农业固体废弃物处理第二章菌种分离技术.ppt

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1、第第二二章章 菌种分离技术菌种分离技术第第二二节节 蕈菌菌种分离技术蕈菌菌种分离技术 一、种菇选择1、选择标准：生长健壮的子实体，成熟度八九分成熟2、处理方法:去柄、用无菌滤纸包好带回实验室。3、消毒方法：75%酒精棉球擦洗表面；0.1%升汞浸泡1-2分钟，用无菌水冲洗2-3次，备用。二、分离方法孢子分离方法组织分离法基内菌丝分离法（1）多孢分离法孢子弹射法(2)单孢子分离法多采用连续稀释法 稀释至毎滴水含有1-2个孢子；显微操作法值得注意的是：对于同宗配合的种类可以得到菌种，但对于异宗配合种类，只能得到初生菌丝！2、组织分离法3、基内菌丝分离法利用基质内菌丝的再生潜能的分离方法 要进行消毒。

2、过程同组织分离法。第三节菌种固体发酵扩繁技术一、一级种（母种）的扩繁技术培养基配方 PDA 培养基 马铃薯200克 葡萄糖20克 琼脂20克 水1000毫升 PSA培养基马铃薯200克 蔗糖20克 琼脂20克 水1000毫升配制方法 马铃薯去皮，切成1立方厘米见方的小块，煮沸20分钟，过滤。分装灭菌转接 培养注意事项 1、转管最多不能超过5代，否则出现菌种退化；2、每个斜面可转接20-30母种和5-8瓶原种。二、二、三级种（原种）的扩繁技术1、二、三级种的培养基 （1）木屑培养基 木屑78%，麦麸20%，石膏1%，蔗糖1%，含水量60-65%；（2）玉米芯培养基 玉米芯75%，糠麸20%，石膏

3、2%，过磷酸钙2%，糖1%，含水量65%；（3）稻草培养基 稻草（1-2cm）79%，糠麸20%，碳酸钙1%，含水量65%；（4）粪草培养基 粪草（6:4）90%，糠麸8%，碳酸钙1%，蔗糖1%，水60-65%。配制方法灭菌：高压蒸汽、常压连续灭菌、间歇灭菌转接 培养第三章平菇栽培技术 概 述 20世纪初，由欧洲开始栽培，1930年进入我国。1、主产区：中国，日本。韩国、印度、法国、德国、意大利、匈牙利、捷克、俄罗斯也有栽培。2、产量：1979年全球3.2万吨，现在100余万吨。是第二位。3、营养价值干菇中蛋白质含量30.5%，其中粗蛋白19.5%，纯蛋白11%；粗脂肪3.7%，粗纤维5.3%

4、；18种氨基酸及维生素B、C、D及各种矿物质。还含有一种酸性多糖对艾氏癌抑制率70%，小白鼠肉瘤180抑制率80%；降血压、血脂，对糖尿病、心血管、胃病、十二指肠溃疡、中老年人肥胖症；还可治疗腰腿痛、手足麻木、筋络不畅。第一节 生物学特性平菇又称侧耳，在分类学上隶属于担子菌亚门，层菌纲、伞菌目、口蘑科。一、形态特征营养体：菌丝体子实体：贝壳形、舌状；丛生、叠生。菌盖（2-20cm）、菌柄（2-6cm），偏生。孢子椭圆形、孢子印白色。目前该属有40多种，栽培10多个种。糙皮侧耳二、生长发育条件营养 1.能分泌纤维素、半纤维素、木质素、果胶酶；2.氮源：铵盐、硝酸盐、尿素、氨基酸、蛋白胨；3.矿质

5、元素:钙、镁、磷、钾。2、温度菌丝生长温度：5-35度，最适宜温度25子实体形成：7-28度，最适宜温度15-18度是变温结实种类温型（子实体形成温度）低温型：最高22度，最适13-17度；中温型：28 20-24；高温型：30 24-283、水分与湿度培养料含水量：65-70%，相对湿度70-80%；过高：厌氧 过低:生长缓慢子实体：相对湿度85-95%；过高：烂菇 过低:生长缓慢4、其他空气：21%二氧化碳小于0.03光照：散射光酸碱度：3-10,5.5-7.但培养料以偏碱为宜。第二节栽培技术按场地划分 室内栽培：仓房、空房、地下室、大棚等 室外栽培：阳畦、地栽栽培方式 瓶栽、床栽、袋、箱

6、一、栽培季节根据温型确定一般每年8月-次年3-5月。东北一般制种在3、4、5月或8、9，接种在4、5二、培养料配制主料：阔叶木屑、纸屑、棉籽壳、花生壳、豆秸、稻草、玉米芯、甘蔗渣配方1、棉籽壳78%、麦麸5%、玉米面3%、豆饼粉3%、石灰1.8%、克霉灵0.1%；2、棉籽壳98%、石膏2%、克霉灵0.1%；3、棉籽壳96%、石膏2%、克霉灵0.1%、过磷酸钙1.5%、石灰0.5%；4、棉籽壳70%、稻草15%、麸皮12%、糖1%、石膏1%、过磷酸钙1%、克霉灵0.1%；5、木屑67%、棉籽壳20%、麸皮10%、尿素0.5%、石灰2%、克霉灵0.1%；6、木屑82%、麸皮10%、石膏3%、过磷酸

7、钙2.5%、石灰2%、尿素0.5%、克霉灵0.1%；7、稻草76%、麸皮20%、糖1%、过磷酸钙2%、石膏1%、克霉灵0.1%；8、稻草74%、玉米粉25%、石膏1%、克霉灵0.1%；9、木屑78%、稻糠20%、石膏1%、过磷酸钙1%、石膏1%、克霉灵0.1%；10、高粱壳47%、高粱壳粉30%、糠麸20%、过磷酸钙1%、石膏1%、克霉灵0.1%；11、玉米芯90%、石膏2%、过磷酸钙3%、石灰4%、尿素0.5%、克霉灵0.1%；12、麦秆80%、麸皮15%、糖1%、石灰4%、克霉灵0.1%；13、豆杆粉78%、棉籽壳20%、石灰2%、克霉灵0.1%；14、玉米芯85%、稻糠10%、石灰3%、

8、石膏1%、糖1%、克霉灵0.1%；15、玉米芯90%、玉米面6%、尿素0.5%、二铵0.5%、石灰3%、克霉灵0.1%；三、栽培方法(一)室内床栽1、菇房的选择 环境清洁、能够保温、保湿。2、菇床设置 床宽80-100cm，层间距60cm，最底层距地面20，最上层距屋顶40，床间作业通道宽603、播种 用0.2%高锰酸钾处理塑料膜30分钟，铺在床上，春播料厚20cm，秋播15cm.采用以下三种方式：（1）层播每层料厚5-6cm，共三层。接种量15%，2/3菌种用于铺在上层。1/3铺于料面。（2）混播：2/3菌种用于混料。（3）穴播：品字形打穴深2-3，穴距10cm,孔径1.5-2cm。1/3铺

9、于料面。4、发菌管理室温控制在20-25度，2-3天开始吃料。此后每天抖动料膜通风换气一次。室温超过28度，加强室内通风。空气相对湿度60-65%。20-30天后，菌丝吃透料，再过7-10天进入出菇期。(二)室外阳畦栽培栽培季节：4-6月；8-9月畦地的选择与建畦 排灌条件较好的低洼地段；东西走向；长4-10米，宽70-80cm，深25-30cm，畦四周挖有排水沟，深30cm左右，作业道40cm,要夯实，最好铺砖。播种 前一天浇灌足水，待水渗透后，在畦面、邦、作业道喷撒石灰，杀菌驱虫。料厚20cm，采用以下三种方式：（1）层播 每层料厚5-6cm，共三层。接种量15%，2/3菌种用于铺在上层。

10、（2）混播：2/3菌种用于混料。1/3铺于料面。（3）穴播：品字形打穴深2-3，穴距10cm,孔径1.5-2cm。1/3铺于料面。将畦面整成龟背形，拍实，盖上报纸和薄膜。畦内插有温度计。发菌管理春播以升温为主，秋播以降温为主。畦内温度20-25度为宜。低于15度，加盖覆盖物草帘，中午撤掉草帘加强光照；高于28度，向草帘喷水降温，早晚揭开膜，通风；干旱，向畦边浇细水，保湿。2-3天后，吃料，以后每天揭膜1-2次，通风，7-10天菌丝封面，此时早晚可揭去草帘和薄膜。25-30天，菌丝吃透料，再过10天左右菌丝达到生理成熟。出菇管理撤掉覆盖物，支起拱形棚，棚上扣膜，覆盖70%遮阴网。棚内温度15-1

11、8度，相对湿度85-90%，依此管理5-7天出菇可采收。越夏、越冬管理，可拆棚，在畦面覆盖10cm的土即可。天气合适时浇透水，进行出菇管理。（三）塑料袋栽培袋大小20-25X45-50cm，接种量15%；层播：2/3菌种用于两头，四层菌种三层料，中间的菌种尽量靠近袋边。混播：2/3菌种用于混料。1/3用于两头。穴播：装好料，用 孔径1.5-2cm的锥形棒在袋的一侧等距打三个孔。在另一侧再打2个孔，塞满菌种即可。发菌管理摆放5-7层，注意散热；温度20-25度，湿度60-65%，避光，通风；2-3天后吃料，加强通风，并开始微孔通气。用14号毛衣针。发菌期的前7天是危险期，不仅要通风、微孔通气，还

12、要注意控温！超过28要倒堆。20-25天满袋，5-10天生理成熟。出菇管理菌墙出菇：不用菇架，将现蕾的菇袋两端打开，摆成80-120 cm高的菌墙；温度15-18度，湿度85-90%；每天通风2-3次，时长30分钟；注意保湿。5-7天出菇采收，然后整理料面，封口，养菌，再出菇；第三节、平菇生产中的问题一、早出菇七法1、温差刺激；昼夜要有10度左右的温差。2、光照刺激；3、搔菌刺激；4、惊蕾刺激；5、通风6、覆土7、喷洒5-10ppm的三十烷醇。二、不出菇的原因及预防发生原因 温型与季节不符；菌种老化；菌种不育；菌种不纯；温差刺激不当；通风光照不良；配方不当；积温不够；水分不足；菌丝徒长；病虫害；预防措施：三、死菇及预防出菇期温度过高：紫孢侧耳超过20度、榆黄蘑超过32度，小菇都会死亡。相对湿度小于80%co2浓度超过0.3-0.5%喷水烂菇出菇过密，营养不良；四、生料栽培污染防治1、菇房消毒、消除隐患；硫磺熏蒸15-20g/m3;甲醛熏蒸10ml/m3；5-10%石灰水喷洒场地；严格选料，适当处理；配料得当，少生杂菌；低温接种，控温培养；15度维持7天；大棚栽培气温稳定在7度；加量接种、酌情选择栽培方式、精心管理。