土壤中分解尿素的细菌的分离与记数maomao.pptx

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1、 涂布平板的所有操作都应在火焰附涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第菌操作要求，想一想，第2步应如何进行步应如何进行无菌操作？无菌操作？问题讨论问题讨论第1页/共75页 涂布平板的所有操作都应在火焰附涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第菌操作要求，想一想，第2步应如何进行步应如何进行无菌操作？无菌操作？应从操作的各个细节保证应从操作的各个细节保证“无菌无菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、

2、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。精灯火焰周围等等。问题讨论问题讨论第2页/共75页微生物的恒温培养微生物的恒温培养微生物的恒温培养微生物的恒温培养第3页/共75页微生物的恒温培养微生物的恒温培养第4页/共75页菌种的保存菌种的保存1.临时保藏临时保藏：接种到固体斜面培接种到固体斜面培养基，菌落长成后置养基，菌落长成后置于于4冰箱保存。冰箱保存。2.长期保存长期保存：甘油冷冻管藏法甘油冷冻管藏法第5页/共75页四、课题成果评价四、课题成果评价 （一）培养基的制作是否合格（一）培养基的制作是否合格 如果未接种的培养基在恒温箱中如果未接种的

3、培养基在恒温箱中保温保温12 d后无菌落生长，说明培养后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新基的制备是成功的，否则需要重新制备。制备。第6页/共75页（二）接种操作是否符合无菌要求（二）接种操作是否符合无菌要求 如果培养基上生长的菌落的颜色、如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要菌落的特点，则说明接种操作是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中，无菌操作还未达到则说明接种过程中，无菌操作还未达到要求，需要分析原因，再次练习。要求，需要分

4、析原因，再次练习。第7页/共75页（三）是否进行了及时细致的观察与记录（三）是否进行了及时细致的观察与记录 培养培养12 h与与24 h后的大肠杆菌菌落的后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同，及时观察记录的同学大小会有明显不同，及时观察记录的同学会发现这一点，并能观察到其他一些细微会发现这一点，并能观察到其他一些细微的变化。这一步的要求主要是培养学生良的变化。这一步的要求主要是培养学生良好的科学态度与习惯。好的科学态度与习惯。第8页/共75页第9页/共75页尿素尿素CO(NHCO(NH2 2)2 2 重要的农业氮肥。重要的农业氮肥。只能被土壤中细菌分解为只能被土壤中细菌分解为NHNH3 3才能被

5、植物才能被植物吸收利用吸收利用 CO(NHCO(NH2 2)2 2+H+H2 2O COO CO2 2+2NH+2NH3 3细菌脲酶细菌脲酶一、课题背景第10页/共75页两个主要目的：两个主要目的：(1)从土壤中分离出能够分解尿从土壤中分离出能够分解尿素的细菌；素的细菌；(2)统计每克土壤样品中究竟含统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌。有多少这样的细菌。第11页/共75页二、研究思路二、研究思路 提出的问题提出的问题 如何寻找耐高温的酶？如何寻找耐高温的酶？解决问题的思路解决问题的思路 寻找耐高温环境；寻找耐高温环境；原理原理 高温淘汰其他菌，选出耐高温细菌，高温淘汰其他菌，选出耐高温细

6、菌，耐高温菌种提取耐高温酶。耐高温菌种提取耐高温酶。第12页/共75页水生耐热细菌水生耐热细菌Taq(Thermus aquaticus)耐高温的耐高温的Taq DNA聚合酶聚合酶美国微生物学科布鲁克（美国微生物学科布鲁克（T.Brock)1966年发现耐热细菌年发现耐热细菌研究思路研究思路（一）筛选菌株（一）筛选菌株第13页/共75页 要分离一种微生物，必须根据该微生物的特点，包括营养、生理、生长条件等；方法：抑制大多数微生物的生长 促进目的菌株的生长结果：培养一定时间后，该菌数量上升，再通过平板稀释等方法对它进行纯化培养分离。实验室中微生物的筛选原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括

7、营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。第14页/共75页尿素分子的尿素分子的立体结构立体结构CO(NH2)2+H2O CO2+2NH3脲脲 酶酶分解尿素的细菌分解尿素的细菌:第15页/共75页（一）筛选菌株（一）筛选菌株KHKH2 2POPO4 4 1.4g 1.4g NaHPO NaHPO4 4 2.1g 2.1g MgSO MgSO4 4H H2 2O 0.2gO 0.2g 葡萄糖葡萄糖 10.0g10.0g 尿素尿素 1.0g1.0g 琼脂琼脂 15.0g15.0g 将上述物质溶解后，将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到用蒸馏水定容到1000mL1000mL。该培养基的配方中，

8、为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是什么物质？此配方能否筛选出产生脲酶的细菌？为什么？碳源：葡萄糖、尿素氮源：尿素能。只有产生脲酶的细菌能利用尿素作为氮源而生存。第16页/共75页在微生物学中，将允许特定种在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。其他种类微生物生长的培养基。选择培养基选择培养基第17页/共75页背景知识背景知识测定微生物数量的方法：测定微生物数量的方法：第18页/共75页1直接计数法：直接计数法：最常用最常用显微镜直接计数法显微镜直接计数法。测定微生物数量的方法：测定微生物数量的方法：背景知识背景知识第1

9、9页/共75页1 1、显微镜直接计数：、显微镜直接计数：利用利用血球计数板血球计数板(血细胞计数板血细胞计数板），在显微镜下在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。计算一定容积里样品中微生物的数量。.统计菌落数目：统计菌落数目：不能区分死菌与活菌；不能区分死菌与活菌；不适于对运动细菌的计数；不适于对运动细菌的计数；需要相对高的细菌浓度；需要相对高的细菌浓度；个体小的细菌在显微镜下难以观察；个体小的细菌在显微镜下难以观察；缺点：缺点：第20页/共75页优点：优点：设备简单、能观察微生物的形设备简单、能观察微生物的形态特征。态特征。第21页/共75页2间接计数法：间接计数法：最常用最常用稀释平

10、板计数法稀释平板计数法。第22页/共75页（二）统计菌落数目（二）统计菌落数目第23页/共75页（二）统计菌落数目（二）统计菌落数目统计菌落数目的理论依据：统计菌落数目的理论依据：当样品的稀释度足够高当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。因此，恰当的样品稀释液中的一个活菌。因此，恰当的稀释度是成功地统计菌落数目的关键。为稀释度是成功地统计菌落数目的关键。为了保证结果准确，通常将几个稀释度下的了保证结果准确，通常将几个稀释度下的菌液都涂布在平板上，培养后再选择菌落菌液都涂布在平板上，培养后再选择菌落数在数在30300的

11、平板进行计数。的平板进行计数。第24页/共75页第25页/共75页每克样品中的菌株数每克样品中的菌株数=(CV)MC：某一稀释度下平板上生长的平均：某一稀释度下平板上生长的平均 菌落数菌落数V：涂布平板时所用的稀释液的体积：涂布平板时所用的稀释液的体积 (ml)M：稀释倍数：稀释倍数第26页/共75页1.某同学在稀释倍数为某同学在稀释倍数为106的培养基的培养基中测得平板上菌落数的平均数为中测得平板上菌落数的平均数为234，那，那么每克样品中的菌落数是（涂布平板时么每克样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为所用稀释液的体积为0.1ml）()A.2.34108B.2.34109C.234

12、D.23.4 练一练练一练第27页/共75页统计的菌落往往统计的菌落往往比活菌的实际数目低。比活菌的实际数目低。这是因为当两个或多这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。因此结果一般用菌落数而不是一个菌落。因此结果一般用菌落数而不是活菌数来表示。活菌数来表示。注意：注意：第28页/共75页 两位同学用稀释涂布平板法测定两位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数。在对应稀释倍同一土壤样品中的细菌数。在对应稀释倍数为数为106的培养基中，得到以下两种统计的培养基中，得到以下两种统计结果。结果。1.第一位同学在该浓度下涂布了一个第一

13、位同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为平板，统计的菌落数为230。2.第二位同学在该浓度下涂布了三个第二位同学在该浓度下涂布了三个平板，统计的菌落数分别为平板，统计的菌落数分别为21、212和和256，该同学以这三个平板菌落数的平均值，该同学以这三个平板菌落数的平均值163作为统计结果。作为统计结果。实例实例1第29页/共75页你认为哪位同学的结果更接近真你认为哪位同学的结果更接近真实值？这两位同学的实验需要改进吗实值？这两位同学的实验需要改进吗？如果需要，如何改进？如果需要，如何改进？?第30页/共75页你认为哪位同学的结果更接近真你认为哪位同学的结果更接近真实值？这两位同学的实验需

14、要改进吗实值？这两位同学的实验需要改进吗？如果需要，如何改进？如果需要，如何改进？第一位同学只涂布了一个平板，第一位同学只涂布了一个平板，没有设置重复组，因此结果不具有说没有设置重复组，因此结果不具有说服力。第二位同学考虑到设置重复组服力。第二位同学考虑到设置重复组的问题，涂布了的问题，涂布了3个平板，但是，其中个平板，但是，其中1个平板的计数结果与另个平板的计数结果与另2个相差太远，说个相差太远，说明在操作过程中可能出现了错误，因此，明在操作过程中可能出现了错误，因此，不能简单地将不能简单地将3个平板的计数值用来求平个平板的计数值用来求平均值。均值。?第31页/共75页 因因此此，这这两两位

15、位同同学学的的实实验验需需要要改改进进，在在设设计计实实验验时时，一一定定要要涂涂布布至至少少3个个平平板板，作作为为重重复复组组，才才能能增增强强实实验验的的说说服服力力与与准准确确性性。在在分分析析实实验验结结果果时时，一一定定要要考考虑虑所所设设置置的的重重复复组组的的结结果果是是否否一一致致，结结果果不不一一致致，意意味味着着操操作作有有误误，需要重新实验。需要重新实验。说明设置重复组的重要性。说明设置重复组的重要性。第32页/共75页注意事项为了保证结果准确，一般选择菌落数在3030300300的平板上进行计数。为使结果接近真实值可将同一稀释度加到三个或三个以上的平板中，经涂布，培养

16、计算出菌落平均数。统计的菌落往往比活菌的实际数目低。第33页/共75页 在做本课题的实验时，在做本课题的实验时，A同学从同学从对应对应106倍稀释的培养基中筛选出大约倍稀释的培养基中筛选出大约150个菌落。但是，其它同学在同样的稀释度个菌落。但是，其它同学在同样的稀释度下只选择出大约下只选择出大约50个菌落。个菌落。其他同学认为其他同学认为A同学的结果有问题。同学的结果有问题。他们分析可能是他们分析可能是A同学的培养基被杂菌污同学的培养基被杂菌污染了，或者培养基中混入了其他含氮物质，染了，或者培养基中混入了其他含氮物质，因而导致不能分解尿素的细菌也能在该培因而导致不能分解尿素的细菌也能在该培养

17、基上生长。养基上生长。实例实例2第34页/共75页但是，但是，A同学确信自己的实验操同学确信自己的实验操作准确无误，与其他同学的结果之所作准确无误，与其他同学的结果之所以不相同，是因为自己所选用的土壤以不相同，是因为自己所选用的土壤样品不同。样品不同。第35页/共75页但是，但是，A同学确信自己的实验操同学确信自己的实验操作准确无误，与其他同学的结果之所作准确无误，与其他同学的结果之所以不相同，是因为自己所选用的土壤以不相同，是因为自己所选用的土壤样品不同。但是，样品不同。但是，A同学在设计实验同学在设计实验的时候并没有设置对照，因而此时也的时候并没有设置对照，因而此时也拿不出令同学们信服的证

18、据。拿不出令同学们信服的证据。你能通过设置对照，帮助你能通过设置对照，帮助A同学同学排除上述两个可能影响实验结果的因排除上述两个可能影响实验结果的因素吗？素吗？第36页/共75页一是由于土样不同，二是由于培养一是由于土样不同，二是由于培养基污染或操作失误。基污染或操作失误。究竟是哪个原因，究竟是哪个原因，可以通过实验来证明。可以通过实验来证明。第37页/共75页一是由于土样不同，二是由于培养一是由于土样不同，二是由于培养基污染或操作失误。基污染或操作失误。究竟是哪个原因，究竟是哪个原因，可以通过实验来证明。可以通过实验来证明。一种方案：一种方案：可以由其他同学用与可以由其他同学用与A同学一样的

19、土样进行实验同学一样的土样进行实验,如果结果与如果结果与A同学一致，则证明同学一致，则证明A无误无误;如果结果如果结果不同，则证明不同，则证明A同学存在操作失误或培同学存在操作失误或培养基的配制有问题。养基的配制有问题。第38页/共75页另一种方案：另一种方案：将将A同学配制的培养基在不加土同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养，作为空白对照，样的情况下进行培养，作为空白对照，以证明培养基是否受到污染。以证明培养基是否受到污染。通过这个事例可以看出，实验结通过这个事例可以看出，实验结果要有说服力，果要有说服力，对照的设置是必不可对照的设置是必不可少的。少的。第39页/共75页（三）设置对照

20、（三）设置对照 1 1、设置对照的目的：、设置对照的目的：排除实验组中非测试因素对实验结排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。果的影响，提高实验结果的可信度。对照实验对照实验是指除了被测试的条件外，其他条件都相同的实验。满足该条件的称为对照组，未满足该条件的称为实验组。第40页/共75页（三）设置对照（三）设置对照判断培养基中是否有杂菌污染判断培养基中是否有杂菌污染：将未接种的培养基同时进行培养。将未接种的培养基同时进行培养。判断选择培养基是否具有筛选作用：判断选择培养基是否具有筛选作用：完全培养基（营养成分齐全）接种后培养完全培养基（营养成分齐全）接种后培养观察菌落数

21、目。观察菌落数目。主要目的是排除实验组中非测试因素对实验主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。结果的影响，提高实验结果的可信度。第41页/共75页实验设计实验设计土壤中分解尿素的细菌的分离与记数土壤中分解尿素的细菌的分离与记数第42页/共75页土壤中某样品细菌的分离与计数土壤中某样品细菌的分离与计数 从肥沃、湿润的土壤中取样。先从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土铲去表层土3cm左右，再取样，将样左右，再取样，将样品装入事先准备好的信封中。品装入事先准备好的信封中。实验步骤实验步骤1土壤取样土壤取样第43页/共75页从从肥肥沃沃、酸酸碱碱度度接接近近中中性性

22、的的湿湿润润土土壤壤中中取取样样。先先铲铲去去表表层层土土3 3 cmcm左左右右，再再取取样样，将将样样品品装装入入事事先先准准备备好的信封中。好的信封中。“微生物的天然培养基”一 土壤取样数量最大、种类最多大约70%90%70%90%是细菌取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。第44页/共75页 制备制备5个牛肉膏蛋白胨培养基和个牛肉膏蛋白胨培养基和15个选择培养基。个选择培养基。实验步骤实验步骤2.制备培养基制备培养基第45页/共75页怎样证明此培养基具有选择性呢？怎样证明此培养基具有选择性呢？以尿素为以尿素为唯一氮源唯一氮源

23、的培养基的培养基牛肉膏牛肉膏蛋白胨蛋白胨培养基培养基是是分离分离尿素尿素细菌细菌判断该判断该培养基培养基有无选有无选择性择性实验组实验组对照组对照组培养基类型培养基类型是否是否接种接种目的目的结果结果只生长尿只生长尿素细菌素细菌生长多种生长多种微生物微生物是是第46页/共75页 制备制备5个牛肉膏蛋白胨培养基和个牛肉膏蛋白胨培养基和15个选择培养基。个选择培养基。注：每个稀释度下需要注：每个稀释度下需要3个选择培个选择培养基，养基，1个牛肉膏蛋白胨培养基。个牛肉膏蛋白胨培养基。稀释倍数为稀释倍数为103107。实验步骤实验步骤2.制备培养基制备培养基第47页/共75页为什么分离不同的微生物为什

24、么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？测定土要采用不同的稀释度？测定土壤中细菌的总量和测定土壤中壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围相同吗？用的稀释范围相同吗？第48页/共75页 因为土壤中各类微生物的数量因为土壤中各类微生物的数量(单位：单位：株株/kg)是不同的，是不同的，例如在干旱土壤中的上例如在干旱土壤中的上层样本中：好氧及兼性厌氧细菌数约为层样本中：好氧及兼性厌氧细菌数约为2 185万，放线菌数约为万，放线菌数约为477万，霉菌数约为万，霉菌数约为23.1万。万。因此，为获得不同类型的微生物，因此，为获得不同类型的微生物，就需要按

25、不同的稀释度进行分离，就需要按不同的稀释度进行分离，同时还同时还应当有针对性地提供选择培养的条件。应当有针对性地提供选择培养的条件。第49页/共75页测定土壤中细菌的数量，一般选测定土壤中细菌的数量，一般选用用104、105和和106倍的稀释液进行平板倍的稀释液进行平板培养；测定放线菌的数量，一般选用培养；测定放线菌的数量，一般选用103、104和和105倍稀释；测定真菌的数倍稀释；测定真菌的数量，一般选用量，一般选用102、103和和104倍稀释。倍稀释。注：注：样品的稀释样品的稀释第50页/共75页 将将10g土样加入盛有土样加入盛有90mL无菌生理无菌生理盐水的锥形瓶中盐水的锥形瓶中,充

26、分摇匀，吸取上清液充分摇匀，吸取上清液1mL，转移至盛有，转移至盛有9mL水的无菌试管中，水的无菌试管中，依次等比稀释至依次等比稀释至107稀释度，并按照由稀释度，并按照由107至至103稀释度的顺序分别吸取稀释度的顺序分别吸取0.1mL进行进行平板涂布操作。按照浓度从低到高的顺平板涂布操作。按照浓度从低到高的顺序涂布平板，不必更换移液管。序涂布平板，不必更换移液管。实验步骤实验步骤3.微生物的培养与观察微生物的培养与观察第51页/共75页将涂布好的培养皿放在将涂布好的培养皿放在30下下培养。比较牛肉膏培养基和选择培培养。比较牛肉膏培养基和选择培养基中菌落的数量、形态等，并做养基中菌落的数量、

27、形态等，并做好记录。好记录。挑选选择培养基中不同形态的挑选选择培养基中不同形态的菌落接入含酚红培养基的斜面中，菌落接入含酚红培养基的斜面中，观察能否变红。观察能否变红。第52页/共75页不同种类的微生物，往往需要不不同种类的微生物，往往需要不同的培养温度和培养时间。细菌一般同的培养温度和培养时间。细菌一般在在3037的温度下培养的温度下培养12d；放线；放线菌一般在菌一般在2528的温度下培养的温度下培养57d；而霉菌一般在；而霉菌一般在2528的温度下培的温度下培养养34d。注：注：第53页/共75页一般来说，在一定的一般来说，在一定的培养条件下培养条件下(相同的培养相同的培养基、温度及培养

28、时间基、温度及培养时间)，同种微生物表现出稳定同种微生物表现出稳定的菌落特征。的菌落特征。第54页/共75页第55页/共75页第56页/共75页第57页/共75页第58页/共75页EMB培养基与大肠杆菌代谢产物培养基与大肠杆菌代谢产物产生紫色带金属光边的菌落产生紫色带金属光边的菌落第59页/共75页 当菌落数目稳定时，选取菌落数在当菌落数目稳定时，选取菌落数在30300的平板进行计数。在同一稀释度的平板进行计数。在同一稀释度下，至少对下，至少对3个平板进行重复计数，然个平板进行重复计数，然后求出平均值，并根据平板所对应的稀后求出平均值，并根据平板所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目。释度计算出

29、样品中细菌的数目。实验步骤实验步骤4.细菌的计数细菌的计数第60页/共75页每克土壤样品菌数每克土壤样品菌数=某稀释倍数的某稀释倍数的菌落平均数菌落平均数稀释倍数稀释倍数细菌培养时细菌培养时所用的稀释液体积所用的稀释液体积第61页/共75页一一无菌操作无菌操作1.取土用的小铁铲和盛土样的信封在取土用的小铁铲和盛土样的信封在使用前都需要灭菌。使用前都需要灭菌。2.应在火焰旁称取土壤。在火焰附近应在火焰旁称取土壤。在火焰附近将称好的土样倒入锥形瓶中，塞好棉塞。将称好的土样倒入锥形瓶中，塞好棉塞。3.在稀释土壤溶液的过程中，每一步在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁操作。都要在火焰旁操作。操作

30、提示操作提示第62页/共75页二二做好标记做好标记注明培养基种类、培养日期、平板注明培养基种类、培养日期、平板培养样品的稀释度等。培养样品的稀释度等。三三规划时间规划时间第63页/共75页四四.结果分析与评价结果分析与评价1.1.通过对照实验，若培养物有杂菌污染，通过对照实验，若培养物有杂菌污染，菌落数偏高；若培养物混入其他氮源，则菌落数偏高；若培养物混入其他氮源，则菌落形态多样，菌落数偏高，难以选择出菌落形态多样，菌落数偏高，难以选择出分解尿素的微生物。分解尿素的微生物。2.2.提示：选择每个平板上长有提示：选择每个平板上长有3030030300个个菌落的稀释倍计算每克样品的菌数最合适。菌落

31、的稀释倍计算每克样品的菌数最合适。同一稀释倍数的三个重复的菌落数不能相同一稀释倍数的三个重复的菌落数不能相差悬殊，如相差较大，表示实验不精确。差悬殊，如相差较大，表示实验不精确。第64页/共75页1.1.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌后，如果PHPH升高，指示剂将变红，说明该细菌能够分解尿素。2.2.测定饮水中大肠杆菌数量的方法是将一定体积的水用细菌过滤器过滤后，将滤膜放到 伊红-美蓝 培养基上培养，大肠杆菌菌落呈现黑色，通过记算得出水样中大肠杆菌的数量。五五.课外延伸课外延伸第65页/共75页（四）鉴定：筛选后必鉴定（四）鉴定：筛选后必鉴定鉴别培养基：不影响微生物鉴

32、别培养基：不影响微生物的生存的生存 酚红培养基：酚红培养基：鉴定分解尿素的细菌。鉴定分解尿素的细菌。原理：脲酶催化尿素分原理：脲酶催化尿素分解成氨解成氨培养基碱性增强培养基碱性增强 酚红变红酚红变红脲酶阳性脲酶阳性第66页/共75页课题延伸课题延伸pHpH升高升高指示剂（酚红）将变红指示剂（酚红）将变红第67页/共75页本课题知识小结本课题知识小结:第68页/共75页1.某同学在稀释倍数为某同学在稀释倍数为106的培养基的培养基中测得平板上菌落数的平均数为中测得平板上菌落数的平均数为234，那，那么每克样品中的菌落数是（涂布平板时么每克样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为所用稀释液的

33、体积为0.1ml）()A.2.34108B.2.34109C.234D.23.4 练一练练一练第69页/共75页1.某同学在稀释倍数为某同学在稀释倍数为106的培养基的培养基中测得平板上菌落数的平均数为中测得平板上菌落数的平均数为234，那，那么每克样品中的菌落数是（涂布平板时么每克样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为所用稀释液的体积为0.1ml）()A.2.34108B.2.34109C.234D.23.4 练一练练一练第70页/共75页2.用稀释涂布平板法来统计样品中用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目，其结果与实际值相比活菌的数目，其结果与实际值相比（）A.比实际值高比实际值

34、高B.比实际值低比实际值低C.和实际值一致和实际值一致D.比实际值可能高也可能低比实际值可能高也可能低第71页/共75页2.用稀释涂布平板法来统计样品中用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目，其结果与实际值相比活菌的数目，其结果与实际值相比（）A.比实际值高比实际值高B.比实际值低比实际值低C.和实际值一致和实际值一致D.比实际值可能高也可能低比实际值可能高也可能低第72页/共75页下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是A.KH2PO4、NA2HPO4、MgSO4.7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水葡萄糖、尿素、琼脂、水B.KH2PO4、NA2HPO4、MgSO

35、4.7H2O、葡萄糖、琼脂、水葡萄糖、琼脂、水C.KH2PO4、NA2HPO4、MgSO4.7H2O、尿素、琼脂、水尿素、琼脂、水D.KH2PO4、NA2HPO4、MgSO4.7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水练一练练一练第73页/共75页下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是A.KH2PO4、NA2HPO4、MgSO4.7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水葡萄糖、尿素、琼脂、水B.KH2PO4、NA2HPO4、MgSO4.7H2O、葡萄糖、琼脂、水葡萄糖、琼脂、水C.KH2PO4、NA2HPO4、MgSO4.7H2O、尿素、琼脂、水尿素、琼脂、水D.KH2PO4、NA2HPO4、MgSO4.7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水练一练练一练第74页/共75页感谢您的观看！第75页/共75页