色谱的定性与定量讲稿.ppt

《色谱的定性与定量讲稿.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《色谱的定性与定量讲稿.ppt（51页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、关于色谱的定性与定关于色谱的定性与定量量第一页，讲稿共五十一页哦一、色谱的定性分析1 1、利用保留值定性、利用保留值定性 鉴别每个色谱峰鉴别每个色谱峰通过比较保留值通过比较保留值(通常是保留时间通常是保留时间)的方法，找的方法，找到各色谱峰所对应的组份到各色谱峰所对应的组份大多数情况下用比较保留时间来定性大多数情况下用比较保留时间来定性即所谓：即所谓：保留时间相同，可能是同样的组份保留时间相同，可能是同样的组份保留时间不同，肯定不是同样的组份保留时间不同，肯定不是同样的组份第二页，讲稿共五十一页哦（1 1）气相色谱中用保留值定性的方法）气相色谱中用保留值定性的方法 利用已知物直接对照进行定性分

2、析利用已知物直接对照进行定性分析 通常做法：把未知物和已知标准物在同一根色谱通常做法：把未知物和已知标准物在同一根色谱柱上，用相同的色谱操作条件进行分析，记录色谱图柱上，用相同的色谱操作条件进行分析，记录色谱图后利用保留时间进行比对后利用保留时间进行比对 为避免载气流速和温度变化引起保留时间的变为避免载气流速和温度变化引起保留时间的变化，可用化，可用相对保留值定性相对保留值定性或用或用已知物增加峰高已知物增加峰高法定法定性性第三页，讲稿共五十一页哦 已知物增加峰高法定性原理：已知物增加峰高法定性原理：在得到未知样品的在得到未知样品的色谱图后，往未知样品中加入一定量的已知物质，色谱图后，往未知样

3、品中加入一定量的已知物质，在同样色谱条件下的两色谱图对比图谱比较峰高。在同样色谱条件下的两色谱图对比图谱比较峰高。第四页，讲稿共五十一页哦利用相对保留值定性利用相对保留值定性 定义：相对保留值是组分定义：相对保留值是组分i i与基准物与基准物S S的调整保留值之比：的调整保留值之比：优点：优点：可以消除某些操作条件的影响，只要柱温、固可以消除某些操作条件的影响，只要柱温、固定相不变，即使柱径、柱长、填充情况及流动相的定相不变，即使柱径、柱长、填充情况及流动相的流速有所变化，相对保留值流速有所变化，相对保留值仍然不变，它是色谱定仍然不变，它是色谱定性分析的重要参数性分析的重要参数第五页，讲稿共五

4、十一页哦利用保留指数定性利用保留指数定性 表示物质在固定液上的保留行为，是目前使用最广表示物质在固定液上的保留行为，是目前使用最广泛并被国际上所公认的定性参数，它具有定性可靠，泛并被国际上所公认的定性参数，它具有定性可靠，重现性好，标准统一等优点。重现性好，标准统一等优点。可将储存在计算机中的标准保留指数转换成用户可将储存在计算机中的标准保留指数转换成用户色谱条件下的保留指数和保留时间（色谱条件下的保留指数和保留时间（tRtR）第六页，讲稿共五十一页哦（A A）定义）定义（B B）保留指数的测定）保留指数的测定 保留指数的准确度和重现性都很好，用同一色谱柱保留指数的准确度和重现性都很好，用同一

5、色谱柱测定误差小于测定误差小于1%1%，因此只要柱温和固定液相同，就可，因此只要柱温和固定液相同，就可以用文献上发表的保留指数定性。以用文献上发表的保留指数定性。第七页，讲稿共五十一页哦（2 2）液相色谱中用保留值定性的方法）液相色谱中用保留值定性的方法 保留值定性的主要方法保留值定性的主要方法 直接与已知标准物对照直接与已知标准物对照 某一未知峰和已知标准物的保留值完全相某一未知峰和已知标准物的保留值完全相 同同可能是可能是 改变色谱柱或流动相，保留时间仍完全相同改变色谱柱或流动相，保留时间仍完全相同基本是基本是第八页，讲稿共五十一页哦利用文献的数据进行对比和定性分析利用文献的数据进行对比和

6、定性分析 注意注意HPLCHPLC的柱填充技术的复杂性，定性受到的柱填充技术的复杂性，定性受到限制限制第九页，讲稿共五十一页哦 最简单的方法：最简单的方法：标标准添加法准添加法 前提：前提：要有标准物要有标准物 判断的标准：判断的标准：加入加入标准样后，使未知标准样后，使未知样色谱峰增高，改样色谱峰增高，改变色谱条件，未知变色谱条件，未知峰仍能增高峰仍能增高第十页，讲稿共五十一页哦同时用其他方法同时用其他方法其他色谱方法（改变机理，如：用不同的色谱柱）其他色谱方法（改变机理，如：用不同的色谱柱）其他检测器其他检测器PDA，光谱图比较、谱库检索，光谱图比较、谱库检索 确认色谱峰的纯度确认色谱峰的

7、纯度 -保证每个色谱峰下只有一个被测的组份保证每个色谱峰下只有一个被测的组份 -检查是否有共流出的物质（杂质）干扰检查是否有共流出的物质（杂质）干扰 色谱峰纯度确认的方法色谱峰纯度确认的方法 -用光电二极管矩阵检测器比较光谱图用光电二极管矩阵检测器比较光谱图 -峰纯度鉴定，四波长比例峰纯度鉴定，四波长比例MS，质谱图解析、谱库检索，质谱图解析、谱库检索其他仪器方法其他仪器方法第十一页，讲稿共五十一页哦（3 3）平面色谱中用保留值定性的方法）平面色谱中用保留值定性的方法 定性方法：定性方法：比较未知组分和已知标准物质的比移值比较未知组分和已知标准物质的比移值影响比移值的因素：影响比移值的因素：固

8、定相的性质、展开剂的性质、被固定相的性质、展开剂的性质、被分离组分的性质、展开时的温度等分离组分的性质、展开时的温度等注意事项注意事项 展开槽应密闭展开槽应密闭 沿分离轨迹固定相与流动相无梯度变化沿分离轨迹固定相与流动相无梯度变化 展开剂的前沿位置能正确测定展开剂的前沿位置能正确测定第十二页，讲稿共五十一页哦2.2.联机定性联机定性 联机定性是指把色谱和质谱、红外、紫外联机定性是指把色谱和质谱、红外、紫外和核磁共振法联合使用和核磁共振法联合使用联用方式：联用方式：第一种：先第一种：先收集色谱分离后的组分，再用收集色谱分离后的组分，再用“四四大谱大谱”的方法进行定性分析的方法进行定性分析第二种：

9、通过第二种：通过“接口接口”技术直接把色谱和技术直接把色谱和“四四大谱大谱”仪器连接起来，对每一被分离的组分仪器连接起来，对每一被分离的组分进行定性分析进行定性分析第十三页，讲稿共五十一页哦二、色谱定量分析二、色谱定量分析定量分析的具体内容定量分析的具体内容确定样品的类型，主要成分确定样品的类型，主要成分/痕量成分痕量成分使分析条件的分离度（使分析条件的分离度（R）大于：）大于：1.5色谱峰的定性，峰一致性测定色谱峰的定性，峰一致性测定检测限及定量限：确定灵敏度及线性范围检测限及定量限：确定灵敏度及线性范围用标样建立标准曲线用标样建立标准曲线检查方法的准确度及精确度检查方法的准确度及精确度用标

10、样定期检查方法用标样定期检查方法第十四页，讲稿共五十一页哦（一）定量分析基础（一）定量分析基础1.1.定量分析的基本公式定量分析的基本公式 定量分析的目的：定量分析的目的：要确定样品中某一组分的准确含量，是一种相要确定样品中某一组分的准确含量，是一种相对的定量方法对的定量方法 定量分析的方法：定量分析的方法：在某些限定条件下，检测器响应值（色谱在某些限定条件下，检测器响应值（色谱峰的峰面积或峰高）峰的峰面积或峰高）-所测组分的数量或浓度所测组分的数量或浓度成正比成正比，第十五页，讲稿共五十一页哦即：即：式中：式中：组分组分i i的质量的质量 组分组分i i的浓度的浓度 组分的校正因子（与检测器

11、的性质和被测组组分的校正因子（与检测器的性质和被测组分的性质有关）分的性质有关）组分组分i i的峰面积，的峰面积，组分组分i i的峰高的峰高第十六页，讲稿共五十一页哦2.2.2.2.峰面积的准确测定峰面积的准确测定峰面积的准确测定峰面积的准确测定1 1）对称峰的峰高和峰面积）对称峰的峰高和峰面积的测定的测定第一法：峰高第一法：峰高半高半高 峰宽峰宽式中：式中：hh从峰顶到峰底线从峰顶到峰底线的垂直距离的垂直距离 W W h/2 h/2峰高峰高1/21/2处的处的峰宽峰宽第十七页，讲稿共五十一页哦第二法：三角形法第二法：三角形法式中：式中：BMBM三角形的高三角形的高 WiWi三角形三角形KML

12、KML的的半高宽，近似等于色半高宽，近似等于色谱峰高谱峰高0.6070.607处的峰宽处的峰宽第十八页，讲稿共五十一页哦2)2)不对称峰峰高和峰面积的测不对称峰峰高和峰面积的测量量第一法：峰高第一法：峰高峰宽的平均值峰宽的平均值式中：式中：hh峰顶到峰底线的垂直峰顶到峰底线的垂直距离距离 （b b0 0.1515+b+b0.850.85)峰高峰高0.150.15处和峰高处和峰高0.850.85处的峰宽平均处的峰宽平均值值第十九页，讲稿共五十一页哦第二法：峰分割计算后加和法第二法：峰分割计算后加和法 A=A1+A2A=A1+A2 =h1b1+h2b2 =h1b1+h2b2第三法：大峰上的小峰峰面

13、积的测量第三法：大峰上的小峰峰面积的测量第四法：基线漂移时色谱峰峰面积的测量第四法：基线漂移时色谱峰峰面积的测量第五法：重叠峰峰面积的测量第五法：重叠峰峰面积的测量第二十页，讲稿共五十一页哦3.3.定量校正因子的测定定量校正因子的测定（1 1）绝对校正因子（）绝对校正因子（f fi i)fifi的物理意义的物理意义:单位峰面积所代表的单位峰面积所代表的I I组分的量组分的量,是一是一个与个与i i组分的物理化学性质和检测器的性质有关的常组分的物理化学性质和检测器的性质有关的常数数定量校正定量校正 因子的计算公式为：因子的计算公式为：注意注意:峰高定量校正因子峰高定量校正因子f fi(h)i(h

14、)受操作条件影响受操作条件影响较较大大 第二十一页，讲稿共五十一页哦 绝绝对对校校正正因因子子fifi的的大大小小主主要要由由操操作作条条件件和和仪仪器器的的灵灵敏敏度度所所决决定定，既既不不容容易易准准确确测测量量，也也无无统统一一标标准准；当当操操作作条条件件波波动动时时，fifi也也发发生生变变化化。故故fifi无无法法直直接接应用，定量分析时，一般采用相对校正因子。应用，定量分析时，一般采用相对校正因子。第二十二页，讲稿共五十一页哦（2 2）相对校正因子（校正因子）：）相对校正因子（校正因子）：式中：式中：f-f-相对校正因子相对校正因子 ，简称为校正因子，简称为校正因子，无因次量无因

15、次量 f fi i,f,fs si i 物质、基准物质（物质、基准物质（s s）的质量）的质量（或浓度（或浓度)A Ai i(h(hi i),A),As s(h(hs s)-)-物质、基准物质的峰面积物质、基准物质的峰面积（或峰高）（或峰高）第二十三页，讲稿共五十一页哦 根据物质量的不同表示方法，校正因子分为根据物质量的不同表示方法，校正因子分为根据物质量的不同表示方法，校正因子分为根据物质量的不同表示方法，校正因子分为：质量校正因子质量校正因子(fm)(fm)定义：当物质量用质量来表示时的校正因子称为质量定义：当物质量用质量来表示时的校正因子称为质量校正因子校正因子 (fm),(fm),表示

16、单位峰面积所代表的组分质量，质表示单位峰面积所代表的组分质量，质量一般用量一般用 g g 或或 mg mg 表示表示.式中：式中：m mi i,m,ms s-被测物质、基准物质的质量被测物质、基准物质的质量 A Ai i,As-,As-被测物质、基准物质的峰面积被测物质、基准物质的峰面积 第二十四页，讲稿共五十一页哦摩尔校正因子摩尔校正因子(f(fM M)定义：物质的量用摩尔数表示，表示单位峰面积所定义：物质的量用摩尔数表示，表示单位峰面积所代表的组分摩尔数代表的组分摩尔数 式中：式中：M Mi i,M,Ms s-被测物质、基准物质的摩尔质量被测物质、基准物质的摩尔质量第二十五页，讲稿共五十一

17、页哦体积校正因子（体积校正因子（fvfv）定义：物质的量用体积表示定义：物质的量用体积表示,表示单位峰面积所代表表示单位峰面积所代表的组分体积。的组分体积。式中：式中：V Vi i,V,Vs s表示被测物质、基准物质的体积表示被测物质、基准物质的体积第二十六页，讲稿共五十一页哦(3)(3)相对响应值相对响应值ss 相对响应值是物质相对响应值是物质i i与标准物质与标准物质S S的响应值（灵敏度）的响应值（灵敏度）之比。单位相同时，与校正因子互为倒数，即：之比。单位相同时，与校正因子互为倒数，即：与只与试样、标准物质以及检测器类型有关，而与操作与只与试样、标准物质以及检测器类型有关，而与操作条件

18、和柱温、载气流速、固定液性质等无关，是一个能条件和柱温、载气流速、固定液性质等无关，是一个能通用的常数通用的常数。第二十七页，讲稿共五十一页哦（4 4 4 4）校正因子的实验测量方法）校正因子的实验测量方法 样品的准备：样品的准备：测定校正因子时，要精密称定适量色测定校正因子时，要精密称定适量色谱纯的被测组分和基准物质，配制成已知准确浓度谱纯的被测组分和基准物质，配制成已知准确浓度的样品。的样品。样品的测定：样品的测定：在已确定的色谱条件下，取准确体在已确定的色谱条件下，取准确体积的样品进样，从谱图上获得准确的峰面积积的样品进样，从谱图上获得准确的峰面积 计算：计算：根据相对校正因子的计算公式

19、可以算出质量根据相对校正因子的计算公式可以算出质量（或摩尔或体积）校正因子（或摩尔或体积）校正因子第二十八页，讲稿共五十一页哦例例：某某试试样样合合有有5g乙乙醇醇，测测得得相相应应的的色色谱谱峰峰面面积积为为150mm2，求乙醇的，求乙醇的fi。解：解：即每平方毫米色谱峰面积代表即每平方毫米色谱峰面积代表3.310-2g乙醇乙醇 第二十九页，讲稿共五十一页哦例例：准准确确称称取取一一定定质质量量的的色色谱谱纯纯对对二二甲甲苯苯、甲甲苯苯、苯苯及及仲仲丁丁醇醇，混混合合后后稀稀释释，采采用用氢氢焰焰检检测测器器，定定量量进样并测量各物质所对应的峰面积，数据如下：进样并测量各物质所对应的峰面积，

20、数据如下：物质物质 苯苯 仲丁醇仲丁醇 甲苯甲苯 对二甲苯对二甲苯 m/g 0.4720 0.6325 0.8149 0.4547 A/cm2 2.60 3.40 4.10 2.20以仲丁醇为标准，计算各物质的相对质量校正因子。以仲丁醇为标准，计算各物质的相对质量校正因子。第三十页，讲稿共五十一页哦第三十一页，讲稿共五十一页哦（二）定量方法（二）定量方法1.1.归一化法归一化法 定义：把所有出峰的组分含量之和按定义：把所有出峰的组分含量之和按100%100%计的定计的定量方法称为归一化法，是一种相对定量方法。量方法称为归一化法，是一种相对定量方法。前提：样品中的所有组分都能流出色谱柱，而且在检

21、前提：样品中的所有组分都能流出色谱柱，而且在检测器上所有的组分都能产生信号。测器上所有的组分都能产生信号。计算方法：计算方法：第三十二页，讲稿共五十一页哦优点：优点：归一化法很直观，容易接受，计算简便、准归一化法很直观，容易接受，计算简便、准确，当操作条件如进样量、流速等发生变化时，对确，当操作条件如进样量、流速等发生变化时，对计算结果的影响很小，是一种常用的计算方法计算结果的影响很小，是一种常用的计算方法缺点：缺点：校正因子的测定比较麻烦，校正因子的测定比较麻烦，必需所有组分都出必需所有组分都出峰峰注意：注意：主要用于主要用于GCGC的定量测定，当的定量测定，当 fifi相近时，可直接用峰相

22、近时，可直接用峰面积归一化法。面积归一化法。由于检测技术的影响由于检测技术的影响,HPLC,HPLC中很少使用归一化中很少使用归一化 第三十三页，讲稿共五十一页哦2 2、内标法、内标法内标法内标法：选择适宜的物质作为待测组分的参比选择适宜的物质作为待测组分的参比物，定量加到样品中去，根据待测组分和参物，定量加到样品中去，根据待测组分和参比物在检测器上的响应值之比和参比物加入比物在检测器上的响应值之比和参比物加入量进行定量分析的方法。量进行定量分析的方法。第三十四页，讲稿共五十一页哦键：选择合适的内标物键：选择合适的内标物内标物的选择原则内标物的选择原则：A A、内标物必须是原样品中不存在的物质

23、，其性质尽、内标物必须是原样品中不存在的物质，其性质尽量与待测组分相近量与待测组分相近(同系物、异构体同系物、异构体)B B、内标物不能和被测组分起化学反应，要能完全溶于被、内标物不能和被测组分起化学反应，要能完全溶于被测样品中；测样品中；C C、内标物的峰尽可能接近待测组分的峰，或位于几个待、内标物的峰尽可能接近待测组分的峰，或位于几个待测组分的中间，但必须和样品中的所有峰完全分离；测组分的中间，但必须和样品中的所有峰完全分离；D D、内标物的加入量应和待测组分相近。、内标物的加入量应和待测组分相近。第三十五页，讲稿共五十一页哦 待测组分待测组分(i)的量的量mi为：为：设样品的总量为设样品

24、的总量为m，则待测组分，则待测组分i的质量分数为的质量分数为第三十六页，讲稿共五十一页哦内标法的特点：内标法的特点：内标法的特点：内标法的特点：无归一化法的限制，即只要被测组分能出峰，不和其无归一化法的限制，即只要被测组分能出峰，不和其他峰重叠，不管其他组分是否出峰或是否重叠，都可以他峰重叠，不管其他组分是否出峰或是否重叠，都可以用内标法进行定量分析用内标法进行定量分析 定量准确，受操作条件影响较小定量准确，受操作条件影响较小 可部分补偿待测组分在样品前处理时的损失可部分补偿待测组分在样品前处理时的损失 若加入几种内标物，还可提高定量分析的精度若加入几种内标物，还可提高定量分析的精度 内标物的

25、选择比较困难，同时内标物称量要求准确，内标物的选择比较困难，同时内标物称量要求准确，操作麻烦操作麻烦 第三十七页，讲稿共五十一页哦内标标准曲线法内标标准曲线法 如果每次称取同样量如果每次称取同样量(m m)的试样，每次加入相等量的试样，每次加入相等量(m ms s)的内标物，则上式中的内标物，则上式中m m，m ms s，f fi i均为常数，计算均为常数，计算公式可写为：公式可写为：从内标公式可知从内标公式可知第三十八页，讲稿共五十一页哦第三十九页，讲稿共五十一页哦实际色谱图第四十页，讲稿共五十一页哦例例:取取二二甲甲苯苯生生产产母母液液1500mg，母母液液中中合合有有乙乙苯苯、对对二二甲

26、甲苯苯、邻邻二二甲甲苯苯、间间二二甲甲苯苯及及溶溶剂剂和和少少量量苯苯甲甲酸酸，其其中中苯苯甲甲酸酸不不能能出出峰峰。以以150mg壬壬烷烷作作内内标标物物，测测得得有有关关数数据据如下：如下：物质物质 壬烷壬烷 乙苯乙苯 对二甲苯对二甲苯 间二甲苯间二甲苯 邻二甲苯邻二甲苯Ai/cm2 98 70 95 120 80 fm 1.02 0.97 1.00 0.96 0.98求求:各组分的含量。各组分的含量。第四十一页，讲稿共五十一页哦解：母液中苯甲酸不能出峰，所以只能用内标法计算。解：母液中苯甲酸不能出峰，所以只能用内标法计算。由各组分的绝对校正因子计算得由各组分的绝对校正因子计算得壬烷、乙苯

27、、对二甲壬烷、乙苯、对二甲苯、间二甲苯、邻二甲苯的苯、间二甲苯、邻二甲苯的相对校正因子分别为相对校正因子分别为1.00，0.95，0.98，0.94，0.96。根据内标法计算公式，对于乙苯有：根据内标法计算公式，对于乙苯有：同样可以计算出对二甲苯、间二甲苯、邻二甲苯的质量分同样可以计算出对二甲苯、间二甲苯、邻二甲苯的质量分数分别为数分别为9.5%，11.5%，7.84%。第四十二页，讲稿共五十一页哦3 3、外标法、外标法 外标法又可分为外标法又可分为标准曲线法标准曲线法和和外标一点法外标一点法，是色谱定量分析中比较常用的一种方法，是是色谱定量分析中比较常用的一种方法，是绝对定量方法。绝对定量方

28、法。第四十三页，讲稿共五十一页哦计算方法：用浓度峰面积（峰高）绘制标准工作用浓度峰面积（峰高）绘制标准工作曲线，其斜率即为绝对校正因子，应该是一条通曲线，其斜率即为绝对校正因子，应该是一条通过原点的直线。过原点的直线。第四十四页，讲稿共五十一页哦特点特点：简便、快速、适合于大量样品的分析简便、快速、适合于大量样品的分析无需各组份都被检出、洗脱无需各组份都被检出、洗脱需要标样需要标样标样及样品测定的条件要一致标样及样品测定的条件要一致进样体积要准确进样体积要准确，重复性好重复性好对样品前处理过程中待测组分的变化无法补偿。对样品前处理过程中待测组分的变化无法补偿。第四十五页，讲稿共五十一页哦外标一

29、点法外标一点法 利用待测组分纯物质配制一个与待测组分含量相利用待测组分纯物质配制一个与待测组分含量相近的标准样（设量为近的标准样（设量为m ms s），在同一色谱条件下，分别将），在同一色谱条件下，分别将相同量的待测组分标样及试样注入色谱仪，出峰后，测相同量的待测组分标样及试样注入色谱仪，出峰后，测量其峰面积（或峰高），得相应的峰面积量其峰面积（或峰高），得相应的峰面积A As s和和AiAi 第四十六页，讲稿共五十一页哦4.4.标准加入法标准加入法 是一种特殊的内标法是一种特殊的内标法 把待测组分的纯物质作为内标物加入到待测样品把待测组分的纯物质作为内标物加入到待测样品在相同的色谱条件下，测

30、定加入待测组分纯物质前、在相同的色谱条件下，测定加入待测组分纯物质前、后待测组分的峰面积（或峰高）后待测组分的峰面积（或峰高）计算出待测组分在样品中的含量。计算出待测组分在样品中的含量。第四十七页，讲稿共五十一页哦具体做法：具体做法：第一步：在确定的色谱条件下，测定样品中待测组分第一步：在确定的色谱条件下，测定样品中待测组分(i)(i)的峰面积或峰的峰面积或峰高，高，Ai(hi);Ai(hi);第二步：在第一步所用样品中准确加入已知量为第二步：在第一步所用样品中准确加入已知量为WiWi的待测组分的待测组分(i)(i)，同样条件下测出峰面积或峰高，同样条件下测出峰面积或峰高，Ai(hi)Ai(h

31、i)；第三步：根据定量基本公式第三步：根据定量基本公式 Wi=fiAi(hi)Wi=fiAi(hi)计算计算第四十八页，讲稿共五十一页哦 Wi=fiAi(hi)Wi=fiAi(hi)（前）（前）Wi+Wi=fi Ai(hi)Wi+Wi=fi Ai(hi)（后）（后）fifi和和fifi是同一组分在加入纯物质前、后两次测是同一组分在加入纯物质前、后两次测定的绝对校正因子定的绝对校正因子,所以有所以有 fi=fifi=fi Wi Wi原样品中待测组分原样品中待测组分(i)(i)的量的量第四十九页，讲稿共五十一页哦标准加入法的特点标准加入法的特点不需另外的标准物质做内标，仅需有待测组分不需另外的标准物质做内标，仅需有待测组分的纯物质的纯物质 进样量的准确性影响不大，操作简单进样量的准确性影响不大，操作简单 若在样品前处理之前就加入已知准确量的待测组分，若在样品前处理之前就加入已知准确量的待测组分，则可完全补偿待测组分在前处理过程中的损失则可完全补偿待测组分在前处理过程中的损失 要求加入待测组分前后两次色谱测定的色谱条件完全要求加入待测组分前后两次色谱测定的色谱条件完全相同，才能保证两次测定相同，才能保证两次测定时的校正因子完全相等时的校正因子完全相等 第五十页，讲稿共五十一页哦感感谢谢大大家家观观看看第五十一页，讲稿共五十一页哦