干扰素制备的工艺流程1复习过程.ppt

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1、干扰素制备的工艺流程1干扰素的作用？干扰素的作用？v一、抗增生作用：这是干扰素能用于治疗多种肿瘤的原因。二、抗病毒作用：当我们的机体感染病毒时，体内会产生大量的干扰素。三、免疫调节作用四、抗纤维化作用五、干扰素还有抗新血管增生、促进细胞凋亡等多种功能v干扰素是目前最主要的抗病毒感染和抗肿瘤生物制品。干扰素的合成v一、基因工程菌的组建1、如何构建基因工程菌？也就是DNA重组克隆单元操作步骤。切、接、转、增、检2、切之前还需要做什么？获取目的cDNAv1、干扰素cDNA的获得产生干扰素的白细胞全RNA5%23%蔗糖密度梯度离心提取12SmRNA12SmRNA什么叫12SmRNA？反转录成cDNA寡

2、dT纤维柱mRNA接目的cDNA产检增转切干扰素2、基因工程菌的组建pBR322质粒抗性筛选抗性筛选？大肠杆菌K12用已知干扰素用已知干扰素DNA片段作为片段作为探针挑选探针挑选TcrAprTcrTcr受体菌的抗性筛选v步骤一：将细菌涂布到含四环素的培养基上培养，就可得到质粒PBR322或重组质粒的细菌单菌落。v步骤二：若想进一步筛选出重组子，可采用负选择（详情请看基因工程P59）。但由于生产中要用已知干扰素DNA片段作为探针挑选富有干扰素的cDNA克隆，所以不需要进行负选择。二、基因工程干扰素的制备二、基因工程干扰素的制备v制备基因工程-干扰素工艺流程如下：(P73)启开种子制备种子液精提粗

3、提发酵培养半成品制备半成品检定分装冻干成品检定成品包装制备的过程及要求：（1）发酵（2）产物提取纯化（3）质量控制标准和要求（P74）v小故事小故事v抉择一个农民从洪水中救起了他的妻子，他的孩子却被淹死了。事后，人们议论纷纷。有的说他做得对，因为孩子可以再生一个，妻子却不能死而复活。有的说他做错了，因为妻子可以另娶一个，孩子却不能死而复活。我听了人们的议论，也感到疑惑难决：如果只能救活一人，究竟应该救妻子呢，还是救孩子?于是我去拜访那个农民，问他当时是怎么想的。v他答道：“我什么也没想。洪水袭来，妻子在我身过，我抓住她就往附近的山坡游。当我返回时，孩子已经被洪水冲走了。”v我琢磨着农民的话，如果当时这个农民稍有迟疑，可能一个都救不了；所谓人生的抉择不少便是如此。v感悟：很多事情根本没有错与对，也容不得你去细想错与对，如果过于犹豫或过于在乎别人的想法，你可能什么事也做不成。此课件下载可自行编辑修改，仅供参考！此课件下载可自行编辑修改，仅供参考！感谢您的支持，我们努力做得更好！谢谢感谢您的支持，我们努力做得更好！谢谢