肿瘤免疫诊断及治疗.pptx

《肿瘤免疫诊断及治疗.pptx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《肿瘤免疫诊断及治疗.pptx（35页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、肿瘤的免疫诊断：通过生化和免疫学技术检测肿瘤抗原、抗肿瘤抗体或其他肿瘤标记物。第1页/共35页肿瘤的免疫诊断包括三个方面：检查肿瘤标记物质检查特异性抗体检查细胞免疫状态第2页/共35页肿瘤标志物的定义：肿瘤标志物（tumormarker,TM）是指在肿瘤的发生和增殖过程中，由肿瘤细胞本身所产生的或者是由机体对肿瘤细胞反应而产生的，反映肿瘤存在和生长的一类物质。一般可以从血或尿中检测。第3页/共35页常见的标记物质有：肝癌的甲胎蛋白（AFP）结肠癌的癌胚抗原（CEA）胰腺癌的糖链抗原（CA199）前列腺癌的前列腺特异性抗原（PSA）第4页/共35页甲胎蛋白（甲胎蛋白（AFPAFP）是胎儿早期血清

2、中主要的蛋白质。分泌型胚胎抗原，主要由胎肝和卵黄囊产生的糖蛋白。当肝细胞或生殖腺胚胎组织发生恶性病变时，AFP含量升高.AFPAFP的检测的检测:EIA:EIA和和RIARIA；正常成人；正常成人20g/L20g/L 成人血清成人血清AFPAFP升高见于：升高见于：原发性肝癌（原发性肝癌（80-90%80-90%）可在症状出现前）可在症状出现前6-126-12个月作出诊断个月作出诊断非转移性肝癌及肝外肿瘤，生殖腺胚胎癌、胃癌或胰腺癌非转移性肝癌及肝外肿瘤，生殖腺胚胎癌、胃癌或胰腺癌非肿瘤性疾病；先天性胆道闭锁症，急性肝炎，肝硬化等非肿瘤性疾病；先天性胆道闭锁症，急性肝炎，肝硬化等孕妇血清孕妇血

3、清AFPAFP增高增高第5页/共35页癌胚抗原（癌胚抗原（CEACEA）主要存在于胎儿消化道上皮组织、胰脏和肝脏。正常情况下主要存在于胎儿消化道上皮组织、胰脏和肝脏。正常情况下CEACEA入胃肠道，而入胃肠道，而肿瘤细胞分泌的肿瘤细胞分泌的CEACEA则进入血液和淋巴液，故血中则进入血液和淋巴液，故血中CEACEA含量会增高。含量会增高。CEACEA的检测：的检测：EIAEIA、RIARIA参考值参考值 5g/L5g/L（97%97%健康人低于此值）健康人低于此值）血清血清CEACEA升高见于：升高见于：消化道恶性肿瘤：整个胃肠道恶性肿瘤均可增高。消化道恶性肿瘤：整个胃肠道恶性肿瘤均可增高。非

4、消化道恶性肿瘤：如卵巢癌、肺癌有不同程度升高。非消化道恶性肿瘤：如卵巢癌、肺癌有不同程度升高。检测胸、腹水或胃液的检测胸、腹水或胃液的CEACEA含量对鉴别诊断有意义。含量对鉴别诊断有意义。CEACEA与其它肿瘤标志物结合测定可以提高对癌症的检出率。与其它肿瘤标志物结合测定可以提高对癌症的检出率。第6页/共35页糖链抗原（CA199）（CA19-9）在消化道腺癌病人血清中的浓度可明显升高，是胰腺癌和胆管癌的肿瘤标志物。参考值ELISA法03.7ku/L（1）胰腺癌(80%95%)、肝癌、胆管癌、胃癌时CA19-9可明显升高。（2）急性胰腺炎、胆汁淤积性胆管炎、胆石症、急性肝炎、肝硬化等CA19

5、-9有不同程度升高。（3）CA19-9、CA50与CEA联合检测可提高阳性检出率第7页/共35页 前列腺特异性抗原前列腺特异性抗原(PSA)血清血清PSA PSA 分子形式：分子形式：复合型复合型PSA(t-PSA)PSA(t-PSA)参考值参考值 4.0 g/L 4.0 g/L F/T F/T比值比值0.250.25游离型游离型PSA(f-PSA)PSA(f-PSA)参考值参考值 1.0 g/L 1.0 g/L （PSAPSA）是是一一种种仅仅由由前前列列腺腺上上皮皮细细胞胞分分泌泌的的糖糖蛋蛋白白，当当正正常常腺腺管管结结构构遭遭到到良良性性、恶恶性性肿肿瘤瘤或或炎炎症症的的破破坏坏时时，

6、其其血血浆浆中中PSAPSA水平升高。正常人血清中水平升高。正常人血清中PSA4ug/LPSA4g/L判断阳性，则阳性率可达50%-80%。t-PSA血清浓度和阳性率随着病程的进展而增高，因此，PSA可作为监测前列腺癌病情变化和疗效的重要指标。（2）前列腺肥大、前列腺炎，也可见t-PSA和f-PSA水平轻度升高，必须结合其它检查进行鉴别。（3）单独使用t-PSA和f-PSA升高来诊断前列腺癌时很难排除前列腺增生症，特别是当t-PSA在5g/L-10g/L时。此时应用t-PSA和f-PSA来判断。t-PSA/f-PSA25%时提示前列腺增生症。其特异性达90%,正确率80%。第9页/共35页酶联

7、免疫吸附试验（ELISA）（Enzyme linked lmmunosorbent Aassay）【原理】把抗原抗体的免疫反应和酶（主要有辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶等）的高效催化作用有机地结合起来，并仍保持其免疫和酶的活性。结合在抗原抗体复合物上的酶在遇到相应的底物时，可以催化底物水解、氧化或还原，从而产生有色的物质。颜色反应的深浅与抗体或抗原的量成正比。【方法】主要有间接法和双抗体夹心法第10页/共35页放射免疫指导外科（RIGS）radioimmunoguidedsurgery肿瘤外科手术有些难以确定肿瘤的浸润的深度，具体边缘及隐藏的部分。RIGS恰好能解决上述难题。该方法是将放射性核素如

8、131I与特异性抗肿瘤单抗结合后，从静脉或腔内注入体内可将放射性核素导向肿瘤的所在部位，显示清晰的肿瘤影像，此种放射免疫显像法是一种有较好应用前景的肿瘤诊断技术。第11页/共35页肿瘤的免疫学治疗第12页/共35页肿瘤的免疫学治疗肿瘤的免疫学治疗1主动免疫治疗主动免疫治疗给机体输入具有抗原性的瘤苗，刺激机体免疫系统产生抗肿瘤免疫以达到治疗肿瘤、预防肿瘤转移和复发的目的。2被动免疫治疗被动免疫治疗给机体输入外源性的免疫效应物质，使其在宿主体内发挥抗肿瘤作用。3细胞因子治疗4肿瘤的基因治疗肿瘤的基因治疗 第13页/共35页一主动免疫治疗肿瘤的特异性主动免疫治疗(ASI)是指利用肿瘤细胞或肿瘤抗原物

9、质诱导机体的特异性细胞免疫和体液免疫，增强机体的抗瘤能力，阻止肿瘤的生长扩散和复发以治疗肿瘤的方法。第14页/共35页（一）细胞疫苗细胞疫苗1 1 基因修饰的肿瘤细胞基因修饰的肿瘤细胞 细细胞胞因因子子的的基基因因或或MHCIMHCI分分子子的的基基因因等等转转移移入入肿瘤细胞，降低致瘤性，增强免疫原性。肿瘤细胞，降低致瘤性，增强免疫原性。2 2 基因修饰的树突状细胞（基因修饰的树突状细胞（DCDC）第15页/共35页（二）分子疫苗（二）分子疫苗1肿瘤抗原疫苗抗原疫苗包括TAA/TSA疫苗、MHC抗原多肽复合疫苗、HSP-肽复合体疫苗，以及人工合成肿瘤肽疫苗等。热休克蛋白(HSP)是在生物进化

10、中高度保守、广泛分布的蛋白质，具有“分子伴侣”(moleculechaperone)作用，参与多种胞内蛋白的折叠、装配及转运。从肿瘤组织中提取的HSP-肽复合体含有多种肿瘤相关肽，可诱导多个肿瘤特异性CTL克隆，发挥特异性杀伤作用，而且不受MHC类抗原限制，因此，HSP-肽复合体疫苗展示一定的应用前景。2 2与肿瘤发生有关的病毒疫苗与肿瘤发生有关的病毒疫苗病毒疫苗不仅可以预防病毒性疾病，更重要的可以预防或治疗人类许多与病毒感染密切相关的肿瘤，如乙型肝炎病毒疫苗。目前，以病毒为载体与其他肿瘤抗原或多肽组成的重组病毒疫苗(如重组痘苗病毒)正在研制和I期临床试验之中。3 3抗独特型抗体疫苗抗独特型抗

11、体疫苗抗独特型抗体作为抗原的内影像，可模拟抗原的结构并代替肿瘤抗原成为疫苗，诱发机体产生特异性抗肿瘤免疫应答。制备简便，只需以肿瘤特异性单克隆抗体作为免疫原，制备抗体并筛选具有内影像作用的抗独特型抗体，不需要分离或鉴别肿瘤抗原。抗独特性疫苗的优点在于不含抗原或抗原片段，制备起来经济，可大量人工合成。抗独特性抗体的分子量小，其免疫原性往往不完全，故需与免疫载体结合。采用抗独特性抗体疫苗已治疗了淋巴瘤、黑色素瘤、结肠癌、皮肤T淋巴细胞瘤、卵巢癌等，其临床疗效有待观察。一组临床试验用抗独特型抗体疫苗治疗了40例恶性淋巴瘤，15获完全缓解、50获部分缓解，缓解期为6个月左右。抗独特型抗体疫苗治疗的主要

12、障碍是肿瘤内存在独特型阴性的细胞，因而可逃脱免疫反应的攻击。第16页/共35页（三）核酸疫苗（三）核酸疫苗DNA疫苗是指人工克隆一段编码肿瘤特异性抗原的DNA，并通过质粒等方式注入机体，使其在体内细胞中有效表达蛋白而成为肿瘤特异性抗原。这种抗原模仿了病毒蛋白等内源性抗原的递呈方式，解除了免疫耐受，诱导机体产生特异性抗肿瘤免疫应答。DNA疫苗虽有许多问题有待研究，但显示了诱人的前景。第17页/共35页免疫导向疗法将具有细胞毒作用的杀伤因子与单克隆抗体偶联制成“生物导弹”，利用单抗能特异性结合肿瘤抗原的特性将杀伤因子“导向”肿瘤病灶，杀伤肿瘤细胞第19页/共35页常用的杀伤因子：放射性核素(131

13、I)抗肿瘤药物氨甲蝶呤临床用于急性白血病，尤其是急性淋巴细胞性白血病，绒毛膜上皮癌及恶性葡萄胎等效果较好。对头颈部肿瘤、乳腺癌、肺癌及盆腔肿瘤均有一定疗效。阿霉素主要适用于急性白血病，对急性淋巴细胞白血病及粒细胞白血病均有效，一般作为第二线药物，即在首选药物耐药时可考虑应用此药。恶性淋巴瘤，可作为交替使用的首先药物。乳腺癌、肉瘤、肺癌、膀胱癌等其他各种癌症都有一定疗效，多与其他抗癌药联合使用。毒素蓖麻毒素由A、B两条链组成。A链比B链稍短，两链之间以一个二硫键相连接。当毒素进入体内，A、B链分开。A链通过渗透经细胞膜进入细胞浆，主要使真核细胞的核糖体抑制失活，从而抑制蛋白质的合成。B链与细胞表

14、面结合，通过内陷作用转入细胞内，它能促使A链进入胞浆。主要通过抑制蛋白质合成来杀伤癌细胞 白喉毒素绿脓杆菌外毒素其中放射性核素应用方便、标记简便，易显像及定位定量检测，并能破坏邻近未被单抗结合的肿瘤细胞，因此应用最多。第20页/共35页二二被动免疫治疗被动免疫治疗将自身或异体抗肿瘤效应细胞或其前体细胞在体外进行诱导、激活和扩增，然后转输给肿瘤患者，提高患者抗肿瘤免疫力，以达到治疗和预防复发的目的常见的免疫效应细胞有LAK、TIL、CD3AK、CTL2.过继免疫疗法第21页/共35页LAK（lymphokine activated killer）用高浓度IL-2激活来自患者自体或正常供者的外周血

15、单个核细胞，能够杀伤NK不敏感肿瘤细胞 TIL（tumor infiltrating lymphocytes）从切除的瘤组织或癌性胸腹水中分离淋巴细胞，体外经IL-2诱导激活扩增。TIL已应用于临床，主要治疗皮肤、肾、肺、头颈部、肝、卵巢部位的原发或继发肿瘤。CD3AK（CD3 antibody activated killer）抗CD3单抗辅以小剂量IL-2激活外周血单个核细胞。CD3AK细胞在体内、外均有较强的抗瘤活性，目前已有报道在临床应用CD3AK细胞治疗肾癌、黑色素瘤并取得一定的疗效。但是由于肿瘤病人一般状况较差，故从肿瘤病人身上大量抽取外周血诱导CD3AK细胞用于治疗较为困难，采用

16、健康成人外周血诱导CD3AK细胞经体外激活扩增后输给肿瘤病人则是较为可行的治疗方法。CTL用特异性多肽抗原体外诱导CTL克隆第22页/共35页三细胞因子疗法将某些细胞因子注射体内后，可调节、增强一种或多种免疫细胞的活性，发挥更强的抗肿瘤免疫功能目前临床常用的细胞因子有IL-2、TNF-、IFN-、CSF等第23页/共35页增加增加MHC-IMHC-I分子的表分子的表达达缓解毛细胞白血病缓解毛细胞白血病,对癌症有弱的效对癌症有弱的效应应IFN-IFN-,IFNIFN-IFN-IFN-增加增加MHC-IMHC-I分子的表分子的表达达,激活激活Tc Tc 和和 NK NK 细胞细胞缓解卵巢癌缓解卵巢

17、癌IL-2IL-2使使T T细胞活化和增殖细胞活化和增殖,激活激活NKNK细胞细胞缓解肾细胞癌和黑缓解肾细胞癌和黑色素瘤色素瘤TNFTNF-激活巨噬细胞和淋激活巨噬细胞和淋巴细胞巴细胞减少恶性腹水减少恶性腹水细胞因子用于免疫治疗细胞因子用于免疫治疗第24页/共35页四基因疗法克隆某些可用于肿瘤治疗的目的基因，体外转染受体细胞，然后回输体内直接将目的基因体内注射，使目的基因在体内有效表达增强体内抗肿瘤作用或改善肿瘤微环境以增强抗肿瘤免疫力第25页/共35页目前常用的抗肿瘤目的基因细胞因子基因IL-212、IFN-、TNF-、CSF等基因肿瘤抗原基因MAGE、CEA等基因MHC基因协同刺激分子基因

18、CD54、LFA-3等基因肿瘤自杀基因TK、CD基因等抑癌基因RB基因、p53基因等第26页/共35页非特异性免疫治疗是指应用一些免疫调节剂通过非特异性地增强机体的免疫功能，激活机体的抗肿瘤免疫应答，以达到治疗肿瘤的目的。晚期肿瘤病人大多伴有免疫功能紊乱，在手术切除肿瘤后，使用免疫增强药物有利于调整机体的免疫功能，提高机体抗肿瘤作用，减少肿瘤的复发。在肿瘤放疗和化疗以后，机体免疫功能受到明显损害，使用免疫增强药物可以促进机体免疫功能的恢复。目前在肿瘤治疗中应用较多的如卡介苗，短小棒状杆菌，酵母多糖，香菇多糖，OK432以及一些细胞因子如IL-2等均属于此类。第27页/共35页第28页/共35页

19、HBV或HCV感染与原发性肝癌HBV(Hepatitis B virus)HCV(Hepatitis C virus)第29页/共35页第30页/共35页l人类乳突病毒Human Papilloma virusHPV感染与宫颈癌第31页/共35页EBV：Epstein-Barr virusEBV感染与鼻咽癌EBV是Epstein和Barr于1964年首次地将Burkitt非洲儿童淋巴瘤细胞通过体外悬浮培养而建株，并在建株细胞涂片中用电镜观察到疱疹病毒颗粒，故名。第32页/共35页HTLV-1感染与成人T细胞白血病HTLV-1人类T淋巴细胞白血病病毒型 第33页/共35页HBV疫苗与肝癌的预防乙

20、型肝炎病毒感染是目前严重的公共卫生问题。肝癌高发区其乙肝病毒携带率高80%的肝癌病人均有乙肝病毒感染。在肝癌病人中发现了乙肝病毒DNA整合到肝细胞的DNA中，因此阻断HBV感染是预防原发性肝癌的重要途径，而接种乙肝疫苗是控制乙肝最根本和有效的措施。WHO指出在HBV低流行区应选择性使用疫苗，而在中高流行区所有婴儿都应接种疫苗，应把乙肝疫苗的应用纳入扩大的计划免疫中去。实践证明对新生儿特别是HBsAg阳性及(或)HBeAg阳性母亲的新生儿进行乙肝疫苗接种免疫效果可靠。在江苏省启东市至1990年底已接种新生儿41717人疫苗接种率达98.6%，5岁时抗HBS阳性率达82%。目前已观察到慢性肝炎下降的趋势，接种乙肝疫苗预防肝癌的远期效果有待进一步观察证实 第34页/共35页感谢您的观看！第35页/共35页