人教版教学教案畜牧微生物学复习参考资料.docx

《人教版教学教案畜牧微生物学复习参考资料.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《人教版教学教案畜牧微生物学复习参考资料.docx（8页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、一、微生物的定义畜牧微生物学复习参考资料绪论微生物：是指个体微小，通常须借助显微镜才能观察的生物类群的总称。二、微生物的类型1. 三大种类分原核细胞型、真核细胞型、非细胞型微生物三大种类2. 各自的种类：原核细胞型：个体为单细胞，包括细菌、放线菌、螺旋体、霉形体、立克次体和衣原体。 真核细胞型：个体为单细胞或多细胞，真菌、藻类和原生动物属于此类型。非细胞型：个体不呈细胞构造，仅含一种核酸，DNA 或 RNA，不能独立生存，必需在宿主细胞内才能增殖。病毒属于这一类型。第一章原核细胞微生物第一节 细菌一、 细菌的定义细菌：是一大类个体微小、形态简洁、构造略有分化、以二分裂法生殖的单细胞微生物。细菌

2、的个体要在显微镜下才能观察。二、细菌形态细菌的根本形态有球菌、杆菌和螺旋状菌 3 大类。螺旋状菌又分弧菌和螺菌 2 种外形。检查培育细菌典型形态的最好时期是对数期 。三、细菌根本构造细菌的根本构造是：细胞壁、细胞膜、间体、细胞浆、质粒、核体、核蛋白体和内含物等。四、革兰氏染色的作用用革兰氏染色可将全部细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两大类。染色后革兰氏阴性菌为红色，革兰氏阳性菌呈紫色。五、革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌细胞壁差异革兰氏阳性菌的细胞壁较厚，约 1580nm，其化学成分主要是肽聚糖。革兰氏阴性菌细胞壁较薄。六、表示细菌大小的单位细菌大小的量度单位用微米 m，亚细胞构造用毫微米 nm。

3、七、细菌细胞壁的主要功能（1） 保持细菌肯定的外形；（2） 保护细菌免受外界渗透压和有害物质的损害；（3） 构成细菌的致病性、抗原性；（4） 与对噬菌体和药物的敏感性有关；（5） 与革兰氏染色反响特性等亲热相关。八、细菌特别构造与主要功能1. 细菌的特别构造有：荚膜包括荚膜、微荚膜、粘液层、菌胶团、鞭毛、芽胞、纤毛菌毛。2. 微荚膜、荚膜、粘液层、菌胶团的概念：荚膜：一局部细菌，在其生活过程中，可以在细胞壁的外面产生一种粘液样的物质，包围整个菌体，厚度在 0.2 m 以上.称为荚膜。菌胶团：由多个细菌的荚膜物质融合而成一团胶状物，内含多个细菌细胞时称为菌胶团。微荚膜：比荚膜薄，厚度在 0.2

4、m 以下,只能在电镜下才能观察的荚膜。粘液层：有些细菌产生一些边界不明显、疏松、易与菌体脱离的粘液样物质称为粘液层。3. 荚膜的功能荚膜有荚膜具有保护细菌的功能、粘附于机体各处外表的功能和养分物质的贮藏作用和废物排解的作用。4. 鞭毛（1） 概念鞭毛：在菌体外表长出由蛋白质组成长约 150-200m 的线状物，称为鞭毛。（2） 排列方式细菌的鞭毛数量和排列不同，大致有四种方式：一端单毛菌、两端单毛菌、丛毛菌、周毛菌。（3） 功能：鞭毛是细菌的运动器官。5. 纤毛纤毛菌毛：在菌体上着生有一种比鞭毛数量多、外形较直、较细、较短的毛发状细丝。纤毛一种空心的蛋白质管，可以分为一般纤毛和性纤毛两类，前者

5、较纤细较短，数量较多，每菌可有1001000 条，后者一般不超过 4 条。6. 芽胞（1） 概念芽孢：一局部杆菌、个别球菌，在生长发育的某一阶段，可以在菌体内形成一个内生孢子，称为芽孢。（2） 数量：一个细菌产生芽孢的个数是 1 个。（3） 功能芽孢是某些细菌抵抗不良环境条件以保存生命的一种休眠构造。形成芽孢不是细菌的一种生殖方式。芽孢产生一种特有的吡啶二羧酸，与钙结合，使芽孢对外界不良理化环境条件有很强的抵抗力， 特别能耐高温、枯燥和渗透压的作用，一般的化学药品也不简洁渗透进去。八、细菌生理1.细菌的养分需要：（1） 水：水是微生物细胞的重要组成成分之一，同时又是一种良好的流媒。（2） 碳素

6、养分和氮素养分：碳素和氮素都是构成原生质所必需的主要成分。（3） 灰分元素养分：细菌对灰分元素的需要很少，但灰分元素对细菌的作用格外重要，它们有些参与细胞的组成，能量的转移，有的维持原生质胶体状态和调整渗透压的功能。这些元素有硫、磷、钾、钠、镁等。（4） 生长因子素：细菌需要以上养格外，还需要生长因素，试验室常用5-10%鲜血或血清制成鲜鱼琼脂培育基和血清琼脂培育基。2,细菌的养分类型依据细菌对碳素养分利用的力量不同，可以把细菌分为自养菌和异养菌两类。依据细菌对碳素养分和能量源利用的力量不同，有四大养分类型：光能自养菌 、化能自养 、光能异养 、化能异养。腐生菌和多数病原菌属化能异养。3. 细

7、菌的养分需要细菌的养分需要主要是 5 大类物质：水、碳素、氮素、生长因子和无机盐。4. 细菌吸取养分物质的方式细菌吸取养分物质的方式分为单纯集中、促进集中、主动运输和基团转位。5. 细菌的呼吸类型细菌的呼吸作用分为有氧呼吸、厌氧呼吸及兼性厌氧呼吸 3种主要类型。6. 有氧呼吸时细菌可将葡萄糖彻底氧化成 CO7. 细菌生长和生殖的条件：和水，因此产生的能量较多。2（1） 养分：首先要有足够的水分，要有适合利用的碳素养分，氮素养分，灰分元素营和生长因素等。（2） 温度：最适温度在 20-38之间。畜禽类病原菌的培育温度一般为 37 。（3） 氢离子浓度pH各种细菌都只能在肯定范围的氢离子浓度内才能

8、生长发育，并在其中最适宜的状况下才能生长发育得最旺盛，大多数病原性细菌的最适 pH 是适宜于中性和微碱性的环境pH7-7.6。（4） 渗透压：细菌要在等渗透压的环境中才能正常地生长发育，低渗透压和高渗透压对细菌都有不利影响。一般制备培育基用 0.5%-20%。（5） 需氧性或厌氧性呼吸环境，依据细菌不同的呼吸类型，要有适合的呼吸环境。8. 细菌的生殖方式细菌以二等分裂法进展无性生殖。9. 细菌生长曲线的 4个时期细菌的生长曲线可分为如下 4个时期，各期特征为： (1)缓慢期此期内细菌渐渐适应的环境， 菌体增大，合成增加，细菌数量并不增加，碱性染色反响较好对消毒剂和其他有害物有高度敏感性。(2)

9、 对数期此期内菌体生殖速度最快，细菌数依几何级数增加，菌体大小、染色反响均较典型，对不良理、化因素和抗菌药物敏感。该期内病原菌的致病力最强。(3) 稳定期这一时期因养分的消耗、代谢产物的积存等，细菌生殖速度下降，死亡增多，生菌数约等于死亡菌数生殖与死亡近乎平衡，形态及生理性状常有转变，革兰氏阳性菌可染成阴性毒素等代谢产物此时期积存多。(4) 衰亡期细菌开头大量死亡，死菌数超过活菌数，细菌如不移植的培育基，最终将全部死亡。形态上常消灭年轻型、退化型或自溶，染色不典型。细菌必需在适宜条件下才能生长生殖，这些条件包括适宜的养分成分、 温度 pH 、渗透压以及气体条件。10. 培育基（1） 培育基：是

10、人工配制的、含有细菌等生长生殖所必需的养分基质。（2） 半固体培育基：液体培育基中加 0 .5琼脂则为半固体培育基。11.观看细菌的大小、形态、构造和细菌的群体生长特性的方法观看细菌的大小、形态、构造必需借助显微镜。观看细菌的群体生长特性则需经液体培育和固体培育，观看它们的生长状况和菌落。12.菌落和菌苔菌落：单个细菌在适当的固体培育基外表或内部，经过肯定时间的培育后，形成一个肉眼可见的、有肯定形态的群体，称为菌落。菌苔：菌落相互连接成片，称为菌苔。其次节 其他原核微生物螺旋体、霉形体(支原体)、立克次体、衣原体的定义螺旋体：是一类介于细菌与原虫之间的单细胞原核微生物。霉形体支原体：是一类特性

11、介于细菌与病毒之间的单细胞原核微生物。霉形体细胞无细胞壁。立克次体：是另一类特性介于细菌与病毒之间的单细胞原核微生物。衣原体：是一类介于立克次体与病毒之间的原核细胞微生物。其次章 真核细胞微生物1. 真菌的概念真菌：是一大类不含叶绿素，无根、茎、叶，营腐生或寄生生活的真核微生物。2. 种类真菌包括酵母菌 、霉菌 、 担子菌三大类。3. 真菌生长生殖的条件（1） 根本的养分需要真菌的养分需要和细菌的相像，大多数为异养菌，它们不仅能利用单糖和双糖，而且也能利用淀粉、纤维素等多种有机物。（2） 温度。真菌的生长温度比细菌低，大多数最适宜的生长温度为20-30。而哺乳动物消化道的真菌在37时生长得最好

12、。（3） 氧气。大多数为需氧呼吸，培育时需要充分的氧气，有些酵母菌能有氧条件下培育生长， 有的在无氧的条件下发酵产生酒精，它们为兼性大厌氧菌。（4） 湿度与渗透压。真菌的生长生殖除了水是必要的条件下，空气的湿度对真菌的生长的影响也很大，基质菌丝和气生菌丝，适宜于生长在潮湿的环境里。（5） pH 值。环境中的酸碱度，是真菌生长生殖的重要条件之一。大多数的真菌能生长在酸性环境中，pH3-6 之间生长良好，而在 1.5-10.0 之间也可以生长。4,酵母菌酵母菌细胞含有丰富的蛋白质和维生素，具有很高的食用和饲用价值。酵母菌细胞比细菌大得多，在高倍镜下可清楚看到。酵母菌一般以无性生殖的出芽生殖为主。5

13、.霉菌（1） 菌丝功能分工霉菌的菌丝功能有了分工，既有伸人固体培育基内或蔓生于固体培育基外表，伸入培育基内的霉菌菌丝，称为养分菌丝或基质菌丝，伸向空中的菌丝，称为气生菌丝。（2） 菌丝构造在构造上霉菌的菌丝分为两种：一种为无隔菌丝，另一种为有隔菌丝。（3） 霉菌的生殖方式多样，如菌丝的碎片或菌丝截段即可发育成的个体，也可产生各种无性或有性孢子来生殖。（4） 孢子类型霉菌无性生殖所产生的孢子叫做无性孢子。主要有掷孢子、节孢子、厚垣孢子、孢子囊孢子、分生孢子。有性孢子有 4种类型，包括合子、卵孢子、接合孢子和子囊孢子。（5） 抵抗力霉菌孢子对热、枯燥等的抵抗力比其养分细胞要强，比细菌的芽胞弱。第三

14、章 非细胞型微生物病毒1. 几个名词病毒：是一类非细胞构造仅能在宿主细胞内以复制方式增殖的微生物。衣壳：包在核酸外周的蛋白质外壳，由壳粒排列而成。包涵体：病毒感染细胞后常可在宿主细胞内形成一种小体， 染色后可在光学显微镜下检测到， 这种小体称为包涵体。2. 几个特性病毒离开寄主细胞就不能生殖。任何病毒只含有一种核酸， DNA 或 RNA。抗生素的作用对细菌敏感对病毒不敏感。3.复制过程病毒完整的复制周期分为 5 个连续的阶段，即吸附、侵入、脱壳、生物合成、装配和释放。4. 囊膜特性有囊膜的病毒对乙醚、氯仿等脂溶剂敏感。5. 噬菌体噬菌体：感染细菌、支原体和螺旋体的病毒统称为噬菌体。一种噬菌体只

15、对相应种类的细菌或真菌发生特异性感染和寄生。6. 朊病毒：是一类感染人类与其他哺乳类动物，引起亚急性海绵样脑病的感染因子，它们的构造主要是蛋白质，称或蛋白侵染因子。7. 培育病毒的方法人工培育病毒的方法有鸡胚培育法、细胞培育法和试验动物培育法等。8. 干扰素是正常细胞在某些病毒或适宜的诱生剂的作用下产生的一种糖蛋白。9. 多聚肌苷酸、多聚胞苷酸、梯洛龙等可刺激机体细胞产生干扰素。第五章 外界因素对微生物的影响灭菌：杀死物体中全部微生物包括微生物及其芽孢、霉菌孢子等，叫做灭菌。消毒：杀死物体中的病原微生物，叫做消毒。防腐：阻挡或抑制微生物的生长生殖叫做防腐或抑菌。无菌：指肯定的空间范围内没有活的

16、微生物。无菌法：是指在实际操作过程中，防止任何微生物进入动物机体或物体的方法。抑菌作用：是指抑制或阻碍微生物生长生殖的作用。杀菌作用是指能使菌体致死的作用。抗菌作用 抗菌作用包括抑菌作用和杀菌作用，是这两者的总称。滤过除菌：是将液体或空气中的细菌等微生物除去的方法。抗生素：某些微生物在陈代谢过程中产生对另一些微生物有抑制或杀灭作用的物质这种物质称为抗生素。干热灭菌法包括火焰灭菌法和热空气灭菌法。养分细胞、菌丝、孢子、芽孢中耐热力量最强的是芽孢。共生：两种或多种生物共同生活在一起，相互依靠，相互得利，称为共生。颉颃：一种微生物在生长发育过程中，能产生某些对他种微生物呈现毒害作用的物质，抑制或杀死

17、他种微生物的现象称为颉颃。寄生：一种生物从另一种生物猎取所需的养分，赖以为生，并对后者具有损害作用的现象，称为寄生。协同：两种或多种生物在同一生活环境中，相互帮助，共同完成或加强某种作用称为协同。巴氏消毒法用于葡萄酒及鲜牛乳的消毒方法。波长 200320nm 紫外线具有杀菌作用 其中 265266nm 波长的紫外线的杀菌力最强。紫外线杀菌原理是破坏 DNA 分子，使之不能进展正常的复制与转录。抗生素的作用原理可分为 4 种主要类型：干扰细菌细胞壁的合成；损伤胞浆膜；影响菌细胞蛋白质合成；影响核酸的合成。第六章 微生物的遗传与变异微生物的变异现象（1） 细菌形态和构造的变异。（2） 毒力的变异。

18、培育基条件可能使细菌的毒力发生变异。（3） 代谢的变异。基因变异或条件转变,次级产物大量积存,产生代谢的变异。（4） 菌落的变异。菌落形态变化,主要是光滑型与粗糙型间的相互变异。（5） 耐药性变异。药剂使用频率增加产生抗药性的细菌,由抗药性质粒打算。第八章：饲料微生物反刍兽瘤胃内的细菌，有合成 B 族维生索和维生素 K 的力量。黄曲霉毒素是霉菌毒素中毒性最强的一种，对畜禽危害很大。用酵母、真菌、藻类等微生物生产的含蛋白质的饲料叫单细胞蛋白质饲料。丁酸菌对青贮饲料的发酵是不利的。第 九 章微生物的致病作用病原1、侵袭力病原微生物突破寄主机体的防范屏障，侵入组织或细胞，在其中生长生殖，探入集中的力

19、量，叫做侵袭力。2.外毒素：外毒素是病原微生物在其生命活动过程中释放或分泌到四周环境的毒素，用细菌滤器过滤可获得纯外毒素，能产生外毒素的微生物包括病原细菌和霉菌。主要由草兰氏阳性菌产生。其次节传染的发生传染病原微生物侵入动物机体，并在其中生长生殖从而引起一系列相互作用的过程，叫做传染。第十章 免疫学根底第一节 免疫的概念及根本功能免疫是机体识别和排解非自身物质，并保持自身完整性的生理学反响。抗原的概念与特性凡能刺激机体产生特异性抗体和致敏淋巴细胞并与之发生反响的物质，称为抗原。抗原的根本特性能刺激机体产生抗体和致敏淋巴细胞，称为免疫原性。在活体内或在体外能与该特异性抗体或致敏淋巴细胞发生反响，

20、称为反响原性。既具有抗原作用又具有反响原性的物质称为完全抗原。半抗原不能单独刺激机体产生免疫物质，但与蛋白质结合后，即能刺激免疫物质产生，并能与这些免疫物质发生特异性结合，这样的物质为半抗原。如荚膜多糖、多肽、类脂质等。抗原打算簇：抗原分子上的某些化学基团，这些基团称为抗原打算簇。细菌对于它所感染的动物机体来说是异种抗原。第五节免疫系统一、免疫器官免疫器官分为中枢免疫器官和外周免疫器官两局部：（1） 中枢免疫器官包括和骨髓、胸腺、腔上嚢 。（2） 四周免疫器官包括淋巴结、脾脏和扁挑体。免疫活性细胞：这类细胞是指受到抗原刺激后，能特异性地识别抗原打算簇，发生免疫反响。主要包括 B 细胞，T 细胞

21、。动物产生淋巴因子的细胞是T 细胞抗体主要是 B 淋巴细胞分化增殖成为 浆细胞 所产生抗体。二、体液免疫主要为 B 淋巴细胞分化增殖成浆细胞产生抗体，参与体液免疫。抗体的概念与特性抗体是由抗原刺激机体而产生的特异性免疫球蛋白，它存在于机体的血清、体液中。抗体是一种球蛋白，对异种动物来说，又是良好的抗原，所以具有双重性，即是抗体，又是抗原。抗体又称免疫球蛋白，简称 Ig，免疫球蛋白有 IgG、IgM、IgA、IgE 和 IgD，家畜无后一种。抗原刺激机体后，在体内消灭最多的免疫球蛋白是 IgG。抗原刺激机体后，在体内消灭最早的免疫球蛋白是 IgM。机体免疫反响的过程 ： 致敏机体免疫反响的过程

22、致敏阶段、反响阶段、 效应阶段. 补体：存在于正常动物血清中具有类似酶活性的一组蛋白质。侵袭力： 病原菌在机体内定殖，突破机体的防范屏障，内化作用，生殖和集中，这种力量称为侵袭力。全身传染： 某些病原微生物能突破动物机体的防范屏障，侵入血流或淋巴结，从而散布到全身各个组织器官，此种状态称为全身传染三、细胞免疫细胞免疫的作用：细胞免疫具有抗细胞内寄生性病原体的感染，发生组织移植排斥反响，以及对抗肿瘤等多种免疫作用。干扰素：是正常细胞在某些病毒或适宜的诱生剂的作用下产生的一种糖蛋白。第七节 抗原抗体反响由于抗原过剩或抗体过剩，都不能形成大分子复合物。抗原抗体反响的概念及特点反响类型一沉淀反响：当抗

23、原为胶体状态时，与相应的抗体结合，在电解质的参与下消灭可见沉淀物， 谓之沉淀反响。特点：抗原为可溶性抗原；复合物中沉淀带，主要成分为抗体。稀释抗原、固定抗体浓度。琼脂免疫集中：简称琼脂集中，用 1%琼脂凝胶上进展沉淀反响。琼脂凝胶含水量很高，可溶性抗原和抗体能在凝胶中自由集中，二者在琼脂凝胶中相遇，在比例最适处消灭沉淀带，称为琼脂集中。用途：用于疾病的诊断，如法氏病、马立克氏病、猪瘟、炭疸杆菌病、牛白血病等。测定抗体水平，测定动物体内的抗体水平，检测免疫状况。测定复合抗原成分，每一种不同抗原均与相应的抗体产生一根沉淀带。二凝集反响细菌、红细胞等颗粒状态抗原与相应抗血清混合后，当有电解质存在时，

24、就发生颗粒相互凝集的现象，叫做凝集反响。在凝集反响的抗原抗体复合物中，主要成分是抗原颗粒；抗原为颗粒状；固定抗原浓度，稀释抗体。变态反响：机体被某些抗原物质所致敏后，再次接触该抗原时，发生对机体有损害的免疫反响。第 十一 章 重 要 病 原 微 生 物第一节 大肠杆菌形态与染色特点大肠杆菌为两端钝圆，中等大小的短杆菌，有周身鞭毛，只有少数变异株无鞭毛，大多数有菌毛， 绝大多数无荚膜，有些有荚膜，革兰氏阴性无芽胞杆菌。第 二 节 沙 门 氏 菌形态及特点染色特点沙门氏菌无芽胞和荚膜，有周身鞭毛为革兰氏阴性杆菌。引起鸡白痢的细菌为沙门氏菌第三节炭疽杆菌在组织片中，菌体两端呈平切状，单个或 25 个

25、相连，形成竹节状短链，用美兰或特瑞氏染色可看到肥厚的荚膜。呈淡红色或淡紫色，菌体呈兰色。在培育物中，菌体两端稍钝圆，几个或几十个相连成长链，假设培育 15h 以上在菌体中心或稍偏一端，形成一个比菌体小的芽胞。用革兰氏染色为阳性大杆菌，芽胞为无色，本菌无鞭毛，不能运动， 简洁被一般染料着色。第四节 多杀性巴氏杆菌禽巴氏杆菌为禽霍乱。形态与染色特点：用培育物涂片作革兰氏染色为 G-小杆菌，在显微镜下观看像煮熟的鱼籽一样。同病料涂片作美兰或瑞特氏染色，可见明显的两极着色。该菌无鞭毛、无芽胞、有荚膜，但用一般染色看不到荚膜。家禽：鸡、鹅霍乱。诊断1. 取病料：可取心、肝、脾、肾、血液、淋巴结、水肿液，

26、不取肺因正呼吸道也存在。2. 分别培育：用鲜血琼脂培育基进展划线分别，37培育 24 小时，可见灰白色露滴状菌落。3. 涂片镜检：取心血或肝脏涂片，作瑞特氏和美兰染色镜检，是否可见明显两极着色。4. 接种动物：取肝、肾磨碎，稀释成 1:5-10吸取上清液接种动物。接种动物时要留意选择动物。第五节 猪丹毒杆菌形态与染色特点用猪丹毒杆菌致死的动物肝组织或者血液涂片，作瑞特氏或美兰，G 染色在显微镜下观看，为纤细，平直或微弯曲的兰色的小杆菌。用病料涂片美涂染色可见蓝色的无芽胞、无荚膜的丝状杆菌试验室诊断1. 取病料，活体动物可取耳 V 血或疹块，尸体动物可取心血、肝、脾、肾、骨髓、淋巴结。2. 分别

27、培育，用无菌操作实行病料，在鲜血血清琼脂培育基上划线分别 37培育 48 小时， 观看是否有针尖状小菌落。3. 涂片镜检，用组织材料，做成涂片或印片，用革兰氏染色、美兰、或瑞特氏染色，在细胞间隙有瘦长的杆菌，或成丛存在，于白血球内的 G+菌、或呈兰色的杆菌可初步鉴定。4. 动物接种，取病料制成盐水乳剂小白鼠，每只接种0.1-0.2ml，鸽子每只0.5-1ml，假设在25 天内死亡，豚鼠和鸡无反响，再取死亡动物心血、组织涂片，检出多量典型的猪丹毒杆菌可谬断为本菌。第六节 口蹄疫病毒一、形态和构造特性病毒的特征口蹄疫病毒是一种无囊膜的二十面体对称单股 RNA 病毒。二、血清型目前觉察已有七大血清型

28、。是抗原，要做不同浓度的稀释，浓度太高或太低都不能产生沉淀线阳性血清滴入中心孔。抗原滴入中心孔，抗原滴入四周孔，在抗原抗体孔之间消灭沉淀线为阳性。第七节 猪水泡病病毒病毒的特征本病毒无囊膜的二十面体对称单股 RNA 病毒第八节 猪瘟病毒病毒的主要特征有囊膜的二十面体对称单股 RNA 病毒。猪瘟强毒进入使兔体，使兔体温不上升。猪瘟病毒只感染猪，使之发病 。第九节 鸡城疫病毒鸡城疫病毒有囊膜单股 RNA鸡城疫病毒为有囊膜螺旋型对称单股 RNA 鸡城疫病毒的微生物学鉴定方法 1取材料：一般取鸡头。2. 分别培育：鲜血或血清琼脂培育基培育，未见细菌菌落生长。3. 病毒分别：接种鸡或鸡胚制成组织悬液或用鸡胚尿囊液作为诊断材料。4. 进展病毒血凝和病毒血凝抑制试验。