一轮复习微生物的培养及应用.pptx

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1、1考点一微生物的实验室培养1培养基(1)概念：人们按照微生物对_的不同需求，配制出供其生长繁殖的_。营养物质营养物质水、碳源、氮源、无机盐pHpH氧气固体培养基第1页/共30页2分类分类标准标准培养基种类培养基种类特点特点用途用途根据根据物理物理性质性质液体培养基液体培养基不加凝固剂不加凝固剂工业生产工业生产半固体半固体培养基培养基加凝固剂，如琼脂加凝固剂，如琼脂观察微生物的运观察微生物的运动、分类、鉴定动、分类、鉴定固体培养基固体培养基加凝固剂，如琼脂加凝固剂，如琼脂微生物分离、鉴微生物分离、鉴定、活菌计数定、活菌计数根据根据用途用途选择培养基选择培养基培养基中加入某种化学物培养基中加入某种

2、化学物质，以质，以抑制抑制不需要的微生不需要的微生物的生长，物的生长，促进促进所需要的所需要的微生物的生长微生物的生长培养、培养、分离出特分离出特定微生物定微生物鉴别培养基鉴别培养基根据微生物的代谢特点，根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指在培养基中加入某种指示示剂或化学药品剂或化学药品鉴别鉴别不同种类的不同种类的微生物微生物微生物的实验室培养基础知识 1 1培养基第2页/共30页3【练习巩固】(2010全国卷改造)某细菌固体培养基的组成成分是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水，其中凝固剂是_，碳源是_，氮源是_。已知只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上

3、生长，故该培养基属于_培养基。从同化作用类型的角度看，用该培养基培养的细菌属于_。异养型琼脂葡萄糖尿素选择第3页/共30页4煮沸消毒法灼烧灭菌条件条件结果结果常用的方法常用的方法消消毒毒灭灭菌菌较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部的对人体有害的部分微生物(不包括芽孢和孢子)煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌2无菌技术第4页/共30页5考点一微生物的实验室培养第5页/共30页6考点一微生物的实验室培养3纯化大肠杆菌的原理与方法(1)原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌

4、落，这个菌落就是纯化的细菌菌落。第6页/共30页7比较比较平板划线法平板划线法稀释涂布平板法稀释涂布平板法原理原理优点优点缺点缺点适用适用范围范围考点一微生物的实验室培养通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基上。在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，即菌落将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落可以观察菌落特征，对混合菌进行分离可以计数，可以观察菌落特征不能计数吸收量较少，较麻烦

5、，平板不干燥效果不好，容易蔓延适用于好氧菌适用于厌氧菌和兼性厌氧菌(2)纯化微生物的接种方法：第7页/共30页8考点一微生物的实验室培养平板划线法纯化大肠杆菌时不同阶段灼烧接种环的目的不同(1)第一次操作：杀死接种环上原有的微生物。(2)每次划线之前：杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端。(3)划线结束后：杀死接种环上残存的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。第8页/共30页9考点一微生物的实验室培养(1)培养基分装到培养皿后进行灭菌。(2013江苏)()(2)转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线。(2013江苏)()(3)接种后的培养皿须放在光照培养箱中

6、培养。(2013江苏)()(4)培养过程中每隔一周观察一次。(2013江苏)()(5)在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌。(2011重庆)()(6)在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长，向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长。(2011重庆)()(7)对新配制的培养基灭菌时所用的设备是高压蒸汽灭菌锅。实验前需对超净工作台进行消毒处理。(2010山东)()(8)用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板。(2009安徽)()第9页/共30页10D D题组一微生物的培养1(2015北京市东城区联考)细菌需要从外界吸收营养物质并通过代谢来维持正常的生长和繁殖。下

7、列与此有关的说法正确的是 ()A乳酸菌与硝化细菌所利用的碳源是相同的B氮源不可能作为细菌的能源物质C琼脂是细菌生长和繁殖中不可缺少的一种物质D以尿素为唯一氮源的培养基上长出的不都是尿素分解菌第10页/共30页11题组一微生物的培养2随着科技的发展，微生物在生产活动中得到了广泛应用。下列关于微生物培养的叙述，正确的是()A青霉素就是抗生素，在青霉菌的培养过程中不用严格灭菌B培养基中加入的琼脂可以作为微生物的碳源C为了避免污染，在微生物培养过程中，操作人员的手必须经过严格灭菌D在菌种选育过程中可以利用人工诱变等手段D D第11页/共30页12成分成分含量含量成分成分含量含量NaNONaNO3 33

8、 g3 gFeSOFeSO4 40.01 g0.01 gK K2 2HPOHPO4 41 g1 g(CH(CH2 2O)O)30 g30 g琼脂琼脂15 g15 gH H2 2O O1 000 mL1 000 mLMgSOMgSO4 47H7H2 2O O0.5 g0.5 g青霉素青霉素0.10.1万单位万单位题组一微生物的培养3下表所示为某微生物培养基的配方，有关叙述错误的是A.依物理性质划分，该培养基属于固体培养基；依用途划分，该培养基属于选择培养基B由培养基的原料可知，所培养微生物的同化作用类型是异养型，培养的微生物可以是酵母菌或毛霉C本培养基中青霉素的添加满足了微生物生长对特殊营养物质

9、的要求D若用该培养基分离能分解尿素的细菌，应除去青霉素和NaNO3，并应加入尿素第12页/共30页13题组一微生物的培养1筛选微生物的原理人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物的生长。因此，可以通过配制选择培养基、控制培养条件等选择目的微生物。2选择培养基的设计原理和功能 根据某种微生物的特殊营养要求或其对某些物理、化学因素(如温度、pH等)的抗性而设计的培养基为选择培养基。此类培养基能使混合菌株中的目的菌株变为优势菌，从而提高该菌的筛选效率。第13页/共30页14题组一微生物的培养3选择培养基应用实例序号序号改变的条件改变的条件分离的目的菌分离的

10、目的菌12345加入青霉素加入高浓度的食盐缺乏氮源石油作为唯一碳源高温环境酵母菌和霉菌金黄色葡萄球菌固氮微生物分解石油的微生物耐高温微生物第14页/共30页15题组二微生物纯化的方法分析4有关平板划线操作正确的是 ()A使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌B打开含菌种的试管后要通过火焰灭菌，取出菌种后要马上塞上棉塞C将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可D最后将平板倒置，放入培养箱中培养D D第15页/共30页16题组二微生物纯化的方法分析5苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土

11、壤中筛选获得了能降解利用苯酚的细菌菌株筛选的主要步骤如下图所示，为土壤样品。下列相关叙述错误的是()A图中培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为碳源B如果要测定中活细菌数量，常采用稀释涂布平板法C若图中为对照实验，则其中应以苯酚作为唯一的碳源D使用平板划线法可以在上获得 单菌落第16页/共30页17题组二微生物纯化的方法分析微生物纯化的三种途径(1)单菌落挑取法：利用平板划线法或稀释涂布平板法接种到固体平板培养基表面，直接根据微生物菌落的特征利用单菌落挑取的方法获得目的微生物。(2)选择培养法：利用选择培养基对微生物进行选择培养，直接获得目的微生物。(3)鉴定培养法：利用鉴别培养基使目的微生

12、物菌落呈现特有的特征，然后筛选目的微生物。第17页/共30页18考点二微生物的分离与数量测定1土壤中分解尿素的细菌的分离与计数(1)分离原理土壤中细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成_，这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起到_作用。(2)统计菌落数目统计样品中的活菌一般用_法。(3)实验流程土壤取样 _微生物的培养与观察细菌的_。脲酶催化稀释涂布平板样品的稀释计数第18页/共30页19考点二微生物的分离与数量测定2分解纤维素的微生物的分离(1)纤维素酶组成：纤维素酶是一种_，一般认为它至少包括三种组分，即_。作用：葡萄糖复合酶C C1 1酶、C CX X酶和葡萄糖苷酶第19页/共30页20

13、(2)(2)纤维素分解菌的筛选纤维素分解菌的筛选原理：原理：纤维素分解菌纤维素分解菌 筛选方法：筛选方法：_染色法，即通过是否产染色法，即通过是否产生生_来筛选纤维素分解菌。来筛选纤维素分解菌。培养基：以培养基：以_为唯一碳源的选择培养为唯一碳源的选择培养基。基。红色复合物透明圈刚果红透明圈纤维素考点二微生物的分离与数量测定第20页/共30页21实验流程：实验流程：土壤取样：富含土壤取样：富含_的环境的环境选择培养：选择培养：用用_培养，以增加纤维素分解菌的培养，以增加纤维素分解菌的浓度浓度_：制备系列稀释液：制备系列稀释液 涂布平板：将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基涂布平板：将样品涂布到

14、鉴别纤维素分解菌的培养基上上 挑选产生挑选产生_的菌落的菌落纤维素选择培养基梯度稀释透明圈考点二微生物的分离与数量测定第21页/共30页22考点二微生物的分离与数量测定(1)分离微生物所用的选择培养基一定是固体培养基，因为菌落只能在固体培养基上形成。(2)平板划线法只适合用于微生物的提纯，不适合进行计数，并且在最后一次划线的末端处的菌种最纯。第22页/共30页23考点二微生物的分离与数量测定(1)要从土壤中分离获取纤维素分解菌，应选用以纤维素为唯一碳源的选择培养基。(2013太原五中月考)()(2)在纤维素分解菌培养过程中，对培养基和接种环常采用的灭菌方法分别是高压蒸汽灭菌和灼烧灭菌。(201

15、3许昌二次调研)()(3)透明圈是刚果红与纤维素形成的复合物，可根据是否出现透明圈来判断有无纤维素分解菌。(2011山东改编)()(4)测定培养液中微生物数量，可选用显微镜直接计数法。(2010山东)()(5)在“检测土壤中细菌总数”的实验中，确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数。(2009安徽)()(6)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的比例合适。(2009高考宁夏卷)()第23页/共30页24题组三对分离分解尿素细菌及纤维素分解菌的筛选分析1欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌，下列实

16、验操作中，不正确的是 ()A将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释B同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板C可将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照D用加入刚果红指示剂的培养基可筛选出分解尿素的细菌D D第24页/共30页25题组三对分离分解尿素细菌及纤维素分解菌的筛选分析2(2015泰州质检)利用农作物秸秆为原料可生产乙醇，生产过程中可采用微生物将秸秆水解或用酶水解，其主要技术流程如下图所示，下列相关说法错误的是A可用刚果红染色法筛选过程所需的纤维素分解菌B过程加入的纤维素酶是葡萄糖苷酶C酒精发酵接种的酵母菌需在无氧条件下发酵D酒精发酵前需对培养基进行高压蒸汽灭菌第25页/共30页26项目项目

17、土壤中分解尿素的细菌的分离土壤中分解尿素的细菌的分离 分解纤维素的微生物的分离分解纤维素的微生物的分离方法方法使用以尿素为唯一氮源的使用以尿素为唯一氮源的选择培养基进行培养选择培养基进行培养利用富含纤维素的选择利用富含纤维素的选择培养基进行培养培养基进行培养原理原理土壤中不能分解尿素的微土壤中不能分解尿素的微生物因缺乏脲酶而不能正生物因缺乏脲酶而不能正常生长常生长，能够分解尿素的能够分解尿素的微生物能利用尿素为氮源微生物能利用尿素为氮源正常生长正常生长，从而起到选择从而起到选择作用作用因为培养基中含有丰富因为培养基中含有丰富的纤维素的纤维素，因此能够分因此能够分解纤维素的微生物具有解纤维素的微

18、生物具有更多的生存机会而大量更多的生存机会而大量繁殖繁殖特有特有代谢代谢过程过程题组三对分离分解尿素细菌及纤维素分解菌的筛选分析筛选微生物的两种方法比较第26页/共30页27题组四微生物的计数分析D D3(2015北京市海淀区高三期中)下列关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述中，不正确的是 ()A用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高压蒸汽灭菌后倒平板B取104、105、106倍土壤稀释液和无菌水各0.1 ml涂布不同平板C将实验组和对照组平板倒置，37 恒温培养2448小时D确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的平板进行计数第27页/共30页28题组四微生物的计数分析4(2014高考新

19、课标全国卷)为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是_；然后，将1 mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为_。(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过_灭菌，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是_。检测培养基平板灭菌是否合格3.8107灼烧将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落第28页/共30页29题组四微生物的计数分析(3)示意图A和图B中，_表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。(4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中_的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高_的利用率。B溶解氧营养物质第29页/共30页30谢谢您的观看！第30页/共30页