实验五菜花中核酸的分离.ppt

《实验五菜花中核酸的分离.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《实验五菜花中核酸的分离.ppt（6页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、实验五 菜花中核酸的分离 Still waters run deep.流静水深流静水深,人静心深人静心深 Where there is life,there is hope。有生命必有希望。有生命必有希望一、核酸的分离一、核酸的分离1.称取称取10g菜花菜花剪碎剪碎加入加入10ml 95的的乙醇乙醇（注意分三次添加注意分三次添加）研磨研磨倒入离心管倒入离心管v=10000,离心离心6min2.弃去上清液弃去上清液沉淀中加入沉淀中加入10ml丙酮丙酮振荡均振荡均匀匀离心离心6min,v=100003.弃去上清液弃去上清液沉淀在冰盐浴中加入沉淀在冰盐浴中加入10ml 5%的的HClO4 振荡均匀振

2、荡均匀离心离心6min,v=100004.弃去上清液弃去上清液沉淀中加入沉淀中加入10ml95%的的乙醇乙醇振荡均匀振荡均匀离心离心6min,v=100005.5.弃去上清液弃去上清液沉淀中加入沉淀中加入10ml10ml丙酮丙酮振荡均匀振荡均匀离心离心6min,v=10000.6min,v=10000.6.6.弃去上清液弃去上清液沉淀中加入沉淀中加入1 10ml0ml10%10%的的NaClNaCl溶液溶液振荡均匀振荡均匀在沸水浴中加热在沸水浴中加热15min15min冷却冷却离心离心5min,v=60005min,v=60007.7.将上清液倒入试管为提取物一将上清液倒入试管为提取物一沉淀中

3、沉淀中加入加入5ml5ml 0.5 mol/L 0.5 mol/L 的的HClOHClO4 4 在在7070水水浴中加热浴中加热20min20min冷却离心冷却离心5min,v=60005min,v=60008.8.将上清液倒入试管为提取物二将上清液倒入试管为提取物二提取物提取物一二做好标记一二做好标记二、核酸的定性鉴定二、核酸的定性鉴定1.1.二苯胺反应二苯胺反应试管号试管号12345DW（ml）1DNA溶液溶液（ml）1RNA溶液溶液（ml）1提取物一提取物一（ml）1提取物二提取物二（ml）1二苯胺试剂二苯胺试剂（ml）22222沸水中加热沸水中加热10min的现象的现象2.2.苔黑酚反应苔黑酚反应试管号试管号678910DW（ml）1DNA溶液（溶液（ml）1RNA溶液（溶液（ml）1提取物一（提取物一（ml）1提取物二（提取物二（ml）1FeCl3浓浓HCl溶液（溶液（ml）22222苔黑酚乙醇溶液（苔黑酚乙醇溶液（ml）0.20.2 0.20.2 0.2沸水中加热沸水中加热10min后的现象后的现象根据现象分析提取物一和提取根据现象分析提取物一和提取物二主要含有什么物质？物二主要含有什么物质？