2017高考生物一轮复习现代生物科技专题2细胞工程2课件新人教版选修3.ppt
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1、高考总复习(第1轮)生物现代生物科技专题第2讲细胞工程选修 3考点3动物细胞培养和核移植技术例3(2016南京检测)某研究小组为测定药物对体外培养细胞的毒性,准备对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行动物细胞培养。下列有关说法正确的是A在利用两种肝组织块制备肝细胞悬液时,可用胃蛋白酶处理B细胞培养应在CO2培养箱中进行,CO2的作用是作为细胞代谢原料C取甲细胞进行培养,传至10代50代就会完全停止D乙细胞在原代培养过程中,最终会出现停止增殖的现象解析:A错,胃蛋白酶的最适pH大约为2,这一环境下细胞往往会受到破坏,不利于培养,所以一般用胰蛋白酶而不用胃蛋白酶处理细胞;B错,培养液中
2、CO2的作用是调节培养液的pH;C错,肝肿瘤细胞可以无限增殖;D对,正常肝细胞在原代培养过程中会出现接触抑制现象,停止增殖。答案:D提升一:动物细胞培养1结果:动物细胞培养不能培养成生物体。传代培养至1050代左右时,部分细胞核型可能发生变化;继续传代培养时,少部分突变细胞朝着癌细胞的方向发展。因此目前使用的超低温、液氮或冷冻保存的正常细胞通常在10代以内,以保持细胞正常的二倍体核型。2代培养和传代培养:通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养。贴壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理,分散后分瓶继续培养,让细胞继续增殖,这样的培养即为传代培养。3.动物细胞培养与植物组织培养的比较:续表提醒:(1
3、)与植物组织培养基比较,动物细胞培养液的独特之处在于:液体培养基;其成分中有动物血清。(2)为了保证细胞培养时满足其营养物质和生长因子的供给,培养基中需添加一定量的血清,因为血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等及一些未知的营养物质。提升二:动物体细胞核移植技术和克隆动物1原理:动物体细胞核的全能性。2过程:3克隆动物:(1)用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。(2)广义的克隆是指所有的无性繁殖,在生物学领域中,有分子、细胞、个体三个水平的不同含义。分子克隆,即DNA扩增。其含义是将某一特定的DNA片段通过重组DNA技术插入到一个载体(如质粒或病毒等)中,并在宿主细胞中自我复制得到的大量完
4、全相同的该DNA片段群体。细胞克隆,是指一个单一的共同祖先细胞分裂所形成的细胞株。其中每一个细胞的基因都是相同,如低等生物的分裂生殖,动、植物的细胞培养等。个体克隆,在个体水平上,克隆是指基因型完全相同的两个或更多的个体组成的群体,如胚胎分割移植,同卵双胞胎也属于克隆。(3)狭义的克隆是指动物通过的核移植由重组细胞发育成新个体的过程。如“多利”羊的培育。变式3(2016海淀区检测)下列对哺乳动物体细胞核移植技术的描述不正确的是()A该技术的难度明显高于胚胎细胞核移植B通常采用减数第二次分裂期的卵母细胞作为受体细胞C可通过显微操作法除去卵母细胞核D克隆动物是对提供体细胞的动物进行了完全复制解析:
5、克隆动物细胞核中的遗传物质来自提供细胞核的动物,其细胞质中的遗传物质来自提供卵母细胞的动物,因而克隆动物的性状主要与提供细胞核的亲本相同,而不是对提供体细胞的动物的完全复制,故选项D错。动物体细胞分化程度高,恢复其全能性十分困难,因而哺乳动物体细胞核移植技术的难度明显高于胚胎细胞核移植;由于M期的卵母细胞含有能促进细胞分裂的物质,因此通常采用减数第二次分裂中期的卵母细胞作为核移植的受体细胞;通过显微操作法用微型吸管将卵母细胞核和第一极体一并吸出。D克隆动物并非是对体细胞供体动物的100%的复制克隆动物绝大部分DNA来自供体细胞核,但其核外还有少量的DNA,即线粒体中的DNA是来自受体卵母细胞。
6、所以,用教材中所述的方法克隆的动物不是供核动物完全相同的复制。此外,即便动物的遗传基础完全相同,但动物的一些行为、习性的形成与其所处的环境有很大的关系,核供体动物生活的环境与克隆动物所生活的环境不会完全相同,其形成的行为、习性也不可能和核供体动物完全相同,从这一角度看,克隆动物也不会是核供体动物100%的复制。拓拓展展拓拓展展考点4动物细胞融合与单克隆抗体例4(2016枣庄检测)下图是单克隆抗体制备过程示意图,其中过程注射的物质和A细胞的名称分别是()A抗体、T淋巴细胞 B抗原、T淋巴细胞C抗体、B淋巴细胞 D抗原、B淋巴细胞解析:单克隆抗体技术首先应该获得能产生单一抗体的B淋巴细胞,所以应该
7、给小鼠注射单一抗原,刺激小鼠产生相应B淋巴细胞,并产生单一抗体。所以图中过程注射的是抗原,A细胞是B淋巴细胞。答案:D提升一:动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较提升二:单克隆抗体的制备1概念:由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体。2特点:化学性质单一,特异性强,灵敏度高,可大量制备。3过程:4需注意的几个问题:(1)首先要注射特定的抗原蛋白免疫小鼠,对小鼠免疫的原因:B淋巴细胞要经过免疫过程,接触抗原,增殖分化为有特异性免疫功能的效应B细胞,才能产生相应的抗体,所以,与骨髓瘤细胞融合的B淋巴细胞实际上是效应B淋巴细胞。(2)融合后可以得到多种细胞,包括
8、未融合的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞、相互融合的B淋巴细胞、相互融合的骨髓瘤细胞、各种杂交瘤细胞,而所需的细胞是专一抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞。(3)整个制备过程中要经过两次筛选。第一次筛选得到杂交瘤细胞(去掉未杂交的细胞及自身融合的细胞),第二次需先在多孔培养板上培养,在每孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养,然后再筛选出能产生特异性抗体的细胞群。(4)杂交瘤细胞具备双亲的遗传物质,不仅具有效应B淋巴细胞产生特异性抗体的能力,还具有骨髓瘤细胞在体外培养条件下大量增殖的能力,从而可以克服单纯B淋巴细胞不能无限增殖的缺点,而大量产生单克隆抗体。变式4(2016大庆检测)利用细胞工程,以SARS病毒核衣
9、壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列叙述正确的是()A用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内,产生的血清抗体为单克隆抗体B体外培养单个浆细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体C将等量浆细胞和骨髓瘤细胞混合,经PEG诱导融合后的细胞一定为杂交瘤细胞D用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出SARS病毒感染者D解析:单克隆抗体是由免疫的B淋巴细胞即浆细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂交瘤细胞产生的,其制备过程是先用SARS病毒核衣壳蛋白刺激机体产生相应的浆细胞,将浆细胞(不能无限增殖但能产生专一性抗体)与骨髓瘤细胞(能无限增殖但不能产生专一性抗体)相融合,经过筛选,去掉相同的融合体
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