药物化学-第四章..word版本.ppt
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1、药物化学-第四章.第一节第一节 定量分析样品的前处理方法定量分析样品的前处理方法 一、概述一、概述 1.1.为什么要对定量分析的样品进行前处理?为什么要对定量分析的样品进行前处理?含卤素有机药物含卤素有机药物 R-X(F,Cl,Br,I)金属有机药物金属有机药物 R-O-Me(有机酸或酚的有机酸或酚的 含金属有机药物含金属有机药物 金属盐;结合不牢固)金属盐;结合不牢固)有机金属药物有机金属药物 R-Me(结合牢固)结合牢固)2.常用的处理方法常用的处理方法 不经有机破坏的分析方法不经有机破坏的分析方法 药物分析中常用的分析方法药物分析中常用的分析方法 经有机破坏的分析方法经有机破坏的分析方法
2、二、不经有机破坏的分析方法二、不经有机破坏的分析方法(一)直接测定法(一)直接测定法 例如:富马酸亚铁例如:富马酸亚铁 溶于热稀矿酸,采用铈量法溶于热稀矿酸,采用铈量法,邻二氮菲作指示剂,邻二氮菲作指示剂 (二)经水解后测定法(二)经水解后测定法 1.直接回流后测定法直接回流后测定法 例如:三氯叔丁醇的含量测定例如:三氯叔丁醇的含量测定 CCl3-C(CH3)2-OH+4NaOH (CH3)2CO+3NaCl+HCOONa+2H2O NaCl +AgNO3 AgCl +NaNO3 AgNO3 +NH4SCN AgSCN +NH4NO3 2.用硫酸水解后测定法用硫酸水解后测定法 例如:硬脂酸镁的
3、含量测定例如:硬脂酸镁的含量测定 Mg(C17H35COO)2 +H2SO4 MgSO4 +2C17H35COOH H2SO4 +2NaOH Na2SO4 +2H2O (三(三)经氧化还原后测定法经氧化还原后测定法 1.碱性还原后碱性还原后测定测定 例如:泛影酸的含量测定例如:泛影酸的含量测定 2.酸性还原后酸性还原后测定测定 例如:碘番酸的含量测定例如:碘番酸的含量测定 Zn还原还原 后银量法后银量法 3.利用药物中可游离的金属离子的氧化性测定含量利用药物中可游离的金属离子的氧化性测定含量 (1)含锑药物)含锑药物 例如:葡萄糖酸锑的含量测定例如:葡萄糖酸锑的含量测定 Sb5+2KI Sb3
4、+2K+I2 I2 +2Na2S2O3 2NaI +Na2S4O6 (2)含铁药物含铁药物 2Fe3+2KI 2Fe2+2K+I2 I2 +2Na2S2O3 2NaI +Na2S4O6H+三、经有机破坏的分析方法三、经有机破坏的分析方法 湿法破坏湿法破坏 药物分析中常用的有机破坏的方法有药物分析中常用的有机破坏的方法有 干法破坏干法破坏 HNOHNO3 3-HClO-HClO4 4法法 高价态高价态 氧瓶燃烧氧瓶燃烧法法(一一)湿法破坏湿法破坏 HNOHNO3 3-H-H2 2SOSO4 4法高价态法高价态 H H2 2SOSO4 4-硫酸盐法低价态硫酸盐法低价态 HNOHNO3 3-H-H2
5、 2SOSO4 4-HClO-HClO4 4法;法;H H2 2SOSO4 4-H-H2 2O O2 2;H H2 2SOSO4 4-KMnO-KMnO4 4(二二)干法破坏干法破坏 加加NaNa2 2COCO3 3或或MgOMgO以助灰化;温度控制在以助灰化;温度控制在420420 (三三)氧燃瓶燃烧法氧燃瓶燃烧法(oxygen flask combustion method)1.仪器装置仪器装置 500ml,1000ml,2000ml,磨口、硬质玻璃锥形瓶磨口、硬质玻璃锥形瓶 2.称样称样 固体样;液体样要求详见固体样;液体样要求详见P68 3.燃烧分解操作法燃烧分解操作法 4.吸收液的选
6、择吸收液的选择 用于用于X、S、Se等的鉴别、检查、含量测定时等的鉴别、检查、含量测定时 多数是多数是H2O或或H2O-NaOH;少数为少数为H2O-NaOH-H2O2.应用示例:碘苯酯的测定应用示例:碘苯酯的测定返 回第二节第二节 定量分析方法特点定量分析方法特点 一、容量分析法一、容量分析法 (一)容量分析法的(一)容量分析法的特点特点 操作简单、快速;操作简单、快速;比较准确(比较准确(RSDRSD0.2%0.2%););仪器普通易得。仪器普通易得。(二)容量分析法的(二)容量分析法的计算计算问题问题 1.1.滴定度滴定度(T T)的概念的概念 每每1 1mlmolmlmol溶液相当于被
7、测物质的量溶液相当于被测物质的量(mg)mg)2.2.滴定度的计算滴定度的计算 aA aA+bB cC bB cC+dD dD T T=M Mb/ab/aB B 3.3.百分含量的计算百分含量的计算 (1 1)直接滴定法)直接滴定法 D%=D%=V V F F T/WT/W 100%100%F F=实际标定的浓度实际标定的浓度/规定的浓度规定的浓度 (2 2)间接滴定法(回滴定法;剩余滴定法)间接滴定法(回滴定法;剩余滴定法)D%=D%=(V VO O V VB B)F F T T/W W 100%100%二、光谱分析法二、光谱分析法 (一)紫外(一)紫外-可见分光光度法(可见分光光度法(20
8、0200nmnm760nm)760nm)灵敏度高,可达灵敏度高,可达10-4g/ml 10-7g/ml 1.特点特点 准确度高,准确度高,SRD(%)为为2%5%5%仪器价格低廉,操作简单,易普及,应用仪器价格低廉,操作简单,易普及,应用 范围广。范围广。2.2.朗伯朗伯-比耳定律比耳定律 A=ECL EA=ECL E1%1%1 1cmcm=10/M10/M 3.3.仪器校正和检定仪器校正和检定 波长校正用汞灯中较强谱线波长校正用汞灯中较强谱线237.38,253.65,275.28,296.73,237.38,253.65,275.28,296.73,313.16,334.15,365.02
9、,404.66,425.83,546.07 313.16,334.15,365.02,404.66,425.83,546.07nmnm与与576.96576.96nmnm 或用仪器中氘灯的或用仪器中氘灯的486.02486.02nmnm与与656.10656.10nmnm进行校正。进行校正。吸收度的检定:用吸收度的检定:用K K2 2CrOCrO7 7(60mg)+0.005mol/LH(60mg)+0.005mol/LH2 2SOSO4 4液至液至10001000mlml 波长波长(nm)235(nm)235(最小最小)257()257(最大最大)313()313(最小最小)350()350
10、(最大最大)E E1%1%1 1cmcm 124.5 144.0 48.62 106.6 124.5 144.0 48.62 106.6 杂散光检查:杂散光检查:试剂试剂 浓度浓度(g/ml)g/ml)测定波长测定波长 透光率透光率(%)(%)NaI 1.00 220nm NaI 1.00 220nm 0.8 0.8 NaNO NaNO2 2 5.00 340nm 5.00 340nm 0.8 0.8 4.4.对溶剂的要求对溶剂的要求:220 220240nm 241240nm 241250nm 251250nm 251300nm 300nm300nm 300nm以上以上 溶剂溶剂+吸收池吸收
11、池A 0.41 0.41 0.20 0.20 0.10 0.10 0.050.05 5.5.测定方法测定方法 要求供试品溶液的要求供试品溶液的A A应在应在0.3 0.3 0.70.7 对照品比较法:对照品比较法:C Cx x=(=(A Ax x/A Ar r)C Cr r;含量含量%=%=C Cx xD/WD/W100%100%常用方法常用方法 吸收系数法:吸收系数法:含量含量%=(%=(E E1%1%1 1cmcm )x x/(/(E E1%1%1 1cmcm )r r 100%100%计算分光光度法:计算分光光度法:V VA A的三点校正法的三点校正法 (二)荧光分光光度法(二)荧光分光
12、光度法 灵敏度高灵敏度高,可达,可达10-10g/ml 10-12g/ml 在在低浓度低浓度进行测定,防止进行测定,防止F与与C不成正比及自熄灭作用不成正比及自熄灭作用 1.特点特点 用基准物溶液校正仪器灵敏度,防止样品液荧光衰减用基准物溶液校正仪器灵敏度,防止样品液荧光衰减 灵敏度高,但灵敏度高,但干扰因素多干扰因素多。制备荧光制备荧光衍生物衍生物,可提高其灵敏度和选择性。,可提高其灵敏度和选择性。用样品用样品量少量少,操作,操作简单简单,方法,方法快速快速,应用,应用范围范围较较广广。2.荧光分析仪荧光分析仪 有二个单色光器有二个单色光器激发单色光器与发射单色光激发单色光器与发射单色光 器
13、;且激发光源、样品池和检测器成直角。器;且激发光源、样品池和检测器成直角。3.含量测定含量测定 常用的方法对照品比较法常用的方法对照品比较法:Ci=(Ri-Rib)/(Rr-Rrb)C Cr r Ch.P收载收载地高辛片、利血平片、洋地黄毒苷片。地高辛片、利血平片、洋地黄毒苷片。三、色谱分析法三、色谱分析法 按分离原理分为:吸附;分配;离子交换;排阻色谱按分离原理分为:吸附;分配;离子交换;排阻色谱 方法分类方法分类 按分离方法分为:按分离方法分为:PC;TLC;柱色谱;柱色谱;GC;HPLC。(一)(一)HPLC法法 1.对对HPLC仪器一般要求仪器一般要求 色谱柱、流动相按品种项下要求。色
14、谱柱、流动相按品种项下要求。色谱柱的理论板数:色谱柱的理论板数:n=5.54(tR/Wh/2)2 2.系统性试验系统性试验 分离度:分离度:R=2(tR1 tR2)/(W1+W2);要大于要大于1.5 拖尾因子:拖尾因子:T=W0.05h/2d1 应在应在0.9 1.05 内标法加校正因子测定供试品中主成分含量内标法加校正因子测定供试品中主成分含量3.测定方法测定方法 标准曲线法标准曲线法 外标法测定供试品中主成分含量外标法测定供试品中主成分含量 外标一点法外标一点法 应用示例:应用示例:RP-HPLC法测定盐酸黄酮哌酯片含量,用标准曲线法法测定盐酸黄酮哌酯片含量,用标准曲线法 如头孢拉丁;头
15、孢羟氨苄;头孢唑啉钠用外标一点法如头孢拉丁;头孢羟氨苄;头孢唑啉钠用外标一点法 (二)(二)GC法法 1.对对GC仪器一般要求仪器一般要求 载气为载气为氮气氮气;色谱柱为填充或毛细管柱;色谱柱为填充或毛细管柱 色谱柱的理论板数:色谱柱的理论板数:n=5.54(tR/Wh/2)2 2.系统性试验系统性试验 分离度:分离度:R=2(tR1 tR2)/(W1+W2);要大于要大于1.5 拖尾因子:拖尾因子:T=W0.05h/2d1 应在应在0.9 1.05 内标法加校正因子测定供试品中主成分含量内标法加校正因子测定供试品中主成分含量 3.测定方法测定方法 标准曲线法标准曲线法 外标法测定供试品中主成
16、分含量外标法测定供试品中主成分含量 外标一点法外标一点法 应用示例:应用示例:Ch.P(2000)收载的月桂卓酮、维生素收载的月桂卓酮、维生素E及其片剂、注及其片剂、注 射剂、甲酚皂溶液等均采用射剂、甲酚皂溶液等均采用GC法中的内标法加校正法中的内标法加校正 因子测定含量。因子测定含量。返 回 第三节第三节 药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证 一、准确度一、准确度 是指用该方法是指用该方法测定结果与真实值接近的程度测定结果与真实值接近的程度,用,用回收率回收率表示表示(一)含量测定方法的准确度(一)含量测定方法的准确度 1.原料药原料药 可用已知纯度对照品或样品进行测定;或与已建
17、准确可用已知纯度对照品或样品进行测定;或与已建准确 度的另一方法测定的结果进行比较。度的另一方法测定的结果进行比较。2.制剂制剂 要考察要考察辅料对回收率的影响辅料对回收率的影响。采用在空白辅料中加入原。采用在空白辅料中加入原 料对照品的方法作回收率试验,然后计算料对照品的方法作回收率试验,然后计算RSD。具体做法:测定高、中、低三个浓度,具体做法:测定高、中、低三个浓度,n=3,共共9个数据来评价个数据来评价 回收率的回收率的RSD2%;用用UV和和HPLC发时,一般回发时,一般回 收率可达收率可达98%102%;容量法可达;容量法可达99.7%100.3%(二)数据要求(二)数据要求 回收
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