第02章药物的鉴别实验..ppt

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1、第二章第二章 药物的鉴别实验药物的鉴别实验药药物物的的鉴鉴别别实实验验是是根根据据药药物物的的分分子子结结构构、理理化化性性质质、采采用用化化学学、物物理理化化学学或或生生物物学学方方法法来来判判断断药药物物的的真真伪，是药品质量检验工作中的首项任务。伪，是药品质量检验工作中的首项任务。药药典典所所收收载载的的药药物物鉴鉴别别实实验验方方法法，均均为为用用来来证证实实贮贮藏藏在在有有标标签签容容器器中中的的药药物物是是否否为为其其所所标标示示的的药药物物，而不是对未知物进行定性分析。而不是对未知物进行定性分析。这这些些方方法法虽虽有有一一定定的的专专属属性性，但但不不足足以以确确证证其其结结构

2、构，因此不能赖以鉴别未知物。因此不能赖以鉴别未知物。第一节第一节 鉴别实验的项目鉴别实验的项目 第二节第二节 鉴别方法鉴别方法第三节第三节 鉴别实验的条件鉴别实验的条件内容内容第一节第一节 鉴别实验的项目鉴别实验的项目 一、药物的性状一、药物的性状 药药物物的的性性状状（descriptiondescription）反反应应药药物物的的特特有有物物理性质，包括：外观、溶解度和物理常数等。理性质，包括：外观、溶解度和物理常数等。1.1.外观外观2.2.指指药药品品的的外外表表感感观观和和色色泽泽，包包括括：药药品品的的集聚状态、晶型、色泽以及臭、味等性质。集聚状态、晶型、色泽以及臭、味等性质。3

3、.3.例例：维维生生素素B B1 1：“本本品品为为白白色色结结晶晶或或结结晶晶性性粉粉末末；有有微微弱弱的的特特臭臭，味味苦苦；干干燥燥品品在在空空气气中迅即吸收约中迅即吸收约4%4%的水分的水分”2.2.溶解度溶解度溶溶解解度度作作为为药药物物的的一一种种物物理理性性质质，在在一一定定程程度上反映药品的纯度。度上反映药品的纯度。中中国国药药典典采采用用“极极易易溶溶解解、易易溶溶解解、略略溶溶、微微溶溶、极极微微溶溶解解、几几乎乎不不溶溶或或不不溶溶”来来描述药品的溶解性能。描述药品的溶解性能。方方法法：称称取取研研成成细细粉粉的的供供试试品品或或量量取取液液体体供供试试品品，置置于于25

4、25C2C2C C一一定定容容量量的的溶溶剂剂中中，每每隔隔5min5min强强力力振振摇摇30s30s；观观察察30min30min内内的的溶溶解解情情况况，如如无无目目视视可可见见的的溶溶质质颗颗粒粒或或液液滴滴，则则为完全溶解。为完全溶解。3.3.物理常数物理常数物物理理常常数数是是评评价价药药物物质质量量的的主主要要指指标标之之一一。其其测测定定结结果果对对药药品品具具有有鉴鉴别别意意义义，也也反反映映该该药药品品的纯度。的纯度。中中国国药药典典收收载载的的物物理理常常数数：相相对对密密度度、熔熔点点、凝凝点点、比比旋旋度度、折折光光率率、黏黏度度、酸酸值值、吸吸收系数等。收系数等。熔

5、点熔点l固固体体熔熔化化成成液液体体的的温温度度、熔熔融融同同时时分分解解的的温度或在熔化时自初熔至全熔的一段温度。温度或在熔化时自初熔至全熔的一段温度。l要要求求报报告告“初初熔熔”（供供试试品品在在毛毛细细管管内内开开始始局局部部液液化化出出现现明明显显液液滴滴时时的的温温度度）和和“全全熔熔”（供试品全部液化时的温度）。（供试品全部液化时的温度）。l例例1 1雌二醇：雌二醇：“本品的熔点为本品的熔点为175175180180C”C”。l例例2 2醋醋酸酸地地塞塞米米松松：“本本品品的的熔熔点点为为223223233233C C，熔融时同时分解，熔融时同时分解”。比旋度比旋度l在在一一定定

6、波波长长与与温温度度下下，偏偏振振光光透透过过长长1dm1dm且且每每1ml1ml中中含含有有旋旋光光性性物物质质1g1g溶溶液液时时测测得得的的旋旋光度称为比旋光度。光度称为比旋光度。l比比旋旋光光度度是是反反映映手手性性药药物物特特性性及及其其纯纯度度的的主主要要指指标标，可可用用以以区区别别药药品品、检检查查纯纯度度或或测定制剂的含量。测定制剂的含量。l例：维生素例：维生素C C的比旋度为的比旋度为+20.5+20.5+21.5+21.5。吸收系数吸收系数l在在给给定定的的波波长长、溶溶剂剂和和温温度度下下，吸吸光光物物质质在在单单位位浓浓度度、单单位位液液层层厚厚度度时时的的吸吸收收度

7、度称称为吸收系数。为吸收系数。l中中国国药药典典收收载载的的吸吸收收系系数数为为百百分分吸吸收收系系数数：在在一一定定波波长长下下，溶溶液液浓浓度度为为1%(W/V)1%(W/V)，厚度为，厚度为1cm1cm时的吸光度，用时的吸光度，用 表示。表示。l吸吸收收系系数数不不仅仅可可用用于于考考察察原原料料药药的的质质量量，同同时时可可作作为为该该药药物物制制剂剂应应用用紫紫外外分分光光光光度度法测定含量时的依据。法测定含量时的依据。无无机机药药物物的的鉴鉴别别：根根据据其其组组成成的的阴阴离离子子和和阳阳离子的特殊反应。离子的特殊反应。有机药物的鉴别：采用典型官能团反应。有机药物的鉴别：采用典型

8、官能团反应。鉴鉴别别实实验验只只能能证证实实是是某某一一类类药药物物，不不能能证证实实是哪一种药物。是哪一种药物。鉴鉴别别实实验验仅仅供供确确认认药药物物质质量量标标准准中中单单一一的的化化学学药药物物，不不适适用用于于混混合合物物或或有有干干扰扰物物质质存存在在的情况。的情况。二、一般鉴别实验二、一般鉴别实验 1.1.有机氟化物的鉴别有机氟化物的鉴别 供试品供试品约约7mg7mg氧瓶燃烧法进氧瓶燃烧法进行有机破坏行有机破坏吸收液：吸收液：20mlH20mlH2 2O-O-6.5mlNaOH6.5mlNaOH(0.01mol/L)(0.01mol/L)燃烧完全后，燃烧完全后，充分振摇，取充分振

9、摇，取吸收液吸收液2ml2ml加茜素氟蓝加茜素氟蓝试液试液0.5ml0.5ml再加再加12%12%醋酸醋酸钠的稀醋酸溶钠的稀醋酸溶液液0.2ml0.2ml用水稀释至用水稀释至4ml4ml，加硝，加硝酸亚铈试液酸亚铈试液0.5ml0.5ml溶液显蓝紫溶液显蓝紫色色,并做空白并做空白对照试验对照试验方法方法原理原理有有机机氟氟化化物物经经氧氧瓶瓶燃燃烧烧法法破破坏坏，被被碱碱性性溶溶液液吸吸收收成成为为无无机机氟氟化化物物，与与茜茜素素氟氟蓝蓝、硝硝酸酸亚亚铈铈在在pH4.3pH4.3溶液中形成蓝紫色络合物。溶液中形成蓝紫色络合物。茜素氟蓝茜素氟蓝OOOHOHCH2NCH2COOHCH2COOHF

10、-+Ce3+pH4.3蓝紫色蓝紫色OOOHOCH2NCH2COOHCH2COOHCeFOH2.2.有机酸的鉴别有机酸的鉴别 水杨酸盐水杨酸盐鉴别方法一：鉴别方法一：取取供供试试品品的的稀稀溶溶液液，加加三三氯氯化化铁铁1 1滴滴，溶溶液液显显紫紫色。色。原理：原理：本本品品在在中中性性或或弱弱酸酸性性下下，与与FeClFeCl3 3生生成成配配位位化化合合物，中性时呈红色，弱酸性时呈紫色。物，中性时呈红色，弱酸性时呈紫色。COOHOH水杨酸水杨酸6+4FeCl3COO-O-2Fe Fe+12HCl鉴别方法二：鉴别方法二：取取供供试试品品的的溶溶液液，加加稀稀盐盐酸酸，即即析析出出白白色色水水杨

11、杨酸沉淀，沉淀在醋酸铵试液中溶解。酸沉淀，沉淀在醋酸铵试液中溶解。酒石酸盐酒石酸盐方法：方法：取取供供试试品品的的中中性性溶溶液液，置置洁洁净净的的试试管管中中，加加氨氨制制硝硝酸酸银银试试液液数数滴滴，置置水水浴浴中中加加热热，银银游游离离并并附在试管内壁成银镜。附在试管内壁成银镜。原理：原理：COOHCHHOCOOHCHHO+Ag(NH+Ag(NH3 3)2 2OHOHCOONH4CHOCOONH4CHO+2NH+2NH3 3+2H+2H2 2O O2Ag+2Ag+供试品供试品约约50mg50mg加稀盐酸加稀盐酸1ml1ml，缓缓，缓缓煮沸使溶解，放冷煮沸使溶解，放冷加加0.1mol/L0

12、.1mol/L亚硝亚硝酸钠溶液数滴酸钠溶液数滴加碱性加碱性-萘萘酚试液数滴酚试液数滴生成橙黄色到猩红色沉生成橙黄色到猩红色沉淀（视供试品不同）淀（视供试品不同）3.3.芳香第一胺类芳香第一胺类方法：方法：原理：原理：+NaNO2+2HClNH2R+NaCl+2H2OR+NaCl+H2ORN=NOH+NaOHROH+方法：方法：供试品约供试品约10mg10mg加发烟硝酸加发烟硝酸5 5滴滴置水浴上蒸干，置水浴上蒸干，得到黄色残渣得到黄色残渣加乙醇加乙醇2 23 3滴润湿滴润湿加固体加固体KOHKOH一小一小粒，显深紫色粒，显深紫色4.4.托烷生物碱类托烷生物碱类原理：原理：OROHO水解水解HO

13、OCHO3HNO3HOOCHONO2O2NNO2托烷类托烷类三硝基衍生物三硝基衍生物KOH（C2H5OH）HOOCHONO2O2NNOHO莨菪酸莨菪酸醌型产物醌型产物KOHHOOCHONO2O2NNOHOHOOCHONO2O2NNOKO深紫色深紫色钠盐、钾盐、钙盐的焰色反应钠盐、钾盐、钙盐的焰色反应鉴别方法：鉴别方法：取取铂铂丝丝，用用盐盐酸酸湿湿润润后后，蘸蘸取取供供试试品品，在在无无色色火火焰焰中燃烧，火焰即显个离子的特征颜色。中燃烧，火焰即显个离子的特征颜色。钠离子钠离子:鲜黄色；钾离子鲜黄色；钾离子:紫色；钙离子紫色；钙离子:砖红色。砖红色。原理：原理：钠的火焰光谱主要谱线：钠的火焰光

14、谱主要谱线：589.0nm589.0nm、589.6nm589.6nm；钾的火焰光谱主要谱线：钾的火焰光谱主要谱线：766.49nm766.49nm、769.90nm769.90nm；钙钙的的火火焰焰光光谱谱主主要要谱谱线线：622nm622nm、554nm554nm、442.67nm442.67nm与与602nm602nm。5.5.无机金属盐无机金属盐铵盐铵盐鉴别方法：鉴别方法：取取供供试试品品，加加过过量量NaOHNaOH试试液液后后，加加热热，即即分分解解，发发生生氨氨臭臭；遇遇湿湿润润的的红红色色石石蕊蕊试试纸纸，能能使使之之变变蓝蓝色色，并并能能使使硝硝酸酸亚亚汞汞试试液液湿湿润润的

15、的滤滤纸显黑色。纸显黑色。原理：原理：NH4+OH-NH3 +H2O4NH3+2Hg2(NO3)2+H2OOHgHgNH2NO3+2Hg +3NH4NO3氯化物氯化物鉴别一：鉴别一：取取供供试试品品溶溶液液，加加稀稀硝硝酸酸使使成成酸酸性性，滴滴加加AgNOAgNO3 3试试液液，生生成成白白色色凝凝乳乳状状沉沉淀淀；沉沉淀淀加加氨氨试液即溶解，再加稀硝酸，沉淀复生成。试液即溶解，再加稀硝酸，沉淀复生成。鉴别二：鉴别二：取取供供试试品品少少量量置置试试管管中中，加加等等量量MnOMnO2 2，混混匀匀，加加H H2 2SOSO4 4湿湿润润，缓缓缓缓加加热热，即即发发生生氯氯气气，能能使使湿润

16、的碘化钾淀粉试纸显蓝色。湿润的碘化钾淀粉试纸显蓝色。6.6.无机酸根无机酸根硫酸盐硫酸盐鉴别一：鉴别一：取取供供试试品品溶溶液液，滴滴加加BaClBaCl2 2试试液液，即即生生成成白白色色沉淀；沉淀在盐酸或硝酸中均不溶解。沉淀；沉淀在盐酸或硝酸中均不溶解。鉴别二：鉴别二：取取供供试试品品溶溶液液，滴滴加加醋醋酸酸铅铅试试液液，即即生生成成白白色沉淀；沉淀在醋酸铵或色沉淀；沉淀在醋酸铵或NaOHNaOH试液中溶解。试液中溶解。鉴别三：鉴别三：取取供供试试品品溶溶液液，加加盐盐酸酸，不不生生成成白白色色沉沉淀淀（与硫代硫酸钠区别）。（与硫代硫酸钠区别）。硝酸盐硝酸盐鉴别一：鉴别一：取取供供试试品

17、品溶溶液液置置试试管管中中，加加等等量量的的硫硫酸酸，小小心心混混合合，冷冷后后，沿沿管管壁壁加加硫硫酸酸亚亚铁铁试试液液，使使成两液层，接界面显棕色。成两液层，接界面显棕色。鉴别二：鉴别二：取取供供试试品品溶溶液液，加加硫硫酸酸与与铜铜丝丝加加热热，即即发发生生红棕色的蒸气（红棕色的蒸气（NONO2 2）。）。鉴别三：鉴别三：取取供供试试品品溶溶液液，滴滴加加KMnOKMnO4 4试试液液，紫紫色色不不应应褪褪去（与亚硝酸钠区别）。去（与亚硝酸钠区别）。三、专属鉴别实验三、专属鉴别实验 l一一般般鉴鉴别别实实验验是是以以某某些些类类别别药药物物的的共共同同化化学学结结构构为为依依据据，根根据

18、据其其相相同同的的物物理理化化学学性性质质进进行行药药物物真真伪的鉴别，以区别伪的鉴别，以区别不同类不同类的药物的药物l药药物物的的专专属属实实验验：在在一一般般鉴鉴别别实实验验的的基基础础上上，根根据据各各种种药药物物化化学学结结构构的的差差异异及及其其所所引引起起的的物物理理化化学学特特性性不不同同，来来鉴鉴别别药药物物，以以区区别别同同类类药药物物或或具具有有相相同同化化学学结结构构部部分分的的各各个个药药物物单单体体，达达到到最最终终确证药物真伪的目的。确证药物真伪的目的。以后各章详解以后各章详解第二节第二节 鉴别方法鉴别方法 l药物的鉴别方法的要求：专属性强 再现性好 灵敏度高、操作

19、简便 快速常用鉴别方法：化学法 光谱法 色谱法 生物学法一、化学鉴别法一、化学鉴别法l要求：要求：反应迅速、现象明显；反应是否完全则不重要。反应迅速、现象明显；反应是否完全则不重要。l化学鉴别法：化学鉴别法：呈色反应呈色反应 沉淀生成反应沉淀生成反应 荧光反应荧光反应气体生成反应气体生成反应 使试剂褪色反应使试剂褪色反应测定生成物的熔点（繁琐、费时、应用少）测定生成物的熔点（繁琐、费时、应用少）二、光谱鉴别法二、光谱鉴别法1.紫外光谱鉴别法紫外光谱鉴别法原理：原理：多多数数有有机机药药物物分分子子含含有有能能吸吸收收紫紫外外可可见见光光的的基基团团而而显示特征吸收光谱，可作为鉴别的依据。显示特

20、征吸收光谱，可作为鉴别的依据。常用方法：常用方法：测定最大吸收波长或同时测定最小吸收波长；测定最大吸收波长或同时测定最小吸收波长；规规定定一一定定浓浓度度的的供供试试液液在在最最大大吸吸收收波波长长处处的的吸吸光光度；度；规定吸收波长和吸收系数法；规定吸收波长和吸收系数法；规定吸收波长和吸光度比值法；规定吸收波长和吸光度比值法；经化学处理后，测定其反应产物的吸收光谱特性。经化学处理后，测定其反应产物的吸收光谱特性。示例：地蒽酚的鉴别实验示例：地蒽酚的鉴别实验取取含含量量测测定定下下的的供供试试品品溶溶液液，于于240240400nm400nm范范围围内内测测定定吸吸光光度度，在在257nm25

21、7nm、289nm289nm与与356nm356nm处处有有最最大大吸吸收收。在在257nm257nm与与289nm289nm处处的的吸吸光光度度比比值值应应为为1.061.061.101.10；在在356nm356nm与与289nm289nm处处的的吸吸光光度度比比值值应应为为0.900.900.940.94。2.红外光谱鉴别法红外光谱鉴别法红红外外光光谱谱法法专专属属性性很很强强，应应用用较较广广（固固体体、液液体体、气气体体样样品品），主主用用于于组组分分单单一一、结结构构明明确确的的原原料料药，特别适合于用其他方法不易区分的同类药物。药，特别适合于用其他方法不易区分的同类药物。在在用用

22、红红外外光光谱谱进进行行鉴鉴别别时时，中中国国药药典典采采用用标标准谱图对照法。准谱图对照法。试样制备方法：试样制备方法：压片法压片法 糊法糊法 膜法膜法 溶液法溶液法注意问题：注意问题：固体药品的测定受晶型的影响固体药品的测定受晶型的影响采用压片法时，盐酸盐样品需使用采用压片法时，盐酸盐样品需使用KClKCl基质。基质。傅傅立立叶叶变变化化红红外外光光谱谱仪仪系系单单光光束束型型仪仪器器，测测定定时时需需采采用用干干燥燥的的氮氮气气吹吹扫扫来来消消除除二二氧氧化化碳碳和和水水汽汽的的干扰。干扰。本法对多组分药物或存在多晶现象的药物不适用。本法对多组分药物或存在多晶现象的药物不适用。制剂的鉴别

23、一般需采取提取分离后压片测试。制剂的鉴别一般需采取提取分离后压片测试。仪仪器器间间的的分分辨辨率率的的差差异异及及操操作作条条件件的的不不同同可可能能影影响响药药品品光光谱谱图图，应应将将测测定定药药品品用用的的仪仪器器上上获获得得的的聚聚苯苯乙乙烯烯薄薄膜膜光光谱谱图图与与药药典典收收录录的的聚聚苯苯乙乙烯烯薄薄膜膜光谱图加以光谱图加以比较。比较。中中国国药药典典红红外外光光谱谱图图的的波波数数范范围围：40004000400cm400cm-1-13.近红外光谱鉴别法近红外光谱鉴别法通通过过测测定定被被测测物物质质在在近近红红外外谱谱区区7507502500nm2500nm的的特特征征光光谱

24、谱并并利利用用适适宜宜的的化化学学计计量量学学方方法法提提取取相相关关信息后，对被测物质进行定性、定量。信息后，对被测物质进行定性、定量。近近红红外外光光谱谱特特点点：快快速速、准准确确、不不破破坏坏样样品品、既既可离线检测，也可在线检测。可离线检测，也可在线检测。近红外光谱鉴别法步骤近红外光谱鉴别法步骤：（1 1）建立参考谱库）建立参考谱库（2 2）数据预处理）数据预处理（3 3）数据评估）数据评估（4 4）数据库的验证（专属性和耐用性）数据库的验证（专属性和耐用性）4.原子吸收法原子吸收法利利用用原原子子蒸蒸汽汽可可以以吸吸收收该该元元素素作作为为空空心心阴阴极极灯灯发发出出的的特特征征谱

25、谱线线的的特特征征，根根据据供供试试品品溶溶液液的的最最大大吸吸收收和和特特征征谱谱线线的的强强度度减减弱弱程程度度进进行行定定性性、定定量量分分析。析。5.核磁共振法核磁共振法通通过过测测定定供供试试品品指指定定基基团团上上的的质质子子峰峰的的化化学学位位移移和耦合常数进行药物的鉴别和耦合常数进行药物的鉴别。三、三、X射线粉末衍射法射线粉末衍射法l化化合合物物的的晶晶体体都都有有其其特特定定的的X X射射线线衍衍射射图图谱谱。衍衍射射极极大大点点（或或线线）间间的的距距离离及及其其相相对对强强度度可可用用以以进进行行结晶物质的定性或定量分析。结晶物质的定性或定量分析。d dhklhkl：面间

26、距；：面间距；：掠射角；：掠射角；：X X射线波长射线波长l结结晶晶物物质质的的鉴鉴别别可可通通过过比比较较供供试试品品与与已已知知物物质质的的X X射线粉末衍射图谱来完成。射线粉末衍射图谱来完成。l各各衍衍射射线线的的衍衍射射角角（2 2）、相相对对强强度度、和和面面间间距距是进行鉴别的依据。是进行鉴别的依据。（布拉格方程）（布拉格方程）-form-form谷氨酸两种晶型的谷氨酸两种晶型的X X射线衍射光谱射线衍射光谱四、色谱鉴别法四、色谱鉴别法l利利用用不不同同物物质质在在不不同同的的色色谱谱条条件件下下，产产生生各各自自的的特特征色谱行为（比移值征色谱行为（比移值R Rf f值或保留时间

27、）进行鉴别。值或保留时间）进行鉴别。l采采用用与与对对照照品品在在相相同同的的条条件件下下进进行行色色谱谱分分离离，并并进进行行比比较较，根根据据两两者者的的保保留留行行为为和和检检测测结结果果是是否否一一致致来验证药品的真伪。来验证药品的真伪。1.1.薄层色谱鉴别法薄层色谱鉴别法（Thin-layer Chromatography）与与同同浓浓度度对对照照品品溶溶液液，在在同同一一薄薄层层板板上上点点样样、展展开开与与检检视视，供供试试品品溶溶液液所所显显主主斑斑点点的的颜颜色色与与位位置置应应与与对对照照品品的的主斑点一致，且主斑点的大小和颜色深浅也应大致相同。主斑点一致，且主斑点的大小和

28、颜色深浅也应大致相同。采采用用供供试试品品溶溶液液与与对对照照品品溶溶液液等等体体积积混混合合，应应显显示示单单一一、紧密的斑点。紧密的斑点。选选用用与与供供试试品品化化学学结结构构相相似似的的药药物物对对照照品品溶溶液液与与供供试试品品溶液的主斑点比较，两者溶液的主斑点比较，两者比移比移值应不同。值应不同。将将项项下下两两种种溶溶液液等等体体积积混混合合，应应显显示示两两个个清清晰晰分分离离的的斑点。斑点。2.2.高高效效液液相相色色谱谱鉴鉴别别法法（High Performance Liquid Chromatography）要求供试品和对照品色谱峰的保留时间应一致。要求供试品和对照品色谱

29、峰的保留时间应一致。含含量量测测定定方方法法为为内内标标法法时时，要要求求供供试试品品溶溶液液和和对对照照品品溶溶液液色色谱谱图图中中的的药药物物峰峰的的保保留留时时间间与与内内标标物物峰峰的的保留时间的比值应一致。保留时间的比值应一致。3.质谱鉴别法质谱鉴别法（Mass Spectrometry）在在高高真真空空状状态态下下将将被被测测物物质质离离子子化化，按按离离子子的的质质荷荷比（比（m/zm/z）大小分离而实现物质成分和结构分析。）大小分离而实现物质成分和结构分析。第三节第三节 鉴别实验条件鉴别实验条件 l鉴鉴别别实实验验必必须须在在规规定定条条件件下下完完成成，否否则则影影响响结果的

30、判断。结果的判断。l影响鉴别实验的因素：影响鉴别实验的因素：被测物浓度被测物浓度 试剂用量试剂用量 溶液温度溶液温度 pHpH值值 反应时间反应时间 干扰物质干扰物质1.溶液的浓度溶液的浓度2.2.在在鉴鉴别别实实验验中中加加入入的的各各种种试试剂剂一一般般是是过过量量的。的。2.2.溶液的温度溶液的温度3.3.温度升高温度升高1010C C，可使反应速度增加，可使反应速度增加2 24 4倍。倍。温温度度升升高高可可使使某某些些生生成成物物分分解解，导导致致颜颜色色变变浅浅，甚至观察不到阳性结果。甚至观察不到阳性结果。3.3.溶液的酸碱度溶液的酸碱度溶溶液液的的酸酸碱碱度度的的作作用用在在于于使使各各反反应应物物有有足足够够的的浓浓度度处处于于活活化化状状态态，使使生生成成物物处处于于稳稳定定和和易易于于观观察察的状态的状态4.实验时间实验时间无无机机化化合合物物的的化化学学反反应应速速度度较较快快，而而有有机机化化合合物物的化学反应速度较慢。的化学反应速度较慢。5.5.干扰物质干扰物质干干扰扰物物质质的的存存在在会会干干扰扰鉴鉴别别实实验验现现象象的的观观察察，难难以做出正确的判断。以做出正确的判断。必必须须选选择择专专属属性性更更高高的的鉴鉴别别方方法法或或将将干干扰扰物物质质分分离后再进行实验。离后再进行实验。