试验六水生生态系统初级生产力的测定——叶绿素法.pptx

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1、水生生态系统初级生产力的测定水生生态系统初级生产力的测定叶绿素法叶绿素法一、目的和一、目的和意义意义了解测定水生生态系统中初级生产力的意义和测定方法l叶绿素a是植物光合作用的重要光合色素。l在一定的光照强度下，叶绿素叶绿素a的含量与光合的含量与光合作用强度之间存在密切关系作用强度之间存在密切关系，因此叶绿素a的含量是水生生态系统初级生产力的重要指标。Ps=CaQ（Q=3.7）l同时叶绿素a的含量的测定，也可用于水体富营养化水平的评价，是水质检测的常规项目。l浮游植物叶绿素的测定方法常用分光光度法。二、基本原理二、基本原理二、基本原理二、基本原理l6CO2+12H2O C6H12O6+6H2O+

2、6O2或化简式：l CO2+H2O CH2O+O2l由反应式可以看出氧气的生成量与有机质的生成量之间存在着一定的当量关系，所以可以通过测定瓶中溶解氧的变化，用O2量间接表示生产量，也可以将O2量转移成C量，从O2转移成C量转换系数是0.375。三、仪器设备和试剂三、仪器设备和试剂冰箱；离心机（配平）；分光光度计；采水器；透明度盘-透明度温度计-水温抽滤器；真空泵乙酸纤维滤膜（孔径0.80 m&0.45 m研钵；离心管；90%丙酮；碳酸镁粉末；石英砂；pH值-pH计或pH试纸 （见指导书2页）溶氧量-碘量法、溶氧量仪（不测）四、方法和步骤四、方法和步骤（一）水体环境观测（一）水体环境观测 透明度

3、（透明度盘）水温（温度计）pH值（pH计或pH试纸）溶氧量（碘量法、溶氧量仪）（一）水体环境观测（一）水体环境观测（二）水样采集与保存（二）水样采集与保存（三）抽滤（三）抽滤（四）提取（四）提取（五）光密度测定（五）光密度测定（六）计算（六）计算四、方法和步骤四、方法和步骤（一）水体环境观测（一）水体环境观测（二）水样采集与保存（二）水样采集与保存（三）抽滤（三）抽滤（四）提取（四）提取（五）光密度测定（五）光密度测定（六）计算（六）计算1.表层水:1m2.采水器:3.体积：1.5-2.0L4.贮存：避光，低温（04）每升水样中加 1%碳酸镁碳酸镁悬浊液1 mL四、方法和步骤四、方法和步骤（一

4、）水体环境观测（一）水体环境观测（二）水样采集与保存（二）水样采集与保存（三）抽滤（三）抽滤（四）提取（四）提取（五）光密度测定（五）光密度测定（六）计算（六）计算1.滤膜：先用0.80 m，再用 0.45 m 光面光面在下，粗糙面粗糙面在上2.水样：倒入定量体积（500 ml）的 水样进行抽滤，3.抽滤时负压应不大于50 kPa。4.水样抽完后，继续抽12 min 以 减少滤膜上的水分。5.如不能立即提取，短期保存 （12 d）可放入普通冰箱冷冻室。四、方法和步骤四、方法和步骤（一）水体环境观测（一）水体环境观测（二）水样采集与保存（二）水样采集与保存（三）抽滤（三）抽滤（四）提取（四）提取

5、（五）光密度测定（五）光密度测定（六）计算（六）计算滤膜剪碎剪碎-研钵中，+少量碳酸镁粉末+23 mL 90%丙酮-充分研磨研磨匀浆物移入离心管中，用离心机（30004000 rmin-1）离心离心10 min将上清液移入移入10 mL的容量瓶中再用23 mL 90%丙酮，继续研磨提取，离心10 min，并将上清液转入容量瓶中。重复12次后，用90%丙酮定容定容为10 mL，摇匀。四、方法和步骤四、方法和步骤（一）水体环境观测（一）水体环境观测（二）水样采集与保存（二）水样采集与保存（三）抽滤（三）抽滤（四）提取（四）提取（五）光密度测定（五）光密度测定（六）计算（六）计算用1 cm光程的比色

6、皿，分别读取750 nm、663 nm、645 nm、630 nm波长的吸光度，并以90%丙酮作空白吸光度测定，对样品吸光度进行校正。其中，750 nm的光密度用作校正样品的浑浊度（注：OD 750 nm不应超过0.005，超过表示样品浑浊，可用丙酮校正），而663 nm、645 nm、630 nm吸光度分别用以测定叶绿素a、叶绿素b、叶绿素c。四、方法和步骤四、方法和步骤（一）水体环境观测（一）水体环境观测（二）水样采集与保存（二）水样采集与保存（三）抽滤（三）抽滤（四）提取（四）提取（五）光密度测定（五）光密度测定（六）计算（六）计算1.叶绿素a含量的计算按如下公式计算（国家环境保护总局水

7、和废水监测分析方法，2002）四、方法和步骤四、方法和步骤（一）水体环境观测（一）水体环境观测（二）水样采集与保存（二）水样采集与保存（三）抽滤（三）抽滤（四）提取（四）提取（五）光密度测定（五）光密度测定（六）计算（六）计算2.初级生产力的估算初级生产力的估算表层水（1 m以内）中浮游植物的潜在生产力（Ps）根据表层水中叶绿素a的含量计算：Ps=CaQCa 为表层叶绿素a的含量（mg m-3）；Q为同化系数（mg C mg-1Chla h-1）。表层水的同化系数为3.7（王俊等，2002）Ps的单位是mg C m-3 h-1五、作业五、作业1.整理观察与分析结果，提交实验报告。2.不同深度的水域初级生产力有何不同？