2013年高考二轮生物专题课件:专题九现代生物科技专题(人教版).ppt
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1、专题九 现代生物科技专题考纲内容要求基因工程(1)基因工程的诞生(2)基因工程的原理及技术(3)基因工程的应用(4)蛋白质工程克隆技术(5)植物的组织培养(6)动物的细胞培养与体细胞克隆(7)细胞融合与单克隆抗体(8)动物胚胎发育基本过程与胚胎工程的理论基础(9)胚胎干细胞的移植(10)胚胎工程的应用考纲内容要求转基因生物安全(11)转基因生物的安全性(12)生物武器对人类的威胁(13)生物技术中的伦理问题生态工程(14)简述生态工程的原理(15)生态工程的实例运载体基因重组提取目的基因全能性单克隆抗体制备受精早期胚胎培养卵裂期囊胚期限制酶DNA 连接酶载体作用切割目的基因和载体拼接 DNA
2、片段,形成重组 DNA携带目的基因进入受体细胞作用部位两核苷酸的脱氧核糖与磷酸之间形成的磷酸二酯键基因工程1实质:在分子水平上利用特殊工具将特定基因转入受体细胞,使其产生所需性状。2基本工具:限制酶DNA 连接酶载体作用特点(条件)识别特定的核苷酸序列在特定位点上切割EcoliDNA 连接酶只能连接黏性末端T4DNA 连接酶能连接黏性末端和平末端能在宿主细胞内稳定存在并大量复制有多个限制酶切割位点具有特殊的标记基因常用类型EcoR限制酶Sma限制酶EcoliDNA 连接酶、T4DNA 连接酶质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒3.操作程序:(1)目的基因的获取:目的基因:指编码蛋白质的结构基因。途
3、径:a从基因文库中获取。b人工合成:化学合成法、反转录法。c利用 PCR 技术扩增。(2)基因表达载体的构建:目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在,遗传给下一代;使目的基因能够表达和发挥作用。组成:目的基因启动子终止子标记基因(常用抗生素基因)。(3)将目的基因导入受体细胞:生物种类植物细胞动物细胞微生物细胞常用方法农杆菌转化法显微注射法Ca2处理法受体细胞体细胞受精卵原核细胞转化过程目的基因插入Ti质粒的TDNA上农杆菌导入植物细胞整合到受体细胞的染色体DNA表达目的基因表达载体提纯取卵(受精卵)显微注射受精卵发育获得具有新性状的动物Ca2处理细胞感受态细胞重组表达载体与感受态细胞混合感受态
4、细胞吸收DNA分子(4)目的基因的检测和鉴定:类型检测内容方法结果显示分子水平检测目的基因是否插入受体细胞染色体的DNA上DNA分子杂交技术(DNA和DNA之间)是否显示出杂交带是否转录出mRNA分子杂交技术(DNA和mRNA之间)同上是否翻译出蛋白质抗原抗体杂交同上个体水平鉴定包括抗虫或抗病的接种实验,以确定是否有抗性以及抗性程度;基因工程产品与天然产品进行活性比较,以确定功能是否相同等【典例 1】(2012 年浙江高考)天然的玫瑰没有蓝色花,这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因 B,而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因 B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰,下列操作正确的是()A 提取矮牵牛蓝色
5、花的 mRNA,经逆转录获得互补的DNA,再扩增基因 BB利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因 BC利用 DNA 聚合酶将基因 B 与质粒连接后导入玫瑰细胞D将基因 B 直接导入大肠杆菌,然后感染并转入玫瑰细胞名师点拨提取矮牵牛蓝色花的mRNA,逆转录得到DNA,然后扩增,可获得大量的基因 B,A 正确;从基因文库中获取目的基因,只要根据目的基因的相关信息和基因文库中的信息进行筛选对比即可,不需要用限制酶进行切割,B 错误;目的基因与质粒的连接需要用 DNA 连接酶,而不是 DNA 聚合酶,C 错误;目的基因需要和运载体连接形成重组质粒后再导入,而且应该用农杆菌进行感染玫瑰
6、细胞,而不是大肠杆菌,D 错误。答案A【典例 2】(2012 年全国新课标)根据基因工程的有关知识,回答下列问题。(1)限制性内切酶切割 DNA 分子后产生的片段,其末端类型有_和_。(2)质粒运载体用 EcoR切割后产生的片段如下:AATTCG GCTTAA为使运载体与目的基因相连,含有目的基因的 DNA 除可用 EcoR切割外,还可用另一种限制性内切酶切割,该酶必须具有的特点是_。(3)按其来源不同,基因工程中所使用的 DNA 连接酶有两类,即_DNA 连接酶和_DNA 连接酶。(4)反转录过程的模板是_,产物是_。若要在体外获得大量反转录产物,常采用_技术。(5)基因工程中除质粒外,_
7、和_等也可作为运载体。(6)若用重组质粒转化大肠杆菌,一般情况下,不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因是_。名师点拨(1)当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA 的两条链分别切开时,产生的是黏性末端,而当限制酶在它识别序列的中心轴线处切开时,产生的则是平末端。(2)为使运载体与目的基因相连,不同的限制酶应切割出相同的黏性末端,它们必须要能识别相同的核苷酸序列,并且使每条链中相同的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。(3)根据 DNA 连接酶的来源不同,可以将这些酶分为两类:一类是从大肠杆菌中分离得到的,称为 Ecoli DNA 连接酶;另一类是从 T4 噬菌体中分离出来的,称为 T4D
8、NA 连接酶。(4)反转录是以 RNA 为模版来合成 DNA 的过程。可以在体外短时间内大量扩增 DNA 的技术叫 PCR(多聚酶链式反应)。(5)基因工程中除质粒可作运载体外,还有噬菌体的衍生物、动植物病毒等。(6)大肠杆菌细胞外有细胞壁和细胞膜,能阻止其他物质的进入,通过 Ca2处理细胞,可使细胞处于能吸收周围环境中DNA 分子的生理状态,这种细胞称为感受态细胞。答案(1)黏性末端 平末端(2)能识别 EcoR I 识别的核苷酸序列,并且断开与 EcoR 断开相同的两个核苷酸之间的磷酸二酯键(3)Ecoli T4(4)RNADNAPCR(5)噬菌体的衍生物 动植物病毒(6)需要用 Ca2处
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