糖尿病自身抗体印迹杂交检测临床应用体会.pdf

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1、糖尿病自身抗体印迹杂交检测临床应用体会糖尿病自身抗体印迹杂交检测临床应用体会近年来随着人们生活水平的提高，糖尿病患病率呈明显上升趋势。中华医学会糖尿病分会主席杨文英教授于 2010 年 3 月公布的研究结果显示，我国现有糖尿病病人9200 万，已成为全球糖尿病病人最多的国家。糖尿病预防、治疗形势严峻，为更好地进行糖尿病分型及隐性糖尿病的诊断，做好糖尿病管理，我科于2009 年 8 月起开展糖尿病自身抗体印迹杂交检测。糖尿病是一类使身体结构及功能改变，无法彻底治愈，需要长期治疗、护理及特殊康复训练的疾病。糖尿病的发生没有特异的原因，往往由多种危险因素共同作用引起，包括遗传、性别、年龄、婚姻、烟酒

2、嗜好、肥胖、饮食习惯、职业、受教育程度、运动、经济收入、精神压力、气候等多种因素。糖尿病自身抗体印迹杂交检测有利于做好糖尿病的分型：1 型和 2型糖尿病的发病机理不同，治疗方法也存在着较大差异。自身抗体印迹杂交检测能够对糖尿病患者准确地分型诊断，在临床上具有重要意义；糖尿病的预防及预测：胰岛内 细胞的免疫性破坏是潜隐性过程，可在出现临床症状前多年即可存在，对无临床症状人群的糖尿病自身抗体联合检测，能够对糖尿病有很高的预测价值，同时可进行免疫干预，从而达到预防作用。印迹杂交技术包括：Northern 印迹技术、Southern 印迹技术、Western 印迹技术（即免疫印迹技术）。Norther

3、n 印迹技术是一种将 RNA 从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维膜上的方法；Southern 印迹技术是一种将 DNA 从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维膜上的方法；Western 印迹（即免疫印迹技术）1是一种将蛋白质从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维膜上的方法。免疫印迹技术（Western）被称作上个世纪分子生物学领域的三大发现之一。糖尿病自身抗体免疫印迹试剂盒是采用Western 印迹技术将胰岛细胞混合抗原（蛋白质）通过电泳将不同分子量的物质分离，再将其转印至硝酸纤维素膜上。我科自 2009 年 8 月起已监测 878 例患者之糖尿病自身抗体印迹杂交检测,通过得到的图谱和统计值,即获得每个患者糖尿病自身抗

4、体印迹杂交检测的完整资料,其中包括 ICA（IA-2）-120KD、GADA-65KD、ICA-64KD、ICA-40KD、IAA-5.8KD，以全面了解患者临床分型、预测B 细胞功能。针对性地制订干预策略,提高治疗效果,取得较好经济及社会效益。详见表1。表 1结果显示有 19 人 IAA-5.8KD 为阳性，占所检测病人的2.16%，有 14 人 ICA-40KD 为阳性，占所检测病人的 1.59%，有 1 人 ICA-64KD 阳性；有 30 人 GADA-65KD 为阳性，占所检测病人的3.4%，；有 2 人 ICA（IA-2）-120KD 为阳性；IAA-5.8KD、GADA-65KD

5、 阳性 4 人；ICA-40KD、GADA-65KD 阳性 2 人；GADA-65KD、ICA（IA-2）-120KD 阳性 1 人；ICA-40KD、GADA-65KD、ICA（IA-2）-120KD 阳性 1 人。胰岛素自身抗体（IAA）：胰岛素为胰岛 细胞所分泌，分子量5.8KD，IAA 在 DM 患儿中阳性率很高，并且是最早出现的自身抗体之一，其对型糖尿病诊断的敏感度40-70%，特异度99%；谷氨酸脱羧酶自身抗体（GADA）：谷氨酸脱羧酶在人类胰岛 细胞内含量丰富，分子量 65KD，目前认为 GADA 的产生是由于机体感染柯萨奇病毒后，因病毒蛋白系列与GAD 的氨基酸系列相似而产生的

6、交叉免疫反应所致。其中 I-DM 诊断的敏感度 70-80%，特异度 99%；胰岛细胞自身抗体（ICA）：ICA 能早于型糖尿病的临床诊断8 年而被检测出来，它可以作为疾病的一个早期指标或对疾病早期预测。ICA 是胰岛 细胞的胞浆抗体，是一种混合抗体。其中包括：（1）胰岛细胞瘤相关蛋白-2（IA-2）是受体型蛋白酪氨酸磷酸酶（PTP）超家族中的一员；（2）IA-2，它与 IA-2 类似，是一种跨膜PTP 类似蛋白。ICA 在儿童和青少年其敏感性达 70-90%，但以后随着发病年龄的升高而降低，它对-DM 诊断的特异性为 96-99%。糖尿病自身抗体印迹杂交检测，可明确糖尿病的分型，我科自2009 年 8 月起检测糖尿病测患者自身抗体印迹杂交检测以来,通过检测结果指导临床及时调整治疗方法，大大提高了患者达标率，缩短了患者的住院时间，提高了科室病床周转率。同时也为糖尿病的预防及预测起到了积极作用，根据检测数据及时可进行免疫干预，从而达到预防作用。总之，通过开展糖尿病自身抗体印迹杂交检测，我科全面了解患者临床分型、预测B 细胞功能，针对性地制订干预策略,提高治疗效果,取得了较好的经济及社会效益。