抑菌试验实用.pptx

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1、稀释法包括试管稀释法和微量稀释法，通过测试细菌在含不同浓度药物培养基内的生长情况，判断其最低抑菌浓度（MIC）。扩散法 第1页/共15页u将培养基平板置培养箱中培养，一方面试验菌（指示菌）开始生长繁殖；另一方面抗生素呈球面扩散，形成递减的梯度浓度，离杯越近，抗生素浓度越大，离杯越远抗生素浓度越小。u在牛津杯周围抑菌浓度范围内的细菌的生长被抑制，形成透明的抑菌圈。u抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度（药敏实验）或药物对指示细菌的抑菌程度（抑菌试验）。一、实验原理第4页/共15页u抗生素浓度越高，抑菌圈越大。u在抑菌圈的边缘处，琼脂培养基中所含抑菌物质的浓度即为该菌悬液中对该种指示菌的最低

2、抑菌浓度（MIC）。u抑菌圈直径与药物对测试菌的最低抑菌浓度 呈负相关，即抑菌圈愈大，MIC愈小。一、实验原理第5页/共15页第6页/共15页二、实验材料培养基：牛肉膏蛋白胨固体培养基菌种：大肠杆菌（E.coli)金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus)枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis)药品：阿莫西林、黄芪多糖、其他：牛津杯、培养皿、酒精棉、酒精灯、涂布器、移液枪、1mL、200uL 枪头、恒温培养箱、超净工作台、接种环第7页/共15页“牛津杯”是放被测抗生素的不锈钢小管，小管内径为6mm，外径为8mm，高10mm的圆筒形管子，管子的重量尽可能相等。牛津杯牛

3、津杯第8页/共15页三、实验操作1.倒平板：将已灭菌的琼脂培养基加热到完全融化，倒在培养皿内，每皿约20ml，凝固。2.标记：菌种、牛津杯摆放位置、药物及其 浓度3.制备菌悬液：用生理盐水洗下试管内的菌苔并稀释。4.菌液涂布：吸取1mL 菌液入平板表面，用涂布器涂布将菌液涂布均匀第9页/共15页5.摆放牛津杯：在培养基表面垂直摆放牛津杯，轻轻加压，使其与培养基接触无空隙。6.加入待检药液：在杯中加入不同稀释度的药液或待检样品。7.孵育：加满后在37 培养1618 h。8.结果报告：用毫米尺量取抑菌圈直径，参考表的标准判读结果，按敏感（S）、中介（I）、耐药（R）报 第10页/共15页注意事项在超净工作台中或酒精灯旁操作平板倒好，一定要平 牛津杯立直，才能保证杯内抑菌物质均匀的向四周扩散 牛津杯均匀摆放于培养基上，位置安排适中，防止出现抑制圈重叠，可在平皿中央摆一个，外周等距离摆56个。第12页/共15页思考题青霉素、头孢菌素类药物的抗菌机制如何？第13页/共15页药敏试验抗菌药物敏感性试验，简称药敏试验，是指对敏感性不能预测的分离菌株进行试验，测试抗菌药在体外对病原微生物有无抑制作用，以指导选择治疗药物和了解区域内常见病原菌耐药性变迁，有助于经验性治疗选药 第14页/共15页谢谢您的观看！第15页/共15页