枸杞叶及枸杞茶中总黄酮含量的测定(T-NAIA 0188—2023).pdf

《枸杞叶及枸杞茶中总黄酮含量的测定(T-NAIA 0188—2023).pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《枸杞叶及枸杞茶中总黄酮含量的测定(T-NAIA 0188—2023).pdf（5页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、 TB 团团 体体 标标 准准 T/NAIA 0188-2023 枸杞枸杞叶及枸杞叶及枸杞茶中茶中总总黄酮黄酮含量含量的的测定测定 Determination of total content of flavonoids in the wolfberry leaves and wolfberry tea 2023-03-01发布 2023-03-10实施 宁夏化学分析测试协会宁夏化学分析测试协会 发发 布布 ICS ICS 6565.0.02 20.0.0101 CCS B CCS B 3838 I 前 言 本文件按照 GB/T 1.1-2020 给出的规则起草。本文件由宁夏回族自治区药品检验

2、研究院（国家枸杞产品质量检验检测中心（宁夏）提出。本文件由宁夏化学分析测试协会归口。本文件起草单位：宁夏回族自治区药品检验研究院（国家枸杞产品质量检验检测中心（宁夏）、宁夏医科大学、宁夏农林科学院农业生物技术研究中心、中国科学院兰州化学物理研究所、宁夏食品检测研究院、宁夏回族自治区残疾人康复中心。本文件主要起草人：马玲、雷艳、王忠强、刘淑瑛、郑国保、王宁丽、马小荣、刘东鹏、赵茜、吴少涛、马宗卫、王英华。本文件为首次发布。1 枸杞叶及枸杞茶中总黄酮含量的测定 1 范围 本文件规定了枸杞叶及枸杞茶中总黄酮含量的分光光度计测定方法。本文件适用于枸杞叶及枸杞茶中总黄酮含量的测定。2 规范性引用文件 下

3、列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。3.1 枸杞茶 Wolfberry tea 枸杞芽茶和枸杞叶茶的全称。4 原理 枸杞茶或枸杞叶中的总黄酮（以芦丁计）经乙醇溶液提取后。在弱碱性条件下与铝盐生成螯合物，加入氢氧化钠溶液后显色，在波长510 nm处测定吸光度值。在一定浓度范围内，该螯合物的吸光度值与总黄酮含量呈成正比，采用标准曲线法定量。5 试剂与材料 除另有说明外，本方法所用试剂均为分

4、析纯和GB/T 6682 中规定的三级水。5.1 试剂 5.1.1 无水乙醇（CH3CH2OH）：分析纯 5.1.2 亚硝酸钠（NaNO2）：分析纯 5.1.3 硝酸铝（Al（NO3）3）：分析纯 5.1.4 氢氧化钠（NaOH）：分析纯 5.2 溶液的配制 5.2.1 乙醇溶液（7+3）：量取70 mL无水乙醇加入到30 mL纯化水中，混匀备用。5.2.2 亚硝酸钠溶液（50 g/L）：准确称取5.00 g亚硝酸钠于100 mL容量瓶中，加适量水溶解，加水定容至刻度，摇匀，备用。5.2.3 硝酸铝溶液（100 g/L）：准确称取10.00 g硝酸铝于100 mL容量瓶中，加适量水溶解，加水定

5、容至刻度，摇匀，备用。2 5.2.4 氢氧化钠溶液（40 g/L）：准确称取8.00 g氢氧化钠于200 mL容量瓶中，加适量水溶解，用水定容至刻度，摇匀，备用。5.3 标准品 芦丁标准品（C27H30O16，CAS号：153-18-4）：纯度98.0%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。5.4 标准溶液配制 准确称芦丁标准品13.40 mg（精确至0.0001g）至50 mL容量瓶中，加乙醇溶液（5.2.1）适量并超声使溶解，定容至刻度，摇匀，配制成0.268 mg/mL的芦丁标准溶液。5.5 材料 微孔滤膜：0.45 m，有机系。6 仪器与设备 6.1 紫外分光光度计。6.2 分析

6、天平，感量0.00001 g。6.3 粉碎机。6.4 超声波清洗器。6.5 水浴锅。6.6 干燥箱。7 试样制备 7.1 试样前处理 7.1.1 枸杞茶 取枸杞茶约 20g，粉碎，样品全部通过 50 目筛，置干燥器中保存，待用。7.1.2 枸杞鲜叶 将枸杞鲜叶置干燥箱中烘干（热风烘干温度控制在45-60），记录水分含量。取烘干后的样品约20g，粉碎，样品全部通过50目筛，置干燥器中保存，待用。7.1.3 枸杞干叶 取枸杞叶约20g，粉碎，样品全部通过50目筛，置干燥器中保存，待用。7.2 试样提取 取样品细粉约1 g（精确至0.0001 g），置三角瓶中，加50 mL的乙醇溶液（5.2.1）冷

7、浸30 min，沸水浴98-100回流提取1 h，滤过，分取滤液，滤渣再加30 mL的乙醇溶液（5.2.1），水浴回流提取1 h，过滤，合并滤液，用乙醇溶液（5.2.1）洗涤滤渣并定容至100 mL的量瓶中摇匀，滤过（5.5）作为试液，待用。8 分析步骤 8.1 标准曲线的绘制 3 精密量取芦丁标准溶液（5.4）0 mL、0.1 mL、0.4 mL、0.8 mL、1.2 mL、1.6 mL、2.0 mL 分别置 10 mL 容量瓶中，分别加水至 2.0 mL，各加亚硝酸钠溶液（5.2.2）0.4 mL，摇匀，放置 6 min，加硝酸铝溶液（5.2.3）0.4 mL，摇匀，放置 6 min，加氢

8、氧化钠溶液（5.2.4）4.0 mL，加水至刻度，摇匀，放置15 min，即得到芦丁含量分别为0.00 mg/L、2.68 mg/L、10.72 mg/L、21.44 mg/L、32.16 mg/L、42.88 mg/L、53.60 mg/L 的标准系列浓度。以相应试剂作空白，在 510 nm 波长处测定吸光度值，以芦丁质量浓度(mg/L)为横坐标，相应的吸光度值 A 为纵坐标，绘制标准曲线，得到标准曲线回归方程。8.2 测定步骤 精密量取待测液1.0 mL，置10 mL容量瓶中，加水至2.0 mL，加亚硝酸钠溶液（5.2.2）0.4 mL，摇匀，放置6 min，加硝酸铝溶液（5.2.3）0.

9、4 mL，摇匀，放置6 min，加氢氧化钠溶液（5.2.4）4 mL，加水至刻度，摇匀，放置15 min，试样于510 nm波长处测定，以测得吸光值由标准曲线查得试样待测液中总黄酮的含量，同时做空白实验。8.3 空白试验 分取 1.0 mL 乙醇溶液（5.2.1）于 10.0 mL 量瓶中，加水至 2.0 mL，其他操作步骤同 8.2。9 结果计算和表达 试样中总黄酮含量以芦丁的含量以百分含量计，按公式（1）计算：（）式（1）中：试样中总黄酮含量的数值，单位为毫克每克（mg/g）从标准曲线上查得试样待测液中总黄酮的质量浓度的数值，单位为毫克每升（mg/L）0从标准曲线上查得空白待测液中总黄酮的质量浓度的数值，单位为毫克每升（mg/L）V1试样中加入并定容的提取溶液体积的数值，单位为毫升（mL）V3试样的最终定容体积的数值，单位为毫升（mL）m试样的质量的数值，单位为克（g）V2提取液的分取体积的数值，单位为毫升（mL）测定结果保留三位有效数字。10 精密度 在重复性条件下，获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过算术平均值的 10%。11 准确度 添加芦丁浓度为 0.15 mg/mL 时，样品的准确度为 101.9%，相对标准偏差为 1.8%。