人教版必修二第六章第2节基因工程及其应用(共59张PPT).ppt
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1、能发光的水母能发光的水母能否能否让热能否能否让热带鱼也能发光带鱼也能发光?设想不能发光的热带斑马鱼不能发光的热带斑马鱼人教版必修二第六章第人教版必修二第六章第2节基因工程及其应用节基因工程及其应用(共共59张张PPT)人教版必修二第六章第人教版必修二第六章第人教版必修二第六章第人教版必修二第六章第2 2节基因工程及其应节基因工程及其应节基因工程及其应节基因工程及其应用用用用(共共共共5959张张张张PPT)PPT)基因工程又叫做基因工程又叫做基因拼接技术基因拼接技术或或DNADNA重组技术重组技术。这种技。这种技术是在生物体外,通地对术是在生物体外,通地对DNADNA分子进行分子进行人工剪切和
2、拼接人工剪切和拼接,对,对生物的基因进行改造和重新组合,然后导入受体细胞内进生物的基因进行改造和重新组合,然后导入受体细胞内进行无性繁殖,使重组基因在受体细胞内表达,产生人类所行无性繁殖,使重组基因在受体细胞内表达,产生人类所需要的基因产物。需要的基因产物。通俗地说,就是按照人们的意愿,把一种生物的个别通俗地说,就是按照人们的意愿,把一种生物的个别基因基因复制出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细复制出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,胞里,定向地改造生物的遗传性状(目的)。定向地改造生物的遗传性状(目的)。基因工程概念的理解基因工程概念的理解原理原理操作环境操作环境操作对象操
3、作对象操作水平操作水平基本过程基本过程结果结果基因重组基因重组生物体外生物体外基因基因DNADNA分子水平分子水平剪切、拼接、导入、表达剪切、拼接、导入、表达定向改造生物的遗传性状,定向改造生物的遗传性状,获得人类需要的基因产物。获得人类需要的基因产物。1.1.1.1.基因的剪刀基因的剪刀基因的剪刀基因的剪刀限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶(简称限制酶简称限制酶简称限制酶简称限制酶)(一)基因操作的工具(一)基因操作的工具 限制酶是在生物体限制酶是在生物体限制酶是在生物体限制酶是在生物体(主要是主要是主要是主要是微生物微生物微生物微生物)内的一种酶内的一种酶内的
4、一种酶内的一种酶,能将外来的能将外来的能将外来的能将外来的DNADNADNADNA切断切断切断切断,由于这种切割作用是在,由于这种切割作用是在,由于这种切割作用是在,由于这种切割作用是在DNADNADNADNA分分分分子内部进行的,故名限制性内切酶。子内部进行的,故名限制性内切酶。子内部进行的,故名限制性内切酶。子内部进行的,故名限制性内切酶。特点:特点:特点:特点:特异性特异性特异性特异性。即即即即一种一种一种一种限制酶限制酶限制酶限制酶只能识别一种只能识别一种只能识别一种只能识别一种特定的特定的特定的特定的核苷酸序列核苷酸序列核苷酸序列核苷酸序列,并且能在并且能在并且能在并且能在特定的切点
5、特定的切点特定的切点特定的切点上切割上切割上切割上切割DNADNADNADNA分子。分子。分子。分子。1.基因的剪刀基因的剪刀限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶(简称限制酶简称限制酶)例:大肠杆菌例:大肠杆菌(E.coli)的一种限制酶的一种限制酶能能识别识别GAATTC序列序列,并在,并在G和和A之间切开之间切开.限制酶限制酶限制限制限制限制酶酶酶酶1.基因的剪刀基因的剪刀限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶(简称限制酶简称限制酶)G A A T T C C T TA A G C C C G G G G G G C C C C T T A A G A A T T C G 黏性末端黏性末端平末端平末
6、端限制性核酸内切酶能识别特定的核苷酸序列:限制性核酸内切酶能识别特定的核苷酸序列:限制酶限制酶限制酶限制酶EcoRIEcoRIC C CG G G G G G C C C 限制酶限制酶SmaI什么叫黏性末端?什么叫黏性末端?被限制酶切开的被限制酶切开的DNA两条单链的切口两条单链的切口,带有几个带有几个伸出的核苷酸伸出的核苷酸,他们之间正好,他们之间正好互互补配对补配对,这样的切口叫,这样的切口叫黏性末端黏性末端。限制性核酸内切酶作用的是限制性核酸内切酶作用的是DNADNA分子中的什么键?分子中的什么键?磷酸二酯键磷酸二酯键即脱氧核糖、磷即脱氧核糖、磷酸之间的连接酸之间的连接AAT TGGGG
7、CCAAT TCCT TT TCCGGAAAA GP AP识别一种特定的核苷酸序列识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的切点上切割并在特定的切点上切割DNADNA分子分子.1.1.来源来源2.2.功能功能3.3.作用部位作用部位4.4.作用结果作用结果主要是从主要是从原核生物中原核生物中分离纯化而来分离纯化而来磷酸二酯键磷酸二酯键切割切割DNADNA产生产生黏性末端或平末端黏性末端或平末端小结:限制性核酸内切酶小结:限制性核酸内切酶 CCTGCAG DCTAAATC GACGTC GATTTAGD课堂演练课堂演练例例.下面哪项不具有限制酶识别序列的特征下面哪项不具有限制酶识别序列的特征()AGA
8、ATTC BGGGGCCCC CTTAAG CCCCGGGG 解析:解析:限制酶识别的各种序具有回文对称的特点。所谓回限制酶识别的各种序具有回文对称的特点。所谓回文对称序列就是当以不同的方向分别阅读文对称序列就是当以不同的方向分别阅读DNADNA的两条互补链的两条互补链时,时,DNADNA的两条链上的碱基序列相同。如的两条链上的碱基序列相同。如A A中的中的DNADNA分子,其分子,其中一条链从左向右阅读碱基序列是中一条链从左向右阅读碱基序列是GAATTCGAATTC,另一条互补链,另一条互补链从右向左阅读碱基序列也是从右向左阅读碱基序列也是GAATTCGAATTC。2.2.限制性内切酶是基因
9、工程中重要的操作工具限制性内切酶是基因工程中重要的操作工具.下下图为限制性内切酶作用后的粘性末端。据图分图为限制性内切酶作用后的粘性末端。据图分析,这是几种限制酶作用的结果及限制酶识别析,这是几种限制酶作用的结果及限制酶识别的核苷酸序列由几个核苷酸组成的核苷酸序列由几个核苷酸组成_._.26 TTAAC G GCAATT AATTC G GCTTAA3.3.下列所示的黏性末端是由几种限制性内切酶下列所示的黏性末端是由几种限制性内切酶作用产生的作用产生的?4 种种 AATTG C CGTTAA CGAATT TTAAG C GACAGTCT4.4.已知某种限制性内切酶在一线性已知某种限制性内切酶
10、在一线性DNADNA分子上有分子上有3 3个酶切位个酶切位点,如图中箭头所指,如果该线性点,如图中箭头所指,如果该线性DNADNA分子在分子在3 3个酶切位个酶切位点上都被该酶切断,则会产生点上都被该酶切断,则会产生a a、b b、c c、d d四种不同长度四种不同长度的的DNADNA片段。现在多个上述线性片段。现在多个上述线性DNADNA分子,若在每个分子,若在每个DNADNA分分子上至少有子上至少有1 1个酶切位点被该酶切断,则从理论上讲,经个酶切位点被该酶切断,则从理论上讲,经该酶切后,这些线性该酶切后,这些线性DNADNA分子最多能产生长度不同的分子最多能产生长度不同的DNADNA片段
11、种类数是片段种类数是:A3 B4 C9 D12线性线性DNA分子的酶切示意图分子的酶切示意图C2.基因的针线基因的针线DNA连接酶连接酶(一)基因操作的工具(一)基因操作的工具 DNADNA连接酶连接酶连接酶连接酶可把黏性末端可把黏性末端可把黏性末端可把黏性末端之间的缝隙之间的缝隙之间的缝隙之间的缝隙“缝合缝合缝合缝合”起来,即把梯子两边扶手的断口连接起来,这起来,即把梯子两边扶手的断口连接起来,这起来,即把梯子两边扶手的断口连接起来,这起来,即把梯子两边扶手的断口连接起来,这样一个样一个样一个样一个重组的重组的重组的重组的DNADNA分子分子分子分子就形成了。就形成了。就形成了。就形成了。磷
12、酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAAAATTCCGTAG 练习使用练习使用EcoRI 剪切目的基因剪切目的基因CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAAAATTCCGTAG 目的基因目的基因具有相同的黏性末端具有相同的黏性末端目的基因目的基因尝试写出下列序列受尝试写出下列序列受EcoRI限制酶作用后的黏性末端限制酶作用后的黏性末端CTTCATGAATTCCCTAA GAAGTACTTAAGGGATT CTTCATG AATTCCCTAA GAA
13、GTACTTAA GGGATT GAATTCCGTAGAATTCGGATT CTTAAGGCATCTTAAGCCTAA GGCATCTTAAAATTCCGTAG 由于具有相同的黏性末端由于具有相同的黏性末端,不同来源的不同来源的DNA片段可以拼接在一起片段可以拼接在一起形成重组形成重组DNA分子分子作用作用把两条把两条DNA末端之间的缝隙末端之间的缝隙“缝合缝合”起来。起来。G A A T T C C T T A A G 即脱氧核糖、磷酸基之间的连接即脱氧核糖、磷酸基之间的连接 GP APCTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAAAATTC
14、CGTAG 2.2.基因的针线基因的针线基因的针线基因的针线DNADNA连接酶连接酶连接酶连接酶运载体的作用有哪些?运载体的作用有哪些?常用的运载体主要有哪些?常用的运载体主要有哪些?质粒的化学本质是什么?质粒的化学本质是什么?基因操作的基本步骤基因操作的基本步骤举例说明什么是目的基因举例说明什么是目的基因培育转基因动物培育转基因动物,目的基因的受体细胞是什么目的基因的受体细胞是什么?与杂交育种、诱变育种相比较,基因工程育与杂交育种、诱变育种相比较,基因工程育种的优点有哪些?种的优点有哪些?阅读思考:阅读思考:外源基因外源基因(如抗虫基因如抗虫基因)怎样才能怎样才能导入受体细胞导入受体细胞(如
15、棉花细胞如棉花细胞)?(一)基因操作的工具(一)基因操作的工具导入过程需要运输工具导入过程需要运输工具3.3.基因的基因的(运运)载体载体(一)基因操作的工具(一)基因操作的工具运载体的作用有哪些?运载体的作用有哪些?作用一作用一作用一作用一:作为运载工具,将外源基因:作为运载工具,将外源基因:作为运载工具,将外源基因:作为运载工具,将外源基因(如如如如:抗虫基因抗虫基因抗虫基因抗虫基因)转移转移转移转移到受体细胞到受体细胞到受体细胞到受体细胞(如如如如:棉花细胞棉花细胞棉花细胞棉花细胞)中去。中去。中去。中去。作用二作用二作用二作用二:利用运载体在受体细胞:利用运载体在受体细胞:利用运载体在
16、受体细胞:利用运载体在受体细胞(棉花细胞棉花细胞棉花细胞棉花细胞)内,内,内,内,对对对对外源基因外源基因外源基因外源基因(抗虫基因抗虫基因抗虫基因抗虫基因)进行进行进行进行复制复制复制复制。质粒质粒质粒质粒、噬菌体、噬菌体、噬菌体、噬菌体、动植物病毒等动植物病毒等动植物病毒等动植物病毒等常用的运载体主要有哪些?常用的运载体主要有哪些?质粒的化学本质是什么?质粒的化学本质是什么?小型环状小型环状DNA3.3.基因的基因的(运运)载体载体质粒质粒 质粒存在于细菌、质粒存在于细菌、酵母菌酵母菌等生物中等生物中,是拟是拟核或核或细胞核以外的小型细胞核以外的小型环状环状DNA分子分子。质粒质粒是基因工
17、程是基因工程最常用最常用的的运载体运载体。3.3.基因的基因的(运运)载体载体大肠杆菌的质粒:大肠杆菌的质粒:最常用的质粒最常用的质粒是是大肠杆菌大肠杆菌的质粒的质粒,其中常含有,其中常含有抗药基因抗药基因,如四环素的标记基因如四环素的标记基因.质粒的质粒的存在与否对宿主细存在与否对宿主细胞生存没有决定性作用胞生存没有决定性作用,但,但复复制只能在宿主细胞内成制只能在宿主细胞内成。注意:注意:质粒与(运)载体的关系质粒与(运)载体的关系四个基本步骤:四个基本步骤:(二二)基因操作的基本步骤基因操作的基本步骤1 1)提取提取提取提取目的基因目的基因目的基因目的基因2 2)目的基因)目的基因)目的
18、基因)目的基因与与与与(运载运载运载运载)体结合体结合体结合体结合3 3)将目的基因)将目的基因)将目的基因)将目的基因导入导入导入导入受体细胞受体细胞受体细胞受体细胞4 4)目的基因的)目的基因的)目的基因的)目的基因的检测检测检测检测和和和和鉴定鉴定鉴定鉴定举例说明什么是目的基因举例说明什么是目的基因(二二)基因操作的基本步骤基因操作的基本步骤目的基因:目的基因:是用于定向改造生物所是用于定向改造生物所需要需要的特定基因。的特定基因。例如:例如:苏云金芽孢杆菌的抗虫基因、苏云金芽孢杆菌的抗虫基因、植物的植物的抗病抗病(抗病毒、抗细菌抗病毒、抗细菌)基因基因、种子贮藏蛋白的基因、种子贮藏蛋白
19、的基因、人的人的胰岛素基因胰岛素基因、干扰素基因干扰素基因等。等。步骤一:步骤一:提取目的基因提取目的基因步骤二:目的基因与运载体结合步骤二:目的基因与运载体结合 1 1)用一定的)用一定的)用一定的)用一定的限制酶切割质粒限制酶切割质粒限制酶切割质粒限制酶切割质粒,使其出,使其出,使其出,使其出现现现现一个切口一个切口一个切口一个切口,露出,露出,露出,露出黏性末端黏性末端黏性末端黏性末端。2 2)用)用)用)用同一种同一种同一种同一种限制酶限制酶限制酶限制酶切断目的基因切断目的基因切断目的基因切断目的基因,使,使,使,使其产生其产生其产生其产生相同相同相同相同的的的的黏性末端黏性末端黏性末
20、端黏性末端。3 3)将切下的目的基因片段)将切下的目的基因片段)将切下的目的基因片段)将切下的目的基因片段插入质粒插入质粒插入质粒插入质粒的的的的切口处,再加入适量切口处,再加入适量切口处,再加入适量切口处,再加入适量DNADNA连接酶连接酶连接酶连接酶,形成了,形成了,形成了,形成了一个一个一个一个重组重组重组重组DNADNA分子分子分子分子(重组质粒)(重组质粒)(重组质粒)(重组质粒)目的基因与运载体的结合过程,实目的基因与运载体的结合过程,实目的基因与运载体的结合过程,实目的基因与运载体的结合过程,实际上是不同来源的际上是不同来源的际上是不同来源的际上是不同来源的基因重组的过程基因重组
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