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1、肝功能实验室检测肝功能实验室检测武警广东总队医院武警广东总队医院李华富李华富肝脏的生物化学功能肝脏的生物化学功能物质代谢功能物质代谢功能 生物转化作用生物转化作用 分泌排泄功能分泌排泄功能肝功能试验肝功能试验 LIVER FUNCTION TEST一、蛋白质代谢功能检测一、蛋白质代谢功能检测 二、脂类代谢功能检测二、脂类代谢功能检测 三、胆红素代谢检检测三、胆红素代谢检检测四、胆汁酸代谢检测四、胆汁酸代谢检测 五、摄取、排泄功能检测五、摄取、排泄功能检测六、血清酶及同功酶检测六、血清酶及同功酶检测 七、肝纤维化检测七、肝纤维化检测一、蛋白质代谢功能检查一、蛋白质代谢功能检查(一)血清总蛋白(S
2、TP)、白蛋白(A)、(球蛋白)G、A/G测定【原理原理】90以上的STP和全部的血清A由肝脏合成G与机体免疫功能与血浆粘度密切相关。A是正常人体血清中的主要蛋白质组成,肝脏每天大约合成120mg/kg,半衰期15-19天。【参考值范围参考值范围】正常成人血清STP:6080g/LA:4055g/LG:2030g/LA/G:1.52.5/1【临床意义临床意义】1.STP及及A增高增高:各种原因导致的血液浓缩、肾上腺皮质功能减退;2.STP及及A降低降低:肝功能损害:亚急性重症肝炎等;营养不良,STP60g/l或A25g/l称为低蛋白血症;蛋白丢失过多:肾病综合征等;消耗增加:如重症结核;血清水
3、分增加:如水钠潴留或静脉补充过多;3.STP及及G增高增高:慢性肝脏疾病;M球蛋白血症:淋巴瘤等;自身免疫性疾病:如SLE;慢性炎症与慢性感染:如结核病;4.G浓度降低浓度降低:生理性减少:小于3岁的婴幼儿;免疫功能限制;先天性低球蛋白血症;5.A/G倒置倒置:严重肝功能损伤及M蛋白血症(二二)血清蛋白电泳血清蛋白电泳【原理原理】在碱性环境中(PH8.6)血清蛋白质均带负电,在电场中均会向阳极泳动。血清中各种蛋白质的颗粒大小不同、等电点及所带的负电荷多少不同,在电场中的泳动速度也不同。A分子量小,所带负电荷相对较多,泳动速度最快。血清蛋白电泳【参考值范围】Albumin:62%71%1 Glo
4、bulin:3%4%2 Globulin:6%10%Globulin:7%11%Globulin:9%18%血清蛋白电泳【临床意义临床意义】1,肝脏疾病:如肝硬化失代偿期,肝脏疾病:如肝硬化失代偿期,Globulin 增加。增加。2,M蛋白血症:如骨髓瘤,单克隆蛋白血症:如骨髓瘤,单克隆 Globulin 明显增加。明显增加。3,肾病综合症、糖尿病肾病:由于血脂增,肾病综合症、糖尿病肾病:由于血脂增高可致高可致2 Globulin及及 Globulin 增高(是增高(是脂蛋白的主要成份)脂蛋白的主要成份)(三)血浆凝血因子测定(三)血浆凝血因子测定【原理原理】极大部分凝血因子、大部分纤维蛋白原
5、都在肝脏合成,同时凝血抑制因子如抗凝血酶等也在肝脏合成。凝血因子半衰期比白蛋白短得多,尤其是维生素K依赖因子(、)。在胆汁淤积患者,脂溶性维生素K吸收减少,维生素K依赖因子(、)不能被激活,引起凝血障碍。【参考值范围与临床意义参考值范围与临床意义】1.凝血酶原时间凝血酶原时间(prothrombin,PT)正常参考值范围:1114秒临床意义:反映血浆中凝血因子、含量,能判断肝病预后。PT延长提示:肝硬化失代偿胆汁淤积2,活化部分凝血活酶时间(活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)正常参考值范围:3042秒。临床意义:反映血浆
6、中凝血因子、含量。APTT延长提示:严重肝病维生素K缺乏3,凝血酶时间凝血酶时间(thrombin time,TT)参考值范围参考值范围:1618秒。秒。临床意义:临床意义:TT延长主要反映血浆纤维蛋白延长主要反映血浆纤维蛋白原含量减少。原含量减少。4,抗凝血酶抗凝血酶(AT-)测定)测定 临床意义:临床意义:AT-活性降低见于严重肝病活性降低见于严重肝病或合并或合并DIC(四)血氨测定(四)血氨测定肝脏利用氨合成尿素,是保证血氨正常的肝脏利用氨合成尿素,是保证血氨正常的关键。关键。参考值范围参考值范围:1872mol/L。临床意义:生理性升高见于高蛋白饮食,临床意义:生理性升高见于高蛋白饮食
7、,病理性升高见于肝性脑病、上消化道出血病理性升高见于肝性脑病、上消化道出血等。等。降低见于低蛋白饮食。降低见于低蛋白饮食。二、脂类代谢功能检查二、脂类代谢功能检查(一)血清胆固醇和胆固醇酯(一)血清胆固醇和胆固醇酯【原理原理】内源性胆固醇(cholesterol)80%由肝脏合成,血浆中卵磷脂胆固醇脂肪酰基转移酶(LCAT)全部由肝脏合成,在LCAT作用下,卵磷脂的脂肪酰氨基转移到胆固醇羟基上,生成胆固醇酯。【参考值范围参考值范围】总胆固醇2.96.0mmol/L胆固醇酯2.343.38mmol/L【临床意义临床意义】1.肝细胞受损,胆固醇酯减少2.肝细胞严重受损,总胆固醇减少3.胆汁淤积,总
8、胆固醇增加。三、胆红素代谢检查三、胆红素代谢检查(一)血清总胆红素(一)血清总胆红素(Serum total bilirubin,STB)测定测定【参考值范围参考值范围】成人成人3.417.1mol/L【临床意义临床意义】1.判断有无黄疸、黄疸程度及演变过程:判断有无黄疸、黄疸程度及演变过程:STB17.1但34.2mol/L,隐性黄疸34.2171mol/L,轻度黄疸171342mol/L,中度黄疸342mol/L,重度黄疸2.根据黄疸程度推断黄疸病因:根据黄疸程度推断黄疸病因:85.5mol/L,溶血性黄疸17.1171mol/L,肝细胞黄疸171256mol/L,不完全性阻塞性黄疸342
9、mol/L,完全性阻塞性黄疸3.根据根据STB,结合及非结合胆红素升高程度判断,结合及非结合胆红素升高程度判断黄疸类型:黄疸类型:STB非结合溶疸,STB结合胆淤疸。(二)血清结合胆红素(二)血清结合胆红素(CB)与非结与非结合胆红素合胆红素(UCB)测定测定【参考值范围参考值范围】CB:06.8mol/L UCB:1.710.2mol/L【临床意义临床意义】CB/STB:20%,溶血性黄疸,溶血性黄疸 CB/STB:20%50%,肝细胞性黄疸,肝细胞性黄疸 CB/STB:50%胆汁淤积性黄疸胆汁淤积性黄疸(三)尿内胆红素检查(三)尿内胆红素检查【参考值参考值】正常人为阴性正常人为阴性【临床意
10、义临床意义】肝细胞性及梗阻性黄疸尿胆红素阳性。肝细胞性及梗阻性黄疸尿胆红素阳性。溶血性黄疸尿胆红素阴性。溶血性黄疸尿胆红素阴性。Dubin-Johnson和和Rotor综合征尿胆红素综合征尿胆红素阳性阳性Gilbert和和Crigler-Najjar综合征尿胆红素阴综合征尿胆红素阴性性(四四)尿中尿胆原检查尿中尿胆原检查【参考值范围参考值范围】阴性或弱阳性,阴性或弱阳性,0.844.2mol/L/24h【临床意义临床意义】增多增多溶血性黄疸明显增加。溶血性黄疸明显增加。肝细胞性黄疸轻度增加肝细胞性黄疸轻度增加 顽固性便秘可增加。顽固性便秘可增加。减少减少梗阻性黄疸梗阻性黄疸 长期服用抗生素长期
11、服用抗生素四、胆汁酸代谢检查四、胆汁酸代谢检查胆汁酸(胆汁酸(bile acid)测定)测定【原理原理】胆汁的主要成份是胆汁酸盐、胆红素和胆固醇【参考值范围参考值范围】总胆汁酸,010mol/L【临床意义临床意义】增高:肝细胞损害胆道梗阻门脉分流五、摄取、排泄功能检查五、摄取、排泄功能检查靛氰绿(靛氰绿(ICG)滞留率试验)滞留率试验【原理原理】ICG90%以上被肝细胞摄取,再以原形从胆道排泄。【参考值范围参考值范围】15分钟血内ICG滞留率010%。【临床意义临床意义】1.增高:增高:肝细胞损害肝细胞损害;胆道梗阻胆道梗阻2.先天性黄疸的鉴别诊断:先天性黄疸的鉴别诊断:Dubin-Johns
12、on-正常;正常;Gilbert-正常,有时正常,有时可轻、中度升高;可轻、中度升高;Rotor-50%六、血清酶及同功酶检查六、血清酶及同功酶检查肝病酶血清浓度变化机理肝病酶血清浓度变化机理变变 化化 机机 理理 酶存在于肝细胞内,肝细胞受损后酶从酶存在于肝细胞内,肝细胞受损后酶从细胞内释放入血,使血清酶活性升高细胞内释放入血,使血清酶活性升高 酶由肝细胞合成,肝脏疾病时肝细酶由肝细胞合成,肝脏疾病时肝细胞合成酶减少,使血清酶活性减低胞合成酶减少,使血清酶活性减低 维生素维生素K K依赖性凝血因子,因胆汁淤依赖性凝血因子,因胆汁淤滞,胆汁酸盐不能进入肠道使维生素滞,胆汁酸盐不能进入肠道使维生
13、素K K吸收障碍,肝脏不能合成这些凝血因子吸收障碍,肝脏不能合成这些凝血因子 胆道梗阻,酶排泄受阻,使血清酶胆道梗阻,酶排泄受阻,使血清酶浓度升高浓度升高 肝脏纤维组织增生时某些酶活性升高肝脏纤维组织增生时某些酶活性升高常见血清酶常见血清酶 ALTALT、ASTAST、ALDALD、LDHLDH、GDHGDH CHECHE、LCATLCAT 各种凝血因子各种凝血因子 凝血因子凝血因子、ALPALP、GGTGGT MAOMAO、PHPH、P PP P、HAHA肝脏疾病诊断酶分类肝脏疾病诊断酶分类分分 类类 肝细胞损害为主的酶肝细胞损害为主的酶 胆汁淤滞为主的酶胆汁淤滞为主的酶 肝脏纤维组织增生为
14、主的酶肝脏纤维组织增生为主的酶 协助诊断肝细胞癌的酶类协助诊断肝细胞癌的酶类代代 表表 酶酶 丙氨酸氨基转移酶(丙氨酸氨基转移酶(ALTALT)门冬氨酸氨基转移酶(门冬氨酸氨基转移酶(ASTAST)谷氨酸脱氨酶(谷氨酸脱氨酶(GDHGDH或或GLDHGLDH)乳酸脱氢酶(乳酸脱氢酶(LDHLDH)谷胱甘肽谷胱甘肽S S转换酶(转换酶(GSTGST)胆碱脂酶(胆碱脂酶(CHECHE)卵磷脂胆固醇酰基转移酶(卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCATLCAT)碱性磷酸酶(碱性磷酸酶(ALPALP)-谷氨酰转换酶(谷氨酰转换酶(-GT-GT或或GGTGGT)亮氨酸氨基肽酶(亮氨酸氨基肽酶(LAPLAP)5-5
15、-核苷酸酶(核苷酸酶(5-NT5-NT)单胺氧化酶(单胺氧化酶(MAOMAO)脯氨酰羟化酶(脯氨酰羟化酶(PHPH)胶原酶(胶原酶(collagenasecollagenase)-谷氨酰转移酶同工酶谷氨酰转移酶同工酶(-GT-GT)-L-L-岩藻糖苷酶(岩藻糖苷酶(AFUAFU)碱性磷酸酶同工酶碱性磷酸酶同工酶(ALP-ALP-)5-5-核苷酸磷酸二脂酶同工酶核苷酸磷酸二脂酶同工酶(5-NPD5-NPD)醛缩酶同工酶醛缩酶同工酶A A(ALD-AALD-A)丙氨酸氨基转移酶丙氨酸氨基转移酶(ALT)天门冬氨酸氨基天门冬氨酸氨基转移酶转移酶(AST)ALT主要分布在肝脏,其次是骨骼肌、肾脏、主要
16、分布在肝脏,其次是骨骼肌、肾脏、心肌等组织中心肌等组织中AST主要分布在心肌,其次在肝脏、骨骼主要分布在心肌,其次在肝脏、骨骼肌和肾脏组织中。肌和肾脏组织中。ALTALT、ASTAST体内分布情况及半衰期变化体内分布情况及半衰期变化 分布分布分布分布 半衰期(小时)半衰期(小时)半衰期(小时)半衰期(小时)脏器脏器脏器脏器 肝细胞肝细胞肝细胞肝细胞 ALTALT肝脏、骨骼肌、肝脏、骨骼肌、主要在胞质主要在胞质4747 肾脏、心肌等肾脏、心肌等 ASTAST心肌、肝脏、心肌、肝脏、80%80%在线粒体在线粒体1717 骨骼肌、肾脏等骨骼肌、肾脏等20%20%在胞浆在胞浆 临床意义:临床意义:用于
17、下列疾病的诊断、鉴别诊断、病情观用于下列疾病的诊断、鉴别诊断、病情观察及疗效判断。察及疗效判断。肝胆疾病肝胆疾病心肌梗塞心肌梗塞(AST)骨骼肌损害骨骼肌损害(AST)参考值范围参考值范围ALT:10-40U/LALT:10-40U/LAST:10-40U/LAST:10-40U/LALT/AST1ALT/AST1ALT/AST1.0轻度肝损害ALT/AST1.0,特别是0.5慢性活动肝炎酒精性肝损害临临 床床 意意 义义 疾疾疾疾 病病病病 ALTALTALTALT与与与与AST ALT/ASTAST ALT/ASTAST ALT/ASTAST ALT/AST 急性病毒性肝炎急性病毒性肝炎
18、1 1 慢性病毒性肝炎慢性病毒性肝炎 N N或或 1 1 酒精性肝病、脂肪肝酒精性肝病、脂肪肝 N N或或 1 1 肝硬化肝硬化 N N、或或 1 1 N:正常;:正常;:轻度升高;:轻度升高;:明显升高;:明显升高;:降低:降低碱性磷酸酶碱性磷酸酶(ALP)主要分布在肝脏、骨骼、肾、小肠及胎盘中同工酶同工酶电泳分离(图)-ALP1-肝型ALP(ALP2)-骨型ALP(ALP3)-胎盘型ALP(ALP4)-小肠型ALP(ALP5)-ALP6正常人血清中ALP2占90%。TotalALPTotalALP参考值范围参考值范围参考值范围参考值范围 40-150U/L40-150U/LALP临临 床床
19、 意意 义义 生理性增加:生理性增加:-妊娠中晚期(胎盘型ALP)-生长中儿童(骨型ALP)-O型及B型人群(小肠型ALP).ALP临临 床床 意意 义义 病理性升高:病理性升高:-肝内、外胆管阻塞性疾病:ALP-肝炎、肝硬化等:ALP-骨骼疾病黄疸时黄疸时ALP、BIL及及ALT的变化的变化黄黄 疸疸 类类 型型ALPBILALT阻塞性黄疸阻塞性黄疸肝细胞性黄疸肝细胞性黄疸N或或溶血性黄疸溶血性黄疸NN注:注:增高;:增高;:较明显增高;:较明显增高;:明显增高:明显增高ALP同工酶同工酶:临临 床床 意意 义义ALP同工酶同工酶:胆汁淤积性黄疸,尤其是癌性梗阻时,100%出现ALP1,且A
20、LP1ALP2。急性肝炎:ALP2,且ALP1ALP2。肝硬化:ALP5,但不出现ALP1。-谷氨酰转移酶谷氨酰转移酶(GGT)参考值范围参考值范围参考值范围参考值范围 50U/L50U/LGGT临临 床床 意意 义义 急性病毒性肝炎:GGT-,慢性肝炎、肝硬化的非活动期:GGT-N,若GGT持续升高,提示病变活动或病情恶化。急、慢性酒精性肝炎、药物性肝炎:GGT-或,ALT和AST-N或.胆道阻塞性疾病:GGT-。七、肝纤维化检查七、肝纤维化检查(一)(一)型前胶原氨基末端肽测定型前胶原氨基末端肽测定【原理原理】前胶原受到肽酶切割分离,成为前胶原受到肽酶切割分离,成为P P,部,部分进入血。
21、分进入血。【参考值范围参考值范围】PP150ng/L为异常。为异常。【临床意义临床意义】PP反映肝纤维化的程度。反映肝纤维化的程度。(二)(二)(二)(二)胶原测定胶原测定胶原测定胶原测定【原理原理】胶原分布于肝窦内皮细胞下,是构成胶原分布于肝窦内皮细胞下,是构成基膜的主要成份。基膜的主要成份。【参考值范围参考值范围】胶原胶原NC1片段为片段为5.31.3g/ml【临床意义临床意义】胶原合成增多是肝纤维化的早期表现之一。胶原合成增多是肝纤维化的早期表现之一。传染源粪便血液/血源性物质/体液血液/血源性物质/体液血液/血源性物质/体液粪便传播途径粪-口经皮肤/经粘膜经皮肤/经粘膜经皮肤/经粘膜粪
22、-口慢性感染否是是是否病毒性肝炎类型病毒性肝炎类型ABCDE基因组类型 ssRNA dsDNA ssRNA ssRNA ssRNAHepatitis B Virus乙型肝炎的病原体乙型肝炎的病原体在全世界广泛流行,估计全球半数以上人在全世界广泛流行,估计全球半数以上人口已被口已被HBV感染过,感染过,5%的人口为的人口为HBV慢性慢性感染感染中国:乙肝高发区,人群中国:乙肝高发区,人群HBsAg的检出率的检出率达达9.8%抗原组成抗原组成(一一)-)-HBsAg位于病毒表面,是一种糖蛋白位于病毒表面,是一种糖蛋白判断判断HBV感染的指标之一感染的指标之一刺激机体产生保护性抗体即抗刺激机体产生保
23、护性抗体即抗-HBs抗原组成抗原组成(二二)-)-HBcAg位于位于Dane颗粒核心部分和肝细胞核内,在颗粒核心部分和肝细胞核内,在血清中不易检出游离的血清中不易检出游离的HBcAg主要成分是蛋白质主要成分是蛋白质刺激机体产生抗刺激机体产生抗-HBc(非保护性抗体非保护性抗体)在乙肝急性期、恢复期和在乙肝急性期、恢复期和HBsAg携带者中携带者中常可检出抗常可检出抗-HBc抗抗-HBc IgM常提示病毒处于复制状态常提示病毒处于复制状态抗原组成抗原组成(三三)-)-HBeAg位于位于HBV的核心的核心,是一种可溶性蛋白抗原是一种可溶性蛋白抗原HBeAg和和Dane颗粒出现相平行,且与颗粒出现相
24、平行,且与DNA多聚多聚酶在血中的消长动态相符合酶在血中的消长动态相符合血中血中HBeAg的出现可作为的出现可作为HBV复制及血清有感染复制及血清有感染性的指标性的指标刺激机体产生抗刺激机体产生抗-HBe抗抗-HBe能与受染肝细胞表面的能与受染肝细胞表面的e抗原结合抗原结合,通过补通过补体介导破坏受染的肝细胞体介导破坏受染的肝细胞,抗抗-HBe的出现是预后的出现是预后良好的征象良好的征象抗原组成抗原组成(四四)-Pre-S)-Pre-S抗原抗原位于位于HBV的外衣壳上,有两种的外衣壳上,有两种刺激机体产生抗刺激机体产生抗Pre-SPre-S1 1和抗和抗Pre-SPre-S2 2,能阻断能阻断
25、HBV与肝细胞受体结合,从而起到抵抗病与肝细胞受体结合,从而起到抵抗病毒毒的作用的作用抗抗Pre-SPre-S1 1和抗和抗Pre-SPre-S2 2的出现,表示病情好转,的出现,表示病情好转,趋向痊愈趋向痊愈病原学诊断病原学诊断(一一)-抗原抗体检测抗原抗体检测项目:项目:HBsAg、抗抗-HBs、HBeAg、抗抗-HBe、抗抗-HBc以及抗以及抗-HBc IgM方法方法ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay,最常用,定性最常用,定性)发光免疫分析发光免疫分析(定量定量)反相间接血凝试验反相间接血凝试验(少用少用)病原学诊断病原学诊断(二二)核酸检测核
26、酸检测核酸杂交核酸杂交探针探针PCR引物引物HBsAg 感染的标志感染的标志Anti-HBs 既往感染既往感染/接种疫苗接种疫苗Anti-HBc IgM 急性感染标志急性感染标志Anti-HBc IgG 既往或慢性感染既往或慢性感染HBeAg 急性病毒复制,有传染性急性病毒复制,有传染性 Anti-HBe 病毒不再复制病毒不再复制HBV-DNA 急急性性病病毒毒复复制制,比比HBeAg更更准准确;主要用于监测治疗反应确;主要用于监测治疗反应血清学检测的临床意义血清学检测的临床意义HBsAg 抗抗-HBs HBeAg 抗抗-HBe 抗抗-HBc 临床意义临床意义急性或慢性感染急性或慢性感染(大三
27、阳大三阳)+-+-+乙肝后期或慢性感染乙肝后期或慢性感染(小三阳小三阳)-+-潜伏期或急性乙肝早期潜伏期或急性乙肝早期-+痊愈或恢复期痊愈或恢复期,有免疫力有免疫力-+-痊愈痊愈,有免疫力有免疫力疫苗接种或曾经感染过疫苗接种或曾经感染过,有免疫力有免疫力项目选择项目选择体检:ALT、AST、GGT、A/G、肝炎病毒标志物。急肝:ALT、胆汁酸、尿胆原及肝炎病毒标志物。慢肝:+AST、ALP、GGT、STP、A/G黄疸鉴别:STB、CB、尿胆红素、尿胆原、ALP、GGT、胆汁酸原发性肝癌:同(慢肝)+AFP+ALP+GGT肝纤维化:ALT、AST、TB、A/G、电泳、PIIIP疗效随访:按要求选择病例分析某患者,男,某患者,男,26岁。岁。主诉:乏力、厌油腻、恶心、肝区不适伴主诉:乏力、厌油腻、恶心、肝区不适伴发热发热2周。周。查体:皮肤、巩膜中度黄染;肝查体:皮肤、巩膜中度黄染;肝肋下肋下2cm,质软,有压痛,脾肋下未触及。,质软,有压痛,脾肋下未触及。应做哪些实验室检查?应做哪些实验室检查?复习思考题复习思考题1.血清胆红素定量测定,尿胆红素及尿胆原检查的正常参考范围及临床意义;2.血清转氨酶、碱性磷酸酶,r一谷氨酸转肽酶的正常参考范围及临床意义。
限制150内