葡萄球菌病20310.ppt

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1、葡萄球菌葡萄球菌(p to qi jn)病病第一页，共四十六页。概概 述述n葡萄球菌病是由葡萄球菌属致病葡萄球菌病是由葡萄球菌属致病性葡萄球菌感染人和动物性葡萄球菌感染人和动物(dngw)引起引起的多种疾病的总称。的多种疾病的总称。第二页，共四十六页。生物学性状生物学性状形态与染色形态与染色球形，葡萄球形，葡萄(pto)串状，革兰染色阳性串状，革兰染色阳性G+病原学病原学第三页，共四十六页。培养培养(piyng)特性特性n易培养易培养普通平板普通平板血平板血平板n有色素有色素金黄色金黄色白色白色柠檬色柠檬色n有些菌溶血有些菌溶血(rnxu)产生溶血环产生溶血环第四页，共四十六页。生化生化(sh

2、n hu)反响反响n触酶阳性触酶阳性(yngxng)n多数菌分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖，产酸不产气多数菌分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖，产酸不产气n致病菌分解甘露醇致病菌分解甘露醇第五页，共四十六页。抗原抗原(kngyun)构造构造capsulepolysaccharide(teichoic acid)SPA第六页，共四十六页。SPAstaphylococcal protein ASPASPAIgGIgGFc receptorFc receptorPHAGOCYTEPHAGOCYTEBACTERIUMBACTERIUM FabFc第七页，共四十六页。金黄色葡萄球菌S.aureus 表皮(biop)葡萄

3、球菌S.epidermidis 腐生葡萄球菌S.saprophyticus性状性状金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌菌落色素菌落色素金黄色金黄色白色白色白色或柠檬色白色或柠檬色发酵甘露醇发酵甘露醇+-凝固酶凝固酶+-溶素溶素+-耐热核酸酶耐热核酸酶+-致病性致病性+-分类分类(fnli)n色素色素(ss)、生化反响、生化反响致病性葡萄球菌的鉴别致病性葡萄球菌的鉴别第八页，共四十六页。分类(fn li)n凝固酶 阴性菌 阳性菌n噬菌体 群 群引起(ynq)葡萄球菌肠毒素食物中毒nDNA相关性 32种第九页，共四十六页。抵抗力n对外界因素的抵抗力强于其他无

4、芽胞菌对外界因素的抵抗力强于其他无芽胞菌n对碱性对碱性(jinxn)染料龙胆紫敏感染料龙胆紫敏感n易产生耐药性，特别对青霉素易产生耐药性，特别对青霉素第十页，共四十六页。致病物质致病物质(wzh)毒素毒素葡萄球菌溶葡萄球菌溶素素毒性休克综合征毒素毒性休克综合征毒素1杀白细胞杀白细胞素素肠毒肠毒素素表皮剥表皮剥脱脱(botu)毒毒素素酶酶凝固凝固酶酶耐热核酸耐热核酸酶酶第十一页，共四十六页。凝固(nngg)酶coagulasen概念q使含有抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类物质q游离凝固酶free coagulaseq结合凝固酶bound coagulasen意义q鉴别有无致病性的重要指标n致病机

5、理(j l)：q抵抗吞噬细胞的吞噬q保护病菌不受血清中杀菌物质的破坏q是感染局限化和形成血栓第十二页，共四十六页。表皮剥脱(bo tu)毒素exfoliative toxinn引起机体发热，增加对内毒素的敏感性n可引起多个器官系统的功能紊乱或毒性休克综合征TSSn引起烫伤(tngshng)样皮肤综合征staphylococcal scalded skin syndrome，SSSS毒性(d xn)休克综合征毒素-1TSST-1第十三页，共四十六页。肠毒素肠毒素enterotoxinn约约1/3临床别离金黄色葡萄球菌可产生临床别离金黄色葡萄球菌可产生n引起急性胃肠炎，即食物中毒引起急性胃肠炎，即

6、食物中毒(shwzhngd)n耐热，抗胃肠液中蛋白酶耐热，抗胃肠液中蛋白酶n作用机制：刺激呕吐中枢导致以呕吐为主要病作用机制：刺激呕吐中枢导致以呕吐为主要病症的食物中毒症的食物中毒第十四页，共四十六页。葡萄球菌葡萄球菌(p to qi jn)溶素溶素staphylolysinn溶素溶素n损伤损伤(snshng)细胞膜的毒素细胞毒素细胞膜的毒素细胞毒素n细胞毒素细胞毒素n攻击中性粒细胞和巨噬细胞攻击中性粒细胞和巨噬细胞n抵抗宿主吞噬细胞，增强细菌侵袭力抵抗宿主吞噬细胞，增强细菌侵袭力杀白细胞素杀白细胞素leukocidin第十五页，共四十六页。所致(su zh)疾病n化脓性炎症化脓性炎症(ynz

7、hng)q局部皮肤：疖、痈、毛囊炎、伤口化脓等局部皮肤：疖、痈、毛囊炎、伤口化脓等q脏器：心内膜炎、脑膜炎脏器：心内膜炎、脑膜炎q全身：败血症、脓毒血症全身：败血症、脓毒血症第十六页，共四十六页。n毒素性疾病毒素性疾病q食物中毒食物中毒(shwzhngd)q烫伤样皮肤综合征烫伤样皮肤综合征(SSSS)q毒性休克综合征毒性休克综合征(TSS)n葡萄球菌性肠炎葡萄球菌性肠炎第十七页，共四十六页。凝固酶阴性凝固酶阴性(ynxng)葡萄球菌葡萄球菌CNSn泌尿系感染泌尿系感染(gnrn)n细菌性心内膜炎细菌性心内膜炎n败血症败血症第十八页，共四十六页。金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌(p to qi jn

8、)第十九页，共四十六页。生物学特性生物学特性-菌体形态菌体形态(xngti)及培养特征及培养特征n革兰氏阳性球菌，直径为革兰氏阳性球菌，直径为0.8-1.0微米微米(wim)，镜检时呈单个、成对、四联或不规那么的簇，镜检时呈单个、成对、四联或不规那么的簇群；群；n无芽孢，不运动；无芽孢，不运动；n兼性厌氧菌，在好氧条件下生长最好；兼性厌氧菌，在好氧条件下生长最好；n可在可在15%氯化钠和氯化钠和40%胆汁中生长胆汁中生长第二十页，共四十六页。第二十一页，共四十六页。生物学特性-菌体形态(xngti)及培养特征大多数菌株能生长在6.5-46之间最适温度30-37能在pH4.2-9.3之间生长最适

9、pH为7.0-7.5；大多数菌株产生类胡罗卜素，使细胞(xbo)团呈现出深橙色到浅黄色，色素的产生取决于生长的条件，而且在单个菌株中可能也有变化第二十二页，共四十六页。生物学特性生物学特性(txng)-菌体形态及培养特征菌体形态及培养特征n好氧生长的细胞产生接触好氧生长的细胞产生接触(jich)酶；酶；n产生蛋白酶、脂肪酶、磷脂酶、脂酶和溶菌酶，产生蛋白酶、脂肪酶、磷脂酶、脂酶和溶菌酶，大多数菌株可水解天然的动物蛋白，例如血红大多数菌株可水解天然的动物蛋白，例如血红蛋白、纤维蛋白、卵白、酪朊和多肽类如明胶，蛋白、纤维蛋白、卵白、酪朊和多肽类如明胶，水解脂类、吐温类和磷脂蛋白质，并释放脂肪水解脂

10、类、吐温类和磷脂蛋白质，并释放脂肪酸；酸；n所有的毒株产生所有的毒株产生凝固酶凝固酶，人和动物来源的菌株，人和动物来源的菌株通常可凝固兔、人、马和猪的血浆。通常可凝固兔、人、马和猪的血浆。第二十三页，共四十六页。致病性致病性n金黄色葡萄球菌为条件致病菌，菌株致病力的强弱主要取决于其产生的毒素和侵金黄色葡萄球菌为条件致病菌，菌株致病力的强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶：袭性酶：na.溶血素：外毒素，分溶血素：外毒素，分、四种，能损伤血小板，破坏溶酶体，引起四种，能损伤血小板，破坏溶酶体，引起肌体局部缺血和坏死；肌体局部缺血和坏死；nb.杀白细胞素：可破坏人的白细胞和巨噬细胞；杀白细胞素：可破

11、坏人的白细胞和巨噬细胞；nc.血浆凝固酶：当金黄色葡萄球菌侵入人体血浆凝固酶：当金黄色葡萄球菌侵入人体(rnt)时，该酶使血液或血浆中时，该酶使血液或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体外表或凝固，阻碍吞噬细胞的吞噬作用。葡萄球菌形成的的纤维蛋白沉积于菌体外表或凝固，阻碍吞噬细胞的吞噬作用。葡萄球菌形成的感染易局部化与此酶有关；感染易局部化与此酶有关；nd.脱氧核糖核酸酶：金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶能耐受高温，可脱氧核糖核酸酶：金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶能耐受高温，可用来作为依据鉴定金黄色葡萄球菌；用来作为依据鉴定金黄色葡萄球菌；ne.肠毒素：金黄色葡萄球菌能产生数种引起急性胃肠炎的蛋白

12、质性肠毒素，肠毒素：金黄色葡萄球菌能产生数种引起急性胃肠炎的蛋白质性肠毒素，分为分为A、B、C、D、E五种。五种。第二十四页，共四十六页。致病性致病性 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌(ptoqijn)是人类是人类化脓感染化脓感染中最常见中最常见的病原菌，临床表现多的病原菌，临床表现多种多样，可引起局部化种多样，可引起局部化脓感染，也可引起肺炎、脓感染，也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等，伪膜性肠炎、心包炎等，甚至败血症、脓毒症等甚至败血症、脓毒症等全身感染全身感染。第二十五页，共四十六页。致病性致病性葡萄球菌性食物中毒是葡萄球菌肠毒素所引起的疾病，可引发不同程度的急性胃肠炎病症，恶心、呕吐最为突

13、出而且普遍(pbin)，腹痛、腹泻次之。当金黄色葡萄球菌污染了含淀粉及水分较多的食品，如牛奶和奶制品、肉、蛋等，在温度条件适宜时，经8-10小时即可相当数量的肠毒素。第二十六页，共四十六页。分布分布(fnb)n在自然界中广泛存在，空气、水、灰尘及人和动物的排泄物在自然界中广泛存在，空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。中都可找到。n作为人和动物的常见病原菌，其主要存在于人和动物的鼻腔、作为人和动物的常见病原菌，其主要存在于人和动物的鼻腔、咽喉、头发上，咽喉、头发上，50%以上健康人的皮肤上都有金黄色葡萄球以上健康人的皮肤上都有金黄色葡萄球菌存在。因而，食品受其污染的时机很多。菌存在。因而

14、，食品受其污染的时机很多。n传播媒介为被该菌污染的食品，主要为淀粉类传播媒介为被该菌污染的食品，主要为淀粉类(如剩饭、米面、如剩饭、米面、粥等粥等)、牛乳及乳制品，以及鱼、肉、蛋类等。被污染的食物、牛乳及乳制品，以及鱼、肉、蛋类等。被污染的食物在室温在室温20-22放置放置5小时以上时，病菌小时以上时，病菌(bngjn)大量繁殖，大量繁殖，并产生肠毒素。并产生肠毒素。第二十七页，共四十六页。葡萄球菌葡萄球菌(p to qi jn)皮肤感染皮肤感染第二十八页，共四十六页。流行病学流行病学(li xn bn xu)n季节分布，多见于春夏季；季节分布，多见于春夏季；n中毒食品种类多，如奶、肉、蛋、鱼

15、及其制品。中毒食品种类多，如奶、肉、蛋、鱼及其制品。此外此外(cwi)，剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引起，剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引起的中毒事件也有报道。上呼吸道感染患者鼻腔的中毒事件也有报道。上呼吸道感染患者鼻腔带菌率带菌率83%，所以人畜化脓性感染部位常成为，所以人畜化脓性感染部位常成为污染源。污染源。第二十九页，共四十六页。流行病学流行病学(li xn bn xu)金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌(ptoqijn)肠毒素是肠毒素是个世界性卫生问题，在美国由金黄色葡萄球菌个世界性卫生问题，在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒肠毒素引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒

16、的的33%，加拿大那么更多，占，加拿大那么更多，占45%，我国每年，我国每年发生的此类中毒事件也非常多。发生的此类中毒事件也非常多。第三十页，共四十六页。流行病学流行病学(li xn bn xu)肠毒素形成条件：肠毒素形成条件：n存放温度，在存放温度，在37C内，温度越高，产毒时间内，温度越高，产毒时间越短；越短；n存放地点，通风不良存放地点，通风不良(bling)氧分压低易形成肠毒氧分压低易形成肠毒素；素；n食物种类，含蛋白质丰富，水分多，同时含一食物种类，含蛋白质丰富，水分多，同时含一定量淀粉的食物，肠毒素易生成。定量淀粉的食物，肠毒素易生成。第三十一页，共四十六页。耐受力耐受力n几乎所有

17、的消毒试剂以及热加工过程对金黄色几乎所有的消毒试剂以及热加工过程对金黄色葡萄球菌都有严重的破坏作用葡萄球菌都有严重的破坏作用n肠毒素可耐受肠毒素可耐受10030分钟不被破坏。分钟不被破坏。n对于加工过的食品或食品加工设备对于加工过的食品或食品加工设备(shbi)而言，而言，此菌或其肠毒素的存在通常作为卫生条件差的此菌或其肠毒素的存在通常作为卫生条件差的一种指标。一种指标。第三十二页，共四十六页。污染污染(wrn)的控制的控制n防止金黄色葡萄球菌污染食品防止金黄色葡萄球菌污染食品n防止带菌人群对各种食物的污染：定期对生产防止带菌人群对各种食物的污染：定期对生产加工人员进行健康检查，患局部化脓性感

18、染加工人员进行健康检查，患局部化脓性感染如疥疮、手指化脓等、上呼吸道如疥疮、手指化脓等、上呼吸道(shnghxdo)感染如鼻窦炎、化脓性肺炎、感染如鼻窦炎、化脓性肺炎、口腔疾病等的人员要暂时停止其工作或调换口腔疾病等的人员要暂时停止其工作或调换岗位。岗位。第三十三页，共四十六页。污染污染(wrn)的控制的控制n防止金黄色葡萄球菌污染防止金黄色葡萄球菌污染(wrn)食品食品 n防止金黄色葡萄球菌对防止金黄色葡萄球菌对奶及其制品奶及其制品的污染：如的污染：如牛奶厂要定期检查奶牛的乳房，不能挤用患化牛奶厂要定期检查奶牛的乳房，不能挤用患化脓性乳腺炎的牛奶；奶挤出后，要迅速冷至脓性乳腺炎的牛奶；奶挤出

19、后，要迅速冷至-10以下，以防毒素生成、细菌繁殖。奶制品以下，以防毒素生成、细菌繁殖。奶制品要以消毒牛奶为原料，注意低温保存。要以消毒牛奶为原料，注意低温保存。第三十四页，共四十六页。污染污染(wrn)的控制的控制n防止金黄色葡萄球菌污染防止金黄色葡萄球菌污染食品食品n对对肉制品肉制品加工厂，患局部化脓感染的禽、畜尸加工厂，患局部化脓感染的禽、畜尸体应除去病变部位，经高温或其他适当体应除去病变部位，经高温或其他适当(shdng)方方式处理后进行加工生产。式处理后进行加工生产。第三十五页，共四十六页。污染污染(wrn)的控制的控制n防止金黄色葡萄球菌防止金黄色葡萄球菌肠毒素肠毒素的生成的生成n应

20、在低温和通风良好的条件下贮藏食物，以防应在低温和通风良好的条件下贮藏食物，以防肠毒素形成；肠毒素形成；n在气温高的春夏季，食物置冷藏或通风阴凉地在气温高的春夏季，食物置冷藏或通风阴凉地方也不应超过方也不应超过6小时小时(xiosh)，并且食用前要彻底加，并且食用前要彻底加热。热。第三十六页，共四十六页。检测检测(jin c)步骤步骤-增菌增菌n利用金黄色葡萄球菌耐盐的特性可耐受利用金黄色葡萄球菌耐盐的特性可耐受(naishu)15%的氯化钠，用含的氯化钠，用含10%氯化钠的胰氯化钠的胰酪胨大豆肉汤增菌。酪胨大豆肉汤增菌。第三十七页，共四十六页。检测步骤(bzhu)-别离n血平板：金黄色葡萄球菌

21、可以产生溶血素，因此在血平板上产生明显的溶血环。n血平板上其典型菌落呈金黄色，有时(yush)也为白色，大而突起，圆形，不透明，外表光滑，有溶血圈。第三十八页，共四十六页。检测步骤(bzhu)-别离nBP平板：n胰蛋白胨、牛肉膏和酵母膏提供碳源、氮源、硫、维生素和痕量矿物元素n丙酮酸钠是一种生长促进剂n亚碲酸盐对除金黄色葡萄球外的其他能分解卵黄的菌株有毒性，并使菌落(jnlu)产生黑色n卵黄提供营养和有利于观察卵磷脂环n甘氨酸和氯化锂对金黄色葡萄球菌以外的其它菌株有抑制作用。第三十九页，共四十六页。检测步骤(bzhu)-别离n在BP平板上其典型菌落为：圆形，光滑突起，湿润，直径2-3mm，颜色

22、呈灰色到黑玉色，边缘常为淡色米黄色或灰白色略带灰色或黄色的白色，周围(zhuwi)为一混浊带，在其外缘常有一透明圈。用接种针接触菌落似有黄油树胶的粘稠感。n偶然会遇到不分解脂肪菌株，除无混浊带及透明圈外，其他外观根本相同。n长期保存的冷冻或枯燥食品中所别离的菌落，其黑色常较典型菌落淡些，且外观可能粗燥，质地较枯燥。第四十页，共四十六页。B-P平板(pngbn)第四十一页，共四十六页。检测步骤(bzhu)-鉴定n金黄色葡萄球菌(p to qi jn)可以产生凝固酶，因此对其鉴别的主要实验是测定其凝固酶。n对于凝固不完全的菌株，可以通过一些其他实验来进一步确认，例如：厌氧葡萄糖发酵、溶葡萄球菌酶敏

23、感性实验、耐热核酸酶实验等。n所有这些实验不能作为鉴别其产毒与否的依据。第四十二页，共四十六页。25g样品样品(yngpn)+225ml 生理盐水生理盐水 5mL样品样品(yngpn)匀液匀液1:10+50mL胰酪胨大豆肉汤胰酪胨大豆肉汤血平板血平板(pngbn)36 1 24hr 镜镜 检检 营养肉汤营养肉汤血浆凝固酶血浆凝固酶实验实验 报告结果报告结果 定性定性检测检测36 1 24hr 36 1 24hr 36 1 6hr BP平板平板第四十三页，共四十六页。25g样品样品(yngpn)+225ml 生理盐水生理盐水 选三个连续梯度，每个梯度各取选三个连续梯度，每个梯度各取3mL参加参加

24、(jir)3管胰酪胨大豆肉汤管胰酪胨大豆肉汤将有生长的管划线将有生长的管划线(hu xin)接种接种36 1 48hr 镜镜 检检 营养肉汤营养肉汤血浆凝固酶血浆凝固酶实验实验 报告结果报告结果 MPN/g(mL)定量定量检测检测MPN法法36 1 48hr 36 1 24hr 36 1 6hr 适用于检测可能含有适用于检测可能含有适用于检测可能含有适用于检测可能含有少量少量少量少量金黄色葡萄球菌，金黄色葡萄球菌，金黄色葡萄球菌，金黄色葡萄球菌，却带有却带有却带有却带有大量竞争菌大量竞争菌大量竞争菌大量竞争菌的样的样的样的样品品品品梯度稀释梯度稀释 第四十四页，共四十六页。25g样品样品(yn

25、gpn)+225ml 生理盐水生理盐水 选三个连续梯度，每个梯度分别取选三个连续梯度，每个梯度分别取1mL接种之至外表枯燥接种之至外表枯燥(gnzo)的的BP平板如平板如0.4mL，0.3mL，0.3mL平板平板(pngbn)计数分别记录每种计数分别记录每种类型的菌落数类型的菌落数36 1 48hr 镜镜 检检 营养肉汤营养肉汤血浆凝固酶实验血浆凝固酶实验 报告结果报告结果 金葡菌数金葡菌数/g(mL)定量定量检测检测平板法平板法每种类型至少选取一个菌落每种类型至少选取一个菌落 36 1 24hr 36 1 6hr 适用于检测金黄色葡萄球菌适用于检测金黄色葡萄球菌适用于检测金黄色葡萄球菌适用于

26、检测金黄色葡萄球菌数不小于数不小于数不小于数不小于10/g10/gmLmL的食的食的食的食品品品品梯度稀释梯度稀释 第四十五页，共四十六页。内容(nirng)总结葡萄球菌病。SPAstaphylococcal protein A。作用机制：刺激呕吐中枢导致以呕吐为主要病症的食物中毒。金黄色葡萄球菌为条件致病菌，菌株致病力的强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶：。b.杀白细胞素：可破坏人的白细胞和巨噬细胞。上呼吸道感染患者鼻腔带菌率83%，所以人畜化脓性感染部位常成为污染源。亚碲酸盐对除金黄色葡萄球外的其他能分解卵黄(lunhung)的菌株有毒性，并使菌落产生黑色。梯度稀释第四十六页，共四十六页。