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1、人工授精人工授精的优点母牛的生殖器官及生殖生理母牛的发情鉴定技术母牛人工输精操作技术母牛的孕娠诊断技术母牛繁殖障碍的治疗技术提高母牛繁殖率的主要措施 人工授精优点:充分利用优良种公牛的种用价值。精液的保存运输,使母牛配种不受地域限制。集中饲养种公牛,节省饲养费用。提高受胎率。防止疾病传染,克服公、母牛体格相差太大不易交配的困难采精精液品质检查精液稀释 精液保存输精人工授精时间正确的位置,正确的时间!卵子是在奶牛发情的后10到14小时从卵巢中释放出 来在未受精之前只能存活6到12小时奶牛的精子在生殖系统中可以存活24小时“早-晚”原_法(8-12小时)奶牛在早晨被发现有发情行为,在当天晚上进行
2、人工授精奶牛在下午被发现有发情行为,在第二天早晨进 行人工授精受孕率低的原因与人工授精有关的问题-种公牛的繁殖能力差-人工授精技术使用不正确-精液质量差奶牛的因素:-生殖系统的传染疾病-荷尔蒙失调-输卵管堵塞-生理缺陷-早期胚胎死亡与营养有关的因素采精的准备场地:宽敞、明亮、安静、清结,有消毒 设施和保护栏。台畜:活台畜、假台畜。假阴道:安装调试后具备适宜的温度、压 力、和润滑度。公畜:具备良好的繁殖体况;经过训练;采精前进行充分的性准备。假阴道法:手握法:电刺激法:按摩法:采精操作公畜的采精频率公牛:每周两天,每天两次。公猪、马:宜隔日一次,如果连续两天釆 精,要休息2-3天。公羊:每天数次
3、,连续数周。精液的品质检查外观检查 精子活力检查 精子密度检查 精子畸形率检查 其他检查精液的外观检查精液量 精液色泽 精液气味 云雾状精子活力检查平板压片法 悬滴法精子活力检查的程存精子密度检查估测法血细胞计计数法 精子密度仪测定估测法密:在整个视野中,精子间空隙不明显,看不清 单个精子运动。10亿/ml。中:在整个视野中,精子间空隙明显,可容纳1 一 2个精子,310亿/ml稀:在整个视野中,精子间空隙较大,可容纳数 不精子,1 3亿/ml。(二)血细胞计数法:在显微镜看清血细胞计数板上的方格:稀释精液:用移液管吸取精液50微升置于小试管中,再吸取3%NaCI溶液450或950微升与精液混
4、匀。镜检:在400倍的显微镜下找出具有代表性的五个中方格,四角和中间一个或对角线五个,用计数器计 数其中的精子数。计算:1毫升原精液精子数=5*5*10*1000*稀释倍数精子密度仪畸形率的检查畸形精子:头部畸形、颈部畸形、尾部畸 形精子畸形率:精液中畸形精子占总精子数 的百分率。优质精液精子畸形率应小于:牛18%、羊 15%、猪18。/。、马 12%畸形率的检查取一滴原精液,均匀的涂在载玻片上,干 燥12分钟。用96%以上酒精固定23分钟。用美蓝或墨水染色12分钟。用蒸馈水轻轻冲洗。干燥后镜检,其他检查顶体异常率精子生存时间和生存指数的测定PH测定美蓝褪色试验 果糖分解试验 精子耗氧量测定顶
5、体异常率的检查取鲜精适量,在37C下用生理盐水稀释。涂片,干燥,用5%福尔马林固定10分钟。姬姆萨液染色1.52小时。干燥后用树脂封闭,制成标本。400600倍镜检,数5001000个精子,计算项体异常率。精子生存时间和生存指数的测定精子生存时间:指精子在某温度下在体外 的总的生存时间。生存指数:将精液在某温度下,每隔812 小时检查一次精子活力,直至无活动精子 为止,相邻两次检查的平均活力与间隔时 间的积之和为生存指数。PH测定正常精液PH:牛、羊6.56.9、猪、马 7.47.5同种精液PH偏低的,品质较好,PH偏高的 受精率、生活力和保存效果都显著降低精液稀释稀释的目的 稀释液的成分及作
6、用 稀释液的配制方法 稀释倍数的确定 稀释方法稀释液的成分及作用稀释剂:单纯扩大容量的等渗液。0.9%NaCI、5%葡萄糖。营养剂:主要提供营养,以补充精子在代谢过程中消耗营养。奶类:奶粉(脱脂、速溶)112。/。;鲜奶经消毒加入1020ml。卵黄,通常加入20%。糖类,3%葡萄糖,11%蔗糖。保护剂:主要保护精子免受各种不良外界环境因素的危害。非电解质或弱电解质:降低精液电解质浓度,常用糖类、氨基 乙酸。缓冲物质:维持精液的PH,常用柠檬酸盐、酒石酸钾钠、磷 酸二氢钾和三羟甲基氨基甲烷(tris)等。防冷物质:防止精子发生冷休克,常用卵黄、奶类。抗冻物质:甘油、二甲基亚砜(DMSO)。抗菌物
7、质:青霉素、链霉素、氨基苯磺胺。其他添加剂:激素类、维生素、酶类、染料类、有机酸、精氨酸等。稀释液的配制要求药物原料应选用化学纯和分析纯制剂。用具须洗净消毒。药品用蒸馏水溶解后,要进行过滤和水浴消毒。蒸馏水要新鲜。卵黄要取自新鲜鸡蛋。最好现用现配,卵黄、奶类、抗生素现用 现加。稀释倍数的确定一头公牛一次采得鲜精12毫升,经检查精子活力 为0.7,密度先11?乙/毫升,如为母+输輪时要余 有效精子数不少于0.1亿,输精量为0.25毫升,本 次米得的精液可兔多少头_牟|俞?每毫升原精液中有效精子数:11+0.7=7.7亿/毫升稀释后每毫升精液中有效精子数:0.1/0.25=0.4亿/毫升稀释倍数:
8、7.7/0.4=19.25 取 19倍可配母牛头数:12*19/0.25=912头稀释方法将精液精液与稀释液同处在30C的环境中。检精液品质,确定稀释倍数。稀释时,将稀释液沿着精液容器的壁慢慢 加入精液中,同时慢慢转动精液瓶,使之 混匀。如需高倍稀释,应先做35倍的低倍稀释查。精液保存常温保存:1525 C低温保存:05C冷冻保存:保存在液氮(-196C)或干冰(-79C)中。液氮及其容器液氮的特性:超低温性、易挥发性、抑菌性。利用液氮:防冻伤、防窒息、防爆炸 液氮罐:精液的冷冻保存原理玻璃化假说:稀溶液在冰晶化温区(0-60 C)易形成冰晶,冰晶为分子有序排列 形态规则、颗粒较大的固体,可对
9、精子产 生渗压和机械危害。如溶液快速降温,则 形成分子无序排列、颗粒较小的玻璃化固 体,对精子危害小,再以同样的方式升温,精子即会恢复活力。输精前的准备母畜的准备:母畜经发情鉴定后,确定已到输精时间,将 其适当保定,尾巴拉向一侧,清洗消毒外阴。场地选择:在室外受精时,选择平坦,避风处,以免尘土飞扬保定方法:先将受配母牛保定在配种架内,将母牛保定结实,再将尾巴系于一则。清洗消毒:将手伸到直肠内清除宿粪,再用清水冲洗外阴部,用清洁湿布擦净,再用2-3%来苏液消毒,然后用清洁干布擦干。冻精准备与解冻解冻方法:自然解冻、手槎解冻、温水解冻。解冻温度:3842C(般控制在40 C)。注意:事项:1、取冻
10、精时,冻精离开液氮的时间不要太长,不超过1秒钟且冻精不要超过瓶口。2、水温控制要控制好,输精解冻时水温稍低,检查时水温可 稍高。3、解冻时间不要太长1015秒,并要轻轻摇晃细管冻精。4、解冻后要擦干细管上的水,并检查细管有无断裂和破损。jHNSAG2006/03/3000018细管精液装枪器械的准备与消毒人工输精开膣器(内窥镜)输精法首肠把捤输精法开膛器(内窥镜)输精法直肠把握输精法直肠把握子宫颈输精法胃1、冻精的适宜解冻温度:3839C2、母牛的输精时间:发情开始后812小时一次,隔812小时一次。3、适宜的输精部位:子宫颈深部和子宫体内。4、精液解冻后要尽快输精。5、精液解冻后要保存在34
11、36C下,温度不可波动过大。6、细管装入枪内后,要检查一下精液是否能从套管外流出。7、排出宿粪后,先擦洗牛外阴部,再插入输精器。8、插入输精器时,先斜向上方前进1015cm,再水平插入。9、向子宫颈插入输精器时,要注意两手协同操作。10、输精器与子宫颈方向要保持一致。11、注入精液困难时,要适当改变输精器方向或稍后拉,但切忌后退过多。12、注入精液要缓慢,一般为10秒。13、注入精液的同时要减缓母牛的努责,防止精液倒流。14、输精同时要注意保护输精器不受粪便污染。15、输精完毕后,先撤出输精器后撤出直肠内的手臂。输精原则:慢插、适深、轻注、缓出、防流注意事项:1、插枪时先将输精枪斜向上45C角插入1015现,再平行向前插入,直至子宫颈口。2、先勿将套管外的保护套除去,待输精枪插入 阴道后再去除。3、注意保护自身的安全,避免被牛只踢伤。
限制150内