厦门大学2002级微生物与免疫学实验期末考试试卷及参考答案.pdf

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1、厦门大学厦门大学 20022002 级微生物与免疫学实验期末考试试卷及参考答案级微生物与免疫学实验期末考试试卷及参考答案厦门大学微生物与免疫学实验课程试卷厦门大学微生物与免疫学实验课程试卷生命科学学院生物学系生命科学学院生物学系 20022002 年级年级 各各 专业专业主考教师：郑忠辉主考教师：郑忠辉试卷类型：（试卷类型：（A A 卷卷/B/B 卷）卷）1.采用哪些方法可获得微生物的纯培养？（15 分）2.试拟出从土壤中分离枯草杆菌蛋白酶产生菌株的主要实验步骤。（20 分）3.要对实验室内的空间及表面进行消毒可采用哪些消毒方法？如何评价你所采用的消毒剂对空气中微生物的杀灭效果？（25 分）4

2、.要快速测定自来水中的大肠菌群是否超标可采用哪些方法？试列出其中一种测定方法的基本操作过程。（20 分）5.酶联免疫吸附实验（ELISA）的基本原理是什么？如何用此方法检测样品中是否含有乙肝病毒表面抗原（HBSAg）？（20 分）参考答案：参考答案：1 1、采用哪些方法可获得微生物的纯培养？、采用哪些方法可获得微生物的纯培养？参考答案平板分离法（稀释涂布平板法、稀释混合平板法、平板划线法）；单细胞挑取法。2 2、试拟出从土壤中分离枯草杆菌蛋白酶产生菌株的主要实验步骤。、试拟出从土壤中分离枯草杆菌蛋白酶产生菌株的主要实验步骤。参考答案取土样制备土壤悬液加热处理（如：80水浴处理 10 min）制

3、备稀释液含奶粉（如：含10%脱脂奶粉）的营养琼脂平板分离（涂布平板法或平板划线法）培养挑菌（选择产生透明圈的菌落）。3 3、要对实验室内的空间及表面进行消毒可采用哪些消毒方法？如何评价你所采用的消毒剂、要对实验室内的空间及表面进行消毒可采用哪些消毒方法？如何评价你所采用的消毒剂对空气中微生物的杀灭效果？对空气中微生物的杀灭效果？参考答案方法：紫外线照射；化学药物：喷雾（0.2%过氧乙酸、1%漂白粉澄清液），气体熏蒸（福尔马林等）。检测杀灭效果：将制备好的普通营养琼脂平板，于消毒前和消毒后分别放于室内的4角和中央，暴露采样 15 min，然后放培养箱培养 24-48h，观察结果。对消毒前、后各5

4、 个板，分别求其平均菌落数及计算杀灭率。4 4、要快速测定自来水中的大肠菌群是否超标可采用哪些方法？试列出其中一种测定方法的、要快速测定自来水中的大肠菌群是否超标可采用哪些方法？试列出其中一种测定方法的基本操作过程。基本操作过程。参考答案方法：快速测定仪测定、纸片法、滤膜法、多管发酵法（常规）。滤膜法基本操作过程：滤膜和滤器的灭菌和安装,过滤水样，培养（用灭菌镊子夹取滤膜边缘，将滤膜移放在伊红美兰平板上，滤膜截留细菌面向上，滤膜与培养基完全贴紧，两者间无空隙。平皿倒置于37温箱培养 22h24h。），计数典型或非典型大肠菌群细菌菌落（并分别取各菌落的部分培养物作涂片，革兰氏染色，镜检。），再培

5、养（凡镜检为革兰氏阴性无芽孢杆菌的，取该菌落的另一部分培养物，接种于乳糖蛋白陈发酵管，置37温箱培养 24h。产气者为总大肠菌群阳性。）。5 5、酶联免疫吸附实验（、酶联免疫吸附实验（ELISAELISA）的基本原理是什么？如何用此方法检测样品中是否含有乙）的基本原理是什么？如何用此方法检测样品中是否含有乙肝病毒表面抗原（肝病毒表面抗原（HBSAgHBSAg）？）？参考答案原理：酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay 简称 ELISA)是将免疫反应的特异性和酶的高效催化作用而表现的高敏感性二者有机地结合起来的一种新型免疫测定技术。其基本原理是先使抗原或抗体吸附在固相载体表面上，并保持其免疫活性，可以与待测抗原或抗体特异性结合，再与酶标记抗原或抗体特异性反应。由于标记的酶具有活性，可以催化无色底物变为有色产物，且颜色的深浅与相应待测抗原或抗体的量相关。双抗体夹心法测定抗原：A.将抗体吸附于固相表面;B.加抗原（样品）；C.加酶标抗体;D.加底物；E.酶标仪测定。