僵蚕养殖与生产技术规范(T-GDATCM 0016—2022).pdf

《僵蚕养殖与生产技术规范(T-GDATCM 0016—2022).pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《僵蚕养殖与生产技术规范(T-GDATCM 0016—2022).pdf（13页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、团体标准僵蚕养殖与生产技术规范Technical Specifications for Bombyx BatryticatusCultivation and Production（完成时间：2022 年 9 月）T/GDATCM 001620222022-12-15 发布2023-03-15 实施广 东 省 中 药 协 会发 布ICS 11.120.99CCS C273T/GDATCM 00162022I目次前言.III引言.IV1 范围.12 规范性引用文件.13 术语和定义.14 规范性技术要素.2附录.6参 考 文 献.9T/GDATCM 00162022III前言本标准按照 GB/T1

2、.1-2020标准化工作导则第 1 部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本标准由广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所提出。本标准由广东省中药协会归口。本标准起草单位：广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所、广州中医药大学、广州汇标检测技术中心、广东农垦热带农业研究院有限公司、广州采芝林药业有限公司、广东省中医院（广东省中医药科学院）。本标准主要起草人：邢东旭、杨琼、廖森泰、邹宇晓、肖阳、李庆荣、庞道睿、詹若挺、陈林明、陈明文、丘小惠、黄志海、罗文英。T/GDATCM 00162022IV引言僵蚕为蚕蛾科昆虫家蚕Bombyx mori Linnaeus 45龄的幼虫感染（或人工接种）白

3、僵菌Beauveriabassiana(Bals.)Vuillant而致死的干燥体，是常用大宗动物类药材，具有息风止痉、祛风止痛、化痰散结等功效，主治肝风夹痰、惊痫抽搐、小儿急惊风、破伤风、中风口、风热头痛、目赤咽痛、风疹瘙痒、发颐痄腮等。僵蚕主产于广东、四川、广西、江苏、浙江和山东，主要来源于蚕农养蚕过程中个别感染白僵菌的家蚕所形成的副产品，质量参差不齐。而且，随着蚕病防治技术的提高，僵蚕产量日益受限。另外，市场上常以其它病蚕或未感染家蚕冒充僵蚕出售，用药的安全性和有效性无法保证。针对以上问题，开展了僵蚕人工养殖技术的探索，其核心技术包括家蚕品种和菌种优选、接种时期、接种菌液浓度、养蚕环境控

4、制、僵化处理及干燥方法等。僵蚕人工养殖技术已在广东茂名、湛江，四川南充、资阳等地示范和应用，但生产及管理较为粗放，缺乏相应的标准规程，制定该模式的养殖技术规程势在必行。T/GDATCM 001620221僵蚕养殖与生产技术规范1范围本标准规定了动物源中药材僵蚕养殖与生产技术规范，包括养殖场所、品种选择、养殖与生产技术规程、桑园和家蚕病虫害防治、质量技术要求、文件管理等要求。本标准适用于指导僵蚕养殖与生产质量控制全过程。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单

5、）适用于本文件。（1）中药材生产质量管理规范（2）GB/Z 250082010饲料和食品链的可追溯性体系设计与实施指南（3）2020年版中华人民共和国药典（4）NMPAB/T 10032019药品追溯系统基本技术要求（5）NY/T 1027 桑园用药技术规程（6）NY/T 1026-2006 养蚕用药技术规程3术语和定义下列术语和定义适用于本文件3.1家蚕又称蚕、桑蚕，属鳞翅目蚕蛾科，学名 Bombyx mori Linnaeus，是一种以桑叶为食的完全变态昆虫，一生经历卵、幼虫、蛹、成虫（蛾）四个阶段。3.2龄期表示家蚕幼虫期所处的某一个发育阶段。从蚕卵孵化到第一次蜕皮为1龄，以后每蜕皮一次

6、增加一个龄期，大多数家蚕品种蜕皮四次，5龄末期吐丝结茧。3.3起蚕刚蜕皮的蚕称为起蚕，此时家蚕外表皮尚未形成，体壁较薄。3.4桑树即桑，学名Morus alba L.，为桑科桑属落叶乔木。桑叶以卵形为主，是喂蚕的饲料。T/GDATCM 0016202223.5僵蚕为蚕蛾科昆虫家蚕Bombyx mori Linnaeus 45龄的幼虫感染（或人工接种）白僵菌Beauveria bassiana(Bals.)Vuillant而致死的干燥体。3.6白僵菌白僵菌Beauveria bassiana(Bals.)Vuillant是一种常见的昆虫病原真菌，分生孢子多为球形，能够穿透家蚕幼虫体壁诱发白僵病并

7、导致蚕体发病死亡。3.7蚕区利用桑园和养蚕设施专业从事家蚕养殖和蚕茧生产的区域。3.8僵死率家蚕在吐丝结茧前通过白僵菌感染引发白僵病死亡的数量占接种家蚕总量的比值，是反映僵蚕养殖成功率的重要指标。3.9僵化过程家蚕感染白僵菌死亡后，白僵菌利用蚕体营养物质继续生长繁殖，并对蚕体进行生物转化生成僵蚕药理活性成分的过程。3.10家蚕饲育车间家蚕14龄饲养的场所，此过程中家蚕未接种白僵菌，以桑叶为食正常生长发育。3.11接种车间家蚕从5龄起蚕接种白僵菌到发病死亡期间的饲养场所。3.12僵化车间家蚕死亡后继续僵化的场所。4规范性技术要素4.1 养殖场所4.1.1 僵蚕养殖场所应远离蚕区，避免白僵菌扩散污

8、染对种茧育和丝茧育家蚕饲养的影响。4.1.2 僵蚕养殖场所应当能满足家蚕饲养和桑园种植对土壤、环境空气和灌溉水等方面的各项要求。4.1.3 桑园边缘与僵蚕接种车间和僵化车间距离应在 2 km 以上，且桑园应选在所在地全年最大频率风向的上风侧。家蚕饲育车间和僵蚕接种车间、僵化车间合理分区，避免白僵菌对 14 龄家蚕饲育过程的感染。4.1.4 养殖场所选址范围内，企业至少完成一个生产周期僵蚕养殖，并有两个收获期僵蚕质量检测数据符合 4.5 项下质量标准。4.2 品种选择4.2.1 桑蚕品种桑蚕品种种源鉴定纯正，并且通过国家或省级审定。家蚕品种以所获得的僵蚕单条体质量大、浸出T/GDATCM 001

9、620223物等指标成分高为选择标准，同样情况下优先考虑当地主导家蚕品种。4.2.2 菌种白僵菌菌种应为家蚕体分离的球孢白僵菌。引进有菌种生产资质单位的母种或自行分离获得的母种，经培育繁殖和提纯复壮后获得优良菌株用于生产。白僵菌菌株筛选时，应以僵死率为首要指标，兼顾考虑菌株营养生长量和产孢量等生物学指标。4.3 养殖技术规程4.3.1 清洁消毒养蚕前、养蚕结束后，对蚕具、采桑用具及养殖场所进行全面清洗和消毒，对僵蚕养殖车间和僵化车间有针对性的重点消毒。根据消毒对象选择合适的消毒方法，科学使用优质蚕药，确保达到药物规定的剂量、温湿度和作用时间。4.3.2 家蚕饲养家蚕 13 龄切叶给桑，大蚕期以

10、桑叶育或条桑育饲养。每天给桑 23 次，做到良桑饱食。饲育过程中做好眠起处理，及时提青分批，淘汰迟眠蚕、弱小蚕和病死蚕。调节适宜的温湿度条件，并进行蚕体蚕座消毒。4.3.3 接种将 4 龄眠蚕转移到接种车间，5 龄起蚕时进行接种。用含 0.1%0.2%的吐温 80 水溶液进行菌液配制，接种菌液浓度通常为 1106个/mL5106个/mL，以接种后僵死率大于 90%且收获的僵蚕单条体质量较大为佳。使用农用喷雾器对蚕体进行喷洒接种，要求雾点细密，喷洒均匀，以蚕体见湿为宜，每万头家蚕菌液使用量约 500600 mL，保持蚕体体表湿润 30 min。4.3.4 接种后管理接种 30 min 后给桑，接

11、种后 48 h 内蚕房温度保持在 2528，湿度 85%以上，之后按正常大蚕饲育环境要求饲养。4.3.5 采收接种约 56 d 家蚕集中发病死亡，待蚕体硬化后开始采收，将病死僵蚕收集后移入僵化车间继续僵化。4.3.6 僵化僵化车间温度 2528，湿度 85%左右，待蚕体表面覆满白色孢子粉时湿度降低至 60%以下。僵化时间 5 d 以上，保证充分僵化。4.3.7 干燥将新鲜僵蚕单层摆放到烘箱的烘干盘内，每平方米摆放约10001200头僵蚕。烘干时首先通过9095 高温处理 50 min 以上使白僵菌孢子全部灭活，然后将温度调整到 6080 烘至水分含量到 13.0%以下。4.4 桑园和家蚕病虫害

12、防治T/GDATCM 0016202244.4.1 桑园和家蚕病虫害防治均采取预防为主、防治结合的综合防治措施，优先使用生物防治、农业和物理防控措施。4.4.2 桑园病虫害防治不得使用国家禁止在中药材生产上使用的农药，使用农药应符合NY/1027的规定。优先选择高效、低毒、低残留农药，依照不同药剂的残留期和目标病虫害的防治适期，适时用药，以确保养蚕原料桑叶的质量安全。4.4.3 家蚕饲养过程中科学使用消毒剂和治疗药物，养蚕用药符合 NY/T 1026 的规定，禁止使用国务院农业农村行政主管部门公布禁用的物质以及对人体具有直接或潜在危害的其它物质。4.4.4 遵守国务院畜牧兽医行政管理部门制定的

13、兽药安全使用规定。4.4.5 禁止使用国务院畜牧兽医行政管理部门规定禁止使用的药品和其它化合物。4.5 质量要求4.5.1 感官指标应符合表 1 要求。表 1 感官指标项目指标检验方法色泽表面灰黄色，被有白色粉霜状的气生菌丝和分生孢子随机抽取僵蚕样本50条放于白色瓷盘中，在自然光线下用目测法进行色泽、形态、杂质等项目的检验，用鼻嗅法检验滋味气味形态略呈圆柱形，多弯曲皱缩。长 25 cm，直径 0.50.7 cm。头部较圆，足 8 对，体节明显，尾部略呈二分歧状。质硬而脆，易折断，断面平坦，外层白色，中间有亮棕色或亮黑色的丝腺环 4 个气味气微腥滋味味微咸杂质正常视力下无明显可见杂质4.5.2

14、理化指标应符合表 2 要求。表 2 理化指标项目指标检验方法杂质不得过 1%中国药典2020 年版四部通则 2301 杂质检查法水分不得过 13.0%中国药典2020 年版四部通则 0832 水分测定法总灰分不得过 7.0%中国药典2020 年版四部通则 2302 灰分测定法酸不溶性灰分不得过 2.0%中国药典2020 年版四部通则 2302 灰分测定法黄曲霉毒素 B1每 1000g 不得过 3 g中国药典2020 年版四部通则 2351 真菌毒素测定法黄曲霉毒素总量（G2、G1、B2、B1）每 1000g 不得过 5 g中国药典2020 年版四部通则 2351 真菌毒素测定法浸出物不得少于

15、25.0%中国药典2020 年版四部通则 2201）醇溶性浸出物测定法的热浸法，用稀乙醇作溶剂T/GDATCM 0016202254.5.3 重金属指标应符合表 3 要求。表 3 重金属指标项目指标检验方法铅不得过 5 mg/kg中国药典2020 年版四部通则 2321 铅、镉、砷、汞、铜测定法 电感耦合等离子体质谱法镉不得过 1 mg/kg汞不得过 0.2 mg/kg砷不得过 2 mg/kg铜不得过 20 mg/kg4.6 文件管理4.6.1 僵蚕养殖主要记录内容应至少包括：家蚕品种、白僵菌菌株；饲养起始时间；桑叶或饲料用量；接种时间，接种菌液浓度，僵死时间，僵化时间；干燥方法；僵蚕产量。4

16、.6.2 文件分类管理，对僵蚕养殖规程中各内容记录需准确、完整。4.6.3 文件妥善保管，对于每个批次的养殖全过程信息至少保存 3 年。T/GDATCM 001620226附录（资料性）僵蚕养殖与生产技术关键点1 白僵菌孢子活力测定接种前对使用的白僵菌孢子粉进行活孢率检测，根据活孢率测定结果对病原活力进行评估，并在配制病原液时对其浓度进行校正。活孢率检测方法如下：用含 0.1%0.2%吐温 80 的水溶液配制 1107个/mL 的白僵菌孢子悬液，取 1 mL 孢子液滴入 9 mL 吐温 80 营养液中，恒温振荡培养 24 h，然后通过血球计数板统计孢子发芽数，计算活孢率。2 接种菌液浓度优选接

17、种菌液浓度对家蚕僵死率和发病整齐度有较大影响。接种菌液浓度越高，家蚕僵死率越高，并且死亡时间越集中，有利于规模化生产的批量操作。同时，接种菌液浓度对僵蚕外观和单条体质量有较大影响，通常接种菌液浓度大于 1107 个/mL 时收获的僵蚕明显皱缩干瘪，单条体质量降低（图 1）。因此，在僵蚕养殖前应根据家蚕品种和白僵菌菌株对接种菌液浓度进行优化，从僵蚕生产操作和僵蚕产量两方面考虑确定最佳接种菌液浓度。图 1 不同菌液浓度接种 5 龄起蚕收获僵蚕的外观比较3 接种后管理接种时期为 45 龄家蚕幼虫，以 5 龄起蚕最优，能够获得更高的僵死率和僵蚕产量。使用农用喷雾器对 5 龄起蚕进行喷洒接种（图 2），

18、要求雾点细密，喷洒均匀，以蚕体体表湿润为宜，每万头家蚕菌液使用量约 500600 mL。接种 30 min 后给桑（图 3），以保证病原孢子与蚕体的充分粘附。接种48 h 内蚕房温度控制在 2528，湿度 85%以上，以利于孢子发芽穿透家蚕体壁侵染家蚕，从而保证僵死率。T/GDATCM 001620227图 2 接种病原图 3 接种 30 min 后给桑4 僵化僵蚕化学成分的变化主要发生在僵化过程，僵化过程是僵蚕品质形成的关键时期（图 4）。因此，要调节好僵化过程的温度和湿度，促进白僵菌的生长繁殖和生物转化。僵化温度通常在 2528 之间，湿度 85%左右。待蚕体表面覆满白色孢子粉时（图 5）

19、，湿度降低至 60%以下。僵化时间 5 d 以上，以保证充分僵化。图 4 僵化不同时间僵蚕的外观变化图 5 僵化后僵蚕体表覆满白色孢子粉5 灭菌与干燥干燥是僵蚕产地加工中至关重要的步骤。在僵蚕规范化养殖中，应摒弃以往僵蚕石灰拌和干燥的方法，采用现代中药材干燥设备对僵蚕进行烘干处理。与其它中药材不同，新鲜僵蚕体表覆满气生菌丝和孢子粉，灭活不完全容易引起病原扩散。为提高僵蚕养殖的安全性，僵蚕干燥时应对白僵菌进行高温灭活处理。首先经 9095 高温处理 50 min 以上使白僵菌孢子全部灭活，然后 6080 烘至水分含量到 13.0%以下。干燥后的僵蚕外观及断面如图 6 所示，与市售僵蚕相比，规范化

20、养殖僵蚕个体较大，个体间均匀整齐，表面覆盖白色粉霜状的气生菌丝和分生孢子，质硬而脆，断面中间有明显的亮黑色或亮棕色丝腺环。T/GDATCM 001620228图 6 市售僵蚕（A，B）和规范化养殖僵蚕（C,D）干燥后的外观及断面比较T/GDATCM 001620229参 考 文 献1 邢东旭，李丽，廖森泰，等.一株感染家蚕的高致病性白僵菌的鉴定及在僵蚕生产中的应用J.蚕业科学，2014,40（5）:879-883.2 Dongxu Xing,Guanwang Shen,Qingrong Li,et al.Quality formation mechanism of stiffsilkworm,BombyxbatryticatususingUPLC-Q-TOF-MS-basedmetabolomicsJ.Molecules,2019,24,3780.（邢东旭，沈关望，李庆荣，等.基于 UPLC-Q-TOF-MS 代谢组学的僵蚕品质形成机理研究J.分子，2019，24：3780.）