子分子B.对某种限制酶而言，载体最

8、好只有一个切点，但还要有其他多种酶的切点对某种限制酶而言，载体最好只有一个切点，但还要有其他多种酶的切点C.目前常用的载体有质粒、目前常用的载体有质粒、噬菌体的衍生物和动植物病毒噬菌体的衍生物和动植物病毒D.载体具有某些标记基因，便于对其进行切割载体具有某些标记基因，便于对其进行切割题组二载体的作用及特点分析题组二载体的作用及特点分析D具有一个至多个限制酶切点，以便目的基因可以插入到载体中具有一个至多个限制酶切点，以便目的基因可以插入到载体中如抗生素抗性基因，以便于对外源基因是否导入进行检测如抗生素抗性基因，以便于对外源基因是否导入进行检测解析答案12344.如图是表达新基因用的质粒的示意图，

9、若要将目的基因插入到质粒上的如图是表达新基因用的质粒的示意图，若要将目的基因插入到质粒上的A处，处，则切割基因时可用的是则切割基因时可用的是()A.HindB.EcoRC.EcoBD.PstA处有处有BamH、EcoB、Cla限制酶的切点，限制酶的切点，使用使用AD中的中的EcoB切割时，才能让目的基因插入到切割时，才能让目的基因插入到A处处C解析答案12341.确定限制酶的种类确定限制酶的种类(1)根据目的基因两端的限制酶切点确定限制酶的种类根据目的基因两端的限制酶切点确定限制酶的种类应选择切点位于目的基因两端的限制酶，如图甲可选择应选择切点位于目的基因两端的限制酶，如图甲可选择Pst。不能

10、选择切点位于目的基因内部的限制酶，如图甲不能选择不能选择切点位于目的基因内部的限制酶，如图甲不能选择Sma。为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也可使用不同的限制酶切割目为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒，如图甲也可选择用的基因和质粒，如图甲也可选择用Pst和和EcoR两种限制酶两种限制酶(但要确保质粒上也但要确保质粒上也有这两种酶的切点有这两种酶的切点)。方法技巧(2)根据质粒的特点确定限制酶的种类根据质粒的特点确定限制酶的种类所选限制酶要与切割目的基因的限制酶相一致，以确保具有相同的黏性末端。所选限制酶要与切割目的基因的限制酶相一致，以确

11、保具有相同的黏性末端。质质粒粒作作为为载载体体必必须须具具备备标标记记基基因因等等，所所以以所所选选择择的的限限制制酶酶尽尽量量不不要要破破坏坏这这些些结结构构，如如图图乙乙中中限限制制酶酶Sma会会破破坏坏标标记记基基因因；如如果果所所选选酶酶的的切切点点不不止止一一个个，则则切切割割重重组组后后可可能能会会丢丢失失某某些些片片段段，若若丢丢失失的的片片段段含含复复制制起起点点区区，则则切切割割重重组组后的片段进入受体细胞后不能自主复制。后的片段进入受体细胞后不能自主复制。2.载体上标记基因的标记原理载体上标记基因的标记原理载载体体上上的的标标记记基基因因一一般般是是一一些些抗抗生生素素的的

12、抗抗性性基基因因。目目的的基基因因要要转转入入的的受受体体细细胞胞没没有有抵抵抗抗相相关关抗抗生生素素的的能能力力。当当含含有有抗抗生生素素抗抗性性基基因因的的载载体体进进入入受受体体细细胞胞后后，抗抗性性基基因因在在受受体体细细胞胞内内表表达达，使使受受体体细细胞胞能能够够抵抵抗抗相相应应抗抗生生素素，所所以以在在受受体体细细胞胞的的培培养体系中加入该种抗生素就可以只保留转入载体的受体细胞，原理如下图所示：养体系中加入该种抗生素就可以只保留转入载体的受体细胞，原理如下图所示：返回考点二 基因工程的操作过程与 应用知识梳理解题探究考纲要求 1.基因工程的诞生基因工程的诞生()2.基因工程的原理

13、及技术基因工程的原理及技术()返回总目录a.目的基因目的基因b._c.终止子终止子d._1.基因工程的操作过程与应用基因工程的操作过程与应用(1)基因工程的操作步骤基因工程的操作步骤获取目的基因获取目的基因基因表达载体的构建基因表达载体的构建组成组成a.从从_中获取中获取b.利用利用_技术扩增技术扩增c.通过化学方法人工合成通过化学方法人工合成基因文库基因文库PCR启动子启动子标记基因标记基因知识梳理答案(2)基基因因工工程程的的应应用用：培培育育转转基基因因植植物物和和_，生生产产基基因因工工程程药药物物，进进行行_治疗。治疗。a.利用利用_技术检测目的基因的有无技术检测目的基因的有无b.利

14、用利用_技术检测目的基因的转录技术检测目的基因的转录c.利用利用_技术检测目的基因的翻译技术检测目的基因的翻译d.利用利用_的鉴定检测重组性状的表达的鉴定检测重组性状的表达a.植物：植物：_、基因枪法、基因枪法、_b.动物：动物：_技术技术c.微生物：感受态细胞法微生物：感受态细胞法将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞方法方法目的基因的检测与鉴定目的基因的检测与鉴定农杆菌转化法农杆菌转化法花粉管通道法花粉管通道法显微注射显微注射转基因动物转基因动物DNA分子杂交分子杂交分子杂交分子杂交抗原抗原抗体杂交抗体杂交个体生物学水平个体生物学水平基因基因答案生物种类生物种类植物植物动物动物微生物

15、微生物常用方法常用方法农杆菌转化法农杆菌转化法显微注射技术显微注射技术感受态细胞法感受态细胞法受体细胞受体细胞_转化过程转化过程将将目目的的基基因因插插入入到到Ti质质粒粒的的TDNA上上农农杆杆菌菌导导入入植植物物细细胞胞整整合合到到受受体体细细胞胞染染色色体体的的DNA上上表达表达将将含含有有目目的的基基因因的的表表达达载载体体提提纯纯取取卵卵(受受精精卵卵)显显微微注注射射受受精精卵卵发发育育获获得得具具有有新新性性状状的的动物动物Ca2处处理理细细胞胞感感受受态态细细胞胞重重组组表表达达载载体体DNA分分子子与与感感受受态态细细胞胞混混合合感感 受受 态态 细细 胞胞 吸吸 收收DNA

16、分子分子(3)目的基因导入不同受体细胞的过程目的基因导入不同受体细胞的过程体细胞或受精卵体细胞或受精卵受精卵受精卵原核细胞原核细胞答案原理原理操作过程操作过程进展进展基因治疗基因治疗_利用利用_导入有基因缺陷导入有基因缺陷的细胞中，以表达出正常性状来的细胞中，以表达出正常性状来治疗治疗(疾病疾病)临床实验临床实验基因诊断基因诊断_制作特定制作特定_与病人样品与病人样品DNA混合，分析杂交带情况混合，分析杂交带情况临床应用临床应用基因表达基因表达碱基互补配碱基互补配对对(4)基因治疗与基因诊断的不同点基因治疗与基因诊断的不同点正常基因正常基因DNA探针探针答案2.蛋白质工程蛋白质工程(1)流程图

17、流程图写出流程图中字母代表的含义：写出流程图中字母代表的含义：A._，B._，C._，D._，E._。(2)结果：改造了现有蛋白质或制造出结果：改造了现有蛋白质或制造出_。(3)应用：主要集中应用于对应用：主要集中应用于对_进行改造，改良生物性状。进行改造，改良生物性状。转录转录分子设计分子设计翻译翻译多肽链多肽链预期功能预期功能现有蛋白质现有蛋白质新的蛋白质新的蛋白质答案1.判断下列说法的正误判断下列说法的正误(1)抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达()(2)应用应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的

18、基因的存在及其探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达完全表达()(3)将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株()(4)利用乳腺生物反应器能够获得一些重要的医药产品，如人的血清白蛋白，利用乳腺生物反应器能够获得一些重要的医药产品，如人的血清白蛋白，这是因为将人的血清白蛋白基因导入了动物的乳腺细胞中这是因为将人的血清白蛋白基因导入了动物的乳腺细胞中()导入了动物的受精卵细胞内导入了动物的受精卵细胞内目的基因的存在可以应用目的基因的存在可以应用DNA探针技术，但表达则需用探针技术，

19、但表达则需用抗原抗原抗体杂交技术抗体杂交技术诊断与思考解析答案(5)为培育出抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为为培育出抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体受体()(6)蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作，定向改变分子蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作，定向改变分子的结构的结构()(7)目前在抗菌性和溶血性均较强的多肽目前在抗菌性和溶血性均较强的多肽P1的基础上研发抗菌性强但溶血性的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物，首先要做的是依据弱的多肽药物，首先要做的是依据P1氨基酸序列设计多条模拟肽氨基酸序列设计多条模拟肽()DN

20、A分子分子只能说最好用受精卵为受体只能说最好用受精卵为受体,因为受精卵全能性高。因为受精卵全能性高。其他体细胞其他体细胞也可作为受体细胞也可作为受体细胞解析答案2.如图为抗虫棉的培育过程，请据图回答下列问题：如图为抗虫棉的培育过程，请据图回答下列问题：(1)该基因工程中的目的基因和载体分别是什么？一般情况下，为什么要用同一该基因工程中的目的基因和载体分别是什么？一般情况下，为什么要用同一种限制酶处理目的基因和载体？种限制酶处理目的基因和载体？提示目的基因是提示目的基因是Bt毒蛋白基因，载体是毒蛋白基因，载体是Ti质粒。用同一种限制酶处理目的基因质粒。用同一种限制酶处理目的基因和载体，可以获得相

21、同的黏性末端，便于构建基因表达载体。和载体，可以获得相同的黏性末端，便于构建基因表达载体。答案(2)该实例中，采用何种方法导入目的基因？为什么目的基因可以整合到染该实例中，采用何种方法导入目的基因？为什么目的基因可以整合到染色体的色体的DNA上？上？提示采用的方法是农杆菌转化法，由于提示采用的方法是农杆菌转化法，由于Ti质粒上的质粒上的TDNA可转移到受体细胞且能整合到受体细胞的染色体可转移到受体细胞且能整合到受体细胞的染色体DNA上，而目的基因又插入上，而目的基因又插入到了到了TDNA上，所以目的基因可以整合到受体细胞的染色体上，所以目的基因可以整合到受体细胞的染色体DNA上。上。2.如图为

22、抗虫棉的培育过程，请据图回答下列问题：如图为抗虫棉的培育过程，请据图回答下列问题：答案(3)该实例中，检测目的基因是否表达常见的方法有哪两种？该实例中，检测目的基因是否表达常见的方法有哪两种？提示抗原提示抗原抗体杂交法、用棉叶饲喂棉铃虫。抗体杂交法、用棉叶饲喂棉铃虫。2.如图为抗虫棉的培育过程，请据图回答下列问题：如图为抗虫棉的培育过程，请据图回答下列问题：返回答案题组一目的基因的获取及基因表达载体的构建题组一目的基因的获取及基因表达载体的构建1.下图表示用化学方法合成目的基因下图表示用化学方法合成目的基因的过程。据图分析，的过程。据图分析，下列叙述正确的是下列叙述正确的是()A.过程过程需要

23、需要DNA连接酶连接酶B.过程过程需要限制性核酸内切酶需要限制性核酸内切酶C.目的基因目的基因的碱基序列是已知的的碱基序列是已知的D.若某质粒能与目的基因若某质粒能与目的基因重组，则该质粒和目的基因重组，则该质粒和目的基因的碱基序列相同的碱基序列相同C质粒和目的基因的碱基序列一般不相同质粒和目的基因的碱基序列一般不相同解题探究解析答案12342.下图是利用基因工程技术生产可食用疫苗的部分过程，其中下图是利用基因工程技术生产可食用疫苗的部分过程，其中Pst、Sma、EcoR、Apa为四种限制性核酸内切酶。下列有关说法中正确的是为四种限制性核酸内切酶。下列有关说法中正确的是()A.图示过程是基因工

24、程的核心步骤，所需的限制性核酸内切酶均来自原核生物图示过程是基因工程的核心步骤，所需的限制性核酸内切酶均来自原核生物B.图示中构建基因表达载体时，需用到一种限制性核酸内切酶图示中构建基因表达载体时，需用到一种限制性核酸内切酶用到用到EcoR、Pst两种限制酶两种限制酶一般一般解析1234D脱氧核苷酸序列脱氧核苷酸序列2.下图是利用基因工程技术生产可食用疫苗的部分过程，其中下图是利用基因工程技术生产可食用疫苗的部分过程，其中Pst、Sma、EcoR、Apa为四种限制性核酸内切酶。下列有关说法中正确的是为四种限制性核酸内切酶。下列有关说法中正确的是()C.一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的核糖

25、核苷酸序列一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的核糖核苷酸序列D.抗卡那霉素基因的存在有利于将含有抗原基因的细胞筛选出来抗卡那霉素基因的存在有利于将含有抗原基因的细胞筛选出来标记基因标记基因解析答案1234题组二基因工程的操作及应用实例分析题组二基因工程的操作及应用实例分析3.下面图下面图1为某植物育种流程，图为某植物育种流程，图2表示利用农杆菌转化法获得某种转基因植物的表示利用农杆菌转化法获得某种转基因植物的部分操作步骤。下列相关叙述错误的是部分操作步骤。下列相关叙述错误的是()A.图图1子代子代与原种保持遗传稳定性，子代与原种保持遗传稳定性，子代和子代和子代选育原理相同选育原理相同B.图图

26、1子代子代选育显性性状需自交多代，子代选育显性性状需自交多代，子代可能发生基因突变和染色体变异可能发生基因突变和染色体变异无性繁殖无性繁殖基因重组基因重组解析1234D题组二基因工程的操作及应用实例分析题组二基因工程的操作及应用实例分析3.下面图下面图1为某植物育种流程，图为某植物育种流程，图2表示利用农杆菌转化法获得某种转基因植物的表示利用农杆菌转化法获得某种转基因植物的部分操作步骤。下列相关叙述错误的是部分操作步骤。下列相关叙述错误的是()C.图图2中中过程的完成需要限制酶和过程的完成需要限制酶和DNA连接酶的参与连接酶的参与D.图图2中中可与多个核糖体结合，并可以同时翻译出多种蛋白质可与

27、多个核糖体结合，并可以同时翻译出多种蛋白质构建基因表达载体构建基因表达载体多个同种多个同种解析答案1234题组三蛋白质工程概念和过程的辨析题组三蛋白质工程概念和过程的辨析4.现代生物技术并不是各自独立的，而是相互联系、相互渗透的。下图表示利用现代生物技术并不是各自独立的，而是相互联系、相互渗透的。下图表示利用乳腺生物反应器生产某种动物蛋白的流程示意图，请分析回答下列问题：乳腺生物反应器生产某种动物蛋白的流程示意图，请分析回答下列问题：(1)该生产流程中应用到的现代生物技术有该生产流程中应用到的现代生物技术有_、_(写出其中两种写出其中两种)。(2)图中图中A、B分别表示分别表示_、_。蛋白质工

28、程蛋白质工程基因工程基因工程(胚胎移植技术胚胎移植技术)推测应有的氨基酸序列推测应有的氨基酸序列基因表达载体基因表达载体答案1234题组三蛋白质工程概念和过程的辨析题组三蛋白质工程概念和过程的辨析4.现代生物技术并不是各自独立的，而是相互联系、相互渗透的。下图表示利用现代生物技术并不是各自独立的，而是相互联系、相互渗透的。下图表示利用乳腺生物反应器生产某种动物蛋白的流程示意图，请分析回答下列问题：乳腺生物反应器生产某种动物蛋白的流程示意图，请分析回答下列问题：(3)为提高培育成功率，进行为提高培育成功率，进行过程之前，对早期胚胎的处理是取其部分细胞用过程之前，对早期胚胎的处理是取其部分细胞用目

29、的基因探针进行目的基因探针进行_检测，对受体动物的处理是用检测，对受体动物的处理是用_进行同期发情处理。进行同期发情处理。DNA(核酸核酸)分子杂交分子杂交促性腺激素促性腺激素答案1234改造后的基因能够遗传改造后的基因能够遗传(且改造基因且改造基因题组三蛋白质工程概念和过程的辨析题组三蛋白质工程概念和过程的辨析4.现代生物技术并不是各自独立的，而是相互联系、相互渗透的。下图表示利用现代生物技术并不是各自独立的，而是相互联系、相互渗透的。下图表示利用乳腺生物反应器生产某种动物蛋白的流程示意图，请分析回答下列问题：乳腺生物反应器生产某种动物蛋白的流程示意图，请分析回答下列问题：(4)蛋白质工程中

30、，要对蛋白质结构进行设计改造，必须通过基因修饰或基因合蛋白质工程中，要对蛋白质结构进行设计改造，必须通过基因修饰或基因合成来完成，而不直接改造蛋白质，原因是成来完成，而不直接改造蛋白质，原因是_。易于操作易于操作)答案12341.几种目的基因获取方法的比较几种目的基因获取方法的比较技法提炼方法方法从基因文库中获取从基因文库中获取人工合成人工合成从基因组文库中获取从基因组文库中获取从部分基因文库，从部分基因文库，如如cDNA文库中获取文库中获取化学合成法化学合成法反转录法反转录法过程过程供体细胞中的供体细胞中的DNA限制酶限制酶许多许多DNA片段片段插入插入载体载体导入导入受体菌群受体菌群(基因

31、组文库基因组文库)外源外源DNA扩增扩增，产生特定性状，产生特定性状分离分离目的基因目的基因目的基因的目的基因的mRNA反转录反转录单链单链DNA合成合成双链双链DNA插入插入载体载体导入导入受体菌群受体菌群(cDNA文库文库)分离分离目的基因目的基因蛋白质的氨蛋白质的氨基酸序列基酸序列推测推测mRNA的核苷的核苷酸序列酸序列推测推测结构基因的核结构基因的核苷酸序列苷酸序列化学合成化学合成目的基因目的基因目的基因目的基因mRNA反转录反转录单链单链DNA合成合成双链双链DNA即目的即目的基因基因2.基因表达载体中启动子、终止子的来源基因表达载体中启动子、终止子的来源(1)如如果果目目的的基基因

32、因是是从从自自然然界界中中已已有有的的物物种种中中分分离离出出来来的的，在在构构建建基基因因表表达达载载体体时时，不不需需要要在在质质粒粒上上目目的的基基因因的的前前后后端端接接上上特特定定的的启启动动子子、终终止止子子，因因为为目的基因中已含有启动子、终止子。目的基因中已含有启动子、终止子。(2)如如果果目目的的基基因因是是通通过过人人工工方方法法合合成成的的，或或通通过过cDNA文文库库获获得得的的，则则目目的的基基因因是是不不含含启启动动子子和和终终止止子子的的。若若只只将将基基因因的的编编码码序序列列导导入入受受体体生生物物中中，目目的的基基因因没没有有启启动动子子、终终止止子子，是是

33、无无法法转转录录的的，因因此此，在在构构建建基基因因表表达达载载体体时时，需要在与质粒结合之前，在目的基因的前后端接上特定的启动子、终止子。需要在与质粒结合之前，在目的基因的前后端接上特定的启动子、终止子。3.基因工程中的几种检测方法基因工程中的几种检测方法4.蛋白质工程与基因工程的比较蛋白质工程与基因工程的比较(1)区别区别项目项目蛋白质工程蛋白质工程基因工程基因工程过程过程预期蛋白质功能预期蛋白质功能设计预期的蛋白质设计预期的蛋白质结构结构推测应有的氨基酸序列推测应有的氨基酸序列找到找到相对应的脱氧核苷酸序列相对应的脱氧核苷酸序列获取目的基因获取目的基因基因表达载体的构基因表达载体的构建建

34、将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定目的基因的检测与鉴定实质实质定向改造或生产人类所需的蛋白质定向改造或生产人类所需的蛋白质定向改造生物的遗传特性，以获得定向改造生物的遗传特性，以获得人类所需的生物类型和生物产品人类所需的生物类型和生物产品结果结果可生产自然界没有的蛋白质可生产自然界没有的蛋白质只能生产自然界已有的蛋白质只能生产自然界已有的蛋白质(2)联系联系蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。基因工程中所利用的某些酶需要通过蛋白质工程进行修饰、改造。基因工程中所利用的某些酶需要通过蛋白

35、质工程进行修饰、改造。返回知识网络 答题语句网络构建1.限制酶具有特异性，即一种限制酶只能识别特定的核苷酸序列，并在特定的限制酶具有特异性，即一种限制酶只能识别特定的核苷酸序列，并在特定的位点上切割位点上切割DNA分子。分子。2.DNA连接酶的作用部位是磷酸二酯键。连接酶的作用部位是磷酸二酯键。3.质粒是常用的载体，它是一种小型的双链环状质粒是常用的载体，它是一种小型的双链环状DNA分子，具有一个至多个分子，具有一个至多个限制酶切割位点及标记基因。限制酶切割位点及标记基因。4.目的基因的获取有从基因文库中获取和人工合成两类方法。目的基因的获取有从基因文库中获取和人工合成两类方法。5.基因表达载

36、体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因。基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因。6.目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法；导入动物细胞常用显微注射技术，目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法；导入动物细胞常用显微注射技术，导入微生物细胞常用感受态细胞法。导入微生物细胞常用感受态细胞法。要语强记返回总目录探究高考 明确考向1.(2015重庆，重庆，6)下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述，正确的是下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述，正确的是()A.表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞mRNA反转录获得反转录获得B.表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启

37、动于复制原表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原(起起)点点C.借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来D.启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用人肝细胞不能合成胰岛素，则不含胰岛素的人肝细胞不能合成胰岛素，则不含胰岛素的mRNA启动于复制起点启动于复制起点标记基因标记基因翻译翻译C1234启动于启动子启动于启动子解析答案2.(2014广东，广东，25)利用基因工程技术生产羧酸酯酶利用基因工程技术生产羧酸酯酶(CarE)制剂的流程如图所示，制剂的流程如图所示，下列叙述正

38、确的是下列叙述正确的是(多选多选)()A.过程过程需使用逆需使用逆(反反)转录酶转录酶B.过程过程需使用解旋酶和需使用解旋酶和PCR获取目的基因获取目的基因C.过程过程使用的感受态细胞可用使用的感受态细胞可用NaCl溶液制备溶液制备D.过程过程可利用可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞从从cDNA文库中获取目的基因文库中获取目的基因不需不需CaCl2溶液溶液AD反转录反转录1234解析答案3.(2015全国全国，40)已知生物体内有一种蛋白质已知生物体内有一种蛋白质(P)，该蛋白质是一种转运蛋白，该蛋白质是一种转运蛋白，由由305个氨基酸组成

39、。如果将个氨基酸组成。如果将P分子中分子中158位的丝氨酸变成亮氨酸，位的丝氨酸变成亮氨酸，240位的谷氨酰位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸，改变后的蛋白质胺变成苯丙氨酸，改变后的蛋白质(P1)不但保留不但保留P的功能，而且具有了酶的催化活的功能，而且具有了酶的催化活性。回答下列问题：性。回答下列问题：(1)从上述资料可知，若要改变蛋白质的功能，可以考虑对蛋白质的从上述资料可知，若要改变蛋白质的功能，可以考虑对蛋白质的_进行改造。进行改造。(2)以以P基因序列为基础，获得基因序列为基础，获得P1基因的途径有修饰基因的途径有修饰_基因或合成基因或合成_基因，基因，所获得的基因表达时是遵循中心法则的，中心

40、法则的全部内容包括所获得的基因表达时是遵循中心法则的，中心法则的全部内容包括_的复制，以及遗传信息在不同分子之间的流动，的复制，以及遗传信息在不同分子之间的流动，即：即：_。氨基酸序列氨基酸序列PP1DNA和和RNA(或遗传物质或遗传物质)1234(或结构或结构)DNARNA、RNADNA、RNA蛋白质蛋白质(或转录、逆转录、翻译或转录、逆转录、翻译)答案12343.(2015全国全国，40)已知生物体内有一种蛋白质已知生物体内有一种蛋白质(P)，该蛋白质是一种转运蛋白，该蛋白质是一种转运蛋白，由由305个氨基酸组成。如果将个氨基酸组成。如果将P分子中分子中158位的丝氨酸变成亮氨酸，位的丝氨

41、酸变成亮氨酸，240位的谷氨酰位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸，改变后的蛋白质胺变成苯丙氨酸，改变后的蛋白质(P1)不但保留不但保留P的功能，而且具有了酶的催化活的功能，而且具有了酶的催化活性。回答下列问题性。回答下列问题(3)蛋白质工程也被称为第二代基因工程，其基本途径是从预期蛋白质功能出发，蛋白质工程也被称为第二代基因工程，其基本途径是从预期蛋白质功能出发，通过通过_和和_，进而确定相对应的脱氧核苷酸序列，进而确定相对应的脱氧核苷酸序列，据此获得基因，再经表达、纯化获得蛋白质，之后还需要对蛋白质的生物据此获得基因，再经表达、纯化获得蛋白质，之后还需要对蛋白质的生物_进行鉴定。进行鉴定。设计蛋白质的

42、结构设计蛋白质的结构推测氨基酸序列推测氨基酸序列功能功能答案4.(2015四川，四川，9)将苏云金杆菌将苏云金杆菌Bt蛋白的基因导入棉花细胞中，可获得抗棉铃虫的蛋白的基因导入棉花细胞中，可获得抗棉铃虫的转基因棉，其过程如下图所示：转基因棉，其过程如下图所示：注：农杆菌中注：农杆菌中Ti质粒上只有质粒上只有TDNA片段能转移到植物细胞中。片段能转移到植物细胞中。(1)过程过程需用同种需用同种_酶对含酶对含Bt基因的基因的DNA和和Ti质粒进行酶切。质粒进行酶切。为将过程为将过程获得的含重组质粒的农杆菌筛选出来，应使用获得的含重组质粒的农杆菌筛选出来，应使用_培养基。培养基。限制性核酸内切限制性核

43、酸内切(限制限制)选择选择1234答案12344.(2015四川，四川，9)将苏云金杆菌将苏云金杆菌Bt蛋白的基因导入棉花细胞中，可获得抗棉铃虫的蛋白的基因导入棉花细胞中，可获得抗棉铃虫的转基因棉，其过程如下图所示：转基因棉，其过程如下图所示：注：农杆菌中注：农杆菌中Ti质粒上只有质粒上只有TDNA片段能转移到植物细胞中。片段能转移到植物细胞中。(2)过程过程中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养，旨在让中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养，旨在让_进入棉花细胞；进入棉花细胞；除尽农杆菌后，还须转接到含卡那霉素的培养基上继续培养，目的是除尽农杆菌后，还须转接到含卡那霉素的培养基上继续培养，目的是_。

44、TDNA筛选出获得筛选出获得TDNA片段的植物细胞片段的植物细胞答案12344.(2015四川，四川，9)将苏云金杆菌将苏云金杆菌Bt蛋白的基因导入棉花细胞中，可获得抗棉铃虫的蛋白的基因导入棉花细胞中，可获得抗棉铃虫的转基因棉，其过程如下图所示：转基因棉，其过程如下图所示：注：农杆菌中注：农杆菌中Ti质粒上只有质粒上只有TDNA片段能转移到植物细胞中。片段能转移到植物细胞中。(3)若过程若过程仅获得大量的根，则应在培养基中增加仅获得大量的根，则应在培养基中增加_以获得芽；以获得芽；部分接种在无激素培养基上的芽也能长根，原因是部分接种在无激素培养基上的芽也能长根，原因是_。生长素可诱导生长素可诱

45、导根的形成，细根的形成，细胞分裂素可诱胞分裂素可诱导芽的形成导芽的形成细胞分裂素浓度细胞分裂素浓度芽顶端合成的生长素向基部芽顶端合成的生长素向基部运输，促进根的分化运输，促进根的分化解析答案12344.(2015四川，四川，9)将苏云金杆菌将苏云金杆菌Bt蛋白的基因导入棉花细胞中，可获得抗棉铃虫的蛋白的基因导入棉花细胞中，可获得抗棉铃虫的转基因棉，其过程如下图所示：转基因棉，其过程如下图所示：注：农杆菌中注：农杆菌中Ti质粒上只有质粒上只有TDNA片段能转移到植物细胞中。片段能转移到植物细胞中。(4)检验转基因棉的抗虫性状，常用方法是检验转基因棉的抗虫性状，常用方法是_。种植转基因抗虫棉能减。

46、种植转基因抗虫棉能减少少_的使用，以减轻环境污染。的使用，以减轻环境污染。投放棉铃虫投放棉铃虫农药农药返回总目录答案练出高分1.如图为某种质粒的简图，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶如图为某种质粒的简图，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcoR、BamH的酶切位点，的酶切位点，P为转录的启动部位。已知目的基因的两端有为转录的启动部位。已知目的基因的两端有EcoR、BamH的酶的酶切位点，受体细胞为无任何抗药性的原核细胞。下列有关叙述正确的是切位点，受体细胞为无任何抗药性的原核细胞。下列有关叙述正确的是()A.将含有目的基因的将含有目的基因的DNA与质粒分别用与质粒分别用EcoR酶切，在酶切，在

47、DNA连接酶作用下，连接酶作用下，生成由两个生成由两个DNA片段之间连接形成的产物有两种片段之间连接形成的产物有两种二者的黏性末端相同二者的黏性末端相同有三种，目有三种，目目连接物，质目连接物，质质连接物，目质连接物，目质连接物质连接物1234578910116解析答案1.如图为某种质粒的简图，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶如图为某种质粒的简图，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcoR、BamH的酶切位点，的酶切位点，P为转录的启动部位。已知目的基因的两端有为转录的启动部位。已知目的基因的两端有EcoR、BamH的酶的酶切切位点，受体细胞为无任何抗药性的原核细胞。下列有关叙述正确的是位点，受

48、体细胞为无任何抗药性的原核细胞。下列有关叙述正确的是()B.DNA连接酶的作用是将酶切后得到的黏性末端连接起来形成一个重组质粒，连接酶的作用是将酶切后得到的黏性末端连接起来形成一个重组质粒，该过程形成两个磷酸二酯键该过程形成两个磷酸二酯键C.为了防止目的基因反向粘连和质粒自身环化，酶切时可选用的酶是为了防止目的基因反向粘连和质粒自身环化，酶切时可选用的酶是EcoR和和BamH4个磷酸二酯键个磷酸二酯键切割后得到的切割后得到的DNA片段两侧的黏性末端不片段两侧的黏性末端不同同1234578910116答案C也可能是只导入了不含目的基因的载体也可能是只导入了不含目的基因的载体1.如图为某种质粒的简

49、图，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶如图为某种质粒的简图，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcoR、BamH的酶切位点，的酶切位点，P为转录的启动部位。已知目的基因的两端有为转录的启动部位。已知目的基因的两端有EcoR、BamH的酶的酶切位点，受体细胞为无任何抗药性的原核细胞。下列有关叙述正确的是切位点，受体细胞为无任何抗药性的原核细胞。下列有关叙述正确的是()D.能在含青霉素的培养基中生长的受体细胞表明该目的基因已成功导入该细胞能在含青霉素的培养基中生长的受体细胞表明该目的基因已成功导入该细胞1234578910116解析答案2.2011年年8月，吉林大学农学部奶牛繁育基地成功培育出一头携带

50、转入赖氨酸基因月，吉林大学农学部奶牛繁育基地成功培育出一头携带转入赖氨酸基因的克隆牛犊的克隆牛犊“织女织女”，从其乳汁中获得大量的赖氨酸，它的诞生标志着国际克隆，从其乳汁中获得大量的赖氨酸，它的诞生标志着国际克隆技术又取得了一次重大突破。以下与此有关的叙述中，正确的是技术又取得了一次重大突破。以下与此有关的叙述中，正确的是()A.该题中赖氨酸基因表达载体的受体细胞的性染色体组成可以是该题中赖氨酸基因表达载体的受体细胞的性染色体组成可以是XX也可以是也可以是XYB.将赖氨酸基因导入牛的卵细胞中，通过组织培养也能形成转基因牛将赖氨酸基因导入牛的卵细胞中，通过组织培养也能形成转基因牛C.人们只在人们