实验十 胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响.ppt

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1、实验十实验十 胰岛素、肾上腺素对胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响血糖浓度的影响原理原理v胰岛素能胰岛素能降低血糖降低血糖，肾上腺素能肾上腺素能升高血糖升高血糖v给动物注射胰岛素或肾上腺素给动物注射胰岛素或肾上腺素v取注射前、后兔的静脉血，测定取注射前、后兔的静脉血，测定血糖血糖含量含量v通过公式计算通过公式计算血糖血糖改变百分率改变百分率血糖改变血糖改变%=注射后注射后BS注射前注射前BS注射前注射前BS100%原理原理葡萄糖葡萄糖 O2 H2OGOD葡萄糖酸葡萄糖酸 H2O2 本实验是本实验是葡萄糖氧化酶葡萄糖氧化酶(GOD)和和过氧化物过氧化物酶酶(POD)相偶联发生的偶联反应相偶联发生的

2、偶联反应2H2O24-氨基安替比林氨基安替比林酚酚 POD红色醌类化合物红色醌类化合物H2O操作步骤操作步骤动物准备动物准备动物准备动物准备注射注射注射注射前前前前取血取血取血取血注射激素注射激素注射激素注射激素注射注射注射注射后后后后取血取血取血取血计算结果计算结果计算结果计算结果称体重，重称体重，重称体重，重称体重，重的注射胰岛的注射胰岛的注射胰岛的注射胰岛素，轻的注素，轻的注素，轻的注素，轻的注射肾上腺素射肾上腺素射肾上腺素射肾上腺素已准备已准备已准备已准备腹部皮下腹部皮下腹部皮下腹部皮下45454545注射，注射，注射，注射，不要穿入不要穿入不要穿入不要穿入腹腔内脏腹腔内脏腹腔内脏腹腔

3、内脏作好作好作好作好标记标记防止溶血防止溶血防止溶血防止溶血测定血糖测定血糖测定血糖测定血糖加加加加样样要准要准要准要准反反反反应时间应时间一致一致一致一致505nm505nm505nm505nm比色比色比色比色 注射激素和取血注射激素和取血n计算注射剂量：胰岛素为0.75U/Kg体重，肾上腺素为0.4mg/Kg体重；n皮下注射激素；n注射激素后取血，时间：肾上腺素30min，胰岛素1h（心脏取血）；n采血后静置10min至血清析出；n3000r/min离心分离10min，吸取血清至新的EP管中，做好标记。取小试管取小试管4支，支，编号，编号，按下表操作：按下表操作：加入物加入物(ml)空白管

4、空白管 标准管标准管 测定前测定前 测定后测定后血清血清 0.01 0.01葡萄糖标准应用液葡萄糖标准应用液 0.01 蒸馏水蒸馏水 0.01 酶酚混合试剂酶酚混合试剂 1.50 1.50 1.50 1.50 血糖测定血糖测定 混匀，置混匀，置混匀，置混匀，置3737 C C C C水浴中，保温水浴中，保温水浴中，保温水浴中，保温15min15min，加加加加2.0ml 2.0ml HH2 2OO混匀后在波长混匀后在波长混匀后在波长混匀后在波长505nm505nm处比色，以空白调零，测处比色，以空白调零，测处比色，以空白调零，测处比色，以空白调零，测定各管吸光度。定各管吸光度。定各管吸光度。定

5、各管吸光度。注意事项注意事项1.腹部腹部皮下注射皮下注射，以，以45进针，针头不要刺进针，针头不要刺 入腹腔，更不要穿破皮肤注射到体外。入腹腔，更不要穿破皮肤注射到体外。2.最后加酶酚混合试剂，各管反应时间应一致。最后加酶酚混合试剂，各管反应时间应一致。3.葡萄糖氧化酶法可直接测定脑脊液葡萄葡萄糖氧化酶法可直接测定脑脊液葡萄 糖含量，但不能直接测定尿液葡萄糖含糖含量，但不能直接测定尿液葡萄糖含 量量结果计算结果计算血糖改变血糖改变%=注射后注射后BS注射前注射前BS注射前注射前BS100%血糖浓度血糖浓度(mmol/L)=A测定管测定管A标准管标准管C标准管标准管思考题思考题v葡萄糖氧化酶法不能直接测定尿液葡萄糖葡萄糖氧化酶法不能直接测定尿液葡萄糖 含量，为什么含量，为什么？