感染性疾病的实验诊断知识讲解.ppt
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1、感染性疾病的实验诊断各种类型的肝炎病毒的传播途径甲型肝炎病毒与戊型肝炎病毒由消化道传播,引甲型肝炎病毒与戊型肝炎病毒由消化道传播,引甲型肝炎病毒与戊型肝炎病毒由消化道传播,引甲型肝炎病毒与戊型肝炎病毒由消化道传播,引起急性肝炎,不转为慢性肝炎或慢性携带者。起急性肝炎,不转为慢性肝炎或慢性携带者。起急性肝炎,不转为慢性肝炎或慢性携带者。起急性肝炎,不转为慢性肝炎或慢性携带者。乙型与丙型肝炎病毒主要由输血、血制品或注射乙型与丙型肝炎病毒主要由输血、血制品或注射乙型与丙型肝炎病毒主要由输血、血制品或注射乙型与丙型肝炎病毒主要由输血、血制品或注射器污染而传播,除引起急性肝炎外,可致慢性肝器污染而传播,
2、除引起急性肝炎外,可致慢性肝器污染而传播,除引起急性肝炎外,可致慢性肝器污染而传播,除引起急性肝炎外,可致慢性肝炎,并与肝硬化及肝癌相关。炎,并与肝硬化及肝癌相关。炎,并与肝硬化及肝癌相关。炎,并与肝硬化及肝癌相关。丁型肝炎病毒为一种缺陷病毒,必须在乙型肝炎丁型肝炎病毒为一种缺陷病毒,必须在乙型肝炎丁型肝炎病毒为一种缺陷病毒,必须在乙型肝炎丁型肝炎病毒为一种缺陷病毒,必须在乙型肝炎病毒的存在下才能复制。病毒的存在下才能复制。病毒的存在下才能复制。病毒的存在下才能复制。一、甲型肝炎病毒Hepatitis A virus,HAV小小RNA病毒科病毒科 肝肝RNA病毒属病毒属1、标本采集血清:采集到
3、急性期和恢复期的血清。粪便:发病前2周内或出现症状后几天采集。2、参考范围抗HAV-IgM、抗HAV-IgA:阴性。HAV抗原:阴性。HAV-RNA:阴性。3、检测方法:抗原和抗体的检测用ELISA。HAV-RNA的检测用PCR。4、临床意义(1)抗HAV-IgM阳性率在发病后2周最高,约6个月后转为阴性,抗HAV-IgM阳性说明机体正在感染HAV,它是早期诊断甲肝的特异性指标。(2)抗HAV-IgG阳性提示既往感染,可作为流行病学调查的指标。(3)HAV-RNA阳性对诊断HAV感染具有特异性。二、乙型肝炎病毒HBV属属 嗜肝嗜肝DNA病毒科病毒科(Hepadnaviridae)土拨鼠肝炎病毒
4、(土拨鼠肝炎病毒(WHV)地松鼠肝炎病毒地松鼠肝炎病毒(GSHV)鸭乙型肝炎病毒(鸭乙型肝炎病毒(DHBV)苍鹭乙型肝炎病毒(苍鹭乙型肝炎病毒(HHBV)HBV的发现源于表面抗原的研究。的发现源于表面抗原的研究。1963年年Blumberg首先在澳大利亚土著人血清中发现一种首先在澳大利亚土著人血清中发现一种新抗原,称为澳大利亚抗原(新抗原,称为澳大利亚抗原(Australia antigen);直至);直至1968年确定这种抗原与血清型年确定这种抗原与血清型肝炎密切相关,称为肝炎相关抗原(肝炎密切相关,称为肝炎相关抗原(hepatitis associated antigen,HAA););1
5、970年年D.S.Dane在肝炎患者血清中发现具有传染性的颗粒,在肝炎患者血清中发现具有传染性的颗粒,即即Dane颗粒(颗粒(Danes particle)。从而)。从而HBV被确被确认。认。HBV是是乙型肝炎乙型肝炎病原体,主要经输血、注射、病原体,主要经输血、注射、性行为和母婴传播。起病徐缓,部分患者可转为性行为和母婴传播。起病徐缓,部分患者可转为慢性,少数还可导致肝硬化和肝癌。慢性,少数还可导致肝硬化和肝癌。HBV HBV形态结构形态结构(三种形态的病毒颗粒三种形态的病毒颗粒)大球形颗粒大球形颗粒(Dane颗粒)颗粒)小球形颗粒小球形颗粒管形颗粒管形颗粒电镜下的HBV1、标本采集:血清2
6、、检测方法:抗原抗体定性用ELISA。抗原抗体的定量检测用化学发光免疫分析。核酸分析(HBV-DNA)用PCR。3、参考范围HBsAg和和HBeAg和抗和抗HBe、HBV-DNA以及抗以及抗HBcIgM和抗和抗HBcIgG均为阴性,均为阴性,抗抗HBs阴性或者阴性或者10IUL,注射乙肝疫苗后阳性为,注射乙肝疫苗后阳性为接种成功。接种成功。乙肝抗原抗体检测乙肝抗原抗体检测HBsAg/抗抗HBsHBeAg/抗抗HBe 抗抗HBc 俗称“二对半”或“乙肝五项”。检测“二对半”的目的是判断有无HBV感染及其感染状态如何。4、临床意义(1)乙型肝炎病毒表面抗原(乙型肝炎病毒表面抗原(HbsAg)Hbs
7、Ag为为HBV中中Dane颗粒外层的脂蛋白囊膜,其编颗粒外层的脂蛋白囊膜,其编码基因位于码基因位于HBV双链双链DNA的的S区。区。HbsAg在感染后在感染后1-2个个月出现于血清中,可持续数周数月甚至数年。月出现于血清中,可持续数周数月甚至数年。慢性乙型肝炎及携带者慢性乙型肝炎及携带者HBsAg 可呈阳性。可呈阳性。患急性乙肝后患急性乙肝后HBsAg阳性持续阳性持续6个月以上、肝功能异常、个月以上、肝功能异常、HBV-DNA阳阳性者可能发展为慢性乙肝或者肝硬化,应积极治疗。性者可能发展为慢性乙肝或者肝硬化,应积极治疗。HBsAg无症状持续阳性无症状持续阳性6个月以上或者持续多年,肝功能个月以
8、上或者持续多年,肝功能正常、正常、HBV-DNA阴性者,可进行医学观察,不必治疗。阴性者,可进行医学观察,不必治疗。(2)乙肝病毒表面抗体()乙肝病毒表面抗体(HBsAb)HBsAb是目前公认的针对是目前公认的针对HBsAg的保护的保护性抗体,性抗体,它对它对HBsAg有一定的中和作用,是机体具有免有一定的中和作用,是机体具有免疫力的标志。疫力的标志。【临床意义】【临床意义】阳性见于阳性见于既往感染过既往感染过HBV,现已恢复,现已恢复,阳性可持续阳性可持续 多年。多年。注射过乙肝疫苗或者注射过乙肝疫苗或者HBsAb免疫球蛋白者。免疫球蛋白者。(3)乙肝病毒)乙肝病毒e抗原(抗原(HBeAg)
9、HBeAg是是HBV核心颗粒中的一种可溶核心颗粒中的一种可溶性蛋白质,具有抗原性。性蛋白质,具有抗原性。【临床意义】【临床意义】HBeAg阳性表明乙肝病毒处于复制期,阳性表明乙肝病毒处于复制期,具有较强的传染性。具有较强的传染性。如患者如患者HBeAg持续阳持续阳性,表明肝细胞损害较重,可发展为慢性性,表明肝细胞损害较重,可发展为慢性乙型肝炎或者肝硬化,孕妇则可以引起垂乙型肝炎或者肝硬化,孕妇则可以引起垂直传播给新生儿。直传播给新生儿。(4)乙肝病毒)乙肝病毒e抗体(抗体(HBeAb)HBeAb是乙肝患者或者携带者经是乙肝患者或者携带者经HBeAg刺激后产生的一种特异性抗体,继刺激后产生的一种
10、特异性抗体,继HBsAb后出现于血液中,后出现于血液中,未具有保护性未具有保护性。HBeAb阳性表示大部分乙肝病毒被消除,病毒复制减少,传染性减低。一些慢性乙型肝炎、肝硬化、肝癌患者可阳性。(5)乙肝病毒核心抗体()乙肝病毒核心抗体(HBcAb)HBcAb有有IgM、IgG、IgA三种,一般三种,一般实验室通常检测抗实验室通常检测抗HBc总抗体和总抗体和IgM类抗体。类抗体。抗HBc总抗体对机体无保护作用,阳性可持续数年甚至终生,见于急、慢性乙肝,肝癌病人及部分HBsAg阴性者。抗HBc-IgM抗体阳性是HBV近期感染的敏感指标,也是HBV在体内持续复制的指标,提示病人有传染性,抗HBc-Ig
11、M抗体阴转,提示乙肝逐渐恢复。(6)HBV血清学标志物检测常见结果的解释血清标志物12345结果解释血液传染性+-+-潜伏期或者急性期高+-+-+急性或者慢性感染(大三阳)高+-+急性或者慢性感染(小三阳)低-+-+痊愈或恢复期,有免疫力无-+-+痊愈,有免疫力无-+既往感染,恢复早期无-+-疫苗接种后获得免疫力。无三、丙型肝炎病毒丙型肝炎病毒(丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)引起丙型肝炎。引起丙型肝炎。HCV主要经血或血制品传播,目前占输主要经血或血制品传播,目前占输血后肝炎的血后肝炎的80%90%。在我国丙型肝炎。在我国丙型肝炎流行率为流行率为2.1%。其临床和流
12、行病学特点类。其临床和流行病学特点类似乙型肝炎,但症状较轻,演变为慢性者似乙型肝炎,但症状较轻,演变为慢性者多见,部分患者可发展为肝硬化或肝癌。多见,部分患者可发展为肝硬化或肝癌。目前对目前对HCV尚不能通过血清分型,而根据尚不能通过血清分型,而根据基因序列同源性及亲缘关系分析可将世界基因序列同源性及亲缘关系分析可将世界各地分离到的毒株分为各地分离到的毒株分为型型6个基因型,个基因型,每个型又可分为亚型每个型又可分为亚型(a、b、c表示表示)。欧美。欧美流行株多为流行株多为型,而亚洲和我国流行的多型,而亚洲和我国流行的多为为型。型。1、标本采集:血清2、检测方法抗体检测用ELISA或者化学发光
13、免疫分析。HCV-RNA检测用PCR。3、参考范围:HCV抗体为阴性,HCV-RNA阴性。HCV的形态结构4、临床意义1、抗HCV-IgM阳性见于急性HCV感染,具传染性,约6个月后转为阴性,否则容易转为慢性丙型肝炎;2、抗HCV-IgG阳性提示既往感染;3、在疾病早期如果HCV抗体阴性,可做HCV-RNA检测,以排除HCV感染。四、丁肝病毒HDV是一种缺陷病毒,必须是一种缺陷病毒,必须依赖嗜肝依赖嗜肝DNA病毒才能复制。病毒才能复制。由由HBsAg构成其外壳构成其外壳HDV定位于肝细胞核内,在血液中由定位于肝细胞核内,在血液中由HBsAg包被,形成包被,形成35-37nm颗粒颗粒单负链环状单
14、负链环状RNAHDV的结构的结构丁肝特点只能感染只能感染HBsAgHBsAg阳性的病人阳性的病人Coinfection-concurrentinfectionatthesametime;Superinfection-HDVinfectionoccursoncarriersofHBV.我国丁肝感染率在我国丁肝感染率在1.6%-5%1.6%-5%,西南地区,西南地区HDVHDV感染使慢性乙肝病情加重和恶化感染使慢性乙肝病情加重和恶化五、戊型肝炎病毒1989年在美国夏威夷召开的国际肝癌会上,年在美国夏威夷召开的国际肝癌会上,将肠道传播的非甲非乙型肝炎病毒正式命将肠道传播的非甲非乙型肝炎病毒正式命名为
15、名为戊型肝炎病毒(戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV),是戊型肝炎(,是戊型肝炎(hepatitis E,HE)的病原体。的病原体。戊型肝炎主要经粪口途径传播常引起戊型肝炎主要经粪口途径传播常引起大流行,其临床和流行病学特点类似甲型大流行,其临床和流行病学特点类似甲型肝炎。肝炎。项目甲型肝炎乙型肝炎丙型肝炎丁型肝炎戊型肝炎病毒HAVHBVHCVHDVHEV病毒分类小RNA病毒嗜肝DNA病毒黄病毒(缺陷病毒)原为杯状病毒病毒大小27nm42nm3060nm40nm2734nm基因组ssRNA(+)7.5kbdsDNA3,2kbssRNA(+)10kbssRNA(-)1.7k
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