其他革兰阴性杆菌的常规检验.ppt

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1、其他革兰阴性杆菌的常规检验其他革兰阴性杆菌的常规检验嗜血杆菌属嗜血杆菌属嗜肺军团菌属嗜肺军团菌属布鲁菌布鲁菌百日咳鲍特菌百日咳鲍特菌弯曲菌弯曲菌幽门螺杆菌幽门螺杆菌流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌G-小杆菌，多形性小杆菌，多形性有毒菌株形成荚膜有毒菌株形成荚膜培养基中需加入血液，以提供培养基中需加入血液，以提供X因子因子和和V因子因子（巧克力色培养基巧克力色培养基）X因子血红素因子血红素 V因子辅酶因子辅酶或辅酶或辅酶菌落光滑、无色透明、露滴状菌落光滑、无色透明、露滴状CO2培养培养“卫星现象卫星现象”卫星现象卫星现象流感嗜血杆菌与金流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在黄色葡萄球菌在血血平板平板上共同孵育时

2、，上共同孵育时，由于后者能合成较由于后者能合成较多的多的V因子因子，在金黄，在金黄色葡萄球菌菌落周色葡萄球菌菌落周围生长的流感嗜血围生长的流感嗜血杆菌的菌落较大，杆菌的菌落较大，离金黄色葡萄球菌离金黄色葡萄球菌菌落越远的越小。菌落越远的越小。根据荚膜抗原分根据荚膜抗原分ABCDEF六型，六型，B型型毒力最强毒力最强可产生自溶酶可产生自溶酶致病物质：荚膜、菌毛、内毒素、致病物质：荚膜、菌毛、内毒素、IgAIgA蛋蛋白酶白酶所致疾病所致疾病 原发感染：脑膜炎、鼻咽炎等，多见于儿原发感染：脑膜炎、鼻咽炎等，多见于儿童童 继发感染：鼻窦炎等，多见于成人继发感染：鼻窦炎等，多见于成人微生物学检查微生物学

3、检查 标本标本（脑脊液、痰、血液、脓液）（脑脊液、痰、血液、脓液）涂片染色镜检涂片染色镜检分离培养分离培养鉴定试验鉴定试验结果报告结果报告G-性杆菌性杆菌多形性多形性“卫星现象卫星现象”检出流感嗜血杆菌鉴定依据鉴定依据革兰阴性小杆菌、多形性革兰阴性小杆菌、多形性培养采用巧克力色培养基，培养采用巧克力色培养基，CO2培养培养血平板上有血平板上有“卫星现象卫星现象”X、V因子需求试验因子需求试验军团菌军团菌是引起军团菌病的病原体是引起军团菌病的病原体首发于首发于1976年的美国一次军人聚会，故年的美国一次军人聚会，故称作军团病称作军团病 1982年年,在我国南京首次证实了军团菌病。在我国南京首次证

4、实了军团菌病。形态染色形态染色革兰阴性，但不易被着色革兰阴性，但不易被着色杆菌，形态有多形性杆菌，形态有多形性Gimenen染色，菌体呈红色，背景为绿染色，菌体呈红色，背景为绿色色不形成芽孢，无荚膜不形成芽孢，无荚膜，有端生或侧生鞭毛有端生或侧生鞭毛培养特性培养特性营养要求高营养要求高专性需氧专性需氧需需2.55CO2生长缓慢生长缓慢常用培养基及菌落特征常用培养基及菌落特征 BCYE培养基：灰白色、圆形光滑湿润菌落培养基：灰白色、圆形光滑湿润菌落 F-G培养基：针尖大小、黄色荧光培养基：针尖大小、黄色荧光军团菌菌落形态军团菌菌落形态(CYE琼脂培养基琼脂培养基)抗原结构抗原结构抗原：具有型特异

5、性抗原：具有型特异性 军团菌病约军团菌病约90%的是由嗜肺军团菌所致的是由嗜肺军团菌所致,已发现已发现15个血清型个血清型，其中以，其中以Lp1血清型血清型最常见最常见,Lp6次之。次之。抵抗力抵抗力分布广泛、抵抗力强分布广泛、抵抗力强水中存活时间长水中存活时间长军团菌病的主要污染源是供水系统及冷军团菌病的主要污染源是供水系统及冷却塔和空调系统却塔和空调系统 定期清洗空调定期清洗空调 预防军团菌病预防军团菌病临床意义临床意义致病物质：内毒素、外毒素、侵袭性酶致病物质：内毒素、外毒素、侵袭性酶传染途径：呼吸道（吸入含有军团菌的传染途径：呼吸道（吸入含有军团菌的气溶胶）气溶胶）所致疾病：军团菌病所

6、致疾病：军团菌病 肺炎型肺炎型 非肺炎型（类似感冒）非肺炎型（类似感冒）免疫性：感染者血清中出现特异性免疫性：感染者血清中出现特异性IgG、IgM抗体抗体微生物学检查微生物学检查 标本标本（痰、支气管分泌物、血液、）（痰、支气管分泌物、血液、）涂片染色镜检涂片染色镜检 （Giemsa染色染色）分离培养分离培养（BEYE琼脂）琼脂）鉴定试验鉴定试验结果报告结果报告形态染色形态染色菌落特征菌落特征氧化酶、触酶氧化酶、触酶荧光抗体染色等荧光抗体染色等血清学试验血清学试验检测指标：检测患者血清中特异性抗体检测指标：检测患者血清中特异性抗体方法：方法：ELISA意义：意义：检测特异性检测特异性IgM：诊

7、断军团菌病：诊断军团菌病 检测特异性检测特异性IgG：军团菌病流行病学调查：军团菌病流行病学调查布鲁菌属布鲁菌属引起布鲁菌病（波状热）引起布鲁菌病（波状热）可引起人畜共患病可引起人畜共患病我国流行菌种主要是羊、牛、猪布鲁菌，我国流行菌种主要是羊、牛、猪布鲁菌，以羊布鲁菌最常见以羊布鲁菌最常见属细胞被寄生菌属细胞被寄生菌形态染色形态染色革兰阴性球杆菌革兰阴性球杆菌光滑型有微荚膜，无芽孢，无鞭毛光滑型有微荚膜，无芽孢，无鞭毛常用染色法：常用染色法：改良改良Ziehl-Neelsen染色法：菌体染色法：菌体红色红色，背景为蓝色背景为蓝色柯兹洛夫斯基染色法：菌体柯兹洛夫斯基染色法：菌体红色红色，背景，背景绿色绿色培养特性培养特性专性需氧、专性需氧、510CO2营养要求高，常用肝浸液培养基营养要求高，常用肝浸液培养基生长缓慢生长缓慢菌落细小、无色透明、光滑菌落细小、无色透明、光滑生化反应生化反应氧化酶、触酶：氧化酶、触酶：氧化分解葡萄糖氧化分解葡萄糖产生硫化氢产生硫化氢抗原构造抗原构造菌种菌种M抗原：抗原：A抗原抗原羊布鲁菌羊布鲁菌20：1牛布鲁菌牛布鲁菌1：20猪布鲁菌猪布鲁菌1：2