营养物质进入细胞方式.pptx
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1、一、营养物质进入细胞的方式1、单纯扩散(simple diffusion)simple diffusion)2 2、促进扩散(facilitated diffusion)facilitated diffusion)3 3、主动运输(active transport)4、基团移位(group translocation)group translocation)第1页/共45页1.单纯扩散(simple diffusion)又称又称“被动扩散被动扩散”(passive transport)属物理扩散。不需能量,无载体参与,以浓差为动力,属物理扩散。不需能量,无载体参与,以浓差为动力,高浓向低浓扩散
2、高浓向低浓扩散特点:特点:非特异性,高浓向低浓扩散;非特异性,高浓向低浓扩散;有一定选择性(原生质膜上含水小孔的大小和形状);有一定选择性(原生质膜上含水小孔的大小和形状);不发生反应,性质(结构)不变;不发生反应,性质(结构)不变;不需能,依靠浓差;不需能,依靠浓差;运送速度随浓差降低而减小。运送速度随浓差降低而减小。第2页/共45页物质跨膜扩散的能力和速率与该物质的性质有关物质跨膜扩散的能力和速率与该物质的性质有关,分子量小、脂溶分子量小、脂溶性、极性小的物质易通过扩散进出细胞。性、极性小的物质易通过扩散进出细胞。扩散并不是微生物细胞吸收营养物质的主要方式扩散并不是微生物细胞吸收营养物质的
3、主要方式,水是唯一可通过水是唯一可通过扩散自由通过原生质膜的分子扩散自由通过原生质膜的分子,脂肪酸、乙醇、甘油、苯、一些气脂肪酸、乙醇、甘油、苯、一些气体分子体分子(O2、CO2)及某些氨基酸在一定程度上可通过扩散进出细胞。及某些氨基酸在一定程度上可通过扩散进出细胞。第3页/共45页2.促进扩散(facilitated diffusion)载体蛋白参与,不需能量,以浓差为动力,由高浓向低浓运送。载体蛋白参与,不需能量,以浓差为动力,由高浓向低浓运送。运送物质:糖,氨基酸(真核微生物中作用明显);运送物质:糖,氨基酸(真核微生物中作用明显);甘油(沙门氏菌,非原核生物的重要运输方式);甘油(沙门
4、氏菌,非原核生物的重要运输方式);第4页/共45页 载体只影响物质的运输速率,并不改变该物质在膜内外形成载体只影响物质的运输速率,并不改变该物质在膜内外形成的动态平衡状态(促进扩散速度比单纯扩散快);的动态平衡状态(促进扩散速度比单纯扩散快);这种性质类似于酶的作用特征,因此载体蛋白也称为透过酶;这种性质类似于酶的作用特征,因此载体蛋白也称为透过酶;透过酶大都是诱导酶透过酶大都是诱导酶,只有在环境中存在机体生长所需的营养只有在环境中存在机体生长所需的营养物质时,相应的透过酶才合成。物质时,相应的透过酶才合成。浓度梯度运输速度被动扩散促进扩散特点:特点:质膜上的载体蛋白具较高的专质膜上的载体蛋白
5、具较高的专一性;被运输物质的分子结构一性;被运输物质的分子结构不发生变化;不发生变化;运输速率与胞内运输速率与胞内外营养物质的浓度差成正比,外营养物质的浓度差成正比,当浓度差达到一定值时,载体当浓度差达到一定值时,载体产生饱和效应,运输速度不再产生饱和效应,运输速度不再随胞内外物质的浓度差的增加随胞内外物质的浓度差的增加而增加。而增加。第5页/共45页3.主动运输(active transport)一类需要提供能量(包括一类需要提供能量(包括ATP、质子动势或离子泵等)并、质子动势或离子泵等)并通过细胞膜上特异性载体蛋白构型的变化,而使膜外环境中低通过细胞膜上特异性载体蛋白构型的变化,而使膜外
6、环境中低浓度的溶质运入膜内的一种物质运送方式。浓度的溶质运入膜内的一种物质运送方式。运输物质所需能量运输物质所需能量来源:来源:好氧型微生物与好氧型微生物与兼性厌氧微生物直兼性厌氧微生物直接利用呼吸能;接利用呼吸能;厌氧型微生物利厌氧型微生物利用化学能用化学能(ATP);光合微生物利用光合微生物利用光能;光能;嗜盐细菌通过紫嗜盐细菌通过紫膜利用光能膜利用光能第6页/共45页运送物质:运送物质:无机离子(无机离子(K+等);等);糖(乳糖,麦芽糖,葡萄糖等糖(乳糖,麦芽糖,葡萄糖等););大部分氨基酸和有机酸。大部分氨基酸和有机酸。特点:特点:需载体蛋白参与;需载体蛋白参与;载体蛋白具有较强的专
7、一性;载体蛋白具有较强的专一性;载体蛋白通过构象变化而改变与被运送物质之间的亲和力,载体蛋白通过构象变化而改变与被运送物质之间的亲和力,载体蛋白构象变化需消耗能量;载体蛋白构象变化需消耗能量;第7页/共45页4.基团转位(group translocation)需载体蛋白,耗能,被运送物质分子结构发生变化需载体蛋白,耗能,被运送物质分子结构发生变化特点:特点:需能量;需能量;需载体蛋白;需载体蛋白;逆浓差运输;逆浓差运输;运输具有专一性;运输具有专一性;物质在运送过程中物质在运送过程中发生化学变化(磷发生化学变化(磷酸化),磷酸基团酸化),磷酸基团来源于来源于PEP(1)PEP+HPr 磷酸H
8、Pr+丙酮酸磷酸HPr+葡萄糖 6-磷酸葡萄糖+HPr第8页/共45页运送机制:运送机制:磷酸转移酶系统(磷酸转移酶系统(PTS)包括包括:酶酶(非特异性,胞内)(非特异性,胞内)酶酶a(非特异性,胞内)非特异性,胞内)酶酶b(特异性,亲水性,接近膜)特异性,亲水性,接近膜)酶酶c(特异性,疏水性,膜上特异性,疏水性,膜上)HPr(热稳载体蛋白)(热稳载体蛋白)(非特异性,膜上(非特异性,膜上)第9页/共45页 基团转位主要存在于厌氧型和兼性厌氧型细菌中,基团转位主要存在于厌氧型和兼性厌氧型细菌中,主要用于糖的运输。主要用于糖的运输。目前尚未在好氧型细菌及真核生物中发现这种运输目前尚未在好氧型
9、细菌及真核生物中发现这种运输方式;方式;尚未发现氨基酸通过这种方式运输。尚未发现氨基酸通过这种方式运输。第10页/共45页第四节 培养基(medium,media)培养基是人工配制的,适合于微生物生长繁殖或产生培养基是人工配制的,适合于微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养基质。代谢产物的营养基质。一、培养基的分类一、培养基的分类 按对培养基中材料的了解情况分按对培养基中材料的了解情况分 按培养基的物理状态分按培养基的物理状态分 按培养基的功能分按培养基的功能分 按培养基使用的目的分按培养基使用的目的分 二、二、配制培养基的原则配制培养基的原则 营养成分配比、渗透压营养成分配比、渗透压 、pHpH
10、值值 、氧化还原电位、氧化还原电位 第11页/共45页一、培养基的种类1 1按对培养基成份的了解情况划分按对培养基成份的了解情况划分(1 1)天然培养基(complex medium)定义:指利用动植物、微生物或其它天然来源的难以确切定义:指利用动植物、微生物或其它天然来源的难以确切知道其化学成分的原料所配成的培养基。知道其化学成分的原料所配成的培养基。培养基可分为天然培养基、合成培养基和半合成培养基。培养基可分为天然培养基、合成培养基和半合成培养基。特点:培养基化学成分复杂,营养丰富,原料来源充足,特点:培养基化学成分复杂,营养丰富,原料来源充足,价格低廉。价格低廉。用途:适宜于实验室和大生
11、产之用。用途:适宜于实验室和大生产之用。举例:培养酵母和霉菌的麦芽汁培养基属于此类。举例:培养酵母和霉菌的麦芽汁培养基属于此类。第12页/共45页实验室常用的天然营养物质实验室常用的天然营养物质第13页/共45页(2)合成培养基(synthetic medium)定义:采用已知化学成分的纯试剂所配成的培养基,也定义:采用已知化学成分的纯试剂所配成的培养基,也称组合培养基称组合培养基(chemically defined medium)chemically defined medium)。特点:这类培养基成分明确,重复性强。特点:这类培养基成分明确,重复性强。用途:适用于做分类鉴定,生物测定、选
12、种育种等方面用途:适用于做分类鉴定,生物测定、选种育种等方面的研究。的研究。举例:培养放线菌的高氏一号培养基,培养真菌的查氏举例:培养放线菌的高氏一号培养基,培养真菌的查氏培养基。培养基。第14页/共45页(3)半合成培养基(semi-synthetic medium)定义:主要以化学试剂配制,同时还加有某种或某些天定义:主要以化学试剂配制,同时还加有某种或某些天然成分的培养基,也称半组合培养基。即在合成培养基中加然成分的培养基,也称半组合培养基。即在合成培养基中加入某种天然成分而制成的培养基。入某种天然成分而制成的培养基。特点:培养基中部分成分清楚,部分成分不清楚。特点:培养基中部分成分清楚
13、,部分成分不清楚。用途:适合于大多数微生物的培养。大多数培养基都用途:适合于大多数微生物的培养。大多数培养基都属此类。属此类。举例:营养琼脂(举例:营养琼脂(NANA)中除含有天然的牛肉膏和蛋白)中除含有天然的牛肉膏和蛋白胨外,还有成分明确的氯化钠。胨外,还有成分明确的氯化钠。第15页/共45页2 2根据物理状态划分根据物理状态划分固体培养基固体培养基(solid medium)半固体培养基半固体培养基(semi-solid medium)液体培养基液体培养基(liquid medium)天然固体基质制成的固体培养基,如马铃薯块、麸皮天然固体基质制成的固体培养基,如马铃薯块、麸皮培养基;二是在
14、液体培养基中添加凝固剂而制成的固体培培养基;二是在液体培养基中添加凝固剂而制成的固体培养基。用于微生物分离、鉴定、计数、测定、保藏等养基。用于微生物分离、鉴定、计数、测定、保藏等,生产生产上固体种子培养,某些产品的发酵培养基。上固体种子培养,某些产品的发酵培养基。液体培养基中加入少量的凝固剂而使之呈半固体状态液体培养基中加入少量的凝固剂而使之呈半固体状态的一类培养基。琼脂的一类培养基。琼脂)。常用于观察细菌运动特征,噬。常用于观察细菌运动特征,噬菌体效价鉴定以及厌氧菌培养等。菌体效价鉴定以及厌氧菌培养等。不含任何凝固剂,其组分均匀,呈液体状态,用途广不含任何凝固剂,其组分均匀,呈液体状态,用途
15、广泛。常用于微生物生理代谢的各种研究,也是大规模工业泛。常用于微生物生理代谢的各种研究,也是大规模工业发酵生产上普遍采用的培养基。发酵生产上普遍采用的培养基。第16页/共45页凝固剂特点和种类凝固剂特点和种类不被微生物液化、分解和利用;不被微生物液化、分解和利用;在微生物生长的温度范围内保持固体状态;在微生物生长的温度范围内保持固体状态;凝固点的温度对微生物无害;凝固点的温度对微生物无害;不会因高温灭菌而受到破坏;不会因高温灭菌而受到破坏;透明度好、凝固力强;透明度好、凝固力强;配制方便,价格低廉。配制方便,价格低廉。理想的凝固剂应具备以下条件:理想的凝固剂应具备以下条件:琼脂和明胶用作凝固剂
16、的性能比较琼脂和明胶用作凝固剂的性能比较凝固剂凝固剂微生物利用程度微生物利用程度融化温度融化温度凝固点凝固点化学本质化学本质常用量常用量琼脂琼脂绝大多数不利用绝大多数不利用964045 聚半乳糖硫酸酯聚半乳糖硫酸酯0.52%明胶明胶大多数利用(作氮源)大多数利用(作氮源)2520动物蛋白动物蛋白512%第17页/共45页(1)鉴别培养基)鉴别培养基(differential medium)一类含有某种代谢产一类含有某种代谢产物指示剂的培养基。微生物指示剂的培养基。微生物在这类培养基上生长后,物在这类培养基上生长后,分泌的代谢产物与指示剂分泌的代谢产物与指示剂起反应产生某种明显的特起反应产生某种
17、明显的特征性变化,根据这种变化征性变化,根据这种变化将该种微生物与其它微生将该种微生物与其它微生物区分开来。物区分开来。3 3按功能划分按功能划分培养基分成鉴别培养基和选择培养基培养基分成鉴别培养基和选择培养基 第18页/共45页 伊红伊红-美兰培养基(美兰培养基(EMB)可用于鉴别大肠杆菌、沙门氏菌、)可用于鉴别大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌等肠道微生物。大肠杆菌能强烈分解乳糖而产生大量志贺氏菌等肠道微生物。大肠杆菌能强烈分解乳糖而产生大量的混合酸,使菌体表面带的混合酸,使菌体表面带H+,染上酸性染料伊红,又因伊红与,染上酸性染料伊红,又因伊红与美兰结合,引起菌落被染上深紫色,反射光下呈绿色金
18、属光泽。美兰结合,引起菌落被染上深紫色,反射光下呈绿色金属光泽。第19页/共45页鉴别培养基举例鉴别培养基举例 第20页/共45页(2)选择培养基)选择培养基(selective medium)根据某类微生物的根据某类微生物的特殊营养要求或对某种特殊营养要求或对某种物理化学因子的抗性而物理化学因子的抗性而设计出来的一类培养基。设计出来的一类培养基。即根据被分离微生即根据被分离微生物的特性,采用物的特性,采用“投其投其所好、取其所抗所好、取其所抗”的原的原则设计的培养基。则设计的培养基。第21页/共45页 目的:增殖少数 手段:“投其所好”混合样品 选择性培养基 成为中劣势菌 优势菌 目的:抑制
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