电泳技术和常用电泳仪.ppt

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1、第十六章第十六章 电泳分析仪器电泳分析仪器 本章教学要求本章教学要求 了解常用的电泳仪了解常用的电泳仪 了解电泳仪临床应用了解电泳仪临床应用 熟悉常用电泳仪的基本结构、电泳方法熟悉常用电泳仪的基本结构、电泳方法 熟悉毛细管电泳仪基本原理、基本结构熟悉毛细管电泳仪基本原理、基本结构 掌握电泳基本原理掌握电泳基本原理 掌握毛细管电泳的特点、分离模式掌握毛细管电泳的特点、分离模式 掌握电泳仪的维护保养及故障排除掌握电泳仪的维护保养及故障排除内内 容容 提提 要要 第一节第一节 电泳原理电泳原理 第二节第二节 常用电泳方法常用电泳方法 第三节第三节 常用电泳仪的基本结构及技术指标常用电泳仪的基本结构及

2、技术指标 第四节第四节 常用电泳仪简介常用电泳仪简介 第五节第五节 毛细管电泳毛细管电泳 第六节第六节 电泳仪的维护保养及故障排除电泳仪的维护保养及故障排除 第七节第七节 电泳仪的临床应用电泳仪的临床应用电泳（电泳（electrophoresis）是指带电荷的溶质或粒子在电）是指带电荷的溶质或粒子在电场中向着与其本身所带电荷相反的电极移动的现象。场中向着与其本身所带电荷相反的电极移动的现象。利用电泳现象将多组分物质分离、分析的技术叫做电泳利用电泳现象将多组分物质分离、分析的技术叫做电泳技术（技术（electrophoresis technique）。）。可以实现电泳分离技术的仪器称之为电泳仪可

3、以实现电泳分离技术的仪器称之为电泳仪（electrophoresister）。）。概概 述述 临床常用的电泳分析方法主要有醋酸纤维素薄临床常用的电泳分析方法主要有醋酸纤维素薄膜电泳、凝胶电泳、等电聚焦电泳、双向电泳和毛膜电泳、凝胶电泳、等电聚焦电泳、双向电泳和毛细管电泳等。细管电泳等。目前，电泳技术已广泛用于蛋白质、多肽、氨目前，电泳技术已广泛用于蛋白质、多肽、氨基酸、核苷酸、无机离子等成份的分离和鉴定，甚基酸、核苷酸、无机离子等成份的分离和鉴定，甚至还用于细胞与病毒的研究。至还用于细胞与病毒的研究。概概 述述第一节第一节 电泳原理电泳原理 一、电泳的基本原理一、电泳的基本原理 物质分子在正常

4、情况下一般不带电，即所带正负电荷物质分子在正常情况下一般不带电，即所带正负电荷量相等，故不显示带电性。但是在一定的物理作用或化学量相等，故不显示带电性。但是在一定的物理作用或化学反应条件下，某些物质分子会成为带电的离子（或粒子），反应条件下，某些物质分子会成为带电的离子（或粒子），不同的物质，由于其带电性质、颗粒形状和大小不同，因不同的物质，由于其带电性质、颗粒形状和大小不同，因而在一定的电场而在一定的电场 中它们的移动方向和移中它们的移动方向和移 动速度也不同，因此可动速度也不同，因此可 使它们分离。使它们分离。电泳现象和电渗流现象电泳现象和电渗流现象第一节第一节 电泳原理电泳原理 若将带净

5、电荷若将带净电荷Q Q的粒子放入电场，则该粒子所受到的电荷引力为：的粒子放入电场，则该粒子所受到的电荷引力为：F F引引=E Q =E Q （16-116-1）在溶液中在溶液中,运动粒子与溶液之间存在阻力运动粒子与溶液之间存在阻力F F阻阻 F F阻阻=6rV =6rV （16-216-2）当当F F引引=F=F阻阻时时 EQ=6rVEQ=6rV V=EQ/6r V=EQ/6r （16-316-3）由上式可以看出由上式可以看出,粒子的移动速度粒子的移动速度(泳动速度泳动速度V)V)与电场强度与电场强度(E)(E)和粒子所带电荷量和粒子所带电荷量(Q)(Q)成正比成正比,而与粒子的半径而与粒子的

6、半径(r)(r)及溶液的及溶液的粘度粘度()()成反比。成反比。第一节第一节 电泳原理电泳原理 二、影响电泳的外界因素二、影响电泳的外界因素 （一）电场强度（一）电场强度 （二）溶液的（二）溶液的pHpH值值 （三）溶液的离子强度（三）溶液的离子强度 （四）电渗作用（四）电渗作用 （五）粒子的迁移率（五）粒子的迁移率 （六）吸附作用（六）吸附作用V=EQ/6r第二节第二节 常用电泳方法常用电泳方法一、纸电泳一、纸电泳 指用滤纸作为支持载体的电泳方法。是最早指用滤纸作为支持载体的电泳方法。是最早使用的区带电泳。使用的区带电泳。将滤纸条水平地架设在将滤纸条水平地架设在两个装有缓冲溶液的容器之两个装

7、有缓冲溶液的容器之间，样品点于滤纸中央。当间，样品点于滤纸中央。当滤纸条被缓冲液润湿后，再滤纸条被缓冲液润湿后，再盖上绝缘密封罩，即可由电盖上绝缘密封罩，即可由电泳电源输入直流电压（泳电源输入直流电压（100V100V1000V1000V）进行电泳。）进行电泳。平卧式电泳槽装置示意图平卧式电泳槽装置示意图第二节第二节 常用电泳方法常用电泳方法二、醋酸纤维素薄膜电泳二、醋酸纤维素薄膜电泳 电泳时经过膜的预处理、加样、电泳、染色、电泳时经过膜的预处理、加样、电泳、染色、脱色与透明即可得到满意的分离效果。此电泳的脱色与透明即可得到满意的分离效果。此电泳的特点是分离速度快、特点是分离速度快、电泳时间短

8、、样品电泳时间短、样品 用量少。因此特别用量少。因此特别 适合于病理情况下适合于病理情况下 微量异常蛋白的检测。微量异常蛋白的检测。血清蛋白的电泳图谱血清蛋白的电泳图谱第二节第二节 常用电泳方法常用电泳方法三、凝胶电泳三、凝胶电泳 由区带电泳中派生出的一种用凝胶物质作支持物由区带电泳中派生出的一种用凝胶物质作支持物进行电泳的方式。进行电泳的方式。凝胶电泳中的琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶凝胶电泳中的琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳是普通电泳中应用最多电泳是普通电泳中应用最多 的两种形式。的两种形式。目前，这种办法被广泛目前，这种办法被广泛用来分析蛋白质和核酸。用来分析蛋白质和核酸。凝胶电泳图

9、凝胶电泳图第二节第二节 常用电泳方法常用电泳方法四、等电聚焦电泳四、等电聚焦电泳 1 1等电聚焦电泳过程等电聚焦电泳过程 一种利用有一种利用有pHpH值梯度的介质，值梯度的介质，分离等电点不同的蛋白质的电泳技术。分离等电点不同的蛋白质的电泳技术。在一个稳定连续的线性在一个稳定连续的线性pHpH梯度的溶液（两性载体电梯度的溶液（两性载体电解质）中进行分离，每一种被解质）中进行分离，每一种被分离的两性物质都移向与它的等分离的两性物质都移向与它的等电点相一致的电点相一致的pHpH位置，在那里不位置，在那里不再移动（称为聚焦）。再移动（称为聚焦）。净电荷与净电荷与PHPH的关系曲线的关系曲线第二节第二

10、节 常用电泳方法常用电泳方法 2 2等电聚焦电泳的特点等电聚焦电泳的特点 使用两性载体电解质，在电极之间形成稳定、使用两性载体电解质，在电极之间形成稳定、连续、线性的连续、线性的pHpH梯度；梯度；由于由于“聚焦效应聚焦效应”，即使很，即使很小的样品也能获得清晰、鲜明的区带界面；小的样品也能获得清晰、鲜明的区带界面；电泳速电泳速度快度快;分辨率高分辨率高;加入样品的位置可任意选择；加入样品的位置可任意选择；可用于测定蛋白质类物质的等电点可用于测定蛋白质类物质的等电点;适用于中、大适用于中、大分子量（如蛋白质、肽类、同工酶等）生物组分的分分子量（如蛋白质、肽类、同工酶等）生物组分的分离分析。离分

11、析。第二节第二节 常用电泳方法常用电泳方法五、等速电泳五、等速电泳 采用两种不同浓度的电解质，一种为前导电解质，采用两种不同浓度的电解质，一种为前导电解质，充满整个毛细管柱；另一种为尾随电解质，置于一端充满整个毛细管柱；另一种为尾随电解质，置于一端的电泳槽中。前导电解质的迁移率高于任何样品组分，的电泳槽中。前导电解质的迁移率高于任何样品组分，尾随电解质则低于任何样品组分，被分离的组分按其尾随电解质则低于任何样品组分，被分离的组分按其不同的迁移率夹在中不同的迁移率夹在中间，在强电场的作用下，各被间，在强电场的作用下，各被分离组分在前导电解质与尾随分离组分在前导电解质与尾随电解质之间的空隙中移动，

12、实电解质之间的空隙中移动，实现分离。现分离。等速电泳示意图等速电泳示意图 第二节第二节 常用电泳方法常用电泳方法六、双向凝胶电泳（二维电泳）六、双向凝胶电泳（二维电泳）第一向采用等电聚焦第一向采用等电聚焦 根据复杂的蛋白质成分中根据复杂的蛋白质成分中各个蛋白质的各个蛋白质的PIPI的不同，将蛋白质进行分离。的不同，将蛋白质进行分离。第二向采用了十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶第二向采用了十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳电泳 （SDS-PAGESDS-PAGE）就是按蛋）就是按蛋白质分子量的大小使其在垂直白质分子量的大小使其在垂直方向进行分离。其结果不再是方向进行分离。其结果不再是条带状，而是呈

13、现为斑点状。条带状，而是呈现为斑点状。等电聚焦等电聚焦仪仪 双向凝胶电泳示意图双向凝胶电泳示意图第二节第二节 常用电泳方法常用电泳方法第一向IEF第二向SDS-PAGE18cm玻璃板MarkerIPG胶条等电聚焦电泳槽六、双向凝胶电泳（二维电泳）六、双向凝胶电泳（二维电泳）第二节第二节 常用电泳方法常用电泳方法六、双向凝胶电泳仪器结构六、双向凝胶电泳仪器结构 制胶板、电泳槽、电源、计算机、扫描仪等制胶板、电泳槽、电源、计算机、扫描仪等第二节第二节 常用电泳方法常用电泳方法七、免疫电泳七、免疫电泳 免免疫疫电电泳泳是是琼琼脂脂平平板板电电泳泳和和双双相相免免疫疫扩扩散散两两种种方方法法的的结结合

14、合。将将抗抗原原样样品品在在琼琼脂脂平平板板上上先先进进行行电电泳泳，使使其其中中的的各各种种成成分分因因电电泳泳迁迁移移率率的的不不同同而而彼彼此此分分开开；然然后后加加入入抗抗体体做做双双相相免免疫疫扩扩散散，把把已已分分离离的的各各抗抗原原成成分分与与抗抗体体在在琼琼脂脂中中扩扩散散而而相相遇遇，在在二二者者比比例例适适当当的的地地方方，形成肉眼可见的沉淀弧。形成肉眼可见的沉淀弧。第三节第三节 常用电泳仪的基本结构及技术指标常用电泳仪的基本结构及技术指标一、常用电泳设备的基本结构一、常用电泳设备的基本结构 （一）电源（一）电源 （二）电泳槽（二）电泳槽 （三）附加装置（三）附加装置 垂直

15、电泳仪器装置示意图垂直电泳仪器装置示意图实验室常用电泳槽和电泳实验室常用电泳槽和电泳 第三节第三节 常用电泳仪的基本结构及技术指标常用电泳仪的基本结构及技术指标垂直板电泳槽和电源垂直板电泳槽和电源水平电泳槽、电泳仪水平电泳槽、电泳仪凝胶铺在水平的玻璃或塑料板上，凝胶铺在水平的玻璃或塑料板上，将凝胶直接浸入缓冲液中。将凝胶直接浸入缓冲液中。常用于琼脂糖电泳分离核酸。常用于琼脂糖电泳分离核酸。电泳槽中间是夹在一起的两块玻璃板，电泳槽中间是夹在一起的两块玻璃板，在玻璃平板中间制备电泳凝胶。垂直板在玻璃平板中间制备电泳凝胶。垂直板式电泳常用于聚丙烯酰胺凝胶电泳中蛋式电泳常用于聚丙烯酰胺凝胶电泳中蛋白质

16、的分离。白质的分离。第三节第三节 常用电泳仪的基本结构及技术指标常用电泳仪的基本结构及技术指标二、电泳仪的主要技术指标二、电泳仪的主要技术指标 1 1输出电压输出电压 6 6功率稳定度功率稳定度 2 2输出电流输出电流 7 7连续工作时间连续工作时间 3 3输出功率输出功率 8 8显示方式显示方式 4 4电压稳定度电压稳定度 9 9定时方式定时方式 5 5电流稳定度电流稳定度 第四节第四节 常用电泳仪简介常用电泳仪简介一、稳压稳流电泳仪一、稳压稳流电泳仪 稳压稳流电泳仪是稳压稳流电泳仪是目前国内中、稳压稳流电泳仪是稳压稳流电泳仪是目前国内中、低压电泳实验中应用最广泛的电泳仪之一。其输出电低压电

17、泳实验中应用最广泛的电泳仪之一。其输出电压的调节范围为压的调节范围为0V0V600V600V、输出电流为、输出电流为0 0 mAmA100mA100mA。这种电泳仪工作稳定性好、调节范围宽，并设有完善这种电泳仪工作稳定性好、调节范围宽，并设有完善的短路保护电路和过流保护电路。的短路保护电路和过流保护电路。稳压稳流电泳仪稳压稳流电泳仪第四节第四节 常用电泳仪简介常用电泳仪简介二、全自动醋纤膜电泳仪二、全自动醋纤膜电泳仪 全自动醋纤膜电泳仪为全自动电泳仪，有可见光全自动醋纤膜电泳仪为全自动电泳仪，有可见光单系统，使用醋酸纤维薄膜电泳片，优点为自动化程单系统，使用醋酸纤维薄膜电泳片，优点为自动化程度

18、高。只需将样品、试剂、电泳片放好，人员可离机度高。只需将样品、试剂、电泳片放好，人员可离机完成实验并得到结果。完成实验并得到结果。第四节第四节 常用电泳仪简介常用电泳仪简介三、全自动荧光三、全自动荧光/可见光双系统电泳仪可见光双系统电泳仪 全全自自动动荧荧光光/可可见见光光双双系系统统电电泳泳仪仪只只需需将将样样品品、试试剂剂和和琼琼脂脂糖糖凝凝胶胶电电泳泳胶胶片片放放好好后后，其其最最大大优优点点是是荧荧光光系系统统全全自自动动，只只需需要要20min20min即即可可完完成成电电泳泳分分析析，速速度非常快。操作人员可离机完成实验并得到结果。度非常快。操作人员可离机完成实验并得到结果。第四节

19、第四节 常用电泳仪简介常用电泳仪简介四、全自动琼脂糖电泳仪四、全自动琼脂糖电泳仪 全自动琼脂糖电泳仪，有可见光单系统，使全自动琼脂糖电泳仪，有可见光单系统，使用琼脂糖凝胶电泳胶片。灵敏度高，可适用于低用琼脂糖凝胶电泳胶片。灵敏度高，可适用于低浓度蛋白检验，如尿蛋白、脑脊液蛋白、同工酶浓度蛋白检验，如尿蛋白、脑脊液蛋白、同工酶的分离。但其自动化程度较差。的分离。但其自动化程度较差。由于这类电泳仪所能做的项目较多，且灵敏由于这类电泳仪所能做的项目较多，且灵敏度较高，仍为许多实验室所接受。度较高，仍为许多实验室所接受。第四节第四节 常用电泳仪简介常用电泳仪简介五、全自动电泳分析系统五、全自动电泳分析

20、系统 全自动电泳分析系统，将上述仪器的优点集于一全自动电泳分析系统，将上述仪器的优点集于一身，仪器自动点样、电泳、呈色（或染色、脱色）、身，仪器自动点样、电泳、呈色（或染色、脱色）、烘干，自动化程度非常高。可用各种电泳片，包括琼烘干，自动化程度非常高。可用各种电泳片，包括琼脂片、醋酸片、聚丙烯酰胺等，采用可见光及荧光呈脂片、醋酸片、聚丙烯酰胺等，采用可见光及荧光呈色双系统，是一种较理想的电泳仪。色双系统，是一种较理想的电泳仪。全自动电泳仪全自动电泳仪第五节第五节 毛细管电泳毛细管电泳一、毛细管电泳的基本工作原理一、毛细管电泳的基本工作原理 溶液中的带电粒子以高压电场为驱动力，沿毛细溶液中的带电

21、粒子以高压电场为驱动力，沿毛细管通道，以不同速度向与其所带电荷相反的电极方向管通道，以不同速度向与其所带电荷相反的电极方向迁移，并依据样品中各迁移，并依据样品中各组分之间淌度和分配行为组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离。上的差异而实现分离。高效毛细管电泳仪高效毛细管电泳仪第五节第五节 毛细管电泳毛细管电泳 毛细管电泳仪装置示意图毛细管电泳仪装置示意图第五节第五节 毛细管电泳毛细管电泳三、毛细管电泳的特点 1.高灵敏度 2.高速度 3.高分辨率 4.样品少 5.自动化程度高 6.应用范围广 TriSepTM-2010GV pCEC System第五节第五节 毛细管电泳毛细管电泳三、毛细管电

22、泳的分离模式三、毛细管电泳的分离模式 （一）毛细管区带电泳（一）毛细管区带电泳 它是通过在充满电解质溶液的毛细管中，不同质它是通过在充满电解质溶液的毛细管中，不同质荷比大小的组分，在电场的作用下，依迁移速度的不荷比大小的组分，在电场的作用下，依迁移速度的不同而进行分离。同而进行分离。根据组分的迁移时间进行根据组分的迁移时间进行 定性，根据电泳峰的峰面定性，根据电泳峰的峰面 积或峰高进行定量分析。积或峰高进行定量分析。毛细血管区带电泳原理图毛细血管区带电泳原理图第五节第五节 毛细管电泳毛细管电泳（二）毛细管凝胶电泳（二）毛细管凝胶电泳 毛细管凝胶电泳毛细管凝胶电泳(CGE)(CGE)常用聚丙烯酰

23、胺在毛细常用聚丙烯酰胺在毛细管内交联制成凝胶柱，依据分离支撑物的分离作用管内交联制成凝胶柱，依据分离支撑物的分离作用不同，不同，CGECGE又分为非变性又分为非变性CGECGE和变性和变性CGECGE，前者以分，前者以分子筛、电荷质量比的作用进行分离；后者则以质子筛、电荷质量比的作用进行分离；后者则以质量、分子筛的作用进行分离。量、分子筛的作用进行分离。适用于分离、测定肽类、蛋白质、适用于分离、测定肽类、蛋白质、DNADNA类物质类物质的分离。的分离。第五节第五节 毛细管电泳毛细管电泳（三）毛细管胶束电动色谱（三）毛细管胶束电动色谱(MECC)(MECC)MECC MECC系统中存在两个相：流

24、动的水相和起到固定系统中存在两个相：流动的水相和起到固定相作用的胶束相。相作用的胶束相。在含有胶束的流动相中，溶质在在含有胶束的流动相中，溶质在“水相水相”和和“胶胶束相束相”(准固定相准固定相)之间进行分配，即使是中性溶质，之间进行分配，即使是中性溶质，因其本身疏水性不同，在二者之间的分配也会有差异，因其本身疏水性不同，在二者之间的分配也会有差异，疏水性强的溶质在疏水性强的溶质在“胶束相胶束相”中停留时间长，迁移速中停留时间长，迁移速度就慢。反之，亲水性强的溶质迁移速度就快，最终度就慢。反之，亲水性强的溶质迁移速度就快，最终中性溶质将依其疏水性不同而得以分离。中性溶质将依其疏水性不同而得以分

25、离。第五节第五节 毛细管电泳毛细管电泳 毛细管胶束电动色谱原理图毛细管胶束电动色谱原理图第五节第五节 毛细管电泳毛细管电泳（四）毛细管等电聚焦电泳（四）毛细管等电聚焦电泳 不不同同等等电电点点的的分分子子分分别别聚聚集集在在不不同同的的位位置置上上，不不作作迁迁移移而而彼彼此此分分离离，这这就就是是等等电电聚聚焦焦分分离离过过程程。毛毛细细管管的的等等电电聚聚焦焦是是在在毛毛细细管管内内实实现现的的等等电电聚聚焦焦过过程程，具具有有极极高高的的分分辨辨率率，通通常常可可以以分分离离等等电电点点差差异异小小于于 0.01pH0.01pH单位的两种蛋白质，例如肽类、蛋白质的分离。单位的两种蛋白质，

26、例如肽类、蛋白质的分离。第五节第五节 毛细管电泳毛细管电泳（五）毛细管等速电泳（五）毛细管等速电泳 毛毛细细管管内内首首先先导导入入具具有有比比被被分分离离各各组组分分高高电电泳泳淌淌度度的的前前导导电电解解质质，然然后后进进样样，随随后后再再导导入入比比各各分分离离组组份份低低电电泳泳淌淌度度的的尾尾随随电电解解质质，在在强强电电场场的的作作用用下下，各各被被分分离离组组分分在在前前导导电电解解质质与与尾尾随随电电解解质质之之间间的的空空隙隙中中发生分离。发生分离。第五节第五节 毛细管电泳毛细管电泳（六）毛细管电色谱（六）毛细管电色谱 它包含了电泳和色谱两种机制，是在毛细管中填充它包含了电泳

27、和色谱两种机制，是在毛细管中填充 或在毛细管壁或在毛细管壁 上键合（或涂壁）固上键合（或涂壁）固 定相，从而构成毛细定相，从而构成毛细 管色谱柱，依靠电渗管色谱柱，依靠电渗 流推动流动相，携带流推动流动相，携带 样品迁移，根据样品样品迁移，根据样品 分子的质荷比、分子分子的质荷比、分子 尺寸及分配系数的差尺寸及分配系数的差 别而分离。别而分离。CEC-CEC-加压毛细管电色谱仪加压毛细管电色谱仪第五节第五节 毛细管电泳毛细管电泳（七）毛细管电泳芯片（七）毛细管电泳芯片 毛细管电泳芯片是在常规毛细管电泳的原理和技毛细管电泳芯片是在常规毛细管电泳的原理和技术基础上，利用微加工技术在平方厘米级大小的

28、芯片术基础上，利用微加工技术在平方厘米级大小的芯片上加工出各种微细结构，如通道和其它功能单元，通上加工出各种微细结构，如通道和其它功能单元，通过不同的通道、反应器、检测单元等的设计和布局，过不同的通道、反应器、检测单元等的设计和布局，实现样品的进样、反应、分离和检测，是一种多功能实现样品的进样、反应、分离和检测，是一种多功能化的快速、高效和低耗的微型实验装置。化的快速、高效和低耗的微型实验装置。第五节第五节 毛细管电泳毛细管电泳四、毛细管电泳仪的基本结构四、毛细管电泳仪的基本结构 毛细管电泳仪的结构并不复杂，主要有高压毛细毛细管电泳仪的结构并不复杂，主要有高压毛细管柱、检测器，以及两个管柱、检

29、测器，以及两个供毛细管两端插入而又可和电供毛细管两端插入而又可和电源相连的缓冲液槽。源相连的缓冲液槽。（一）毛细管柱（一）毛细管柱 （二）检测器（二）检测器 （三）毛细管电泳（三）毛细管电泳 法的进样技术法的进样技术 毛细管电泳仪毛细管电泳仪 第六节第六节 电泳仪的维护保养及故障排除电泳仪的维护保养及故障排除 一、电泳仪的维护保养一、电泳仪的维护保养 （一）每日维护（一）每日维护 （二）每周维护（二）每周维护 （三）每月维护（三）每月维护 （四）按需进行的维护（四）按需进行的维护 TriSep 毛细管电泳仪毛细管电泳仪 第六节第六节 电泳仪的维护保养及故障排除电泳仪的维护保养及故障排除二、电泳

30、仪的故障排除二、电泳仪的故障排除 电泳仪是精密仪器，在操作过程中要严格遵电泳仪是精密仪器，在操作过程中要严格遵守操作规程，但不可避免会出现各种各样的故障，守操作规程，但不可避免会出现各种各样的故障，当仪器提示有故障时，应立即处理。当仪器提示有故障时，应立即处理。BECKMAN COULTER毛细管电泳仪毛细管电泳仪 第六节第六节 电泳仪的维护保养及故障排除电泳仪的维护保养及故障排除故障信息故障信息引起故障可能原因引起故障可能原因解决方法解决方法转盘识别错误转盘识别错误细微灰尘吸附在灯上细微灰尘吸附在灯上 仪仪器器关关机机，用用洁洁净净棉棉签签轻轻轻轻拭拭去去灯灯上上面面的的灰尘。仪器开机后再进

31、行测定。灰尘。仪器开机后再进行测定。样品识别错误样品识别错误血清分离不好或者有灰尘吸附血清分离不好或者有灰尘吸附 关机状态，拆开仪器内透明有机玻璃，关机状态，拆开仪器内透明有机玻璃，用无水乙醇擦拭加样针外壁，然后安装用无水乙醇擦拭加样针外壁，然后安装好，再用仪器内程序进行加样针清洗，好，再用仪器内程序进行加样针清洗，洗完洗完 12 次后，进行加样针加样感应次后，进行加样针加样感应定位。定位。仪器报警出现缺少稀仪器报警出现缺少稀释杯或稀释杯感应释杯或稀释杯感应错误错误仪器稀释杯位置错误仪器稀释杯位置错误 观观察察稀稀释释杯杯位位置置，如如果果没没有有处处于于正正常常位位置置，可可手手动动将将其其

32、移移动动到到其其原原来来位位置置，然然后后进行稀释杯感应定标。进行稀释杯感应定标。曲线不理想，显示不稳曲线不理想，显示不稳定定毛细管的长期使用出现不清洁毛细管的长期使用出现不清洁 毛毛细细管管清清洗洗程程序序进进行行清清洗洗，然然后后按按激激活活程程序进行激活既可序进行激活既可电泳时出现峰丢失电泳时出现峰丢失未接入检测器，或检测器不起作用未接入检测器，或检测器不起作用，进进样温度太低样温度太低，柱箱温度太低，无载柱箱温度太低，无载气流气流 检查设定值。检查设定值。检检 查查 温温 度度，并并 根根 据据 需需 要要 调调 整整。检检 查查 温温 度度，并并 根根 据据 需需 要要 调调 整整。

33、检检查查压压力力调调节节器器，并并检检查查泄泄漏漏，验验证证柱柱进品流速。进品流速。运行过程中突然断电运行过程中突然断电电流量不稳定或仪器内有短路现象电流量不稳定或仪器内有短路现象采用稳压措施，咨询工程师更换保险采用稳压措施，咨询工程师更换保险毛细管电泳仪常见故障及故障排除方法毛细管电泳仪常见故障及故障排除方法 第七节第七节 电泳仪的临床应用电泳仪的临床应用一、一、血清蛋白电泳血清蛋白电泳 新鲜血清经醋酸纤维薄膜或琼脂糖电泳、新鲜血清经醋酸纤维薄膜或琼脂糖电泳、染色后，通常可见染色后，通常可见5 5条带，即清蛋白、条带，即清蛋白、1 1、2 2、和和 球蛋白。许多疾病总血清蛋白浓度和各蛋白组球

34、蛋白。许多疾病总血清蛋白浓度和各蛋白组分的比例有所改变，通过血清蛋白电泳图谱能帮分的比例有所改变，通过血清蛋白电泳图谱能帮助我们对某些疾病进行诊断及鉴别诊断。助我们对某些疾病进行诊断及鉴别诊断。血清蛋白电泳图谱血清蛋白电泳图谱第七节第七节 电泳仪的临床应用电泳仪的临床应用二、尿蛋白电泳二、尿蛋白电泳 临床进行尿蛋白电泳的主要目的是：临床进行尿蛋白电泳的主要目的是：确定确定尿蛋白的来源；尿蛋白的来源；了解肾脏病变的严重程度（选了解肾脏病变的严重程度（选择性蛋白尿与非选择性蛋白尿），从而有助于诊择性蛋白尿与非选择性蛋白尿），从而有助于诊断和预后的判断。断和预后的判断。当不能进行肾活检时当不能进行肾

35、活检时 ，尿蛋白电泳结果能，尿蛋白电泳结果能 很好地协助临床判断很好地协助临床判断 肾脏的主要损害。肾脏的主要损害。尿蛋白电泳图谱尿蛋白电泳图谱第七节第七节 电泳仪的临床应用电泳仪的临床应用 三、血红蛋白及糖化血红蛋白电泳三、血红蛋白及糖化血红蛋白电泳 应用电泳法鉴别患者血液中应用电泳法鉴别患者血液中HbHb的类型及含量，的类型及含量，对于贫血类型的临床诊断及治疗具有重大意义。对于贫血类型的临床诊断及治疗具有重大意义。HbHb电泳结果应根据不同年龄人群进行分析。电泳结果应根据不同年龄人群进行分析。血红蛋白电泳图谱血红蛋白电泳图谱第七节第七节 电泳仪的临床应用电泳仪的临床应用四、免疫固定电泳四、

36、免疫固定电泳 可对各类Ig及其轻链进行分型，最常用于临床常规M蛋白的分型与鉴定。一般用于单克隆Ig增殖病、单克隆Ig病、本周氏蛋白和游离轻链病、多组分单克隆Ig病、重链病、CSF寡克隆蛋白鉴 别、多克隆Ig病的 诊断和鉴别诊断 免疫固定电泳图谱免疫固定电泳图谱第七节第七节 电泳仪的临床应用电泳仪的临床应用 五、五、同工酶电泳同工酶电泳 同工酶电泳用于临床上常见的同工酶或同工同工酶电泳用于临床上常见的同工酶或同工酶亚型分析。酶亚型分析。1 1乳酸脱氢酶乳酸脱氢酶(LD/LDH)(LD/LDH)同工酶同工酶 2 2肌酸激酶（肌酸激酶（CKCK）同工酶）同工酶 3 3CKCK同工酶亚型同工酶亚型 同工酶电泳图谱同工酶电泳图谱第七节第七节 电泳仪的临床应用电泳仪的临床应用六、脂蛋白电泳六、脂蛋白电泳 脂蛋白电泳检测各种脂蛋白（包括胆固醇和甘油三脂蛋白电泳检测各种脂蛋白（包括胆固醇和甘油三酯）主要用于高脂血症的分型、冠心病危险性估计，酯）主要用于高脂血症的分型、冠心病危险性估计，以及动脉粥样硬化性及相关疾病的发生、发展、诊断以及动脉粥样硬化性及相关疾病的发生、发展、诊断和治疗（包括治疗性生活方式改变、饮食及调脂药物和治疗（包括治疗性生活方式改变、饮食及调脂药物冶疗）效果观察的研究等。冶疗）效果观察的研究等。脂蛋白电泳图谱脂蛋白电泳图谱谢谢 谢谢