体外受精和早期胚胎培养 .pptx

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1、胚胎工程胚胎工程第1页/共28页国产奶牛：年均产奶量3000公斤左右国际良种奶牛：年均产奶量10000公斤左右我国蒙古黄牛：均重300Kg海福特肉用牛：2岁体重可达800Kg1.1.引进一头良种成年奶牛需要引进一头良种成年奶牛需要3 3万万5 5万元万元2.2.牛牛的的生生育育率率低低，一一头头牛牛一一胎胎只只一一个个，一一生生只只能能生生育四五次育四五次第2页/共28页牛牛的的生生育育率率虽虽然然很很低低，但但是是牛牛的的卵卵母母细细胞胞却却相相当当的的多多，其其卵卵巢巢中中卵卵母母细细胞胞数数目目要要比比一一生生中中排排卵卵数数多多10001000倍左右倍左右公牛产生的精子数目就更多了公牛

2、产生的精子数目就更多了伟大设想诞生了伟大设想诞生了第3页/共28页(1)概念：通通过过人人工工操操作作使使卵卵子子和和精精子子在在体体外外条条件件下下成成熟熟和和受受精精，并并通通过过培培养养发发育育为为早早期期胚胚胎胎后后，再再经经过过移移植植产生后代的技术产生后代的技术(2)过程卵子卵子受精卵受精卵早期胚胎早期胚胎子宫子宫精子精子个体个体试管动物技术试管动物技术第4页/共28页从试管牛说起从试管牛说起实实现现良良种种牛牛快快速速大大量量繁繁殖殖首首先先要要做做的的是是（体体外外受受精精 ）和和（早期胚胎早期胚胎）的培养）的培养体外受精：采取雌性动物的（卵细胞）和雄性动物的（精子），使其在（

3、试管）中受精。第5页/共28页试管动物克隆动物生殖方式技术手段遗传规律1.思考一下，试管动物和克隆动物的比较？有性生殖有性生殖 无性生殖无性生殖体外受精、体外受精、胚胎移植胚胎移植核移植技术、核移植技术、胚胎移植胚胎移植遵循遵循不遵循不遵循第6页/共28页1、卵母细胞的采集和培养2、精子的采集和获能3、受精二、体外受精：二、体外受精：第7页/共28页用促性腺激素处理，使其排出更多的卵子，然后，从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。对不同动物对不同动物,采取卵母细胞的方法不同采取卵母细胞的方法不同第8页/共28页不同动物不同动物,采集卵母细胞的方法不同：采集卵母细胞的方法不同：实验动物

4、如小鼠、兔，以及家畜猪、羊等卵细实验动物如小鼠、兔，以及家畜猪、羊等卵细胞的采集：胞的采集：最常用的方法是卵巢经过最常用的方法是卵巢经过 处理。处理。具体做法是给供体注射具体做法是给供体注射 ，使一头母，使一头母畜一次排出比自然情况下多几倍到十几倍的卵畜一次排出比自然情况下多几倍到十几倍的卵子，之后从子，之后从 中冲取卵子，直接与获能的中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。精子在体外受精。超数排卵超数排卵促性腺激素促性腺激素输卵管输卵管第9页/共28页大家畜或大型动物，如牛，卵细胞的采集：大家畜或大型动物，如牛，卵细胞的采集：从屠宰场已屠宰母畜的从屠宰场已屠宰母畜的 中采集卵母细中采集卵母细

5、胞；胞；也可以借助也可以借助 、或或 等工具确定卵泡位置，直接从活体动物中等工具确定卵泡位置，直接从活体动物中吸取泡卵液（连同卵母细胞）取出。吸取泡卵液（连同卵母细胞）取出。卵巢卵巢超声波超声波(B超超)探测仪探测仪 内窥镜内窥镜腹腔镜腹腔镜注意：后两种方法采集的卵母细胞需在体外培养成熟后才能与获能的精子受精。第10页/共28页活体采集的牛卵母细胞第11页/共28页超声波探测仪超声波探测仪第12页/共28页第13页/共28页卵母细胞的成熟培养：CO2培养箱第14页/共28页培养箱第15页/共28页1.不同方法采集的卵母细胞成熟程度相同吗？不同方法采集的卵母细胞成熟程度相同吗？能不能直接用于体外

6、受精？能不能直接用于体外受精？为什么？为什么？不同不同初级卵母细胞，体外培养至初级卵母细胞，体外培养至MII中期中期不能。不能。2.如何让雌性动物排出更多的卵细胞？超数排卵，给供体注射促性腺激素。超数排卵，给供体注射促性腺激素。第16页/共28页精子的收集和获能精子的收集和获能 收集精子的收集精子的方法有：方法有：假阴道法假阴道法手握法手握法电刺激法电刺激法第17页/共28页受精受精 获能的精子获能的精子和培养成熟的卵和培养成熟的卵子，一般情况下子，一般情况下在在 或或中完成受精过程。中完成受精过程。获能溶液获能溶液专用受精溶液专用受精溶液第18页/共28页获能的精子成熟的卵子（MII）受精卵

7、获能液或受精液或受精液胚胎胚胎发育培养液发育培养液第19页/共28页三、三、胚胎的早期培养胚胎的早期培养培养液成分：培养液成分：有机盐有机盐、无机盐无机盐、激素、维生素维生素、氨氨基酸基酸、核苷酸核苷酸、血清血清等等第20页/共28页培养发育到适宜阶段时，可将其取出向受体移植或冷动保存。不同动物胚胎移植时间不同桑椹胚阶段：桑椹胚阶段：牛、羊牛、羊8个或个或16细胞胚阶段：细胞胚阶段：小鼠、家兔小鼠、家兔4个细胞胚阶段：个细胞胚阶段：试管婴儿试管婴儿检查受精状况和受精卵的发育能力。检查受精状况和受精卵的发育能力。目的：目的：第21页/共28页1.以牛为例，从屠宰场收集卵巢中的卵母细胞进行体外受精

8、的应用效果如何？目前，从屠宰场废弃的卵巢中，每个卵巢平均可采集10枚左右可用卵母细胞，经体外培养成熟和受精后约可获4枚可用的胚胎，经过移植给受体母牛，最终可得到12头犊牛。牛的体外受精胚胎的工厂化生产已在一些发达国家开展。第22页/共28页第23页/共28页采集良种母牛卵母细胞采集良种公牛精子卵母细胞的体外培养精子体外获能体外受精良种牛体外受精胚胎受体牛良种犊牛成熟期牛屠宰加工厂采集卵巢中卵母细胞市场“试试管管牛牛”工工业业化化生生产产的的技技术术流流程程图图胚胎移植第24页/共28页小结：试管牛工厂化生产技术流程小结：试管牛工厂化生产技术流程（）（包括卵细胞采集、精子的获能、）（包括卵细胞采

9、集、精子的获能、受精等步骤）受精等步骤）（）（）（）良种牛犊良种牛犊 成熟期牛成熟期牛例题例题1 1 从澳大利亚和新西兰引进一流良种从澳大利亚和新西兰引进一流良种无无角道赛特肉用绵羊角道赛特肉用绵羊和和布尔肉用山羊布尔肉用山羊，能否设，能否设计一种快速繁殖子代个体，而又大大缩短良计一种快速繁殖子代个体，而又大大缩短良种本身周期的办法？简述其具体的过程。种本身周期的办法？简述其具体的过程。体外受精体外受精早期胚胎的培养早期胚胎的培养胚胎移植胚胎移植代孕母牛代孕母牛第25页/共28页 能。能。分别取赛特肉用绵羊和布尔肉用山羊的卵母分别取赛特肉用绵羊和布尔肉用山羊的卵母细胞和精子，然后做以下处理：细胞和精子，然后做以下处理：卵母细胞培养成熟卵母细胞培养成熟 精子获能精子获能体外受精体外受精受精卵受精卵早期胚胎早期胚胎胚胚胎胎移移植植普通羊子宫里普通羊子宫里幼体幼体发育发育分娩分娩第26页/共28页小结试管动物技术概念过程体外受精卵细胞的采集精子的采集和获能受精胚胎早期培养胚胎移植第27页/共28页感谢您的观看！第28页/共28页