游离DNA提取原理和方法精选课件.ppt
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1、关于游离关于游离DNA提取提取原理和方法原理和方法第一页,本课件共有12页l游离游离DNADNA介绍介绍l提取提取原理原理l提取提取流程流程l各缓冲液介绍各缓冲液介绍第二页,本课件共有12页血中游离DNA简称循环核酸指循环血中游离于细胞外的部分降解了的机体内源性DNA。游离DNA大部分都是双链DNA分子,血中游离DNA片段远小于基因组DNA,片段长度集中在0.1821kb之间。疾病的早期诊断,预后,检测。游离游离DNA介绍介绍第三页,本课件共有12页提取提取DNADNA总的原则总的原则:1 保证核酸一级结构的完整性;2 其他生物大分子的污染应降低到最低程度;3 核酸样品中不应存在对酶有抑制作用
2、的有机溶剂和过高浓度的金属离子;4 其他核酸分子,如RNA,也应尽量去除。第四页,本课件共有12页l方法比较方法比较第五页,本课件共有12页第六页,本课件共有12页破坏红细胞破坏红细胞,通常利用红细胞与白细胞膜结构的差异通常利用红细胞与白细胞膜结构的差异,先使红细胞裂解先使红细胞裂解,经离心后收集白细胞经离心后收集白细胞白细胞裂使膜蛋白和核蛋白变性白细胞裂使膜蛋白和核蛋白变性,游离游离DNA,通常是采通常是采用离子型表面活性剂使蛋白质变性用离子型表面活性剂使蛋白质变性除去变性蛋白质:通常采用蛋白沉淀剂沉淀变性蛋白质除去变性蛋白质:通常采用蛋白沉淀剂沉淀变性蛋白质,使使DNA留在上清液中留在上清
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