固相萃取柱原理及应用ppt课件.ppt
![资源得分’ title=](/images/score_1.gif)
![资源得分’ title=](/images/score_1.gif)
![资源得分’ title=](/images/score_1.gif)
![资源得分’ title=](/images/score_1.gif)
![资源得分’ title=](/images/score_05.gif)
《固相萃取柱原理及应用ppt课件.ppt》由会员分享,可在线阅读,更多相关《固相萃取柱原理及应用ppt课件.ppt(42页珍藏版)》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。
1、固相萃取柱简介何 群丹东兽药饲料监察所为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权益固相萃取原理v固相萃取(SolidPhaseExtraction,简称SPE),也称固相提取,是一项结合了选择性保留、选择性洗脱等过程的分离技术。v当复杂的样品溶液通过吸附剂(Sorbent)时,吸附剂会通过极性相互作用、疏水相互作用或离子交换等作用力选择性地保留目标物(AimedCompound)和少量与目标物性质相近的组分,其他组分则透过吸附剂流出小柱,然后用另一种溶剂体系选择性地把目标物洗脱下来,从而实现对复杂样品的分离、纯化和富集。v
2、在固相萃取过程中,“保留”(Retention)和“洗脱”(Elution)均受目标物、吸附剂和溶剂三种因素的影响,对于给定的目标物,选择合适的吸附剂、样品溶剂以及洗脱溶剂是实现成功分离的关键。为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权益固相萃取的作用v富集:痕量分析或制备时,对目标物进行富集是必要的过程。比如,分析水中的PAHs,可以将1000mL水样加入SPE柱,PAHs保留在柱中,然后用少量溶剂(比如2mL)洗脱,这样PAHs就被浓缩了500倍,这意味着在相同的检测条件下,分析物的方法检测限仅为为处理前的1/500。
3、v净化:在仪器分析之前除去除去杂质,这一方面避免了杂质对目标物的干扰,提高了分析灵敏度,另一方面也避免了杂质对或仪器的损害。v转换溶剂:一些分析仪器对分析物溶解溶剂有特殊的要求,可以通过SPE柱进行转换。比如,采用GC法分析水中的半挥发性污染物时,如果采用直接进样,水分会影响分离并损害气相色谱柱,因而需要转换溶剂。将水样加入反相萃取柱,目标物保留在柱中与水分离,然后用对目标物溶解性强并且易挥发的有机溶剂洗脱,干燥并浓缩后即可分析。为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权益SPE柱的结构v柱管:吸附剂的载体,由血清级的聚丙
4、烯制成,通常做成注射器形状。一些厂家也提供玻璃的柱管用以特殊分析(比如PAEs分析)。柱管下端出口的尺寸已标准化,可用于不同厂家的固相萃取多管真空装置。v筛板:起固定吸附剂和过滤溶液的作用。聚乙烯是常见的筛板材料,对于特殊分析也可采用特氟隆、不锈钢片或玻璃等材质。v吸附剂:固相萃取柱中发挥分离作用的物质。早期广泛应用于柱层析的Al2O3、florisil、石墨化炭黑等吸附剂在固相萃取中仍被使用;目前最常见的吸附剂是硅胶键合吸附剂,由球形硅胶颗粒键合各种官能团制得;上世纪末被发明的有机聚合物吸附剂,比如聚二乙烯基苯-N-乙烯吡咯烷酮,以重现性好、pH适用范围宽以及适用性广等优势在许多应用中已经取
5、代硅胶键合吸附剂。v配套装置:储样器,用于增加柱管上方的容器体积,提高单次上样量;适配器,用于连接柱管与柱管、柱管与储样器。为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权益固相萃取技术常见术语v吸附剂(Sorbent):固相萃取柱中的填充物,能够从样品溶液中选择性地萃取某些化合物;v吸附容量(Capacity):在特定条件下,一定质量吸附剂能够保留化合物(包括目标化合物和部分干扰物)的总质量;为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权益固相萃取柱一般使用过
6、程v活化(Activation):也称溶剂化,加入合适的溶剂使吸附剂上的官能团展开,并除去吸附剂上可能存在的干扰物,对于反相吸附剂常常用中等极性溶剂(比如甲醇),正相吸附剂常常用弱极性或非极性溶剂(比如己烷);v平衡(Equilibrium):除去活化溶剂为上样创造适宜的溶剂环境,所用溶剂通常与样品溶液的溶剂一致;对于离子交换柱,如果样品是碱性化合物平衡液中往往需要加入酸,如果样品为酸性化合物平衡液中往往需要加入碱;v保留(Retention):当样品溶液通过吸附剂,吸附剂与某些化合物的作用力超过后者与溶剂的作用力时,这些化合物就会被吸附剂固定,该过程称为保留;v淋洗(Washing):上样后
7、,部分干扰物与目标化合物同时被保留,需要加入合适的溶液以最大可能地除去干扰物而不影响目标化合物的保留,通常情况下用上样时的样品溶剂淋洗不会影响回收率,但洗脱强度较大的溶剂能最大程度地去除干扰物,选择淋洗液时需要在回收率和净化效果间找到平衡点;v洗脱(Elution):让洗脱能力较强的溶剂通过吸附剂,打断吸附剂与被保留的化合物之间的作用力,使这些化合物随溶剂从吸附剂中流出;通常情况下,能刚好洗脱目标化合物的洗脱溶剂是最佳选择,此时洗掉的干扰物最少,选择洗脱液时也需要在回收率和净化效果间找到平衡点;为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位
8、和职工的合法权益固相萃取过程中的作用力v非极性相互作用(Non-PolarInteraction):目标化合物上的非极性官能团与非极性吸附剂之间的作用力,这种作用力在极性溶剂环境尤其是水环境中才能较好体现,因而也称疏水相互作用,比如水环境中,邻苯二甲酸酯类化合物与C18之间的作用力;v极性相互作用(PolarInteraction):目标化合物上的极性官能团与吸附剂上的极性官能团之间的作用力,这种作用力在弱极性或非极性溶剂环境下才能较好的体现;v离子相互作用(IonInteraction):离子型目标化合物上的离子官能团与吸附剂上带有相反电荷的官能团之间的库伦力;v次级相互作用(Seconda
9、ryInteraction):对于反相硅胶键合吸附剂,颗粒表面残余的硅羟基会与极性化合物发生极性相互作用,并且部分硅羟基解离后会与碱性化合物发生离子相互作用,相对于非极性相互作用这些作用力处于次要地位,因而被称为次级相互作用。次级相互作用是反相硅胶吸附剂所不期望的,通常可以通过封端技术(Endcaping)加以消除;为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权益非极性相互作用(Non-PolarInteraction)v非极性相互作用是指发生在(吸附剂上)烃基和(目标化合物上)烃基之间的作用力,这类基团呈现非极性或弱极性,它
10、们之间仅存在一种名为“色散力”的作用力(属于VanDerWaals力的一种)。由于绝大多数有机化合物分子均含有或多或少的非极性基团,非极性相互作用会使这些化合物保留在含有非极性官能团的吸附剂上。为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权益非极性相互作用(Non-PolarInteraction)v未键合的硅胶不显示非极性相互作用,但硅胶基质键合链状官能团后得到的吸附剂会表现出一定程度的非极性,使得硅胶键合相具有非极性相互作用。C18(硅胶键合十八烷基,封端)是真正的非极性吸附剂,它和目标化合物之间仅存在非极性相互作用;C8
11、(硅胶键合辛基)和PH(硅胶键合苯基)的非极性弱于C18,但非极性相互作用仍是这些吸附剂的主要作用力,它们与目标化合物间的其他作用力可以被忽略。C2(硅胶键合乙基)和CN(硅胶键合氰丙基)的碳链更短,同时具备非极性相互作用和极性相互作用,但非极性相互作用仍占优势。键合有极性基团和离子基团的吸附剂(NH2、PSA、SCX、SAX等)具有较强的极性,它们与目标化合物间的非极性相互作用显得微不足道。v对于聚合物基质的吸附剂,比如ProEutPLS、PXC、PXA、PWC、PWA等以聚苯乙烯/二乙烯基苯共聚物为基质的吸附剂,吸附剂中的苯基和乙烯基为非极性基团,非极性相互作用是这些吸附剂与目标化合物间重
12、要作用力。ProElutPXC、PXA、PWC、PWA等与离子型化合物间还存在较强的离子交换作用,是另一重要作用力。为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权益非极性相互作用(Non-PolarInteraction)v吸附剂与目标化合物间作用力的强弱受溶剂环境的影响。v强极性溶剂环境可以促进非极性吸附剂和目标化合物之间的非极性相互作用,并且在极性环境下,即使目标化合物含有极性基团,其非极性部分与非极性吸附剂之间也将发生非极性相互作用。因而使用非极性和弱极性吸附剂时,最好的样品溶剂是纯水,因为纯水可以增加非极性相互作用,促
13、进目标化合物保留。v极性较弱的有机溶剂对目标化合物具有一定的溶解性,能够破坏目标化合物和吸附剂之间非极性相互作用,比如甲醇这样的极性溶剂就具有足够的非极性以打断许多弱极性化合物与非极性吸附剂之间的非极性相互作用,将化合物从吸附剂上洗脱下来。对于极性更弱的目标化合物,就需要乙酸乙酯、甲基叔丁基醚甚至正己烷这样的弱或非极性溶剂进行洗脱。为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权益非极性相互作用(Non-PolarInteraction)v一般来说,非极性萃取法比极性或离子交换萃取法选择性小,尤其是当目标化合物结构与样品基质组分
14、相似的时候,但非极性相互作用用于分离具有结构具有差异的一组化合物时则很有效。v总之,通过非极性相互作用保留目标化合物时总之,通过非极性相互作用保留目标化合物时(亦即使用反亦即使用反相固相萃取柱时相固相萃取柱时),极性溶剂,极性溶剂(尤其是水尤其是水)能够增强这类分离能够增强这类分离物的保留,可以选作上样时的样品溶剂和淋洗溶剂;弱极性物的保留,可以选作上样时的样品溶剂和淋洗溶剂;弱极性的溶剂或混合溶剂能够破坏目标化合物与吸附剂间的非极性的溶剂或混合溶剂能够破坏目标化合物与吸附剂间的非极性相互作用,将目标化合物从非极性吸附剂上洗脱下来。相互作用,将目标化合物从非极性吸附剂上洗脱下来。为了规范事业单
15、位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权益非极性相互作用(Non-PolarInteraction)C18固相萃取柱C8固相萃取柱CH固相萃取柱为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权益非极性相互作用(Non-PolarInteraction)PH固相萃取柱PLS固相萃取柱为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权益极性相互作用(PolarInteraction)v多种吸附剂与目标化合物官能
16、团之间存在极性相互作用。极性相互作用包括氢键(HydrogenBonding),偶极距(Dipole/Dipole),诱导偶极距(InducedDipole/Dipole),-(Pi-Pi)和其它多种相互作用力。极性基团上往往是一些电负性差异较大的原子,电子云在这些原子间具有不同的密度,使官能团带有极性,这一性质进而使具有极性官能团的目标化合物分子与吸附剂上的极性官能团发生相互作用。典型的极性互相作用基团包括羟基、胺基,羰基、巯基、双键以及带有杂原子(如氧、氮、氟、硫和磷)的基团。为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权
17、益极性相互作用(PolarInteraction)v由于硅胶基质(尤其是游离的硅羟基)具有较强的极性,极性相互作用广泛存在于硅胶键合吸附剂中,在非极性溶剂中,硅胶键合吸附剂的次级极性相互作用尤为显著,含胺基和羟基对次级相互作用极为敏感。v键合了非极性基团的非极性吸附剂(C18、C8、PH、CH等)通常被用来保留非极性和弱极性化合物,其硅胶基质表面残余的硅羟基经过了封端处理,并且通常在极性溶剂环境下操作,因而次级相互作用在这些硅胶键合吸附剂中非常微弱;v在极性硅胶键合吸附剂(Silica、NH2、PSA)和离子交换硅胶键合吸附剂(SCX、SAX)中极性相互作用是被期望的,所以无须进行封端处理以抑
18、制次级相互作用。为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权益极性相互作用(PolarInteraction)v氢键是最主要极性相互作用力之一。氢键产生的条件为:电负性原子X(氟、氯、氧、氮等)共价结合的氢原子与另一电负性原子Y(氟、氯、氧、氮等)接近,在X与Y之间以氢为媒介,生成X-HY形式的键。羟基或氨基是最主要氢键给予体,能与氢键给予体相互吸引的官能团(亦即氢键受体)是那些包含氧、氮或硫原子的基团为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权益极性相互
19、作用(PolarInteraction)v非极性溶剂能促进极性分离物在极性吸附剂上的保留,这是因为非极性溶剂分子无法轻易破坏吸附剂和目标化合物之间的极性相互作用。反之,极性溶剂就能有效地破坏这种极性相互作用,这是因为极性目标化合物易溶于极性溶剂中,并且极性溶剂能更有效地与目标化合物竞争吸附剂上的吸附位点。v高离子浓度同样能够破坏极性相互作用,极性目标化合物经常通过与硅胶基体的次级相互作用保留在非极性吸附剂上,但是这种保留被高离子浓度抑制。如果次级相互作用是需要的,可以让Tris缓冲液通过吸附剂,使该作用力得到加强。为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 萃取 原理 应用 ppt 课件
![提示](https://www.taowenge.com/images/bang_tan.gif)
限制150内