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1、实验7 胃肠运动(yndng)的直接观察 离体肠段平滑肌的描记 目的:动物在体胃肠运动及调节了解(lioji)肠段平滑肌的生理特性学习离体肠段平滑肌的实验方法第一页,共24页。原 理1.胃肠道平滑肌经常(jngchng)维持一定的紧张性收缩,在体内受到神经和体液的调节。在神经及某些药物的作用下,这种紧张性及运动节律可发生改变。神经调节中,副交感神经通过释放乙酰胆碱使其运动加强,交感神经通过释放去甲肾上腺素使其运动减弱。第二页,共24页。第三页,共24页。原 理2.胃肠道平滑肌以胆碱能神经占优势,小剂量或低浓度的乙酰胆碱能激动M受体,产生与兴奋胆碱能神经节后纤维(xinwi)相似的作用,兴奋胃肠
2、道。阿托品与胆碱受体结合阻断胆碱能递质从而产生抗胆碱作用。新斯的明作为胆碱酯酶的抑制剂,抑制乙酰胆碱的分解,使乙酰胆碱的作用持续加强。第四页,共24页。原 理3.消化道平滑肌的特点是兴奋性较低,收缩缓慢,富有伸展性,具有紧张性,自动节律性,对化学物质,温度和机械牵张刺激(cj)较敏感等特点,给予离体肠肌一接近于在体情况的适宜环境,消化道平滑肌仍可保持良好的生理特性。本实验观察当模拟内环境发生变化时,离体小肠平滑肌运动的变化。第五页,共24页。第六页,共24页。第七页,共24页。原 理4.该实验方法不仅在理论上证明平滑肌的生理特性,而且(r qi)还可用来测量化学物质或药物的生理学特性,被称为生
3、物学鉴定法。第八页,共24页。仪器设备n家兔,手术台,手术器械,恒温(hngwn)水浴槽,恒温(hngwn)水浴,RM6240,张力换能器,氧气袋,铁架台,烧杯,滴管,注射器,台氏液,阿托品(0.5mg/ml),新思的明(1mg/ml)0.01%肾上腺素,0.01%乙酰胆碱,1mol/LNaOH,1mol/LHCl,2%戊巴比妥钠。第九页,共24页。第十页,共24页。方法(fngf)与步骤一.胃肠运动观察:1.手术操作:(1)家兔称重,用戊巴比妥钠麻醉(20毫克/公斤体重)。(2)将兔子(t zi)仰卧位固定于手术台上。(3)剪腹部毛,沿腹中线切口,剖开腹腔,露出胃和肠。第十一页,共24页。方
4、法(fngf)与步骤2.实验项目:(1)观察正常情况下胃和小肠的运动。注意其紧张度(可用手触摸(ch m)胃测其紧张度)。(2)由耳缘静脉静脉注射新思的明0.2-0.3ml,或滴几滴于胃肠浆膜上,观察胃和小肠运动的变化。(3)在新思的明作用的基础上,注射阿托品0.5ml,观察胃和小肠运动的变化。第十二页,共24页。方法(fngf)与步骤二.离体小肠平滑肌的生理特性:1.实验准备:装备麦氏浴槽,将其放置于37恒温水浴。麦氏浴槽内盛满37台氏液,将充满氧气(yngq)的球胆经橡皮管连接至麦氏浴槽乙型通气管上,不断注入氧气(yngq),调节气流速度,使气泡一个接一个注入。第十三页,共24页。第十四页
5、,共24页。方法(fngf)与步骤2.在幽门下端分离十二指肠3-4cm,双结扎此肠段,于双结扎中间将肠段剪断,用台氏液反复冲洗肠内容物,在其两端穿线,将一端固定于麦氏浴槽乙型通气管挂钩(gugu)上,另一端与张力换能器相连。第十五页,共24页。方法(fngf)与步骤3.待此装置稳定10-20分钟后,使用RM6240记录小肠(xiochng)段平滑肌运动曲线。第十六页,共24页。4.实验项目:(1)观察记录37 台氏液中的肠段节律性收缩(shu su)曲线。(2)观察记录25 台氏液中的肠段节律性收缩(shu su)曲线。第十七页,共24页。(3)待台氏液温度稳定在37 后,用滴管向浴槽中加入0
6、.01%乙酰胆碱3-4滴,观察并记录小肠平滑肌活动的变化。然后(rnhu)用台氏液反复冲洗并更换新的台氏液。(4)待平滑肌稳定后,加入0.01%肾上腺素3-4滴,观察并记录小肠平滑肌活动的变化。然后(rnhu)用台氏液反复冲洗并更换新的台氏液。第十八页,共24页。方法(fngf)与步骤(5)滴加1mol/L HCl溶液3-4滴,观察并记录小肠平滑肌活动(hu dng)的变化。然后用台氏液反复冲洗并更换新的台氏液。(6)滴加1mol/L NaOH溶液3-4滴,观察并记录小肠平滑肌活动(hu dng)的变化。然后用台氏液反复冲洗并更换新的台氏液。第十九页,共24页。注意事项1.实验操作过程中,注意
7、动物保温。经常 用温热的生理盐水湿润胃肠。2.取小肠标本时勿牵拉。3.保证(bozhng)氧气的补充。第二十页,共24页。实验(shyn)要求n描述各项实验项目所得实验现象并分析。n描记小肠平滑肌运动曲线(qxin),并分析各种因素对其影响的机制。第二十一页,共24页。表1 不同处理(chl)因素对小肠平滑肌活动的影响(次/min,g)组别 频率(次/min)振幅(g)正常(37C)25C乙酰胆碱肾上腺素盐酸氢氧化钠第二十二页,共24页。n乙酰胆碱作用于肠道平滑肌M3受体n肾上腺素主要作用于肠道平滑肌2受体,此受体为抑制性受体,抑制胃肠道运动。nPH过高、过低,收缩幅度及张力都会降低,最适PH时收缩效果最好。n肠管平滑肌对温度改变极为敏感,当温度降到30以下时,由于代谢水平的降低,兴奋性减弱,可出现收缩曲线基线下移,频率变慢,收缩幅度变小。有时可能会见到基线先上移后下降的现象。这是因为降温本身对肠管是一种刺激,也可短暂(dunzn)地加强代谢活动,所以肌张力升高。第二十三页,共24页。设计(shj)实验p问题是怎么提出(t ch)的?p研究此问题的意义p提出(t ch)的假设中自变量是什么?因变量是什么?p对照是什么?怎么分组?p用三线表列出预期的结果(包括表头)第二十四页,共24页。
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